The Study Of Cistanche Deserticola Slices and the Wine Steam Processed Product From Cistanche Deserticola

Η Διαφορά των Χημικών Συστατικών και των Βιολογικών Δραστηριοτήτων των φετών Ακατέργαστων Προϊόντων και του Προϊόντος Επεξεργασμένου σε Ατμό Οίνου από το Cistanche

Επικοινωνία: emily.li@wecistanche.com

Ying Zhang, 1,2 Yuewu Wang, 3 Song Yang, 1 Yunfeng Xiao, 3 Haibin Guan, 2 Xin Yue, 2 Xiaoqin Wang, 2 και Xiangri Li 1

Αφηρημένη

Ως γνωστό κινέζικο βότανο, τοCistanche deserticolaέχει χρησιμοποιηθεί για τη θεραπεία του συνδρόμου νεφρικής ανεπάρκειας στην Κίνα εδώ και χιλιάδες χρόνια. Τόσο το ακατέργαστο προϊόν τουΦέτες Cistanche deserticola(RCD) και τουΠροϊόν Επεξεργασμένο με Ατμό Οίνου(WSCD) χρησιμοποιούνται κλινικά για διαφορετικά αποτελέσματα. Σε αυτή τη μελέτη, οι επιρροές της διαδικασίας ατμού με κρασί (SPW) απόCistanche deserticolaδιερευνήθηκαν οι χημικές συνθέσεις και οι βιολογικές επιδράσεις. Η ανάλυση του κύριου συστατικού (PCA) και η ποσοτική ανάλυση χρησιμοποιήθηκαν για τη μελέτη των διαφορών στις χημικές συνθέσεις. Τα αποτελέσματα των θρεπτικών νεφρών διερευνήθηκαν επίσης για να συγκριθούν οι διαφορές μεταξύ του RCD (φέτες Cistanche deserticola)και το WSCD (Προϊόν Επεξεργασμένο με Ατμό Οίνου). Τα αποτελέσματα PCA έδειξαν ότι ο προφανής διαχωρισμός επιτεύχθηκε στο RCD(φέτες Cistanche deserticola)και WSCD (Προϊόν Επεξεργασμένο με Ατμό Οίνου). Τα αποτελέσματα της ποσοτικής ανάλυσης έδειξαν ότι το WSCD έχει υψηλότερες ποσότητες ολικών πολυσακχαριτών, ολικών PhG, ισοακτεοσίδη και οσμανθουσίδη Β από το RCD(φέτες Cistanche deserticola), ενώ η περιεκτικότητα σε 2'-ακετυλακτεοσίδη και ακτεοσίδη μειώθηκε μετά το SPW. Η σύγκριση των RCD και WSCD σχετικά με τις βιολογικές δραστηριότητες έδειξε ότι και οι δύο θα μπορούσαν να αποκαταστήσουν το επίπεδο της ορμόνης του φύλου στο μοντέλο της ανεπάρκειας νεφρού-yang και να βελτιώσουν την αντιοξειδωτική δράση. Το WSCD(Προϊόν Επεξεργασμένο με Ατμό Οίνου)ήταν πολύ καλύτερο στην αύξηση του βάρους των σπλάχνων τουνεφρόκαι σπερματικό κυστίδιο. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι το SPW άλλαξε τα χημικά του συστατικά και ενίσχυσε τις βιολογικές του δραστηριότητες.

1. Εισαγωγή

Cistanche deserticolaείναι μια κοινή παραδοσιακή κινεζική ιατρική και χρησιμοποιείται γενικά ως τονωτικό στην Κίνα και την Ιαπωνία εδώ και πολλά χρόνια, κοινώς γνωστό ως «τζίνσενγκ της ερήμου».Cistanche deserticolaκαταγράφηκε για πρώτη φορά ως κορυφαίος βαθμός στο "Shennong's Herbal Classic of Materia Medica (Shen Nong Ben Cao Jing)" περίπου το 100 π.Χ. και χρησιμοποιήθηκε για τη θεραπεία διαφόρων ασθενειών όπως νεφρική ανεπάρκεια, ανικανότητα, γυναικεία υπογονιμότητα, νοσηρή λευκόρροια, άφθονη μετρορραγία (λευκά) , αίσθηση κρύου στην οσφύ και τα γόνατα και χρόνια δυσκοιλιότητα στους ηλικιωμένους [1]. Μέχρι στιγμής, έχουν απομονωθεί αρκετά κύρια συστατικά, όπως οι πολυσακχαρίτες [2, 3], οι φαινυλαιθανοειδείς γλυκοσίδες (PhGs) [1, 4], τα ιριδοειδή [1] και τα λιγνανοειδή [1, 5]. Μεταξύ αυτών, τα PhGs και οι πολυσακχαρίτες έχουν αποδειχθεί ότι είναι τα κύρια βιολογικά ενεργά συστατικάCistanche deserticola[6–9]. Τα σύγχρονα φαρμακολογικά πειράματα έχουν αποδείξει ότι το Cistanche deserticola μπορεί να ενισχύσει την παραγωγή τεστοστερόνης και να προστατεύσει το σπέρμα, να διεγείρει τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων και να ενισχύσει το ποσοστό επιβίωσης των κυττάρων, εμφανίζοντας αξιοσημείωτες δραστηριότητες για τη σεξουαλική ισχύ, τη βελτίωση της μνήμης, την αντιγήρανση, τη σάρωση ελεύθερων ριζών και τη νευροπροστασία [10. –13].

Προκειμένου να μειωθεί η τοξικότητα και/ή να ενισχυθούν τα αποτελέσματα, τα περισσότερα από τα παραδοσιακά κινέζικα βότανα θα πρέπει να υποβάλλονται σε επεξεργασία πριν από τη συνταγή. Τα παραδοσιακά στάδια της διαδικασίας περιλαμβάνουν τον καθαρισμό, τη διαδικασία νερού (άλεσμα στο νερό, στον ατμό και ψήσιμο) και τη διαδικασία φωτιάς (θέρμανση με κρασί, ξύδι, αλάτι ή μέλι) [14]. Κατά τη διάρκεια της διαδικασίας, τα χημικά συστατικά μπορεί να αλλάξουν: τα σχετικά περιεχόμενα ορισμένων συστατικών μπορεί να αλλάξουν ή να σχηματιστούν νέα συστατικά [15]. Η διαδικασία τουCistanche deserticolaέχει μακρά ιστορία καιCistanche deserticolaπρέπει να υποβάλλονται σε επεξεργασία με μούλιασμα στο κρασί ρυζιού, στον ατμό όπως περιγράφεται στην κινεζική φαρμακοποιία (έκδοση 2015) [16]. Το SPW έχει αποδειχθεί ότι επηρεάζει τις επιδράσεις τους στον μεσημβρινό των νεφρών σύμφωνα με τη θεωρία της παραδοσιακής κινεζικής ιατρικής (TCM) [17]. WSCD(Προϊόν Επεξεργασμένο με Ατμό Οίνου)τεκμηριώνεται για πρώτη φορά στο "Lei Gongs Treatise on Preparation and Boiling of Materia Medica (Lei Gong Pao Zhi Lun)" στη Βόρεια και Νότια Δυναστεία της Κίνας. Το WSCD χρησιμοποιείται καλύτερα για τη θεραπεία ανεπάρκειας των νεφρών και την προστασία του σπέρματος όπως καταγράφεται στο "Taiping Shenghui Fang" στη Δυναστεία Σονγκ της Κίνας. Ωστόσο, δεν υπήρχαν συγκριτικές μελέτες σχετικά με τα χημικά συστατικά μεταξύ RCD(φέτες Cistanche deserticola)και WSCD(Προϊόν Επεξεργασμένο με Ατμό Οίνου)μέχρι τώρα.

Οι σύγχρονες φαρμακολογικές έρευνες έχουν δείξει ότι το WSCD θα μπορούσε να τονώσει το νεφρό για να εξασφαλίσει την ουσία διεγείροντας τον άξονα υποθάλαμος-υπόφυση-γονάδα σε διάφορους βαθμούς και χρησιμοποιείται για τη θεραπεία ανεπάρκειας στο νεφρό, όπως ανεπάρκεια νεφρού-yang [18]. Ωστόσο, μέχρι τώρα, οι διαφορές στις βιολογικές δραστηριότητες μεταξύ RCD(φέτες Cistanche deserticola)και WSCD(Προϊόν Επεξεργασμένο με Ατμό Οίνου)δεν έχουν ερευνηθεί. Πρόσφατα, για να διευκολυνθεί η πειραματική έρευνα, το μοντέλο ζώου με ανεπάρκεια νεφρών-yang έχει αντιγραφεί με ένεση σε αρουραίους με υψηλή δόση υδροκορτιζόνης, στην οποία οι αρουραίοι θα εμφανίσουν συμπτώματα που μοιάζουν πολύ με αυτά που περιγράφονται στην ανεπάρκεια νεφρού-yang του TCM [19, 20] . Οι αρουραίοι με ανεπάρκεια νεφρού-γιανγκ έχουν πάντα κάποια συμπτώματα όπως απώλεια βάρους, μείωση κατανάλωσης τροφής, αδυναμία, αυξημένη πρόσληψη νερού και μειωμένη δραστηριότητα. Με βάση αυτό το ζωικό μοντέλο, ανιχνεύθηκαν οι διαφορές των επιδράσεων τροφής στα νεφρά μεταξύ RCD και WSCD και αποκάλυψαν ακόμη και την επιστημονική ουσία της παραδοσιακής κινεζικής διαδικασίας.

Το Cistanche deserticola έχει πολλές λειτουργίες

2. Υλικά και μέθοδοι

2.1. Υλικά και Χημικά

Η τυπική ουσία όπως ακτεοσίδης, ισοακτεοσίδης, εχινακοσίδης, κιστανοζίτης Α και 2'-ακετυλακτεοσίδης αγοράστηκε από την Shanghai Yuanye Biotechnology Co. Ltd (Σαγκάη, Κίνα). Το Cistanoside F, το cistanoside C, το osmanthuside B και το tubuloside B αγοράστηκαν από την Chengdu Pfeide Biotechnology Co. Ltd (Chengdu, Κίνα). Η καθαρότητα όλων των προτύπων δεν ήταν μικρότερη από 98 τοις εκατό. Η μεθανόλη και ακετονιτρίλιο ποιότητας HPLC αγοράστηκαν από την Aladdin Chemistry Inc. (Σαγκάη, Κίνα). Το απιονισμένο νερό ελήφθη χρησιμοποιώντας ένα MilliQ50 SP Reagent Water System (Bedford, MA, USA) για την παρασκευή δειγμάτων και κινητών διαλυμάτων. Όλοι οι άλλοι οργανικοί διαλύτες που χρησιμοποιήθηκαν σε αυτή τη μελέτη ήταν αναλυτικής ποιότητας και αγοράστηκαν από την Shanghai Chemical Co. Ltd (Σαγκάη, Κίνα).

2.2. Συλλογή δειγμάτων

Όλα τα ακατέργασταCistanche deserticola(7 παρτίδες δειγμάτων) συλλέχθηκαν από το Ιατρικό Πανεπιστήμιο Inner Mongolia από τις επαρχίες της Εσωτερικής Μογγολίας και της Νινγκξίας. Όλοι ταυτοποιήθηκαν ωςcistanche deserticolaYC Ma από τον Xiao-qin Wang, τον καθηγητή του Τμήματος Φαρμακογνωσίας στο Ιατρικό Πανεπιστήμιο της Εσωτερικής Μογγολίας. Ένα δείγμα κουπονιού κατατέθηκε στη Φαρμακευτική Σχολή του Ιατρικού Πανεπιστημίου της Εσωτερικής Μογγολίας. Μετά τη συλλογή, οι ταξιανθίες τουCistanche deserticolaαφαιρέθηκαν, οι μίσχοι κόπηκαν σε φέτες και ξηράνθηκαν σε θερμοκρασία δωματίου με αέρα και στη συνέχεια οι φέτες χωρίστηκαν τυχαία σε δύο ομάδες σε κάθε παρτίδα: η μία είναι RCD(φέτες Cistanche deserticola)και το άλλο χρησιμοποιείται για την παρασκευή του WSCD(Προϊόν Επεξεργασμένο με Ατμό Οίνου).

Το WSCD(Προϊόν Επεξεργασμένο με Ατμό Οίνου)παρασκευάστηκαν στο εργαστήριο σύμφωνα με την κινεζική φαρμακοποιία (έκδοση 2015) [16], που σημαίνει ότι το κομμένο RCD(φέτες Cistanche deserticola)Μουλιάστηκαν σε κρασί από ρύζι με κλειστό δοχείο για 6 ώρες μέχρι να μαλακώσουν, μαγειρεύτηκαν στον ατμό σε λουτρό νερού για επιπλέον 12 ώρες μέχρι να μαυρίσει η επιφάνεια και στέγνωσαν σε θερμοκρασία δωματίου με αέρα.

2.3. Ανάλυση κύριου στοιχείου (PCA)

Η ανάλυση κύριου συστατικού (PCA) είναι μια πολύπλοκη τεχνική που χρησιμοποιείται ευρέως για τη μείωση των διαστάσεων των πολυμεταβλητών προβλημάτων. Μειώνει τη διάσταση του αρχικού συνόλου δεδομένων εξηγώντας τη συσχέτιση μεταξύ ενός μεγάλου αριθμού μεταβλητών με όρους μικρότερου αριθμού υποκείμενων παραγόντων χωρίς σημαντική απώλεια πληροφοριών. Σε αυτή τη μελέτη, οι διαφορές μεταξύ RCD(φέτες Cistanche deserticola)και WSCD(Προϊόν Επεξεργασμένο με Ατμό Οίνου)πραγματοποιήθηκαν από μη εποπτευόμενη PCA χρησιμοποιώντας το λογισμικό SIMCA 13.0 που βασίζεται στις σχετικές περιοχές κορυφής στη χρωματογραφία HPLC. Με τη βοήθεια του PCA, βρέθηκαν οι κύριες επιρροές των χημικών ουσιών στην ταξινόμηση μεταξύ διαφορετικών δειγμάτων.

2.4. Η προετοιμασία των δειγμάτων

2.4.1. Προετοιμασία εκχυλίσματος για ζώα

Το RCD(φέτες Cistanche deserticola)και WSCD(Προϊόν Επεξεργασμένο με Ατμό Οίνου)επιλέχθηκαν από τα δείγματα που συλλέχθηκαν και παρασκευάστηκαν όπως περιγράφεται στην Ενότητα 2.2.

Στεγνωμένο στον αέρα και κομμένο σε φέτες RCD(φέτες Cistanche deserticola)κονιοποιήθηκε με κονιοποιητή (FW135, Tianjin Taisite Instrument Co., Ltd.), ζύγιζε με ακρίβεια 1,{2}} kg και εμποτίστηκε σε 50 τοις εκατό αιθανόλη για 30 λεπτά και οι αναλογίες φυτού/αιθανόλης που χρησιμοποιήθηκε ήταν 1/ 10 (β/β). Και στη συνέχεια, εκχυλίστηκε υπό αναρροή δύο φορές για 1 ώρα κάθε φορά. Τα δύο εκχυλίσματα συνδυάστηκαν και διηθήθηκαν και η αιθανόλη ανακτήθηκε υπό μειωμένη πίεση στους 60 βαθμούς. Το συνολικό ακατέργαστο εκχύλισμα PhGs ξηράνθηκε σε κενό στους 60°C και καθαρίστηκε με μακροπορώδη ρητίνη. Τέλος, ελήφθη το εκχύλισμα PhGs του RCD και ζυγίστηκε με ακρίβεια.

Το εκχύλισμα PhGs του WSCD(Προϊόν Επεξεργασμένο με Ατμό Οίνου)λήφθηκε ακολουθώντας την ίδια διαδικασία παραπάνω.

Τα ιζήματα από την εκχύλιση των PhG ξηράνθηκαν στον αέρα και αφυπνίστηκαν δύο φορές για 1,5 ώρα κάθε φορά με 20 φορές νερό. Τα δύο εκχυλίσματα συνδυάστηκαν και φυγοκεντρήθηκαν στις 4000 rpm για 10 λεπτά, και το υπερκείμενο συμπυκνώθηκε και καταβυθίστηκε με 95 τοις εκατό αιθανόλη. Μετά τη φυγοκέντρηση, το ίζημα ξηράνθηκε σε κενό στους 60 βαθμούς. Τέλος, το εκχύλισμα πολυσακχαρίτη του RCD(φέτες Cistanche deserticola)ελήφθη και ζυγίστηκε με ακρίβεια.

Το εκχύλισμα πολυσακχαρίτη του WSCD(Προϊόν Επεξεργασμένο με Ατμό Οίνου)λήφθηκε ακολουθώντας την ίδια διαδικασία παραπάνω.

Τα PhGs και τα εκχυλίσματα πολυσακχαριτών του RCD(φέτες Cistanche deserticola)και WSCD(Προϊόν Επεξεργασμένο με Ατμό Οίνου)ήταν ανάμεικτα εναιωρήματα σε νερό, αντίστοιχα, όταν οι αρουραίοι υποβλήθηκαν σε αγωγή από το στόμα.

2.4.2. Προετοιμασία δείγματος για τον προσδιορισμό των PhGs

Τα εκχυλίσματα PhGs στην Ενότητα 2.4.1 ζυγίστηκαν με ακρίβεια ως 0,15 g και εκχυλίστηκαν με υπερήχους με 50mL υδατικού διαλύματος μεθανόλης 50 τοις εκατό για 40 λεπτά. Μετά την ψύξη, η απώλεια βάρους αναπληρώθηκε με 50 τοις εκατό μεθανόλη. Όλα τα δείγματα και οι διαλύτες διηθήθηκαν μέσω μεμβράνης 0,45 μm πριν από την ανάλυση. Το περιεχόμενο τεσσάρων PhGs σε RCD(φέτες Cistanche deserticola)και WSCD(Προϊόν Επεξεργασμένο με Ατμό Οίνου)προσδιορίστηκε χρησιμοποιώντας HPLC και τα συνολικά PhG προσδιορίστηκαν χρησιμοποιώντας φασματοφωτομετρία UV.

2.4.3. Παρασκευή δείγματος για τον προσδιορισμό του πολυσακχαρίτη

Τα εκχυλίσματα πολυσακχαριτών στην Ενότητα 2.4.1 ζυγίστηκαν με ακρίβεια ως 0.10 g και εκχυλίστηκαν με υπερήχους με 50 mL ζεστό νερό για 40 λεπτά. μετά την ψύξη, η απώλεια βάρους αναπληρώθηκε με νερό. Όλα τα δείγματα και οι διαλύτες διηθήθηκαν μέσω μεμβράνης 0,45 μm πριν από την ανάλυση.

2.5. Χρωματογραφική Κατάσταση HPLC και Προσδιορισμός των τεσσάρων PhGs

Ο χρωματογραφικός διαχωρισμός πραγματοποιήθηκε σε σύστημα HPLC UltiMate 300{{4{0}} (Thermo Fisher Scientific, ΗΠΑ), εξοπλισμένο με αντλία διπλής κλίσης, διαμέρισμα στήλης , και έναν ανιχνευτή DAD. Τα δεδομένα συλλέχθηκαν και υποβλήθηκαν σε επεξεργασία χρησιμοποιώντας ένα σύστημα δεδομένων χρωματογραφίας ChromeLeon. Τα δείγματα διαχωρίστηκαν σε Agilent Zorbax SB-C18 (250mm×4,6 mm, 5 μm) με προστατευτική στήλη C18 (4,6 mm×12,5 mm, 5 μm). Η κινητή φάση αποτελούνταν από ακετονιτρίλιο (Α) και 0.1 τοις εκατό διάλυμα φωσφορικού οξέος (Β) με ρυθμό ροής 1 mL/min. Η βαθμιδωτή έκλουση είναι η εξής: αρχική 0–13 λεπτά, γραμμική αλλαγή από ΑΒ (5:95, ν/ν) έως ΑΒ (15:85, ν/ν); 13–25 λεπτά, γραμμική αλλαγή σε AB (20:80, v/v). 25–43 λεπτά, γραμμική αλλαγή σε AB (25:75, v/v). Το μήκος κύματος του ανιχνευτή παρακολουθήθηκε στα 330 nm. Η θερμοκρασία της στήλης ορίστηκε στους 30 βαθμούς και ο όγκος του δείγματος που εγχύθηκε ήταν 10 μL [21]. Το αποθεματικό διάλυμα που περιέχει τέσσερα πρότυπα αναφοράς παρασκευάστηκε με διάλυση των προτύπων αναφοράς σε 50 τοις εκατό μεθανόλη σε τελική συγκέντρωση 0,20 mg/mL για 2-ακετυλακτεοσίδη, 0,20 mg/mL για ακτεοσίδη, 0,05 mg/mL για οσμανθουσίδη Β, και 0,10 mg/mL για ισοακτεοσίδη. Το διάλυμα στη συνέχεια αραιώθηκε σε πέντε διαφορετικές συγκεντρώσεις με τρία αντίγραφα για να δημιουργηθούν καμπύλες βαθμονόμησης. Το περιεχόμενο του δείγματος εκφράστηκε σε g/kg ακατέργαστου βάρους.

Η μελέτη των φετών Cistanche deserticola και του Wine Steam Processed Product from Cistanche deserticola

2.6. Προσδιορισμός Ολικών PhGs

Τα συνολικά PhG προσδιορίστηκαν χρησιμοποιώντας τη μέθοδο φασματοφωτομετρίας UV στο μήκος κύματος 330nm στο φασματοφωτόμετρο UV1000 (Shanghai Tianmei Scientific Instrument Co., Ltd.). Το αποθεματικό διάλυμα παρασκευάστηκε με διάλυση προτύπων εχινακοσίδης σε 50 τοις εκατό μεθανόλη σε τελική συγκέντρωση 0,10 mg/mL και στη συνέχεια αραιώθηκε σε πέντε διαφορετικές συγκεντρώσεις με τρία αντίγραφα για τη δημιουργία καμπυλών βαθμονόμησης.

2.7. Προσδιορισμός Πολυσακχαριτών

Ο προσδιορισμός των πολυσακχαριτών πραγματοποιήθηκε με τη μέθοδο φαινόλης-θειικού οξέος. 1 mL του διαλύματος του δείγματος τοποθετήθηκε σε δοκιμαστικό σωλήνα 20 mL με γυάλινο πώμα και 1 mL διαλύματος φαινόλης 6 τοις εκατό και 5 mL πυκνού θειικού οξέος προστέθηκαν και ανακινήθηκαν για 5 λεπτά. Το μίγμα μεταφέρθηκε σε λουτρό ζέοντος νερού για 10 λεπτά και ψύχθηκε σε θερμοκρασία δωματίου για ανίχνευση υπεριώδους. Η απορρόφηση υπεριώδους παρακολουθήθηκε στα 480 nm σε φασματοφωτόμετρο UV1000. Το πρότυπο αναφοράς της άνυδρης D-γλυκόζης ζυγίστηκε με ακρίβεια και διαλύθηκε σε απεσταγμένο νερό σε τελική συγκέντρωση 0,10 mg/mL. Στη συνέχεια το διάλυμα αραιώθηκε σε πέντε διαφορετικές συγκεντρώσεις με τρία αντίγραφα για να δημιουργηθούν καμπύλες βαθμονόμησης.

2.8. Πειράματα σε ζώα

2.8.1. Ζώα και Στέγαση

Αρσενικοί αρουραίοι SD με σεξουαλική ωριμότητα (180-200 g) αγοράστηκαν από το Xinglong (Πεκίνο) Experimental Animal Farm (ηλικίας: 6 εβδομάδων) και η άδεια εργαστηριακού ζώου ήταν SCXK (Jing):2016-0003. Όλες οι διαδικασίες σε ζώα εγκρίθηκαν από την Επιτροπή Έρευνας Ζώων του Ιατρικού Πανεπιστημίου της Εσωτερικής Μογγολίας και πραγματοποιήθηκαν σύμφωνα με τις οδηγίες του Εθνικού Ινστιτούτου Υγείας σχετικά με τις αρχές της φροντίδας των ζώων (2004). Όλα τα ζώα διατηρήθηκαν σε σύστημα φραγμού με ρυθμιζόμενη θερμοκρασία 21-23 βαθμών και σχετική υγρασία 40-65 τοις εκατό και σε κύκλο σκότους/φωτός 12 ωρών. Στους αρουραίους δόθηκε κατά βούληση τροφή και νερό και εγκλιματίστηκαν στο παραπάνω περιβάλλον για μια εβδομάδα.

2.8.2. Δοσολογία και Δειγματοληψία

Οι αρουραίοι μεταφέρθηκαν σε μεμονωμένα μεταβολικά κλουβιά και χωρίστηκαν τυχαία σε 6 ομάδες (=10 σε κάθε ομάδα). Τους δόθηκε μια ενδομυϊκή ένεση 15 mg/kg ηλεκτρικού νατρίου υδροκορτιζόνης (που αγοράστηκε από την Tianjin Biochemical Pharmaceutical Co., Ltd., Tianjin, Κίνα) για 2 εβδομάδες εκτός από την ομάδα 1 που εγχύθηκε με ίσο όγκο φυσιολογικού ορού. Την 14η ημέρα, το σωματικό βάρος, η κατανάλωση τροφής, η πρόσληψη νερού, ο όγκος ούρων και η αυθόρμητη δραστηριότητα μέσα σε 5 λεπτά συλλέχθηκαν για να βεβαιωθείτε ότι το μοντέλο ανεπάρκειας νεφρού-γιανγκ έγινε με επιτυχία. Από την 15η ημέρα, 6 ομάδες αντιμετωπίστηκαν ως εξής: η ομάδα 1 και η ομάδα 2 (ομάδα μοντέλου, Μ) υποβλήθηκαν σε αγωγή με ίσο όγκο απεσταγμένου νερού, ομάδα 3 (εκχύλισμα PhGs του RCD(φέτες Cistanche deserticola)ομάδα, PR) υποβλήθηκαν σε θεραπεία με 0.42 g/kg PhGs εκχύλισμα RCD, το οποίο ήταν ίσο με περίπου 1,8 g/kg ακατέργαστουCistanche deserticolaκαι οι άλλες ομάδες ήταν οι ίδιες, η ομάδα 4 (PhGs εκχύλισμα WSCD(Προϊόν Επεξεργασμένο με Ατμό Οίνου)ομάδα, PW) έλαβαν δόση 0.49 g/kg PhGs εκχύλισμα WSCD(Προϊόν Επεξεργασμένο με Ατμό Οίνου), ομάδα 5 (πολυσακχαριδικό εκχύλισμα RCD(φέτες Cistanche deserticola)ομάδα, SR) υποβλήθηκαν σε θεραπεία με 0.18 g/kg το εκχύλισμα πολυσακχαρίτη του RCD και η ομάδα 6 ήταν (εκχύλισμα πολυσακχαρίτη του WSCD(Προϊόν Επεξεργασμένο με Ατμό Οίνου)ομάδα, SW) υποβλήθηκαν σε αγωγή με δόση 0,22 g/kg του εκχυλίσματος πολυσακχαρίτη του WSCD. Όλοι οι αρουραίοι υποβλήθηκαν σε αγωγή με γαστρική έγχυση ανά ημέρα. Μετά από θεραπεία ενός μήνα, οι αρουραίοι αρνήθηκαν την τροφή για 12 ώρες πριν από τη συλλογή αίματος. Την επόμενη μέρα, όλοι οι αρουραίοι αναισθητοποιήθηκαν και θυσιάστηκαν. Κατά τη διάρκεια της δοκιμής, οι αρουραίοι ζυγίζονταν μία φορά την εβδομάδα για προσαρμογή της δόσης και ζυγίζονταν ξανά πριν από τη θυσία. Δείγματα αίματος συλλέχθηκαν σε σωληνάριο Eppendorf με διάλυμα EDTA-2Na 10 τοις εκατό. Ο ορός διαχωρίστηκε μέσω φυγοκέντρησης στις 2000 rpm για 15 λεπτά και αποθηκεύτηκε σε -80 βαθμό για περαιτέρω χρήση. Επιπλέον, αφαιρέθηκαν νεφρά, όρχεις, επιδιδυμίδα, προστάτης και σπερματοδόχος κύστη και ζυγίστηκαν γρήγορα. Μετά τη ζύγιση, οι όρχεις καταψύχθηκαν σε υγρό άζωτο για τον προσδιορισμό των SOD και MDA.

2.9. Ανάλυση ορμονικών και αντιοξειδωτικών επιδράσεων

Τα επίπεδα τεστοστερόνης (Τ) και οιστραδιόλης (Ε2) προσδιορίστηκαν στο Κέντρο Ποιότητας Επιθεώρησης Qingdao Kechuang με ραδιοανοσία και χρωματομετρική μέθοδο. Οι παγωμένοι όρχεις ζυγίστηκαν και αναμίχθηκαν με 20 φορές ψυχρό φυσιολογικό ορό (Β/Β). Το ομογενοποίημα των όρχεων που ελήφθη με ομογενοποίηση ιστού στο λουτρό πάγου φυγοκεντρήθηκε για να ληφθεί το υπερκείμενο. Τα περιεχόμενα των SOD και MDA του όρχι προσδιορίστηκαν με κιτ SOD και MDA ακολουθώντας τις οδηγίες.

2.10. Στατιστική ανάλυση

Η σημασία των διαφορών μεταξύ των ομάδων συγκρίθηκε μέσω μιας δοκιμής ANOVA μονής κατεύθυνσης που ακολουθήθηκε από τη δοκιμή του Scheffe με όριο σημαντικότητας 0.05 χρησιμοποιώντας το λογισμικό SPSS 25.0. Όλα τα δεδομένα εκφράστηκαν ως η μέση ± τυπική απόκλιση (SD) (n=3).

3. Αποτελέσματα

3.1. Η Ανάλυση των Αλλαγών των PhGs μετά το SPW με χρήση PCA

Για να συγκριθούν οι Αλλαγές PhGs μετά το SPW, επιλέχθηκαν 9 χρωματογραφικές κορυφές ως χαρακτηριστικές κορυφές και ταυτοποιήθηκαν. Οι δομές τους φαίνονται στο Σχήμα 1, οι σχετικές περιοχές κορυφής των οποίων υπολογίστηκαν για ποσοτική έκφραση. Το χρωματογράφημα HPLC όπως φαίνεται στο Σχήμα 2, το οποίο έδειξε ότι η σχετική περιεκτικότητα των κύριων PhGs άλλαξε κατά τη διάρκεια του SPW. Η ανάλυση PCA στις σχετικές περιοχές κορυφής των 9 συστατικών λήφθηκε για διάκριση διαφορετικών δειγμάτων. Το RCD(φέτες Cistanche deserticola)και WSCD(Προϊόν Επεξεργασμένο με Ατμό Οίνου)ήταν μακριά το ένα από το άλλο στην γραφική παράσταση των βαθμολογιών (Σχήμα 3(α)), το οποίο έδειξε ότι τα δείγματα ταξινομήθηκαν σε δύο ομάδες. Έτσι πιστεύεται ότι το περιεχόμενο των χημικών συστατικών ήταν διαφορετικό. Για να βρεθούν περαιτέρω οι πιθανοί χημικοί δείκτες για τη διάκριση, πραγματοποιήθηκε μια εκτεταμένη στατιστική ανάλυση για τη δημιουργία της γραφικής παράστασης φόρτωσης Bi (Εικόνα 3(β)). Οι κορυφές 2, 3, 4, 6 και 7 θα μειωθούν μετά το SPW ενώ οι κορυφές 5, 8 και 9 θα αυξηθούν και όλα ήταν τα πιο σημαντικά στοιχεία για τη διάκριση του RCD(φέτες Cistanche deserticola)και WSCD(Προϊόν Επεξεργασμένο με Ατμό Οίνου). Τα σχετικά περιεχόμενα της κορυφής 1 δεν ποικίλλουν πολύ μετά το SPW.

Εικόνα 1 Χημικές δομές των PhGs σεCistanche deserticolaYC Ma.

Σχήμα 2 Χρωματόγραμμα HPLC της τυπικής ουσίας (α), RCD(φέτες Cistanche deserticola)(β) και WSCD(Προϊόν Επεξεργασμένο με Ατμό Οίνου)(ντο). Κορυφές: (1) κιστανοζίτης F, (2) εχινακοσίδης, (3) κιστανοσίδης Α, (4) ακτεοσίδης, (5) ισοακτεοσίδης, (6) κιστανοσίδης C, (7) 2'-ακετυλακτεοσίδης, (8) οσμανθουσίδης Β, και (9) τουμπουλοσίδη Β.

Σχήμα 3 Διάγραμμα βαθμολογίας PCA (α) και διάγραμμα φόρτωσης Bi (β) RCD(φέτες Cistanche deserticola)(πράσινος κύκλος) και WSCD (κόκκινος κύκλος). Τα RCD και WSCD ταξινομήθηκαν σε δύο ομάδες. Οι κορυφές 2, 3, 4, 6 και 7 είναι τα πιο σημαντικά στοιχεία για τη διάκριση RCD και WSCD, τα οποία θα μειωθούν κατά τη διάρκεια του SPW. Οι κορυφές 5, 8 και 9 είναι επίσης τα πιο σημαντικά στοιχεία για τις διαφορές μεταξύ RCD και WSCD(Προϊόν Επεξεργασμένο με Ατμό Οίνου), το οποίο θα αυξηθεί κατά τη διάρκεια του SPW.

3.2. Τα περιεχόμενα των ολικών πολυσακχαριτών και των PhGs άλλαξαν μετά το SPW

Όπως φαίνεται στο Σχήμα 3(β), 8 συστατικά (5, 8 και 9 αυξήθηκαν και 2, 3, 4, 6 και 7 μειώθηκαν) είχαν αλλάξει σημαντικά και είχαν σημαντικό αντίκτυπο στη ομαδοποίηση του δείγματος. Μεταξύ αυτών, ο ισοακτεοσίδης και ο οσμανθουσίδης Β είχαν αυξηθεί περισσότερο ενώ ο 2′-ακετυλολακτεοσίδης και ο ακτεοσίδης μειώθηκαν περισσότερο. Έτσι, τα περιεχόμενα του ισοακτεοζίτη, του οσμανθουσίδη Β, του 2'-ακετυλακτεοσιδίου και του ακτεοσιδίου προσδιορίστηκαν με HPLC. Όπως φαίνεται στο Σχήμα 1, η κορυφή 4 ήταν ακτεοσίδη, η κορυφή 5 ήταν ισοακτεοσίδη, η κορυφή 7 ήταν 2'-ακετυλακτεοσίδη και η κορυφή 8 ήταν οσμανθουσίδη Β. Τα συνολικά PhG στο RCD(φέτες Cistanche deserticola)και WSCD(Προϊόν Επεξεργασμένο με Ατμό Οίνου)προσδιορίστηκαν χρησιμοποιώντας τη μέθοδο UV και οι ολικοί πολυσακχαρίτες πραγματοποιήθηκαν χρησιμοποιώντας τη μέθοδο φαινόλης-θειικού οξέος, τα αποτελέσματα φαίνονται στον Πίνακα 1, η ισοακτεοσίδη, ο Οσμανθουσίδης Β, οι ολικοί πολυσακχαρίτες και τα PhG στο WSCD είχαν αυξηθεί σημαντικά σε σύγκριση με το RCD. Ο 2'-ακετυλακτεοσίδης και ο ακτεοσίδης είχαν μειωθεί σημαντικά.

Πίνακας 1 Τα περιεχόμενα πολυσακχαριτών και PhG στο RCD(φέτες Cistanche deserticola)και WSCD(Προϊόν Επεξεργασμένο με Ατμό Οίνου)(mg/g) (n=3).

Σημείωση. Σημαντικές διαφορές με το RCD(φέτες Cistanche deserticola)ορίστηκαν ως *p < 0.05.

3.3. Κατασκευάστηκε το μοντέλο ανεπάρκειας νεφρού-γιανγκ που προκαλείται από υδροκορτιζόνη

Σε σύγκριση με την κανονική ομάδα, μετά από 2 εβδομάδες ενδομυϊκής ένεσης 15 mg/kg ηλεκτρικού νατρίου υδροκορτιζόνης, το σωματικό βάρος, η κατανάλωση τροφής και η αυθόρμητη δραστηριότητα μειώθηκαν σημαντικά (P<0.05) and="" the="" water="" intake="" and="" urine="" volume="" were="" increased;="" the="" results="" were="" shown="" in="" table="" 2.="" the="" t="" and="" e2="" levels="" in="" the="" serum="" of="" the="" model="" group="" were="" lower="" than="" the="" normal="" group="" as="" shown="" in="" figure="" 4.="" from="" the="" above,="" the="" kidney-yang="" deficiency="" model="" was="" successfully="">

Πίνακας 2 Οι δείκτες άλλαξαν μετά από ενδομυϊκή ένεση ηλεκτρικής νατρίου υδροκορτιζόνης, (n=10).

Σημείωση. Σημαντικές διαφορές με την ομάδα Ν χαρακτηρίστηκαν ως^# p<>

Εικόνα 4 Τα επίπεδα Τ και Ε2: (α) το επίπεδο Τ και (β) το επίπεδο Ε2. Σημαντικές διαφορές με την ομάδα Μ χαρακτηρίστηκαν ως^∗p < 0.05.="" σημαντικές="" διαφορές="" με="" την="" ομάδα="" ν="" χαρακτηρίστηκαν="">^#p < 0.05.

3.4. Η επίδραση των εκχυλισμάτων στο μέσο βάρος και τον δείκτη των σπλάχνων

Όλοι οι αρουραίοι και τα σπλάχνα τους ζυγίστηκαν και στη συνέχεια υπολογίστηκε ο μέσος δείκτης σπλάχνων.

Σε σύγκριση με την ομάδα Ν, η ομάδα Μ είχε μειώσει σημαντικά τα βάρη των σπλάχνων του νεφρού, της σπερματικής κύστης, της επιδιδυμίδας και του όρχεως, γεγονός που έδειξε επίσης ότι το μοντέλο ανεπάρκειας νεφρού-yang που προκαλείται από υδροκορτιζόνη πραγματοποιήθηκε με επιτυχία. Σε σύγκριση με την ομάδα Μ, όλο το παρατηρούμενο βάρος των σπλάχνων είχε αυξηθεί στην ομάδα PW και SR, η ομάδα PR είχε αυξημένο βάρος όρχεως, επιδιδυμίδας, σπερματοδόχου κύστης και προστάτη και η ομάδα SW είχε αυξημένο βάρος νεφρού, όρχεως, επιδιδυμίδας. και σπερματικό κυστίδιο. Σε σύγκριση με τις ομάδες PR, η ομάδα PW ήταν καλύτερη στους νεφρούς, τη σπερματική κύστη και τον προστάτη αδένα. Δεν υπήρχε σημαντική διαφορά μεταξύ των ομάδων SR και SW στο βάρος του όρχεως, της επιδιδυμίδας, της σπερματικής κύστης και του προστάτη. Τα αποτελέσματα φαίνονται στον Πίνακα 3.

Πίνακας 3 Το βάρος των σπλάχνων (g) (n=10).

Σημείωση. Σημαντικές διαφορές με την ομάδα Μ χαρακτηρίστηκαν ως^∗p < 0.05.="" σημαντικές="" διαφορές="" με="" την="" ομάδα="" ν="" χαρακτηρίστηκαν="">^#p < 0.05.

Σε σύγκριση με την ομάδα Ν, οι δείκτες των σπλάχνων του νεφρού, των όρχεων, της επιδιδυμίδας και της σπερματικής κύστης μειώθηκαν στην ομάδα Μ. Σε σύγκριση με την ομάδα Μ, η ομάδα PW και SR είχε αυξήσει τον δείκτη του νεφρού, του όρχεως, του προστάτη και της σπερματικής κύστης, οι ομάδες PR είχαν αυξήσει τον δείκτη του όρχεως, του προστάτη αδένα και της σπερματικής κύστης και η ομάδα SW είχε αύξησε τον δείκτη του νεφρού, των όρχεων και της σπερματικής κύστης. Σε σύγκριση με τις ομάδες PR, η ομάδα PW ήταν καλύτερη στους νεφρούς, τη σπερματική κύστη και τον προστάτη αδένα. Οι ομάδες SW και SR είχαν παρόμοιο δείκτη νεφρού, όρχεως, σπερματοδόχου κύστης και επιδιδυμίδας. Τα αποτελέσματα φαίνονται στον Πίνακα 4.

Πίνακας 4 Ο μέσος δείκτης σπλάχνων (g/100g) (n=10).

Σημείωση. Σημαντικές διαφορές με την ομάδα Μ χαρακτηρίστηκαν ως^∗p < 0.05.="" σημαντικές="" διαφορές="" με="" την="" ομάδα="" ν="" χαρακτηρίστηκαν="">^#p < 0.05.

3.5. Η επίδραση του εκχυλίσματος στο επίπεδο της ορμόνης (Τ και )

Όπως φαίνεται στο Σχήμα 4, σε σύγκριση με την ομάδα Μ, τα επίπεδα Τ και Ε2 σε όλες τις ομάδες θεραπείας (ομάδα PW, PR, SW και SR) είχαν αυξηθεί σημαντικά (P<0.05). however,="" the="" pw="" group="" was="" better="" than="" the="" pr="" group="" at="" levels="" t="" and="" e2.="" the="" sr="" and="" sw="" groups="" had="" no="" significant="">

3.6. Η επίδραση των εκχυλισμάτων στην αντιοξειδωτική δράση

Το SOD είναι ένα σημαντικό αντιοξειδωτικό ένζυμο. Το MDA είναι το προϊόν της υπεροξείδωσης των λιπιδίων που είναι ο δείκτης που αντικατοπτρίζει το βαθμό της οξειδωτικής βλάβης. Τα περιεχόμενα SOD και MDA αντικατοπτρίζουν την έκταση της οξειδωτικής και αντιοξειδωτικής ικανότητας. Όπως φαίνεται στο Σχήμα 5, Σε σύγκριση με την ομάδα Μ, η αντιοξειδωτική δράση σε όλες τις ομάδες θεραπείας (PW, PR, SW και SR) είχε ενισχυθεί. Η ομάδα της ΝΔ είχε τη μεγαλύτερηαντιοξειδωτικόαποτέλεσμα.

Εικόνα 5 Τα περιεχόμενα MDA και SOD: (α) το περιεχόμενο MDA και (β) το περιεχόμενο SOD. Σημαντικές διαφορές με την ομάδα Μ χαρακτηρίστηκαν ως^∗p< 0.05.="" significant="" differences="" with="" the="" n="" group="" were="" designated="" as=""><>

4. Συζήτηση

Πριν από την κλινική εφαρμογή, τα ακατέργαστα υλικά θα πρέπει να υποβάλλονται σε παραδοσιακές κινεζικές τεχνικές επεξεργασίας. Ο ατμός είναι μια από τις παραδοσιακές προσεγγίσεις επεξεργασίας για ορισμένα κινέζικα φαρμακευτικά βότανα, η οποία δίνει ένα μαύρο χρώμα που παράγεται από την αντίδραση Maillard [22], αυξάνοντας τις ποσότητες ορισμένων βιοδραστικών συστατικών [23] και τις φαρμακολογικές δραστηριότητες. WSCD(Προϊόν Επεξεργασμένο με Ατμό Οίνου)καθώς ένα από τα προϊόντα της διαδικασίας είναι καλύτερο από την άποψη της θρέψης των νεφρών σε σύγκριση με το RCD(φέτες Cistanche deserticola)όπως τεκμηριώνεται στην έκδοση του 2015 της κινεζικής φαρμακοποιίας. Σε αυτή τη μελέτη, τα αποτελέσματα της PCA έδειξαν ότι το SPW είχε αλλάξει το χημικό προφίλ του RCD(φέτες Cistanche deserticola). Επιπλέον, 8 συστατικά στα PhGs είχαν αλλάξει σημαντικά. Τα συνολικά PhG, οι ολικοί πολυσακχαρίτες, ο ισοακτεοσίδης και ο Οσμανθουσίδης Β είχαν αυξηθεί περισσότερο, ενώ ο 2'-ακετυλολακτεοσίδης και ο ακτεοσίδης μειώθηκαν μετά το SPW. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι το SPW θα μπορούσε να αλλάξει τα χημικά συστατικά του RCD(φέτες Cistanche deserticola). Τα περιεχόμενα των PhGs με 1,3,4-τρις-υποκατεστημένα τμήματα γλυκοπυρανοσυλίου (όπως ακτεοσίδη, 2'-ακετυλακτεοσίδη και κιστανοσίδη C) μειώθηκαν στο WSCD(Προϊόν Επεξεργασμένο με Ατμό Οίνου), ωστόσο, οι συγκεντρώσεις των ισομερών τους με 1,3,5-τρι-υποκατεστημένο τμήμα γλυκοπυρανοσυλίου (όπως ισοακτεοσίδη και τουμπουλοσίδη Β) αυξήθηκαν, γεγονός που έδειξε ότι ο μετασχηματισμός των χημικών συστατικών μπορεί να συνέβη κατά τη διάρκεια του SPW και η αντίδραση υδρόλυσης θα είναι μία των λόγων. Οι προτεινόμενες οδοί μετασχηματισμού φαίνονται στο Σχήμα 6. Η αύξηση των πολυσακχαριτών μετά το SPW είχε επίσης αναφερθεί στο ginseng [24].

Εικόνα 6 Προτεινόμενες οδοί μετασχηματισμού των PhGs στο Cistanche deserticola YC Ma κατά τη διάρκεια του SPW.

Cistanche deserticolaτεκμηριώθηκε ότι τονώνει τα νεφρά και αναστρέφει τη μείωση του επιπέδου τεστοστερόνης και έχει αντιοξειδωτική δράση και αντιφλεγμονώδη δράση [25], και τα PhGs και οι πολυσακχαρίτες ήταν τα δύο κύρια βιολογικά ενεργά συστατικά του Cistanche deserticola. Ως PhGs, η ισοακτεοσίδη και η οσμανθουσίδη Β είχαν αντιοξειδωτικά και αντιφλεγμονώδη αποτελέσματα [26, 27]. Έτσι, η σύγκριση των φαρμακολογικών επιδράσεων στο επίπεδο τεστοστερόνης και της αντιοξειδωτικής δράσης των RCD και WSCD(Προϊόν Επεξεργασμένο με Ατμό Οίνου)μελετήθηκε. Στο μοντέλο της ανεπάρκειας νεφρού-yang που προκαλείται από την υδροκορτιζόνη, το ενδοκρινικό σύστημα διαταράχθηκε και το επίπεδο της σεξουαλικής ορμόνης μειώθηκε σημαντικά στο αίμα. Σε αυτή τη μελέτη, τα αποτελέσματα της ανάλυσης ορμονών φύλου έδειξαν ότι και οι δύο RCD(φέτες Cistanche deserticola)και το WSCD θα μπορούσαν να αυξήσουν σημαντικά τα επίπεδα Τ και Ε2 και τόσο τα PhG όσο και οι πολυσακχαρίτες έδειξαν βελτίωση των ορμονών του φύλου. Το WSCD ήταν καλύτερο από το RCD(φέτες Cistanche deserticola), ειδικά σε ομάδες εκχυλίσματος PhGs. Τα αποτελέσματα των δεικτών σπλάχνων έδειξαν ότι τόσο τα PhGs όσο και οι πολυσακχαρίτες μπορούν να βελτιώσουν τα βάρη των σπλάχνων και τους δείκτες βάρους τους. Σε ομάδες εκχυλίσματος PhGs, το WSCD(Προϊόν Επεξεργασμένο με Ατμό Οίνου)είναι καλύτερο από το RCD στην αύξηση των βαρών και των δεικτών του νεφρού και της σπερματικής κύστης. Επιπλέον,Cistanche deserticolaέχει σημαντική αντιοξειδωτική δράση, ειδικά οι ομάδες εκχυλίσματος πολυσακχαριτών με WSCD. Όπως συζητήθηκε παραπάνω, και τα δύο RCD(φέτες Cistanche deserticola)και το WSCD θα μπορούσαν να βελτιώσουν το σύνδρομο ανεπάρκειας νεφρού-yang. Ωστόσο, το WSCD είναι καλύτερο από το RCD στην αύξηση του επιπέδου Τ, Ε2, των βαρών και των δεικτών της επιδιδυμίδας και των όρχεων. Τα αποτελέσματα της μελέτης των φαρμακολογικών επιδράσεων έδειξαν ότι το SPW είχε αλλάξει τα χημικά συστατικά των PhGs και αύξησε την περιεκτικότητα σε πολυσακχαρίτες, γεγονός που με τη σειρά του αύξησε το επίπεδο της σεξουαλικής ορμόνης και ενίσχυσε τοαντιοξειδωτικόαποτέλεσμα.

5. Συμπέρασμα

Η μελέτη ήταν να ανακαλύψει την αλλαγή των PhGs, των ολικών πολυσακχαριτών και της φαρμακολογικής επίδρασης στο RCD(φέτες Cistanche deserticola)και WSCD στον αρουραίο με ανεπάρκεια νεφρών-yang, ειδικά σε επίπεδο ορμονών και αντιοξειδωτική δράση. Αυτή η μελέτη έδειξε ότι η διαδικασία των παραδοσιακών κινεζικών βοτάνων μπορεί να αλλάξει τα χημικά συστατικά τους και να επηρεάσει τη βιοδραστηριότητά τους. Υποστηρίζεται επίσης ότι τα ωμά προϊόντα και τα μεταποιημένα προϊόντα συνταγογραφούνταν διαφορετικά στην κλινική.

Διαθεσιμότητα δεδομένων

Τα δεδομένα που χρησιμοποιούνται για την υποστήριξη των ευρημάτων αυτής της μελέτης είναι διαθέσιμα από τον αντίστοιχο συγγραφέα κατόπιν αιτήματος.

Συγκρούσεις συμφερόντων

Οι συγγραφείς δηλώνουν ότι δεν έχουν σύγκρουση συμφερόντων.

Συνεισφορές Συγγραφέων

Ο Ying Zhang και ο Song Yang σχεδίασαν τα πειράματα. Οι Ying Zhang, Yuewu Wang και Yunfeng Xiao διεξήγαγαν τη συλλογή και την προετοιμασία των δειγμάτων. Ο Ying Zhang ανέλυσε τα δεδομένα και συνέταξε την εργασία. Οι Xiangri Li και Xiaoqin Wang ήταν υπεύθυνοι για την επίβλεψη της μελέτης. Όλοι οι συγγραφείς συμμετείχαν στη συγγραφή και την παροχή σχολίων για την εργασία. Όλοι οι συγγραφείς έχουν διαβάσει και εγκρίνει την τελική εργασία.

Ευχαριστίες

Αυτή η εργασία υποστηρίχθηκε από επιχορηγήσεις από τις Διαδικασίες Επεξεργασίας για τις Παρασκευασμένες Φέτες Κινεζικών Ακατέργαστων Ναρκωτικών (Αρ. YP-PZ-2014). Ιδιαίτερες ευχαριστίες στους Wenjia Qu και Tianying Jia για τη μεγάλη βοήθειά τους στη συλλογή τουCistanche deserticola.

βιβλιογραφικές αναφορές

1. Y. Jiang and P.-F. Tu, "Analysis of chemical constituents in Cistanche species," Journal of Chromatography Α, τομ. 1216, αρ. 11, σελ. 1970–1979, 2009.

Προβολή στο: Publisher Site|Μελετητής Google

2. W. Zhao, Η. Yan, Ζ.-Υ. Liang, Y.-J. Zhang και X.-Q. Jiao, "Δομική ανάλυση του υδατοδιαλυτού πολυσακχαρίτη SPA που απομονώθηκε από το στέλεχος τουCistanche deserticolaMa," Chemical Journal of Chinese Universities, vol. 26, no. 3, σελ. 461–463, 2005.

Προβολή στο: Google Scholar

3. Q. Dong, J. Yao, J.-N. Fang και K. Ding, "Δομικός χαρακτηρισμός και ανοσολογική δραστηριότητα δύο πολυσακχαριτών που μπορούν να εκχυλιστούν με κρύο νερό απόCistanche deserticolaYC Ma," Carbohydrate Research, τόμος 342, αρ. 10, σελ. 1343–1349, 2007.

Προβολή στο: Publisher Site|Μελετητής Google

4. Χ.-Μ. Wu και P.-F. Tu, "Απομόνωση και χαρακτηρισμός -(1→6)-γλυκανών απόCistanche deserticola," Journal of Asian Natural Products Research, τόμος 7, αρ. 6, σελ. 823–828, 2005.

Προβολή στο: Publisher Site|Μελετητής Google

5. B. Košíková, A. Ebringerová, και R. Naran, "Χαρακτηρισμός κλασμάτων λιγνίνης-υδατάνθρακα που απομονώθηκαν από το παράσιτο του ξύλουCistanche deserticolaYC Ma.," Holzforschung, τόμος 53, αρ. 1, σελ. 33–38, 1999.

Προβολή στο: Google Scholar

6. G. Sheng, X. Pu, L. Lei, P. Tu, and C. Li, "Tubuloside B from Cistanche salsa rescates the PC12 neuronal cells from 1-methyl-4-phenylpyridinium-ion-induced απόπτωση και οξειδωτικό στρες», Planta Medica, τομ. 68, αρ. 11, σελ. 966–970, 2002.

Προβολή στο: Publisher Site|Μελετητής Google

7. Μ. Deng, J.-Y. Zhao, X.-D. Ju, P.-F. Tu, Y. Jiang και Ζ.-Β. Li, "Protective effect of tubuloside B on TNF alpha-induced απόπτωση σε νευρωνικά κύτταρα", Acta Pharmacologica Sinica, τομ. 25, αρ. 10, σελ. 1276–1284, 2004.

Προβολή στο: Google Scholar

8. X. Geng, L. Song, X. Pu, and P. Tu, "Neuroprotective effect of phenylethanoid glycosides from Cistanches salsa against 1-methyl-4-phenyl-1,2,3 ,6-επαγόμενη από τετραϋδροπυριδίνη (MPTP) ντοπαμινεργική τοξικότητα σε ποντικούς C57," Biological & Pharmaceutical Bulletin, τομ. 27, αρ. 6, σελ. 797–801, 2004.

Προβολή στο: Publisher Site|Μελετητής Google

9. H. Chen, FC Jing, CL Li, PF Tu, QS Zheng και ZH Wang, "Echinacoside αποτρέπει τη μείωση των ραβδωτών εξωκυτταρικών επιπέδων των νευροδιαβιβαστών μονοαμίνης σε 6-υδροξυντοπαμίνη βλάβες αρουραίους," Journal of Ethnopharmacology, τομ. . 114, αρ. 3, σελ. 285–289, 2007.

Προβολή στο: Publisher Site|Μελετητής Google

10 J. Pan, C. Yuan, C. Lin, Z. Jia, and R. Zheng, «Φαρμακολογικές δράσεις και μηχανισμοί φυσικών φαινυλοπροπανοειδών γλυκοσιδίων», Die Pharmazie, τομ. 58, αρ. 11, σελ. 767–775, 2003.

Προβολή στο: Google Scholar

11. G. Fu, H. Pang, and YH Wong, "Naturally happening phenylethanoid glycosides: Potential leads for new therapeutics," Current Medicinal Chemistry, τομ. 15, αρ. 25, σελ. 2592–2613, 2008.

Προβολή στο: Publisher Site|Μελετητής Google

12. Χ.-Δ. Wang, X.-F. Wang και L.-Y. Wu, "Βελτίωση της μνήμης των ποντικών των φαινυλαιθανοειδών γλυκοσιδίων τουCistanche deserticola," Chinese Pharmacological Bulletin, αρ. 19, σελ. 41-42, 2002.

Προβολή στο: Google Scholar

13. J.-X. Xie και C.-F. Wu, «Επίδραση αιθανολικού εκχυλίσματος τουCistanche deserticolaσχετικά με τα περιεχόμενα των νευροδιαβιβαστών μονοαμίνης στον εγκέφαλο του αρουραίου," Chinese Traditional and Herbal Drugs, αρ. 24, σελ. 417-419, 1993.

Προβολή στο: Google Scholar

14. H. Wu and C.-J. Hu, Πειθαρχία Διαδικασίας Κινέζικης Ιατρικής, Εκδοτικός Οίκος People's Medical, Πεκίνο, Κίνα, 2012.

15. ZZ Zhao, ZT Liang, K. Chan et al., «Ένα μοναδικό ζήτημα στην τυποποίηση της κινεζικής ουσίας ιατρικής: επεξεργασία», Planta Medica, τομ. 76, αρ. 17, σελ. 1975–1986, 2010.

Προβολή στο: Publisher Site|Μελετητής Google

16. Επιτροπή Κινέζικης Φαρμακοποιίας, Φαρμακοποιία της Λαϊκής Δημοκρατίας της Κίνας 2015, τόμ. IV, Φαρμακοποιία της Λαϊκής Δημοκρατίας της Κίνας, Πεκίνο, Κίνα, 2015.

17. J.-M. Chen, Enlightening Primer of Materia Medical, Traditional Chinese Medicine Ancient Books Press, Πεκίνο, Κίνα, 2009.

18. Β.-Ρ. Li and Y.-C. Εκείνη, "Επιδράσεις τονωτικών νεφρικών φαρμάκων στον άξονα υποθάλαμος-υπόφυση-γονάδα (HPG)," Journal of Traditional Chinese Medicine, αρ. 7, σελ. 63–65, 1984.

Προβολή στο: Google Scholar

19. M. Chen, L. Zhao, and W. Jia, "Metabonomic study on the biochemical profiles of a hydrocortisone-induced animal model," Journal of Proteome Research, τομ. 4, αρ. 6, σελ. 2391–2396, 2005.

Προβολή στο: Publisher Site|Μελετητής Google

20. Q. Chen and N.-Y. Yi, "The animal models and drugs for Yin-deficiency and Yang-deficiency," στο Experimental Methodology of Pharmacological Research in Traditional Chinese Medicine, People's Health Publishing House, Πεκίνο, Κίνα, 1993.

Προβολή στο: Google Scholar

21. Ζ.-Γ. Ma, Z.-L. Yang, P. Li, and C.-H. Li, "Simultaneous determination of eight phenylethanoid glycosides in different species of the genus Cistanche by high-performance liquid chromatography," Journal of Liquid Chromatography & Related Technologies, τομ. 31, αρ. 18, σελ. 2838–2850, 2008.

Προβολή στο: Publisher Site|Μελετητής Google

22. Z. Liu, Z. Chao, Y. Liu, Z. Song, and A. Lu, "Maillard αντίδραση που εμπλέκεται στην διαδικασία ατμοποίησης της ρίζας του Polygonum multiflorum", Planta Medica, τομ. 75, αρ. 1, σελ. 84–88, 2009.

Προβολή στο: Publisher Site|Μελετητής Google

23. W.-T. Chang, YH Choi, R. Van Der Heijden, et al., "Η παραδοσιακή επεξεργασία επηρεάζει έντονα τη σύνθεση μεταβολιτών με υδρόλυση σε ρίζες Rehmannia glutinosa", Chemical & Pharmaceutical Bulletin, τομ. 59, αρ. 5, σελ. 546–552, 2011.

Προβολή στο: Publisher Site|Μελετητής Google

24. Y. Jin, Y.-J. Kim, J.-N. Jeon et al., "Effect of white, red and black ginseng on physicochemical properties and ginsenosides," Plant Foods for Human Nutrition, τομ. 70, αρ. 2, σελ. 141–145, 2015.

Προβολή στο: Publisher Site|Μελετητής Google

25. T. Wang, X.-Y. Zhang και W.-Y. Xie, "Cistanche deserticolaYC Ma, 'desert Ginseng': A review," American Journal of Chinese Medicine, τόμος 40, αρ. 6, σελ. 1123–1141, 2012.

Προβολή στο: Publisher Site|Μελετητής Google

26. Σ.-Υ. Nam, H.-Y. Kim, M.-S. Youou et al., "Αντιφλεγμονώδη αποτελέσματα ισοακτεοσίδης από Abeliophyllum distichum", Immunopharmacology and Immunotoxicology, τομ. 37, αρ. 3, σελ. 258–264, 2015.

Προβολή στο: Publisher Site|Μελετητής Google

27. S. Chae, JS Kim, KA Kang, et αϊ., «Αντιοξειδωτική δραστικότητα ισοακτεοσίδης από Clerodendron trichotomum», Journal of Toxicology and Environmental Health, Part Α. Current Issues, τομ. 68, αρ. 5, σελ. 389–400, 2005.

Προβολή στο: Publisher Site|Μελετητής Google

Από: Συμπληρωματική και Εναλλακτική Ιατρική Βασισμένη σε Στοιχεία / 2019 / Άρθρο

Τόμος 2019 |Αριθμός άρθρου 2167947|https://doi.org/10.1155/2019/2167947