Οι πολυσακχαρίτες Xinjiang Cistanche Deserticola έχουν αντιοξειδωτική δράση

αφηρημένη

Μελετήθηκε in vitro η αντιοξειδωτική δράση του πολυσακχαρίτη Cistanche deserticola. Λήψη ασκορβικού οξέος ως ελέγχου, λήψη της αντίδρασης τύπου Fenton για την παραγωγή ριζών υδροξυλίου, της αντίδρασης αυτοοξείδωσης της ντοπαμίνης για την παραγωγή ριζών ανιόντων υπεροξειδίου, της αντίδρασης υποχλωριώδους νατρίου με υπεροξείδιο του υδρογόνου για την παραγωγή απλού οξυγόνου, ρίζες διφαινυλ πικρής υδραζίνης ως πειραματικό μοντέλο , οι επιδράσεις των πολυσακχαριτών Cistanche deserticola σε ρίζες ανιόντων υπεροξειδίου, ρίζες υδροξυλίου DPPH · ελεύθερη ρίζα (διφαινυλική πικρή ρίζα υδραζίνης), η επίδραση δέσμευσης του απλού οξυγόνου. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι οι πολυσακχαρίτες από το Cistanche deserticola είχαν εμφανή αποτελέσματα σάρωσης στις παραπάνω ελεύθερες ρίζες και το αποτέλεσμα σάρωσης συσχετίστηκε θετικά με τη συγκέντρωση πολυσακχαριτών.

Λέξεις-κλειδιά :Cistancαυτός σωληνάριοosa PolysaccHaride? Ελεύθερες ρίζες

1. Εισαγωγή

Το σώμα παράγει συνεχώς διάφορες δραστικές ελεύθερες ρίζες οξυγόνου (ROS) στη διαδικασία του οξειδωτικού μεταβολισμού των δραστηριοτήτων της ζωής, που είναι το ενδιάμεσο προϊόν της αντίδρασης οξείδωσης-μείωσης του αερόβιου μεταβολισμού.Η έρευνα έχει βρει ότι η περίσσεια ελεύθερων ριζών θα επιτεθεί σε μακρομόρια της ζωής και διάφορα οργανίδια, προκαλώντας διάφορες βλάβες σε μοριακό επίπεδο, επίπεδο κυττάρων, ιστών και οργάνων, επιταχύνοντας τη διαδικασία γήρανσης του σώματος και προκαλώντας ασθένειες όπως θρόμβωση, διαβήτης, αθηροσκλήρωση. όγκους κ.λπ. [1]. Λόγω της τοξικότητας των χημικά συντιθέμενων αντιοξειδωτικών στο ανθρώπινο σώμα, η αναζήτηση φυσικών αντιοξειδωτικών υψηλής απόδοσης και χαμηλής τοξικότητας που μπορούν να απομακρύνουν τις ελεύθερες ρίζες οξυγόνου έχει γίνει ένα καυτό ερευνητικό θέμα στους τομείς της ιατρικής, των τροφίμων, της χημικής μηχανικής και άλλων τομέων στο τα τελευταία χρόνια.

Cistanche deserticola(YCMa.)είναι ένα σπάνιο κινέζικο παραδοσιακό φάρμακο και είναι γνωστό ως "τζίνσενγκ της ερήμου" [2]. Cistanche deserticola maΟ πολυσακχαρίτης είναι ένα από τα κύρια βιοδραστικά συστατικά του Cistanche deserticola, αλλά δεν υπάρχει αναφορά για το εάν ο πολυσακχαρίτης Cistanche deserticola έχει την επίδραση της δέσμευσης των ελεύθερων ριζών. Σε αυτό το άρθρο, τα αποτελέσματα σάρωσης του πολυσακχαρίτη Cistanche deserticola στη ρίζα ανιόντων υπεροξειδίου, στη ρίζα υδροξυλίου, στην ελεύθερη ρίζα DPPH και στο μονό οξυγόνο προσδιορίστηκαν με φασματική ανάλυση, για να αξιολογηθεί η αντιοξειδωτική του δράση και να παρασχεθεί μια επιστημονική βάση για την πλήρη ανάπτυξη και χρήση του αυτόν τον φυσικό πόρο.

Κινεζικό βότανο cistanche

2. Πειραματικό μέρος

2.1 Όργανα και αντιδραστήρια

Φασματοφωτόμετρο UV-2401 Ορατό με υπεριώδη ακτινοβολία (Shimadzu, Ιαπωνία); Υπερευαίσθητο φωτόμετρο σωλήνα LumatLB9507 (Γερμανία

BertholdTechnologies); Περιστροφικός εξατμιστής RE-52CS (Shanghai Yarong Biochemical Instrument Factory); HW-SY ηλεκτρονικό θερμοστατικό λουτρό νερού (Jintan Xinhang Instrument Factory); PHS-3C pH meter (Shanghai Precision Scientific Instrument Co., Ltd.); DZF-6020 φούρνος στεγνώματος κενού (Shanghai Yiheng Technology Co., Ltd.). Cistanche deserticola: αγοράστηκε από την Kuitun Pharmaceutical Corporation. Η λουμινόλη (Sigma, ΗΠΑ), η ντοπαμίνη (Κινεζικό Ινστιτούτο για τον Έλεγχο Φαρμακευτικών και Βιολογικών Προϊόντων), FeSO4, EDTA, βιταμίνη C, H2O2, NaClO, Na2CO3, NaHCO3 κ.λπ. είναι όλα εγχώρια αναλυτικά αντιδραστήρια. Το πειραματικό νερό είναι απεσταγμένο νερό ανταλλαγής ιόντων.

2.2 Πειραματική μέθοδος

2.2.1 Μέθοδος εκχύλισης τουCistanche deserticolaπολυσακχαρίτης

Πάρτε 30 g σκόνης Cistanche deserticola και βάλτε το σε μια κωνική φιάλη των 5{16}} mL. Βυθίστε το σε πετρελαϊκό αιθέρα (60-90 βαθμός), αιθέρα και 80% θερμό διάλυμα αιθανόλης (30 μοίρες) για 6 ώρες αντίστοιχα, και το υπόλειμμα εξατμίζεται για να στεγνώσει ο διαλύτης. Μουλιάζουμε το υπόλειμμα του φίλτρου σε νερό σε αναλογία 1 ∶ 10 για 24 ώρες, το θερμαίνουμε στους 30 βαθμούς και το εκχυλίζουμε για 100 λεπτά. Μετά την εκχύλιση, φυγοκεντρήστε για να ληφθεί το υπερκείμενο. Αφού το υπερκείμενο συμπυκνωθεί υπό ελαττωμένη πίεση, κατακρημνίζεται με 95% αιθανόλη τριπλάσια του όγκου. Επιτρέπεται να παραμείνει για 24 ώρες στους 4 βαθμούς. Μετά τη φυγοκέντρηση, συλλέγεται και κατακρημνίζεται. Μετά την ξήρανση υπό κενό, μπορεί να ληφθεί ο ακατέργαστος πολυσακχαρίτης του Cistanche deserticola. Ζυγίστε 1,00 g ακατέργαστου πολυσακχαρίτη, διαλύστε τον με νερό και βάλτε τον σε ογκομετρική φιάλη 50 mL για αναμονή.

Τζίνσενγκ της ερήμου — Αντιοξειδωτικό

Κάντε κλικ εδώ για να δείτε τα προϊόντα σε σκόνη Cistanche

【Ζητήστε περισσότερα】 Email:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

2.2.2 Δοκιμή για την ικανότητα καθαρισμού τουCistanche deserticolaπολυσακχαρίτη σε Ο-2 · ελεύθερη ρίζα

Η ικανότητα σάρωσης του πολυσακχαρίτη Cistanche deserticola σε O{{0}} · δοκιμάστηκε με την παραγωγή ελεύθερων ριζών υπεροξειδίου (O-2 ·) από αυτοοξείδωση ντοπαμίνης [3]. Προσθέστε 3.0mL {{10}}.1 mmol/LpH=10.12 ανθρακικού ρυθμιστικού διαλύματος, 3.0mL νερού και {{18} }}.5 mL διαλύματος δείγματος πολυσακχαρίτη διαφορετικών συγκεντρώσεων στον δοκιμαστικό σωλήνα ξήρανσης με κλίμακα με τη σειρά. Αφού προθερμάνετε σε υδατόλουτρο 30 βαθμών για 5 λεπτά, προσθέστε 1.0mL 2,0 mmol/L ντοπαμίνης προθερμασμένης σε υδατόλουτρο 30 μοιρών, αμέσως ανακατέψτε και χρονομετρήστε, διατηρήστε την αντίδραση στους 30 βαθμούς για 5 λεπτά και διακόψτε αμέσως την αντίδραση με 2 σταγόνες 10mol/L HCl. Χρησιμοποιήστε το ρυθμιστικό διάλυμα ως αναφορά, μετρήστε την απορρόφηση (δείγμα Α) στα 221 nm, αντικαταστήστε το δείγμα (κενό Α) με 0,5 mL νερού στην τυφλή ομάδα και αντικαταστήστε το δείγμα με 0,5 mL ασκορβικού οξέος στην ομάδα ελέγχου , μετρήστε κάθε δείγμα τρεις φορές παράλληλα και λάβετε τη μέση τιμή. O-2 · ποσοστό κάθαρσης (%)=(Ένα κενό - Ένα δείγμα)/A κενό × 100%

2.2.3 Δοκιμή για την ικανότητα καθαρισμού τουCistanche deserticolaπολυσακχαρίτη σε · ελεύθερη ρίζα ΟΗ

DΖωντανό βότανο κιστανάκι-Αντιοξειδωτικό

Το σύστημα EDTA-Fe (Ⅱ) - μπλε του μεθυλενίου - H2O2 χρησιμοποιήθηκε για να ελεγχθεί η ικανότητα σάρωσης του πολυσακχαρίτη Cistanche deserticola σε ρίζα υδροξυλίου. Η αρχή είναι ότι το EDTA-Fe (Ⅱ) αντιδρά με το υπεροξείδιο του υδρογόνου για να παράγει · ΟΗ ελεύθερες ρίζες, οι οποίες μειώνουν τη χαρακτηριστική κορυφή απορρόφησης του διαλύματος μπλε του μεθυλενίου στα 660 nm.

Προσθέστε 1.0mL διαλύματος LFeSO4 5 mmol/L, 1,2 mL διαλύματος LEDTA 5 mmol/L, 2.0mL 0.03mol/L NaH2PO{ {12}}Ρυθμιστικό διάλυμα Na2HPO4 (pH{=7}.4) και 1,3 mL διαλύματος υπεροξειδίου του υδρογόνου 20mmol/L σε μια σειρά δοκιμαστικών σωλήνων 10mL με πώματα, ανακινήστε καλά, προσθέστε 0,7 mL διαλύματος μπλε του μεθυλενίου 0,2 mmol/L και, στη συνέχεια, προσθέστε 1,0 mL του προς δοκιμή διαλύματος και βιταμίνη C1,0 διαφορετικών συγκεντρώσεων αντίστοιχα, αραιώστε στο 10.{30}} mL με νερό, ανακατεύουμε καλά, διατηρούμε στους 37 βαθμούς για 30 λεπτά και μετράμε την τιμή απορρόφησης κάθε διαλύματος στα 660 nm. Η κενή ομάδα αντικατέστησε το διάλυμα δείγματος με νερό. Κάθε δείγμα μετράται τρεις φορές παράλληλα και λαμβάνεται η μέση τιμή. · Ρυθμός σάρωσης ριζών OH δείγματος (%)=[(A2-A1)/(A0-A1) × Στον τύπο 100%: A0 -- απορρόφηση αξία του άθικτου σωλήνα. Α{41}} τιμή απορρόφησης κατεστραμμένου σωλήνα. A2 -- Φωτομετρική τιμή μετά την προσθήκη δείγματος.

2.2.4 Δοκιμή σε DPPH · ικανότητα σάρωσης τουCistanche deserticolaπολυσακχαρίτης

Πάρτε {{0}}.1 mL διαλύματος πολυσακχαρίτη Cistanche deserticola και προσθέστε το σε διάλυμα 5,0 mLDPPH · ανακατέψτε το γρήγορα και αφήστε το για 10 λεπτά σε θερμοκρασία δωματίου,

Προσδιορίστε τη μεταβολή της απορρόφησής του σε μήκος κύματος 517 nm [4]. Κάθε δείγμα μετράται τρεις φορές παράλληλα και λαμβάνεται η μέση τιμή. Το ποσοστό κάθαρσης δείγματος της DPPH · (%)=1 - [(AB)/A0] × Στον τύπο 100%: A0 -- τιμή απορρόφησης του DPPH · (1.9mLDPPH ·+0.1mL50% αιθανόλη) χωρίς δείγμα. Α - τιμή απορρόφησης του δείγματος μετά την αντίδραση με DPPH ·; B -- τιμή απορρόφησης τυφλού δείγματος (δείγμα 0,1 mL+1, 9 mL 50% αιθανόλη).

2.2.5Cistanche deserticolaΔοκιμή μονήρους οξυγόνου 1O2 για σάρωση πολυσακχαρίτη

Το οξυγόνο μονής γραμμής (1O2) παράγεται από τη χημική αντίδραση του NaClO και του H2O2 στους 37 βαθμούς [5]. Το διάλυμα που χρησιμοποιείται για τον προσδιορισμό του 1O2 είναι 100 μ L2,8mmol/L διάλυμα NaClO, 400 μ L5mmol/LNaOH διάλυμα, 300 μ L10mmol/LH2O2 διάλυμα, 50 μ L1mmol/Λουμινόλη. Κατά τη διάρκεια της αντίδρασης, το διάλυμα αντίδρασης προστίθεται στο διάλυμα του δείγματος και το όργανο χημειοφωταύγειας καταγράφει αυτόματα τη διαδικασία αντίδρασης ταυτόχρονα. Πάρτε NaClO-H2O2-NaOH-Luminol ως τυφλό μάρτυρα. Ξεκινήστε την αντίδραση και προσθέστε το διάλυμα αντίδρασης στο σωλήνα δείγματος από τη φιάλη αποθήκευσης του οργάνου χημειοφωταύγειας σύμφωνα με την ποσότητα που ορίζεται από τη διαδικασία. Στη συνέχεια, η ένταση χημειοφωταύγειας του μείγματος αντίδρασης καταγράφεται στο χαρτί εγγραφής κάθε 5 δευτερόλεπτα, κάθε δείγμα μετράται τρεις φορές παράλληλα και λαμβάνεται η μέση τιμή.

Το ποσοστό κάθαρσης υπολογίζεται σύμφωνα με τον ακόλουθο τύπο: ποσοστό κάθαρσης (%)=(έντονο φωτεινή ένδειξη ελέγχου - φωτεινή ένταση δείγματος)/ φωτεινή ένταση ελέγχου × 100%

3. Αποτελέσματα και συζήτηση

3.1 Απορροφητικό αποτέλεσμα τουCistanche deserticolaπολυσακχαρίτης σε Ο-2 ·

Οφέλη από το cistanche tubulosa-Antioxidant

Η χημική ιδιότητα του O-2 · είναι ενεργή, η οποία μπορεί να κάνει τα λιπαρά οξέα στο βιοφίλμ να παράγουν υπεροξείδιο και στη συνέχεια να καταστρέψουν τα κύτταρα [6]. Σε αυτό το άρθρο, η μέθοδος ντοπαμίνης χρησιμοποιήθηκε για τον προσδιορισμό της ικανότητας σάρωσης του O-2 ·. Η ικανότητα σάρωσης του Cistanche deserticola σε Ο-2 · φαίνεται στο Σχήμα 1. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι ο πολυσακχαρίτης Cistanche deserticola θα μπορούσε να αναστείλει το Ο-2 · που παράγεται από την αυτοοξείδωση της ντοπαμίνης και αυξήθηκε με την αύξηση του συγκέντρωση εντός του εύρους των μετρούμενων συγκεντρώσεων (0-8mg/mL), αλλά η ικανότητα σάρωσης ήταν χαμηλότερη από αυτή του ασκορβικού οξέος.

3.2 Απορροφητικό αποτέλεσμα τουCistanche deserticolaπολυσακχαρίτης · ΟΗ

·Το OH είναι μια από τις πιο ενεργές ελεύθερες ρίζες οξυγόνου στα είδη ενεργού οξυγόνου. Μπορεί να αντιδράσει με σχεδόν οποιοδήποτε βιολογικό μακρομόριο στα ζωντανά κύτταρα και μπορεί να οδηγήσει σε βιοχημικές διεργασίες όπως υπεροξείδωση λιπιδίων, πολυμερισμός πρωτεϊνών και αποπολυμερισμός, θραύση νουκλεϊκού οξέος κ.λπ. στον ιστό του σώματος, προκαλώντας ασθένειες ιστών και κυττάρων, οδηγώντας στην εμφάνιση διάφορες ασθένειες και επιτάχυνση της γήρανσης του σώματος [7]. Η ικανότητα σάρωσης του πολυσακχαρίτη Cistanche deserticola σε · ΟΗ φαίνεται στο Σχήμα 2. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι ο πολυσακχαρίτης Cistanche deserticola είχε μια καλή επίδραση σάρωσης στο · ΟΗ και αυξήθηκε με την αύξηση της συγκέντρωσης.

3.3 Η ικανότητα σάρωσης του πολυσακχαρίτη Cistanche deserticola σε DPPH ·

Η DPPH · (ρίζα πικρής διφαινυλικής υδραζίνης) είναι μια σταθερή ελεύθερη ρίζα, η οποία είναι μωβ σε οργανικό διαλύτη και έχει ισχυρή απορρόφηση κοντά στα 517 nm. Μετά την προσθήκη αντιοξειδωτικών, ορισμένες ελεύθερες ρίζες απομακρύνονται, οι οποίες εξασθενούν την απορρόφηση, η οποία μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την αξιολόγηση της αντιοξειδωτικής δράσης αυτής της ουσίας [8]. Δείτε την Εικόνα 3 για την ικανότητα σάρωσης DPPH του πολυσακχαρίτη Cistanche deserticola. Τα πειραματικά αποτελέσματα έδειξαν ότι η ικανότητα σάρωσης του πολυσακχαρίτη Cistanche deserticola σε DPPH · συσχετίστηκε θετικά με τη συγκέντρωσή του και η ικανότητα σάρωσης ήταν μεγαλύτερη από αυτή του ασκορβικού οξέος.

3.4 Ικανότητα σάρωσης του πολυσακχαρίτη Cistanche deserticola σε 1O2

Το οξυγόνο μονής γραμμής είναι διεγερμένο μοριακό οξυγόνο με ενεργές χημικές ιδιότητες. Επειδή τα ασύζευκτα ηλεκτρόνια έχουν την τάση να ζευγαρώνουν, οι ελεύθερες ρίζες εμφανίζουν πιο ενεργές χημικές ιδιότητες [9]. Η ικανότητα σάρωσης του πολυσακχαρίτη Cistanche deserticola σε 1O2 φαίνεται στο Σχήμα 4. Τα πειραματικά αποτελέσματα έδειξαν ότι η ικανότητα σάρωσης του πολυσακχαρίτη Cistanche deserticola ήταν χαμηλότερη από αυτή του ασκορβικού οξέος στην περιοχή των 0-4.0mg.0mg. /mL και η ικανότητα σάρωσης του πολυσακχαρίτη Cistanche deserticola ήταν υψηλότερη από εκείνη του ασκορβικού οξέος όταν η συγκέντρωση ήταν μεγαλύτερη από 4.0mg/mL.

4. Συμπέρασμα

Η αντιοξειδωτική δράση των πολυσακχαριτών Cistanche deserticola in vitro μελετήθηκε λεπτομερώς μέσω διαφορετικών συστημάτων αντιδραστικών ριζών χωρίς οξυγόνο.Από τα πειραματικά αποτελέσματα, μπορεί να φανεί ότι εντός του εύρους της πειραματικής συγκέντρωσης, το εκχύλισμα πολυσακχαρίτη του Cistanche deserticola έχει σαρωτικά αποτελέσματα στο O-2 ·, · OH, DPPH · και 1O2, και τα αποτελέσματα σάρωσης είναι διαφορετικά για διαφορετικά συστήματα.Τα αποτελέσματα έδειξαν ότιΟ πολυσακχαρίτης Cistanche deserticola είναι ένα αποτελεσματικό εξωγενές φυσικό αντιοξειδωτικό, το οποίο αξίζει περαιτέρω έρευνας, ανάπτυξης και ολοκληρωμένης χρήσης.

Cistanche tubulosa 200mg— Αντίοxidant