Η ιντερλευκίνη που προέρχεται από κύτταρα T-22 ωθεί την έκφραση του CD155 από καρκινικά κύτταρα για την καταστολή της λειτουργίας των κυττάρων ΝΚ και την προώθηση της μετάστασης
Oct 10, 2023
ΠΕΡΙΛΗΨΗ
Αν και τα Τ κύτταρα μπορούν να ασκήσουν ισχυρή αντικαρκινική ανοσία, ένα υποσύνολο Τ βοηθητικών κυττάρων (Th) που παράγουν ιντερλευκίνη-22 (IL-22) σε όγκους του μαστού και του πνεύμονα συνδέεται με θλιβερά αποτελέσματα ασθενών. Εδώ, εξετάσαμε τους μηχανισμούς με τους οποίους αυτά τα Τ κύτταρα συμβάλλουν στην ασθένεια. Σε μοντέλα ποντικού καρκίνου του πνεύμονα και του μαστού, η συνταγματική και η ειδική για Τ κύτταρα διαγραφή του Il22 μείωσε τις μεταστάσεις χωρίς να επηρεάσει την ανάπτυξη του πρωτοπαθούς όγκου. Η διαγραφή του υποδοχέα IL-22 στα καρκινικά κύτταρα μειώνει τη μετάσταση σε βαθμό παρόμοιο με αυτόν που παρατηρείται σε ποντίκια με έλλειψη IL-22-. Το IL-22 προκάλεσε υψηλή έκφραση του CD155, το οποίο δεσμεύτηκε στον ενεργοποιητικό υποδοχέα CD226 στα κύτταρα ΝΚ. Η υπερβολική ενεργοποίηση οδήγησε σε μειωμένες ποσότητες CD226 και λειτουργικά εξασθενημένα κύτταρα ΝΚ, γεγονός που αύξησε το μεταστατικό φορτίο. Η σηματοδότηση IL{11}} συσχετίστηκε επίσης με την έκφραση CD155 σε ανθρώπινα σύνολα δεδομένων και με κακή έκβαση ασθενών. Συνολικά, τα ευρήματά μας αποκαλύπτουν ένα ανοσοκατασταλτικό κύκλωμα που ενεργοποιείται από IL που προέρχεται από Τ κύτταρα-22 που προάγει τη μετάσταση στους πνεύμονες.
Οφέλη από σωληνοειδές σωληνίσκο-αντικαρκινικό
ΕΙΣΑΓΩΓΗ
Το κύριο χαρακτηριστικό της νεοπλασματικής εξέλιξης και η κύρια αιτία της θνησιμότητας που σχετίζεται με τον καρκίνο είναι η ικανότητα των καρκινικών κυττάρων να διασπείρονται σε δευτερεύουσες θέσεις και να σχηματίζουν μεταστάσεις. , και Τ βοηθητικά κύτταρα (Th) 1.3,4 Αντίθετα, τα ρυθμιστικά Τ κύτταρα (Treg), τα κυκλοφορούντα μονοκύτταρα και η προερχόμενη από κύτταρα Th IL-17A σχηματίζουν ένα ανοσοκατασταλτικό μικροπεριβάλλον, που επιτρέπει την ανοσολογική διαφυγή και προάγει τις μεταστάσεις. 4–6 Ως εκ τούτου, είναι κρίσιμο να προσδιοριστούν οι καταρράκτες σηματοδότησης που καθορίζουν τη λειτουργία των υπέρ- έναντι των αντιογκογόνων ανοσοκυττάρων.7,8 Η ιντερλευκίνη-22 (IL-22) είναι μια κυτοκίνη που παράγεται από το Th17 και, στους ανθρώπους, επίσης από το υποσύνολο Th1, γνωστό ότι προάγει την ανάπτυξη καρκινικών κυττάρων, ενισχύει τη μετανάστευση, προστατεύει από την απόπτωση, επάγει τη μετάβαση από το επιθήλιο στο μεσεγχυματικό και διατηρεί το στέλεχος των κακοήθων κυττάρων.9–13 Προάγει επίσης την πρώιμη καρκινογένεση, ενεργώντας σε πρόδρομες βλάβες ή ανώριμα καρκινικά βλαστοκύτταρα. 14–18 κύτταρα που παράγουν IL, κυρίως Th κύτταρα, αλλά και γάμμα δέλτα (gd) Τ κύτταρα, αμετάβλητα φυσικά φονικά κύτταρα Τ (iNKT) και έμφυτα λεμφοειδή κύτταρα (ILCs ), έχουν ανιχνευθεί σε πρωτοπαθείς καρκινικές βλάβες. 19–24 IL-22 εκφράζεται σε βιολογικά σχετικά επίπεδα σε καρκίνωμα μαστού, παχέος εντέρου, πνεύμονα, γαστρικού και ηπατοκυτταρικού καρκινώματος.9,11,12,25,26 Στις περισσότερες μελέτες , η έκφρασή του σχετίζεται με κακή πρόγνωση, υψηλότερο στάδιο της νόσου και ταχύτερη εξέλιξη του όγκου.13,22–24,27–29 IL-22 δρα αποκλειστικά μέσω του υποδοχέα IL-22 (IL{{40 }}R) που αποτελείται από δύο υπομονάδες, IL-22RA1 και IL-10RB.30,31 Η δράση της εκκρινόμενης IL-22 ρυθμίζεται από έναν αναστολέα, την IL{{47} } πρωτεΐνη δέσμευσης (IL-22BP, IL-22RA2), ένα ομόλογο της IL-22RA1, που παράγεται κυρίως από μυελοειδή κύτταρα.32,33 Υπό συνθήκες σταθερής κατάστασης, IL Το -22 είναι μια ουσιαστική ομοιοστατική κυτοκίνη σε επιθηλιακούς φραγμούς όπως το έντερο, οι πνεύμονες και το δέρμα.34,35 Σε αυτές τις θέσεις, η IL-22 προάγει την προστασία, την αναγέννηση και την επιδιόρθωση για τη διατήρηση της ακεραιότητας του φραγμού,36, 37 και η απουσία της επιδεινώνει την επαγόμενη από φλεγμονή καρκινογένεση.13,38 Μαζί, αυτά τα δεδομένα υπογραμμίζουν τις ευρείες, εξαρτώμενες από το πλαίσιο λειτουργίες της IL-22 τόσο σε φυσιολογικές όσο και σε παθολογικές καταστάσεις. Κατά τη δέσμευση του υποδοχέα, το IL-22 ενεργοποιεί τις κινάσες Janus Jak1 και Tyk2 για να φωσφορυλιώσουν τα STAT3, STAT1 ή STAT5, αλλά η IL-22 μπορεί να ξεκινήσει άλλες κατάντη οδούς, συμπεριλαμβανομένου του καταρράκτη των ενεργοποιούμενων από μιτογόνο πρωτεϊνικών κινασών (MAPK) ή σηματοδότηση PI3K-AktmTOR, ανάλογα με το κυτταρικό πλαίσιο.13,36,39–44 Αυτή η ποικιλομορφία οδών σηματοδότησης αντικατοπτρίζεται από το πλήθος των φυσιολογικών επιδράσεων που έχουν συσχετιστεί με τη σηματοδότηση IL-22, συμπεριλαμβανομένων αυτών που περιγράφονται παραπάνω, καθώς και προστασία από γονοτοξική βλάβη και την επαγωγή αντιβακτηριακών πεπτιδίων, βλέννας, προ- και αντιφλεγμονωδών κυτοκινών και χημειοκινών.36,38,39,45,46 Τα καρκινικά κύτταρα επάγουν την παραγωγή IL-22 από τα κύτταρα Th σε ασθενείς με καρκίνο του μαστού και του πνεύμονα.12,47,48 Η απελευθέρωση της IL-1b από το φλεγμονώδες NLRP3 επάγει την παραγωγή IL{-22 από Τ κύτταρα στον όγκο και αμφότερες τις IL-22+ Τα κύτταρα Th και μια υπογραφή NLRP3-IL{-1b μπορούν να βρεθούν σε δείγματα όγκου καρκίνου του μαστού και του πνεύμονα.48,49 Εδώ, βάλαμε στόχο να οριοθετήσουμε έναν μηχανισμό με τον οποίο το IL-22 προάγει εξέλιξη του καρκίνου του μαστού και του πνεύμονα. Βρήκαμε ότι το IL-22 προάγει την εξάπλωση της μετάστασης στον πνεύμονα, αποκαλύπτοντας ένα κύκλωμα όπου το IL{104}} μεσολάβησε στην ανοσοκαταστολή στη μεταστατική θέση προάγοντας την έκφραση του CD155 σε καρκινικά κύτταρα, η οποία συσχετίστηκε με μειωμένη έκφραση του CD226 στα κύτταρα ΝΚ και μειωμένη παραγωγή ιντερφερόνης-g (IFNg). Τα κλινικά δεδομένα υποδεικνύουν ότι η ενεργοποίηση τέτοιων οδών συνδέεται με τα αποτελέσματα των ασθενών.
ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΑ
Οφέλη συμπληρώματος cistanche-αύξηση της ανοσίας
Το IL-22 επηρεάζει τα διάσπαρτα καρκινικά κύτταρα σε συγγενή μοντέλα ποντικών με καρκίνωμα πνεύμονα και μαστού
To understand the impact of the IL-22-IL-22R1 signaling axis on cancer progression, we analyzed syngeneic murine models of breast and lung carcinoma. As cancer patients mostly succumb to metastatic disease, we recapitulated this with phenotypically relevant models. We implanted either 4T1 breast cancer or Line-1 lung cancer cells subcutaneously (s.c.) in the right flank of wild-type mice (WT) and mice lacking IL-22 expression (Il22 / ) (Figure 1A). IL-22 did not impact the outgrowth of the primary tumors in either model (Figures 1B and 1C). Upon reaching pre-defined termination criteria (tumor >225 mm2 ή έλκος), οι πνεύμονες ήταν η κύρια μεταστατική θέση στο μοντέλο μας με περιστασιακές μεταστάσεις που βρέθηκαν αλλού (δεν φαίνεται). Το Il22 / ποντίκια εμφάνισαν μειωμένη μεταστατική διάδοση των κυττάρων Line-1 και 4T1 στον πνεύμονα σε σύγκριση με ζώα άγριου τύπου ανεξάρτητα από το μέγεθος του πρωτογενούς όγκου χρησιμοποιώντας διαφορετικές μεθόδους ανίχνευσης μετάστασης (Εικόνες 1B, 1C και S1A). Έχουμε επίσης παρατηρήσει έναν παρόμοιο μεταστατικό φαινότυπο σε ένα ορθοτοπικό μοντέλο καρκίνου του μαστού, όπου 4Τ1 κύτταρα εμφυτεύτηκαν στο μαστικό λίπος (Εικόνα S2B). Όλες οι χρησιμοποιούμενες μέθοδοι τυφλής μακροσκοπικής μέτρησης, κλωνογονικών δοκιμασιών ή ιστολογίας έδειξαν υψηλή συνέπεια στην ανίχνευση χαμηλότερου μεταστατικού φορτίου σε Il22 / ζώα (Εικόνες 1B, 1C και S1C). Αυτό συνεπάγεται τον κεντρικό ρόλο της IL-22 στη μεταστατική διαδικασία. Στη συνέχεια, αναγκάσαμε τη μετάσταση μέσω ενδοφλέβιας έγχυσης καρκινικών κυττάρων, η οποία παρακάμπτει την ανάγκη για αποκόλληση και διήθηση ιστού (Εικόνα 1Δ). Οι ενδοφλέβιες (iv) ενέσεις και των δύο κυτταρικών γραμμών αντικατόπτριζαν τον φαινότυπο στο υποδόριο μοντέλο. Θα μπορούσαμε πράγματι να επιβεβαιώσουμε ένα χαμηλότερο μεταστατικό φορτίο σε Il22 / ποντίκια (Εικόνες 1Ε και 1ΣΤ). Αυτά τα αποτελέσματα υποδεικνύουν έναν συγκεκριμένο ρόλο για την IL-22 σε διάσπαρτα κύτταρα στην κυκλοφορία. Για να διακρίνουμε επιδράσεις ειδικά για το στέλεχος, χρησιμοποιήσαμε ένα μοντέλο καρκίνου του μαστού E0771 (Εικόνα 1G).50,51 Η ενδοφλέβια ένεση κυττάρων Ε0771- GFP αποκάλυψε μειωμένο μεταστατικό φορτίο σε Il22 / ζώα που επικυρώθηκε με κυτταρομετρία ροής (Εικόνες 1Η και S1D). Ομοίως, παρατηρήσαμε χαμηλότερο μεταστατικό φορτίο στο ήπαρ ποντικών όταν τα κύτταρα Ε{32}}GFP εγχύθηκαν ενδοσπληνικά (Εικόνα S1E). Ολόκληρος ο αριστερός πνεύμονας ποντικών με ένεση E0771-GFP καθαρίστηκε οπτικά ακολουθώντας ένα πρωτόκολλο iDISCO για ποσοτικό προσδιορισμό των μεταστάσεων με μικροσκοπία φωτός επί τόπου (Εικόνα 1I).52 Εδώ, το Il22 / ποντίκια εμφάνισαν μειωμένη τάση να αναπτύξουν μεταστάσεις , ενώ το μέγεθος των οπτικοποιημένων μεταστάσεων δεν διέφερε και δεν είχε συγκεκριμένο μοτίβο εντοπισμού τους (Εικόνα 1J). Συνοπτικά, η IL-22 ενήργησε σε διάσπαρτα καρκινικά κύτταρα, επιτρέποντας μεταστάσεις καρκίνου του μαστού και του πνεύμονα στον πνεύμονα.
Τα Τ κύτταρα είναι η σχετική πηγή IL-22 στη μεταστατική θέση στον πνεύμονα
Εντοπίσαμε προηγουμένως CD4+ Τ κύτταρα ως την κύρια πηγή IL-22 σε πρωτοπαθείς όγκους ανθρώπινου πνεύμονα και βρογχοκυψελιδικά δείγματα πλύσης. στους πνεύμονες των μοντέλων μας, εγχύαμε ενδοφλεβίως κύτταρα E0771 σε ζώα αναφοράς Foxp3mRFP Il17aGFPIl22sgBFP και προσδιορίσαμε ποσοτικά κύτταρα IL{10}} χρησιμοποιώντας κυτταρομετρία ροής (Εικόνες 2Α και S2A).53 Οι πληθυσμοί ορίστηκαν ως {5} CD{1 }} και διπλά αρνητικά (DN) (CD4 , CD8 ) ab T κύτταρα (CD3+ gdTCR NK1.1 ), gd T κύτταρα (CD3+ gdTCR+ NK1.1) και CD{{ 26}} NK1.1+ και CD3 NK1.1+ κύτταρα (Εικόνες 2Β και S2B). Παρατηρήσαμε μια αύξηση στο κλάσμα των CD4+, CD8+ Τ κυττάρων και NK1.1+ κύτταρα που παρήγαγαν IL-22 στους πνεύμονες ζώων στα οποία έγινε ένεση με όγκο ( Σχήματα 2C, S2C και S2D). Εδώ, τα CD{43}} και τα CD8+ Τ κύτταρα αποτελούσαν την πλειοψηφία των κυττάρων που παράγουν IL{{45} σε ποντικούς που φέρουν όγκο (Εικόνα 2C). Επιπλέον, εντοπίσαμε ότι τέτοια CD4+ Τ κύτταρα παρήγαγαν IL{-22 αλλά όχι IL-17A (Εικόνα 2D). Αυτά τα κύτταρα είχαν χαμηλή έκφραση CD44, επιβεβαιώνοντας τον φαινότυπο μνήμης τους σύμφωνα με τις προηγούμενες παρατηρήσεις μας (Εικόνα S2E).48 Για να διερευνήσουμε περαιτέρω αυτά τα ευρήματα σε όλα τα μοντέλα, χρησιμοποιήσαμε ενδοκυτταρική χρώση για να αξιολογήσουμε την παραγωγή IL-22 στη γραμμή {56}} sc μοντέλο, το οποίο έδωσε παρόμοια αποτελέσματα εκτός από ένα μειωμένο κλάσμα παραγωγών IL-22 CD8+ Τ κυττάρων (Εικόνες S2F–S2I). Θα μπορούσαμε επίσης να αναγνωρίσουμε ότι τα κύτταρα IL-22+ δεν συνέκφρασαν IFNg, γεγονός που ξεχωρίζει τους παραγωγούς IL-22 ποντικιού από το υποσύνολο Th1 (Εικόνα 2G).49 Επιπλέον, χρησιμοποιήσαμε συνεστιακή μικροσκοπία σε κοπή ακριβείας φέτες πνεύμονα από ζώα ανταποκριτές για να διερευνηθεί η χωρική κατανομή τους στους πνεύμονες ποντικών με έγχυση όγκου. Εδώ, θα μπορούσαμε να αναγνωρίσουμε ότι τέτοιοι παραγωγοί IL{-22 και IL-17A εντοπίζονται σχεδόν αποκλειστικά στις μεταστατικές εστίες (Εικόνα 2Ε). Όπως αποδεικνύεται από την κυτταρομετρία ροής, δεν βρήκαμε καμία συσχέτιση μεταξύ IL{-22 και IL-17Α παραγωγής από τα κύτταρα αναφοράς στις μεταστατικές εστίες, υποδεικνύοντας ότι η IL{-22 και η IL-17 παράγονται πράγματι από δύο διαφορετικά κυτταρικά υποσύνολα. Επιβεβαιώσαμε επίσης ότι ένα μεγάλο μέρος των κυττάρων που παράγουν IL-22-είναι CD4+ Τ κύτταρα (Εικόνα 2Ε). Καθώς αυτά τα δεδομένα έδειξαν κυρίαρχο ρόλο για τα Τ κύτταρα στην παραγωγή IL-22, δημιουργήσαμε ένα ποντίκι Il22floxCd4cre με μια υπό όρους διαγραφή του Il22 σε όλα τα ώριμα Τ κύτταρα (Εικόνα 2F). Όταν προκλήθηκαν με κύτταρα E0771-GFP, τα ποντίκια Il22floxCd4cre είχαν μειωμένη τάση να αναπτύξουν μεταστάσεις στον πνεύμονα, που θυμίζει τον φαινότυπο που παρατηρείται στο παγκόσμιο Il22 / ζώα (Εικόνα 2F). Ωστόσο, θα μπορούσαμε επίσης να επιβεβαιώσουμε ότι η cre-recombinase υπό τον έλεγχο του προαγωγέα CD4 κατάργησε εντελώς την παραγωγή IL{-22 όχι μόνο σε CD{4+, αλλά και σε CD8+ Τ κύτταρα που απομονώθηκαν από τον σπλήνα ποντικών Il22floxCd4cre, και επομένως αυτό το μοντέλο δεν μπορούσε να χρησιμοποιηθεί για τον εντοπισμό μιας συγκεκριμένης πηγής IL-22 (Εικόνα S2J). Για να επιβεβαιώσουμε τον ρόλο των κυττάρων Th ως την κρίσιμη πηγή IL{-22 στο μοντέλο μας, μεταφέραμε άγριου τύπου και Il22 / CD{101}} Τ κύτταρα σε ζώα Rag1 / II22/ που στη συνέχεια έλαβαν E{{ 104}} Κύτταρα GFP iv (Εικόνα 2G). Εδώ, θα μπορούσαμε να επιβεβαιώσουμε ότι η παραγωγή IL-22 από τα υιοθετημένα μεταφερόμενα CD4+ Τ κύτταρα είναι επαρκής για την προώθηση των μεταστάσεων στους πνεύμονες στο μοντέλο μας, αλλά καταργείται όταν χρησιμοποιούνται CD{108}} Τ κύτταρα που απομονώνονται από II22 / ζώα (Εικόνα 2G). Είναι σημαντικό ότι οι διαφορές στη μετάσταση επηρεάστηκαν από τη μεταμόσχευση Τ κυττάρων κατά τη μεταφορά (Εικόνα S2K). Συμπερασματικά, εντοπίσαμε τα κύτταρα Th ως επαρκή πηγή IL-22 που οδηγεί τις μεταστάσεις στον πνεύμονα ποντικών που φέρουν όγκο και στη συνέχεια προσπαθήσαμε να αναγνωρίσουμε το σχετικό κύτταρο στόχο.
Σχήμα 1. Το IL-22-knockout μειώνει τον αριθμό των μεταστάσεων στους πνεύμονες αλλά δεν επηρεάζει την ανάπτυξη του όγκου σε συγγενή μοντέλα ποντικών με καρκίνωμα πνεύμονα και μαστού
Εικόνα 2. Τα Τ κύτταρα είναι η κύρια πηγή IL-22 στον πνεύμονα ποντικών που φέρουν όγκο
Η έκφραση της IL-22RA1 σε κύτταρα όγκου είναι απαραίτητη για το σχηματισμό μετάστασης
Η έκφραση IL-22RA1 περιορίζεται σε μη αιμοποιητικά κύτταρα και χρησιμεύει ως περιοριστικός παράγοντας για τη σηματοδότηση της IL-22. Για να διερευνήσουμε την επιρροή του στον μεταστατικό φαινότυπο, δημιουργήσαμε μια σταθερή διαγραφή Il22ra1 στα κύτταρα 4T1 και Line-1 (Εικόνα 3Α). Σύμφωνα με τα προηγούμενα ευρήματά μας, η ανάπτυξη όγκου των κυττάρων 4T1 Il22ra1 ήταν σε μεγάλο βαθμό ανεπηρέαστη σε σύγκριση με τα κύτταρα ελέγχου 4T1 (Εικόνα 3Β). Ωστόσο, τα ποντίκια στα οποία έγινε ένεση με κύτταρα 4T1 Il22ra1 sc ή iv είχαν λιγότερες μακροσκοπικές και κλωνογονικές μεταστάσεις στον πνεύμονα σε σύγκριση με τα κύτταρα ελέγχου 4T1 (Εικόνες 3Β και 3Γ). Για να επιβεβαιώσουμε ότι αυτό το αποτέλεσμα δεν εξαρτάται από κλώνους, δημιουργήσαμε και αναλύσαμε τρεις κλώνους Line{-1 Il22ra1 και τους δοκιμάσαμε έναντι τριών κλώνων ελέγχου, οι οποίοι απέδωσαν παρόμοια αποτελέσματα (Εικόνες 3D και 3E). Αυτό επιβεβαιώνει ότι τα καρκινικά κύτταρα που εκφράζουν IL-22RA1-είναι ο σχετικός στόχος της IL-22 στην οδήγηση μεταστάσεων στους πνεύμονες. Για να αποκλείσουμε τα αποτελέσματα εκτός στόχου της μεθοδολογίας, χρησιμοποιήσαμε το IL-22BP για την αναστολή της σηματοδότησης IL-22. Δημιουργήσαμε κυτταρικές σειρές 4T1 και Line{-1 που εκκρίνουν συστατικά IL-22BP (Il22ra2+) (Εικόνα S3A). Όταν εγχύθηκαν sc, τα κύτταρα Line-1 Il22ra2+ αναπτύχθηκαν συγκρίσιμα με το μάρτυρα στο σημείο εμφύτευσης, όπως είχε προηγηθεί στα μοντέλα Il22ra1 και τα Il22 / ποντίκια, αν και τα κύτταρα 4T1 Il22ra2+ αναπτύχθηκαν πιο αργή (Εικόνα S3B). Εδώ, τα κύτταρα 4T1 Il22ra2+ είχαν σε μεγάλο βαθμό μειωμένο αριθμό μεταστάσεων όταν εγχύθηκαν sc (Εικόνα S3B και S3C). Παρά τη μεγαλύτερη μεταβλητότητα, τα κύτταρα Line-1 Il22ra{2+ σχημάτισαν επίσης λιγότερες μεταστάσεις όταν εγχύθηκαν υποδορίως ή ενδοφλέβια (Εικόνα S3D και S3E). Έτσι, η εξουδετέρωση της IL-22 μέσω της IL-22BP μιμήθηκε σε μεγάλο βαθμό τον φαινότυπο που παρατηρήθηκε με τα κύτταρα Il22ra1 και τα Il22 / ποντίκια, επιβεβαιώνοντας τη συνάφεια της κυτοκίνης για τη μεταστατική διαδικασία.
Οφέλη συμπληρώματος cistanche-αύξηση της ανοσίας
Το IL-22 ελέγχει την ανάπτυξη των καρκινικών κυττάρων κατά το πρώιμο στάδιο της μεταστατικής μεταμόσχευσης
To determine the role of IL-22 signaling during the dissemination process, we analyzed the kinetics of metastatic seeding in our models. For this, we injected 4T1-GFP cells i.v. and analyzed lungs at 12 and 48 h after injection (Figure S4A). We used confocal microscopy to quantify the numbers of GFP+ colonies (defined as cell clusters of >100 mm) και μεμονωμένα κύτταρα ανά mm2 πνευμονικού ιστού (Εικόνα S4B). Δεν μπορέσαμε να εντοπίσουμε διαφορές στις 12 ώρες μετά την ένεση, υποδεικνύοντας ότι η σπορά μπορεί να μην επηρεαστεί σε μεγάλο βαθμό από την IL-22 (Εικόνες S4C και S4D). Ωστόσο, στο χρονικό σημείο 48-h, ο αριθμός των κυττάρων και των αποικιών GFP+ μειώθηκε στον πνεύμονα Il22 / ποντικών (Εικόνες S4C και S4D). Αυτό υποδηλώνει έναν ρόλο για το IL-22 στην πρόκληση πρώιμης μετάστασης στους πνεύμονες. Για να αξιολογήσουμε τον ρυθμό πολλαπλασιασμού, χορηγήσαμε σε ποντίκια την ταυτόχρονη ένεση με 5-αιθυνυλ-20 -δεοξυουριδίνη (EdU) 4 ώρες πριν από τη διερεύνηση στις 12, 24, 48 ώρες και 7 ημέρες μετά την ένεση του όγκου (Εικόνα S4E) . Παρόμοια με τη μικροσκοπική μέτρηση, δεν εντοπίσαμε διαφορές στον αριθμό των κυττάρων GFP+ νωρίτερα από 48 ώρες μετά την ένεση (Εικόνες S4F–S4G). Αντίθετα, θα μπορούσαμε να ανιχνεύσουμε διαφορές στην ενσωμάτωση του EdU, κάτι που υποδεικνύει υψηλότερο κλάσμα διαιρούμενων κυττάρων μόνο την ημέρα 7 μετά την ένεση (Εικόνα S4G). Επομένως, πιστεύουμε ότι οι διαφορές στο φορτίο όγκου του πνεύμονα που επηρεάζεται από την IL-22 που παρατηρούνται ήδη από 48 ώρες διαμεσολαβούνται από έναν μηχανισμό ανεξάρτητο από τον πολλαπλασιασμό.
Εικόνα 3. Η έκφραση IL-22RA1 σε κύτταρα όγκου είναι απαραίτητη για το σχηματισμό μεταστάσεων
Η IL-22 ρυθμίζει την έκφραση του CD155 στα καρκινικά κύτταρα και έτσι προάγει τη μετάσταση
Με βάση τα ευρήματά μας ότι η IL-22 δρα σε καρκινικά κύτταρα IL{-22ra1+ για την προώθηση της μετάστασης, πραγματοποιήσαμε αλληλουχία μαζικού RNA των κυττάρων 4T1 που υποβλήθηκαν σε θεραπεία με IL-22 για περαιτέρω οριοθέτηση τον υποκείμενο μηχανισμό (GEO: GSE202314) (Εικόνα 4Α). Ανακαλύψαμε 147 γονίδια που ρυθμίζονταν διαφορετικά. Από αυτά, η έκφραση 133 γονιδίων αυξήθηκε και 14 μειώθηκαν κατά τη θεραπεία με IL{11}} (Εικόνες 4Β και S5A). Επικυρώσαμε το Pvr (υποδοχέας ιού πολιομυελίτιδας, Pvr) ως έναν από τους πιο σημαντικά αυξημένους στόχους χρησιμοποιώντας το qPCR (Εικόνα S5B). Αυτό είναι αξιοσημείωτο επειδή το CD155, το προϊόν του Pvr, υπερεκφράζεται σε διάφορους καρκίνους και έχει ιδιότητες που προάγουν τον όγκο, συμπεριλαμβανομένης της μετάστασης. Γραμμή-1 και κύτταρα Ε0771 με κυτταρομετρία ροής (Εικόνα 4C). Ανιχνεύσαμε αύξηση στην έκφραση του CD155 σε όλες τις κυτταρικές σειρές σε διάστημα 72 ωρών (Εικόνες 4D και 4Ε), αλλά αυτό το αποτέλεσμα απουσίαζε σε κύτταρα που δεν είχαν IL-22RA1 (Εικόνα S5C). Στη συνέχεια, αξιολογήσαμε την επίδραση της IL-22 στην έκφραση CD155 σε κύτταρα E0771-GFP από τους πνεύμονες ποντικών που φέρουν όγκο (Εικόνα 4F). Εδώ, θα μπορούσαμε να επιβεβαιώσουμε ότι τα κύτταρα που εμφυτεύτηκαν σε Il22 / ποντίκια είχαν χαμηλότερη έκφραση του CD155, η οποία συσχετίστηκε με ένα μικρότερο κλάσμα κυττάρων E0771-GFP που ανιχνεύθηκε με κυτταρομετρία ροής (Εικόνες 4G και 4H). Για να επαληθεύσουμε το ρόλο του CD155 στη μετάσταση, δημιουργήσαμε κυτταρικές σειρές Pvr Line-1 και 4T1 (Εικόνες 4I, S5D και S5G). Ενώ αυτό είχε μικρή επίδραση στην ικανότητά τους να αναπτύσσονται υποδόρια (Εικόνες S5E και S5F), κατάργησε την ικανότητα να σχηματίζουν μεταστάσεις στον πνεύμονα (Εικόνες 4J και S5H). Θα μπορούσαμε να αντιστρέψουμε αυτή τη διαδικασία με συστατική έκφραση CD155 σε κύτταρα Pvr ανεξάρτητα από τη ρύθμιση που προκαλείται από την IL-22- (Pvr+).
Εικόνα 4. Η σηματοδότηση IL-22 αυξάνει την έκφραση του CD155 στην επιφάνεια των καρκινικών κυττάρων και προσδίδει αντίσταση στον έλεγχο της μετάστασης
Σε αυτό το πλαίσιο, θα μπορούσαμε να προκαλέσουμε μεταστάσεις στους πνεύμονες Il22 / ποντικών, τονίζοντας τη σύνδεση μεταξύ αυτών των δύο μορίων και τον ρόλο τους ως μεσολαβητές της μεταστατικής διαδικασίας (Εικόνες 4K και S5I).
Το CD155 στα καρκινικά κύτταρα σχετίζεται με μειωμένη έκφραση του CD226 σε κύτταρα ΝΚ και μειωμένη παραγωγή IFNg
Το CD155 παίζει έναν εγγενή ρόλο στον πολλαπλασιασμό και την προσκόλληση στα καρκινικά κύτταρα, 54-57 μεταξύ άλλων. Δεν εντοπίσαμε ελλείψεις στον πολλαπλασιασμό των Line-1 Pvr κυττάρων in vitro (τα δεδομένα δεν εμφανίζονται). Είναι σημαντικό ότι το CD155 έχει έναν εξωγενή κυτταρικό προ-μεταστατικό ρόλο δεσμεύοντας στους ανοσοτροποποιητικούς υποδοχείς CD96, CD226 ή TIGIT στην επιφάνεια των ΝΚ και Τ κυττάρων. αντικαρκινικές αποκρίσεις στους πνεύμονες ποντικών που περιέχουν κύτταρα 4Τ1-λουσιφεράσης+ (4Τ1-Luc) (Εικόνα 5Α). Επιβεβαιώσαμε χρησιμοποιώντας ένα σύστημα απεικόνισης in vivo (IVIS) ότι άγριου τύπου και Il22 / ποντίκια είχαν παρόμοια σπορά καρκινικών κυττάρων την ημέρα 5 μετά την ένεση και οι διαφορές στο φορτίο του όγκου αυξήθηκαν κατά τη διάρκεια δύο εβδομάδων (Εικόνες 5Β και 5Γ) . Πράγματι, το ελάττωμα της παραγωγής IFNg από κύτταρα ΝΚ, αλλά όχι από άλλους κυτταρικούς τύπους, παρουσίασε την απώλεια μηχανισμών χυμικών τελεστών (Εικόνες 5D, 5Ε και S6A) και συσχετίστηκε με υψηλότερο φορτίο όγκου (Εικόνα S6B). Αυτό το εφέ βρέθηκε με συνέπεια στο μοντέλο Line-1 sc (Εικόνες S6C–S6E). Εξονυχιστικά με κυτταρομετρία τσιπ, 60 δείγματα από 4Τ1-ποντίκια που φέρουν μετάσταση στους πνεύμονες κατέδειξαν αυξημένη έκφραση του CD155 στις μεταστατικές εστίες στο WT αλλά όχι σε Il22 / ζώα (Εικόνες 5F και S6F). Βρήκαμε υψηλότερη διήθηση κυττάρων ΝΚ στις μεταστατικές εστίες των ζώων Il22 / αλλά όχι των ζώων WT, υποδηλώνοντας υψηλότερη ενεργοποίηση και επιβεβαιώνοντας την εξάρτηση από κύτταρα ΝΚ ως κύτταρα τελεστών κατά του όγκου (Εικόνα 5ΣΤ). Το CD226, αλλά όχι το TIGIT ή το CD96, εκφράστηκε διαφορικά από κύτταρα ΝΚ και, σε μικρότερο βαθμό, από CD{46}} Τ κύτταρα στους πνεύμονες άγριου τύπου και Il22 / ζώων (Εικόνες 5G και S6G–S6H). Το CD226 είναι ένας συν-υποδοχέας απαραίτητος για την ενεργοποίηση των λειτουργιών τελεστών των Τ κυττάρων ΝΚ και CD8. Ως εκ τούτου, ξεκινήσαμε να διερευνήσουμε την παθοφυσιολογική του σημασία στο μοντέλο μας.61–64
cistanche tubulosa-βελτίωση του ανοσοποιητικού συστήματος
Ο αποκλεισμός του CD226 καταργεί τον αντιμεταστατικό φαινότυπο των ζώων με ανεπάρκεια IL-22-
Η υπερβολική σηματοδότηση με τη μεσολάβηση CD155-που υπάρχει στο μικροπεριβάλλον του όγκου μπορεί να προκαλέσει εσωτερίκευση και αποικοδόμηση του CD226 στα τελεστικά κύτταρα.61,63 Για να σκιαγραφήσουμε τον ρόλο της υπερβολικής έκφρασης CD155 στο CD226 και την επακόλουθη αντικαρκινική απόκριση, εγχύαμε 4T1 έλεγχο και Κύτταρα Pvr+ iv σε ποντικούς Il22/ και δύο ομάδες έλαβαν επίσης αντίσωμα αποκλεισμού αντι-CD226 (480.1) (Εικόνα 6Α). Τόσο τα κύτταρα Pvr+ όσο και ο αποκλεισμός του CD226 θα μπορούσαν παρομοίως να προάγουν τη μετάσταση στους πνεύμονες σε Il22 / ποντίκια και αυτά τα αποτελέσματα δεν συνεργάστηκαν (Εικόνα 6Β). Παρόμοια με τις προηγούμενες παρατηρήσεις μας σε ζώα άγριου τύπου, αυτό ήταν αρκετό για να αναστείλει την παραγωγή IFNg από κύτταρα ΝΚ (Εικόνα 6C). Τέλος, εντοπίσαμε μείωση στην έκφραση CD226 σε κύτταρα ΝΚ σε ποντίκια στα οποία χορηγήθηκε ένεση Pvr+- σε σύγκριση με κύτταρα ελέγχου. Αυτό συσχετίστηκε με τη μειωμένη ικανότητα αυτών των κυττάρων ΝΚ να παράγουν IFNg (Εικόνα 6D). Επιπλέον, διερευνήσαμε τη δυνατότητα του αγωνιστικού αντισώματος TIGIT (IG9) να αναστέλλει την ενεργοποίηση των ΝΚ κυττάρων σε Il22 / ζώα και του αποκλεισμού CD96 (3.3) για να αποτρέψουμε την αναστολή της λειτουργίας των κυττάρων ΝΚ (Εικόνα 6Ε). Ούτε ο αγωνιστής TIGIT ούτε ο ανταγωνιστής CD96 άλλαξαν τον αριθμό των μεταστάσεων σε σύγκριση με Il22 / ζώα που έλαβαν κύτταρα ελέγχου ή Pvr+ 4Τ1, αντίστοιχα (Εικόνα 6F). Όταν ενεργοποιηθεί, το TIGIT θα μπορούσε να αναστείλει την παραγωγή IFNg από CD8+ T αλλά όχι από κύτταρα NK (Εικόνα 6G). Έτσι, ένας άξονας IL-22- CD155 πυροδοτεί μειωμένη έκφραση του CD226 σε κύτταρα ΝΚ και τα καθιστά αδρανή στο μικροπεριβάλλον του όγκου.
Η έκφραση CD155 συμπληρώνει την υπογραφή του γονιδίου IL-22 σε ασθενείς με καρκίνο του μαστού και του πνεύμονα
Τέλος, αξιολογήσαμε την κλινική συνάφεια του CD155 στο πλαίσιο του άξονα IL-22-IL-22RA1. Η έκφραση του CD155 από μόνη της σχετίζεται με δυσμενή πρόγνωση σε μια ποικιλία καρκινικών οντοτήτων.54 Αναλύσαμε δεδομένα αλληλουχίας RNA από τον άτλαντα γονιδιώματος του καρκίνου (TCGA) αδενοκαρκίνωμα πνεύμονα (TCGA: LUAD, n=504) και HER2- θετικά δείγματα ασθενών από τα σύνολα δεδομένων διηθητικού καρκινώματος μαστού (TCGA: BRCA, n=110). Εστιάσαμε στα βασικά γονίδια που σχετίζονται με την IL-22-: IL22RA1, IL22RA2, IL10RB και PVR. Για τη διαστρωμάτωση των κοορτών ασθενών, χρησιμοποιήσαμε τη συσσωρευτική ομαδοποίηση, μια μέθοδο ομαδοποίησης χωρίς επίβλεψη, με αποτέλεσμα τρεις κύριες ομάδες (Εικόνες 7Α και 7Β). Αυτό αποκάλυψε χαρακτηριστικά μοτίβα γονιδιακής έκφρασης: σύμπλεγμα 0 (IL22RA1hi, IL22RA2lo, IL10RBmed, PVRhi), σύμπλεγμα 1 (IL22RA1lo, IL22RA2hi, IL10RBhi, PVRlo2) και cc (IL22RA1lo, IL22RA2lo, IL10RBlo, PVRmed) (Εικόνα 7C). Αυτές οι ομάδες κατανεμήθηκαν ομοιόμορφα σε αυτές τις δύο κοόρτες (Εικόνα 7Δ). Οι ασθενείς της ομάδας 0 και της ομάδας δεδομένων LUAD 2 είχαν χειρότερη επιβίωση από τους ασθενείς της ομάδας 1 (Εικόνα 7Ε). Η επιβίωση των ομάδων 1 και 2 δεν διέφερε και στις δύο κοόρτες (Εικόνα 7Ε). Περαιτέρω, υπολογίσαμε περιορισμένους μέσους χρόνους επιβίωσης (RMST) για τις ομάδες 0 και 1 για να ποσοτικοποιήσουμε τη διαφορά στον αναμενόμενο χρόνο επιβίωσης μέχρι τα πέντε χρόνια παρακολούθησης, με αποτέλεσμα 361,18 ημέρες για το LUAD και 93,23 ημέρες για το BRCA (Εικόνα 7F). Οι ομάδες 0 και 1 είχαν διαφορές στη συχνότητα των σταδίων παθολογικής νόσου εντός τους στο LUAD αλλά όχι στην κοόρτη BRCA (Εικόνα 7G). Είναι σημαντικό ότι τέτοιες διαφορές επιβίωσης μεταξύ των ομάδων (IL22RA1hiPVRhi) και 1 (IL22RA1loPVRlo) προέρχονται κυρίως από ασθενείς που διαγνώστηκαν στα πρώιμα (I και II), αλλά όχι σε προχωρημένα στάδια της νόσου (III και IV) (Εικόνα S7A). Για να αξιολογήσουμε την επίδραση κάθε γονιδίου στην επιβίωση, χρησιμοποιήσαμε το μοντέλο αναλογικών κινδύνων του Cox. Τόσο το IL22RA1 (αναλογία κινδύνου [HR]=1.23) όσο και το PVR (HR=1.28) επηρεάζουν την επιβίωση, ενώ το IL22RA2 και το IL10RB δεν άλλαξαν τον κίνδυνο στην κοόρτη LUAD (Εικόνα S7B). Επιπλέον, μόνο το CD226 (p=0.06), αλλά όχι το TIGIT ή το CD96, έτειναν να επηρεάζουν την επιβίωση, σύμφωνα με τα ευρήματά μας σε προκλινικά μοντέλα (Εικόνα S7B). Χρησιμοποιήσαμε τον αλγόριθμο αποσυνέλιξης CIBERSORTx στην κοόρτη LUAD για να αξιολογήσουμε εάν τα μοτίβα γονιδιακής έκφρασης των συστάδων μας έχουν αντίκτυπο στη διήθηση των ανοσοκυττάρων στους ασθενείς.65 Είναι ενδιαφέρον ότι υπάρχει αύξηση στις μονάδες CIBERSORTx για ενεργοποιημένα κύτταρα ΝΚ στο σύμπλεγμα 1 σε σύγκριση με τα συμπλέγματα 0 και 2 σε ασθενείς με LUAD, ενώ δεν υπήρχαν διαφορές στα κύτταρα ΝΚ ηρεμίας ή στα ενεργοποιημένα Τ κύτταρα μνήμης CD4+ (Εικόνα S7C) με παρόμοια τάση στην κοόρτη BRCA (Εικόνα S7D). Μαζί, αυτά τα αποτελέσματα από κλινικές κοόρτες καταδεικνύουν τη συνάφεια μιας ρυθμιστικής σχέσης μεταξύ της IL-22 που προέρχεται από Τ κύτταρα και του CD155.
Εικόνα 5. Η έκφραση του CD226 είναι υψηλότερη σε κύτταρα ΝΚ σε ποντικούς Il22–/–
ΣΥΖΗΤΗΣΗ
Σε αυτήν τη μελέτη, ανακαλύψαμε έναν μηχανισμό με τον οποίο τα Τ κύτταρα παράγουν IL-22 για την προώθηση της μετάστασης στους πνεύμονες σε μοντέλα ποντικών με καρκίνο του πνεύμονα και του μαστού. Μηχανιστικά, τα Τ κύτταρα στις μεταστατικές εστίες στον πνεύμονα, κυρίως CD4+, παράγουν IL-22 που σηματοδοτεί απευθείας μέσω του υποδοχέα της που εκφράζεται σε καρκινικά κύτταρα, προάγοντας την έκφραση του προ-μεταστατικού μορίου CD155.{{ 5}},58,59 Παρά την καλά μελετημένη πανκαρκινική έκφραση του CD155 και τους εγγενείς και εξωγενείς ρόλους του στην εξέλιξη του καρκίνου,54 η οδός που είναι υπεύθυνη για τη ρύθμιση του CD155 στα κακοήθη κύτταρα παραμένει ασαφής.66–68 Δείξαμε ότι η IL{{{ 15}} αύξησε την έκφραση CD155 σε κυτταρικές σειρές καρκίνου του πνεύμονα και του μαστού in vitro και in vivo, ενώ η συστατική έκφρασή του επέτρεψε τις μεταστάσεις σε Il22 / ποντίκια, σε σύγκριση με κύτταρα ελέγχου και ανεπαρκή κύτταρα. Η αυξημένη έκφραση του CD155 στο μικροπεριβάλλον του πνεύμονα του όγκου οδήγησε σε μείωση του συν-διεγερτικού μορίου CD226 στα κύτταρα ΝΚ, μειώνοντας τον εντοπισμό τους σε μεταστάσεις και παραγωγή IFNg, η οποία συσχετίστηκε με υψηλότερο φορτίο όγκου. Σε προηγούμενες μελέτες μας, εντοπίσαμε συσσώρευση Τ κυττάρων που παράγουν IL{{21} σε δείγματα όγκων ασθενών με μη μικροκυτταρικό καρκίνωμα του πνεύμονα (NSCLC).12,48 Έχουμε αποδείξει ότι τα καρκινικά κύτταρα ενεργοποιούν το NLRP3- εξαρτημένη έκκριση IL-1b που επάγει τέτοια παραγωγή IL{-22 κυρίως από Th κύτταρα.18 Αξίζει να σημειωθεί ότι, στους ανθρώπους, λόγω των διαφορών στα προφίλ κυτοκινών Th κυττάρων, η IL{{ 31}} επάγεται επίσης στα Th1 κύτταρα. Είναι κατανοητό ότι αυτό μπορεί να βλάψει την αντικαρκινική ανοσολογική απόκριση. Είναι σημαντικό ότι τέτοιες παραλλαγές Th1 μπορεί εν μέρει να εξηγούν την υπερπρόοδο του καρκίνου κατά την ενεργοποίηση των Τ κυττάρων μετά από αποκλεισμό του σημείου ελέγχου.69 Σύμφωνα με τις προηγούμενες παρατηρήσεις μας, επιβεβαιώσαμε τη συσσώρευση IL-22-που παράγει CD4+ και CD{{38} } Τ κύτταρα, αλλά και NK1.1+ κύτταρα, στη μεταστατική θέση στον πνεύμονα ζώων με έγχυση όγκου. Είναι σημαντικό να σημειωθεί ότι παρατηρήσαμε διαφορές ειδικών στελεχών στη συσσώρευση τέτοιων Τ κυττάρων CD8+ που παράγουν IL στα μοντέλα μας. Ωστόσο, η κατάργηση της παραγωγής IL-22 στα συνολικά ώριμα Τ κύτταρα ήταν αρκετή για να ανακεφαλαιώσει το αποτέλεσμα που παρατηρήσαμε σε ζώα με ανεπάρκεια IL.70 Επίσης, η θετική μεταφορά των CD4+ Τ κυττάρων σε Τα Rag / II22 / ποντίκια ήταν επαρκή για να προκαλέσουν μεταστάσεις στους πνεύμονες, επισημαίνοντας τον πρωταρχικό ρόλο των κυττάρων Th ως πηγής IL-22. Αντίθετα, τα προηγούμενα ευρήματά μας υποδηλώνουν ότι παρά τη συσσώρευση CD8+ Τ κυττάρων σε δείγματα όγκου, η συνεισφορά τους στη δεξαμενή IL-22 είναι μικρή.48 Σε κάθε περίπτωση, ο χαρακτηρισμός τέτοιου CD{{53 }} Η παραγωγή Τ-λεμφοκυττάρων-22-είναι απαραίτητη για την προσεκτική αξιολόγηση των προ- ή κατά των όγκων ιδιοτήτων τους καθώς αναδύονται νέα δεδομένα για αυτόν τον υποπληθυσμό.71,72 Επίσης, ο πρωταρχικός ρόλος των κυττάρων ΝΚ και ΝΚΤ στον έλεγχο του όγκου υπερτερεί πιθανή συνεισφορά στον σχηματισμό μετάστασης μέσω της IL-22, η οποία διακρίνεται σε ένα πείραμα μεταφοράς Rag / II22 / υιοθέτησης χρησιμοποιώντας ζώα χωρίς ώριμα Τ κύτταρα αλλά με λειτουργικά κύτταρα ΝΚ.37 Αυτή η υπόθεση υποστηρίζεται περαιτέρω από τα ευρήματά μας στη μεταστατική εστίες όπου τα ΝΚ κύτταρα βρέθηκαν πιο άφθονα από τα κυτταροτοξικά Τ κύτταρα, υπογραμμίζοντας τα ΝΚ κύτταρα ως βασικούς παράγοντες στον έλεγχο του όγκου απουσία IL-22. Είναι σημαντικό να σημειωθεί ότι εστιάσαμε στους παραγωγούς IL{-22 σε μεταστατικές εστίες στον πνεύμονα, αλλά δεν λάβαμε υπόψη την προέλευσή τους, την κλωνικότητα ή την κατανομή τους στο αίμα ή στα λεμφοειδή όργανα. Επιπλέον, διάφορες πηγές IL-22 προάγουν την εξέλιξη του όγκου με τρόπο εξαρτώμενο από το πλαίσιο που μεσολαβεί από την πλειοτροπική δράση αυτής της κυτοκίνης. Μαζί με αυτές τις γραμμές, παρόμοια κύτταρα{66}}που παράγουν IL σε διάφορα διαμερίσματα (πνεύμονας έναντι σπλήνας έναντι λεμφαδένα) θα μπορούσαν να επηρεάσουν διαφορικά τους προ-ογκικούς φαινότυπους ή να μην έχουν καμία λειτουργία ανάλογα με το πλαίσιο, κάτι που θα πρέπει να διερευνηθεί περαιτέρω. Οι μελέτες για τον καρκίνο αναφέρουν επανειλημμένα ότι η IL-22 επηρεάζει την ανάπτυξη και την ανάπτυξη των πρωτοπαθών όγκων και, τελικά, την εξέλιξη της νεοπλασίας. in vitro και έτσι προάγουν το σχηματισμό μεταστάσεων.76,77 Σημαντικά, η κατάλυση της IL-22 μπορεί να ανακουφίσει το ανοσοκατασταλτικό μικροπεριβάλλον σε ένα μοντέλο Kras-mutant καρκινώματος του πνεύμονα.14 Στην τρέχουσα μελέτη, δείξαμε ότι το αυξημένο μεταστατικό φορτίο ήταν μια άμεση επίδραση της IL{-22 σε διάσπαρτα κύτταρα όγκου IL{{-22RA{1+, η οποία είχε ως αποτέλεσμα αυξημένη ανάπτυξη αποικιών. Είναι σημαντικό ότι τα δεδομένα μας δεν αποκλείουν επίσημα την επίπτωση σε μη καρκινικά κύτταρα. Ως εκ τούτου, η επίδραση της IL-22 στη διάδοση των καρκινικών κυττάρων μέσω της εγγενούς δράσης της ενδογενώς εκφραζόμενης IL-22R επισημαίνεται εκτενώς από τους Giannou et al.78
Εικόνα 6. Η σηματοδότηση CD226 είναι απαραίτητη για την παραγωγή IFNg από κύτταρα ΝΚ
Δείξαμε ότι το Pvr είναι ένα από τα γονίδια με αυξημένη έκφραση στα καρκινικά κύτταρα κατά τη θεραπεία με IL-22. Σε αυτό το πλαίσιο, τα κύτταρα με ανεπάρκεια CD155-σχημάτισαν λίγες μεταστάσεις, τόσο σε άγριου τύπου όσο και σε ποντίκια Il22/και, σημαντικότερο, η επανεισαγωγή του CD155 μας επέτρεψε να ανασυστήσουμε τον μεταστατικό φαινότυπο. Ο εγγενής ρόλος του CD155 στα καρκινικά κύτταρα έχει μελετηθεί καλά και είναι γνωστό ότι επηρεάζει τη σπορά, τον πολλαπλασιασμό των καρκινικών κυττάρων και τη μετανάστευση.56,57 Ωστόσο, τα κύτταρα Pvr δεν εμφάνισαν ανασταλτικό πολλαπλασιασμό ή μετανάστευση στα χέρια μας και τη σπορά των καρκινικών κυττάρων δεν επηρεάστηκε σε Il22 / ποντίκια. Αρχικά αναγνωρίστηκε σε κύτταρα που παρουσιάζουν αντιγόνο, το CD155 χρησιμεύει ως εξωτερικός προαγωγέας της εξέλιξης του όγκου που καταστέλλει τη λειτουργία των κυττάρων ΝΚ και Τ συνδέοντας με το CD96 και το TIGIT στην επιφάνειά τους και επάγει την εσωτερίκευση και την καθοδική ρύθμιση του CD226.56,61-64,79-85Due για την ανοσοκατασταλτική του λειτουργία, το CD155 σε κύτταρα καρκίνου και ξενιστές ασκεί προ-μεταστατικές ιδιότητες και προτείνεται ως στόχος για τον αποκλεισμό της αναστολής του σημείου ελέγχου. 87 Ωστόσο, η υπερβολική διέγερση του CD226 στο μικροπεριβάλλον του όγκου οδηγεί σε εσωτερίκευση και αποικοδόμηση.63 Αυτό συνήθως εξουδετερώνεται από τα CD96 και TIGIT, τα οποία δεσμεύουν το CD155 με υψηλότερη συγγένεια.58 Είναι ενδιαφέρον ότι τα κύτταρα 4T1 είναι γνωστό ότι επάγουν την καθοδική ρύθμιση του CD226 στην ενδοδιήθηση του όγκου. λεμφοκύτταρα και καταστέλλουν την παραγωγή IFNg.88 Εδώ, δείξαμε ότι η ανεπάρκεια IL-22 διατήρησε την έκφραση CD226 στα NK και CD8+ Τ κύτταρα. Ωστόσο, μόνο τα κύτταρα ΝΚ είχαν δραματικά υψηλότερες δυνατότητες παραγωγής IFNg και αντιστρόφως συσχετίστηκαν με το μεταστατικό φορτίο. Είναι ενδιαφέρον ότι η ενεργοποίηση της σηματοδότησης TIGIT στη μελέτη μας ανέστειλε την παραγωγή IFNg από CD{38}} Τ, αλλά όχι NK, κύτταρα και δεν ήταν επαρκής για να αυξήσει το μεταστατικό φορτίο. Ομοίως, ένας άλλος υποδοχέας για το CD155, το CD96, δεν ρυθμίστηκε διαφορικά σε Il22/ποντίκια ούτε η αναστολή του απέτρεψε τη μετάσταση, υποδεικνύοντας ότι το CD155 δεν καταστέλλει τα κύτταρα ΝΚ μέσω CD96 στο μοντέλο μας. Αυτό υπογραμμίζει την ειδική για τον κυτταρικό τύπο ρύθμιση των αντικαρκινικών αποκρίσεων από το CD155 και τους διάφορους συνεργάτες δέσμευσης του.
Οφέλη συμπληρώματος cistanche-πώς να ενισχύσετε το ανοσοποιητικό σύστημα
Κάντε κλικ εδώ για να δείτε τα προϊόντα Cistanche Enhance Immunity
【Ζητήστε περισσότερα】 Email:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692
Ο αντίκτυπος του CD155 στην πρόγνωση και ο ρόλος του στην παθογένεση του καρκίνου του πνεύμονα, του μαστού, του παχέος εντέρου και άλλων τύπων καρκίνου έχει τεκμηριωθεί.79-85 Υπάρχουν τεράστιες ενδείξεις για την προγνωστική σημασία της IL-22 και των σχετικών γονιδίων της σε διάφορες καρκινικές οντότητες.10,21,27,75,89–91 Ωστόσο, ορισμένες μελέτες δεν αναφέρουν καμία επίδραση της έκφρασης της IL-22 στην επιβίωση.12 Ενώ αυτές οι αποκλίσεις μπορεί να οφείλονται στην ετερογένεια στην πληθυσμούς ασθενών, ζητήματα δειγματοληψίας και αναφοράς, πολλές από αυτές τις μελέτες επικεντρώνονται σε ένα μόνο γονίδιο που σχετίζεται με τη σηματοδότηση της IL{12}}. Εδώ, χρησιμοποιήσαμε αθροιστική ομαδοποίηση για να διακρίνουμε τα μοτίβα έκφρασης των IL22RA1, IL22RA2, IL10RB και PVR σε κοόρτες LUAD και BRCA στο TCGA και να τις συσχετίσουμε με τα κλινικά δεδομένα. Εδώ, εντοπίσαμε τρία πρότυπα έκφρασης αυτών των γονιδίων: το πρότυπο 0 (IL22RA1hi, IL22RA2lo, PVRhi), το πρότυπο 1 (IL22RA1lo, IL22RA2hi, PVRlo) και το πρότυπο 2 (IL22RA1lo, IL22RA2lo, PVRmed). Προσδιορίσαμε ότι η υψηλή έκφραση της IL22RA1 συνέπεσε με μια υψηλή έκφραση της PVR, η οποία επίσης μεταφράστηκε σε φτωχά αποτελέσματα συνολικής επιβίωσης, ιδιαίτερα σε ασθενείς που διαγνώστηκαν με πρώιμα (I και II), αλλά όχι προχωρημένα (III και IV), παθολογικά στάδια, τον συγκεκριμένο σκηνικό ρόλο αυτού του μηχανισμού. Αντίθετα, η υψηλή έκφραση του IL22RA2, επίσης γνωστή ως IL-22BP, συσχετίστηκε με χαμηλότερη έκφραση PVR και καλύτερη επιβίωση.18,34 Το τρίτο πρότυπο αντιστοιχούσε σε εντελώς χαμηλή έκφραση και αντιπροσώπευε ανοσολογικά ψυχρούς όγκους.92 Σε αυτές τις γραμμές Η αποσυνέλιξη CIBERSORTx έδειξε ότι το σύμπλεγμα 1 που χαρακτηρίζεται από υψηλή έκφραση IL22RA2 διαθέτει υπογραφή γονιδίου για ενεργοποιημένα, αλλά όχι σε ηρεμία, κύτταρα ΝΚ σε σύγκριση με άλλες συστάδες. Η έκφραση του CD226 αποδεικνύεται ότι στρωματοποιεί τους ασθενείς ως προς την έκβαση σε αρκετές κλινικές δοκιμές NSCLC.93 Ωστόσο, λόγω του διπλού τρόπου ρύθμισης του CD226 πριν και μετά τη μετάφραση, η έκφραση δεν αντανακλάται πάντα στα δεδομένα αλληλουχίας mRNA.94 Ως εκ τούτου, μελέτες που εστιάζουν σχετικά με τη μετα-μεταφραστική ρύθμιση του CD226 αξιολογήστε την έκφρασή του σε κλινικά δείγματα χρησιμοποιώντας χρώση αντισωμάτων.63 Ωστόσο, κατά την εξέταση του συνόλου δεδομένων TCGA σχετικά με τη σχέση των εταίρων δέσμευσης CD155 με την επιβίωση, μόνο το CD226 είχε τάση προς βελτιωμένη πρόγνωση (log (HR) {{57 }}.24, p=0.06), ενώ το TIGIT και το CD96 δεν έδειξαν καμία συσχέτιση με την επιβίωση. Είναι σημαντικό ότι τα κύτταρα όγκου που κατασκευάστηκαν για να εκκρίνουν IL-22BP σχημάτισαν λιγότερες μεταστάσεις, υπογραμμίζοντας τη δυνατότητα της οδού IL-22 για στοχευμένη θεραπευτική παρέμβαση. Αυτό θα μπορούσε να εξουδετερώσει την υπερέκφραση του όγκου CD155, καθώς η άμεση στόχευση της οποίας παραμένει πρόκληση λόγω ενός πολύπλοκου δικτύου συν-υποδοχέων. Αξίζει να σημειωθεί περαιτέρω ότι οι μακροπρόθεσμες επιδράσεις της εξουδετέρωσης της IL-22 στη μετάσταση είναι άγνωστες, αλλά θα μπορούσαν να έχουν άμεσο αντίκτυπο στη θεραπευτική θεώρηση των Τ κυττάρων ή να παρέχουν τη λογική για την εξουδετέρωση της IL-22 χρησιμοποιώντας αντισώματα με ευεργετικό προφίλ ασφάλειας, όπως το Fezakinumab (δοκιμή NCT01941537) ή η μηχανική IL-22 με σχεδιασμό που βασίζεται στη δομή.39,95 Συνοπτικά, εντοπίσαμε την επαγόμενη από την IL-22-υπερέκφραση CD155 στα καρκινικά κύτταρα ως μηχανισμό που ωφελεί τη μεταστατική ανάπτυξη. Αυτός ο ουσιαστικός ρόλος στην πρόγνωση τόνισε τη δυνατότητα της IL-22 ως θεραπευτικού στόχου στον καρκίνο. Μέχρι στιγμής, η εξουδετέρωση της IL-22 προτείνεται κυρίως ως στρατηγική για τη θεραπεία αυτοάνοσων νοσημάτων.31,49 Τα δεδομένα μας για την IL-22BP ως εξουδετερωτή της IL-22, η οποία φαινοτυπεί η παγκόσμια ανεπάρκεια IL-22, υποστήριξε τις θεραπευτικές δυνατότητες για τη στόχευση του άξονα IL{-22R1 και θα πρέπει να διερευνηθεί περαιτέρω σε προκλινικές και κλινικές μελέτες.
ΒΙΒΛΙΟΓΡΑΦΙΚΕΣ ΑΝΑΦΟΡΕΣ
1. Hanahan, D., and Weinberg, RA (2011). Χαρακτηριστικά του καρκίνου: η επόμενη γενιά. Cell 144, 646-674. https://doi.org/10.1016/j.cell.2011. 02.013.
2. Massague´ , J., and Obenauf, AC (2016). Μεταστατικός αποικισμός από κυκλοφορούντα καρκινικά κύτταρα. Nature 529, 298–306. https://doi.org/10.1038/ nature17038.
3. Renner, P., Rovira, J., Klein, C., Schlitt, HJ, Geissler, EK, and Kroemer, A. (2014). Τα φυσικά φονικά κύτταρα KLRG1(+) προστατεύουν από την πνευμονική μεταστατική νόσο μέσω ανοσοεπιτήρησης. OncoImmunology 3, e28328. https://doi.org/10.4161/onci.28328.
4. Mohme, M., Riethdorf, S., and Pantel, K. (2017). Κυκλοφορούντα και διάχυτα καρκινικά κύτταρα - μηχανισμοί ανοσολογικής επιτήρησης και διαφυγής. Nat. Κλιν. Oncol. 14, 155–167. https://doi.org/10.1038/nrclinonc. 2016.144.
5. Briukhovetska, D., Do¨ rr, J., Endres, S., Libby, P., Dinarello, CA, and Kobold, S. (2021). Ιντερλευκίνες στον καρκίνο: από τη βιολογία στη θεραπεία. Nat. Rev. Cancer 21, 481–499. https://doi.org/10.1038/s41568-021-00363-z.
6. Kitamura, T., Qian, BZ, and Pollard, JW (2015). Προαγωγή των μεταστάσεων των ανοσοκυττάρων. Nat. Rev. Immunol. 15, 73–86. https://doi.org/10.1038/ nri3789.
7. Galon, J., and Bruni, D. (2020). Ανοσολογία όγκου και εξέλιξη όγκου: αλληλένδετες ιστορίες. Ανοσία 52, 55–81. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2019.12.018.
8. Page` s, F., Mlecnik, B., Marliot, F., Bindea, G., Ou, FS, Bifulco, C., Lugli, A., Zlobec, I., Rau, TT, Berger, MD , et al. (2018). Διεθνής επικύρωση της συναίνεσης Immunoscore για την ταξινόμηση του καρκίνου του παχέος εντέρου: μια μελέτη προγνωστικής και ακρίβειας. Lancet 391, 2128–2139. https://doi. org/10.1016/S0140-6736(18)30789-Χ.
9. Rui, J., Chunming, Z., Binbin, G., Na, S., Shengxi, W., and Wei, S. (2017). Η IL-22 προάγει την εξέλιξη του καρκίνου του μαστού ρυθμίζοντας το HOXB-AS5. Oncotarget 8, 103601–103612. https://doi.org/10.18632/ oncotarget.22063.
10. Kryczek, I., Lin, Y., Nagarsheth, N., Peng, D., Zhao, L., Zhao, E., Vatan, L., Szeliga, W., Dou, Y., Owens, S ., et al. (2014). Τα IL-22(+)CD4(+) Τ κύτταρα προάγουν τη στελέχη του καρκίνου του παχέος εντέρου μέσω της ενεργοποίησης του μεταγραφικού παράγοντα STAT3 και της επαγωγής της μεθυλοτρανσφεράσης DOT1L. Immunity 40, 772-784. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2014.03.010.
11. Jiang, R., Tan, Z., Deng, L., Chen, Y., Xia, Y., Gao, Y., Wang, X., and Sun, B. (2011). Η ιντερλευκίνη-22 προάγει το ανθρώπινο ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα με την ενεργοποίηση του STAT3. Hepatology 54, 900-909. https://doi.org/10.1002/ hep.24486.
12. Kobold, S., Vo¨ lk, S., Clauditz, T., K€ upper, NJ, Minner, S., Tufman, A., D€ uwell, P., Lindner, M., Koch, I ., Heidegger, S., et al. (2013). Η ιντερλευκίνη-22 εκφράζεται συχνά σε μικροκυτταρικό και μεγαλοκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα και προάγει την ανάπτυξη καρκινικών κυττάρων ανθεκτικών στη χημειοθεραπεία. J. Thorac. Oncol. 8, 1032–1042. https://doi.org/10.1097/JTO.0b013e31829923c8.
13. Hernandez, P., Gronke, K., and Diefenbach, A. (2018). Μια σύλληψη-22: ιντερλευκίνη-22 και καρκίνος. Ευρώ. J. Immunol. 48, 15–31. https://doi.org/10. 1002/eji.201747183.
14. Khosravi, N., Caetano, MS, Cumpian, AM, Unver, N., De la Garza Ramos, C., Noble, O., Daliri, S., Hernandez, BJ, Gutierrez, BA, Evans, SE, et al. (2018). Η IL22 προάγει τον καρκίνο του πνεύμονα του μεταλλαγμένου Kras με την επαγωγή μιας ανοσοαπόκρισης του πρωτόγονου και την προστασία των ιδιοτήτων του στελέχους. Cancer Immunol. Res. 6, 788–797. https://doi.org/10.1158/ 2326-6066.CIR-17-0655. 15. Li, H., Mou, Q., Li, P., Yang, Z., Wang, Z., Niu, J., Liu, Y., Sun, Z., Lv, S., Zhang, B ., και Yin, C. (2019). Το MiR-486-5p αναστέλλει την επαγόμενη από την IL-22-επιθηλιακή-μεσεγχυματική μετάβαση των καρκινικών κυττάρων του μαστού καταστέλλοντας το Dock1. J. Cancer 10, 4695-4706. https://doi.org/10.7150/jca.30596.
16. Kim, K., Kim, G., Kim, JY, Yun, HJ, Lim, SC και Choi, HS (2014). Η ιντερλευκίνη-22 προάγει τον μετασχηματισμό των επιθηλιακών κυττάρων και την ογκογένεση του μαστού μέσω της ενεργοποίησης του MAP3K8. Carcinogenesis 35, 1352-1361. https:// doi.org/10.1093/carcin/bgu044.
17. Katara, GK, Kulshrestha, A., Schneiderman, S., Riehl, V., Ibrahim, S., and Beaman, KD (2020). Η ιντερλευκίνη-22 προάγει την ανάπτυξη κακοήθων βλαβών σε ένα μοντέλο ποντικού αυθόρμητου καρκίνου του μαστού. ΜοΙ. Oncol. 14, 211–224. https://doi.org/10.1002/1878-0261.12598.
18. Huber, S., Gagliani, N., Zenewicz, LA, Huber, FJ, Bosurgi, L., Hu, B., Hedl, M., Zhang, W., O'Connor, W., Jr., Murphy, AJ, et al. (2012). Η IL-22BP ρυθμίζεται από το φλεγμονώδες σώμα και ρυθμίζει την ογκογένεση στο έντερο. Nature 491, 259–263. https://doi.org/10.1038/ nature11535.
19. Perez, LG, Kempski, J., McGee, HM, Pelzcar, P., Agalioti, T., Giannou, A., Konczalla, L., Brockmann, L., Wahib, R., Xu, H., et al. (2020). Η σηματοδότηση TGFbeta στα κύτταρα Th17 προάγει την παραγωγή IL-22 και τον καρκίνο του παχέος εντέρου που σχετίζεται με την κολίτιδα. Nat. Commun. 11, 2608. https://doi.org/10.1038/ s41467-020-16363-w.
20. Meyer, A., Stark, M., Karstens, JH, Christiansen, H., and Bruns, F. (2012). Ιστοκύττωση των κυττάρων Langerhans της κρανιακής βάσης: είναι αποτελεσματική η ακτινοθεραπεία χαμηλής δόσης; Case Rep. Oncol. Med. 2012, 789640. https:// doi.org/10.1155/2012/789640.
21. Zhuang, Υ., Peng, LS, Zhao, YL, Shi, Y., Mao, XH, Guo, G., Chen, W., Liu, XF, Zhang, JY, Liu, Τ., et αϊ. (2012). Τα αυξημένα κύτταρα Τ CD4(+) και τα κύτταρα Th22 που παράγουν ενδοκαρκινική IL{2}}συσχετίζονται με την εξέλιξη του γαστρικού καρκίνου και προβλέπουν κακή επιβίωση του ασθενούς. Cancer Immunol. Άλλο ανοσοποιητικό. 61, 1965–1975. https://doi.org/10.1007/s00262-012- 1241-5.
22. Chen, X., Wang, Y., Wang, J., Wen, J., Jia, X., Wang, X., and Zhang, H. (2018). Η συσσώρευση κυττάρων T-βοηθού 22, ιντερλευκίνης-22 και κατασταλτικών κυττάρων που προέρχονται από μυελοειδή προάγει την εξέλιξη του γαστρικού καρκίνου σε ηλικιωμένους ασθενείς. Oncol. Κάτοικος της Λατβίας. 16, 253–261. https://doi.org/10.3892/ol.2018.{12}}.
23. Doulabi, H., Rastin, M., Shabahangh, H., Maddah, G., Abdollahi, A., Nosratabadi, R., Esmaeili, SA, and Mahmoudi, M. (2018). Ανάλυση των κυττάρων Th22, Th17 και CD4(+) που παράγουν IL-17/IL-22 σε διαφορετικά στάδια του ανθρώπινου καρκίνου του παχέος εντέρου. Biomed. Pharmacother. 103, 1101–1106. https://doi.org/10.1016/j.biopha.2018.04.147.
24. Zeng, H., Liu, Z., Wang, Z., Zhou, Q., Qi, Y., Chen, Y., Chen, L., Zhang, P., Wang, J., Chang, Y ., et al. (2020). Τα κύτταρα που παράγουν ενδοκαρκινική IL22-καθορίζουν τον ανοσοδιηθητικό υποτύπο μυοδιηθητικό καρκίνο της ουροδόχου κύστης (2017). Μια προστατευτική λειτουργία της IL-22BP σε ισχαιμία-επαναιμάτωση και ηπατική βλάβη που προκαλείται από ακεταμινοφαίνη. J. Immunol. 199, 4078–4090. https://doi. org/10.4049/jimmunol.1700587.
25. Jiang, R., Wang, H., Deng, L., Hou, J., Shi, R., Yao, M., Gao, Y., Yao, A., Wang, X., Yu, L ., και Sun, B. (2013). Η IL-22 σχετίζεται με την ανάπτυξη ανθρώπινου καρκίνου του παχέος εντέρου μέσω ενεργοποίησης του STAT3. BMC Cancer 13, 59. https://doi.org/10.1186/1471-2407-13-59.
26. Fukui, H., Zhang, X., Sun, C., Hara, K., Kikuchi, S., Yamasaki, T., Kondo, T., Tomita, T., Oshima, T., Watari, J ., et al. (2014). Η IL-22 που παράγεται από ινοβλάστες που σχετίζονται με τον καρκίνο προάγει την εισβολή γαστρικών καρκινικών κυττάρων μέσω σηματοδότησης STAT3 και ERK. Br. J. Cancer 111, 763-771. https://doi.org/ 10.1038/bjc.2014.336.
27. Liu, T., Peng, L., Yu, P., Zhao, Y., Shi, Y., Mao, X., Chen, W., Cheng, P., Wang, T., Chen, N ., et al. (2012). Τα αυξημένα κυκλοφορούντα κύτταρα Th22 και Th17 σχετίζονται με την εξέλιξη του όγκου και την επιβίωση των ασθενών στον ανθρώπινο γαστρικό καρκίνο. J. Clin. Immunol. 32, 1332–1339. https://doi.org/10.1007/ s10875-012-9718-8.
28. Niccolai, E., Taddei, A., Ricci, F., Rolla, S., D'Elios, MM, Benagiano, M., Bechi, P., Bencini, L., Ringgressi, MN, Pini, A ., et al. (2016). Τα κύτταρα Th22 που παράγουν IFN γάμμα εντός του όγκου συσχετίζονται με τη σταδιοποίηση του TNM και τα χειρότερα αποτελέσματα στον καρκίνο του παγκρέατος. Clin. Sci. 130, 247–258. https:// doi.org/10.1042/CS20150437.
29. Xu, X., Tang, Y., Guo, S., Zhang, Y., Tian, Y., Ni, B., and Wang, H. (2014). Τα αυξημένα επίπεδα ενδοογκικής ιντερλευκίνης 22 και οι συχνότητες των κυττάρων Τ που παράγουν ιντερλευκίνη 22-CD4+ συσχετίζονται με την εξέλιξη του καρκίνου του παγκρέατος. Pancreas 43, 470-477. https://doi.org/10.1097/MPA.{10}}.
30. Kotenko, SV, Izotova, LS, Mirochnitchenko, OV, Esterova, E., Dickensheets, H., Donnelly, RP, and Pestka, S. (2001). Αναγνώριση του λειτουργικού συμπλέγματος υποδοχέα ιντερλευκίνης-22 (IL-22): η αλυσίδα IL-10R2 (IL-10Rbeta ) είναι μια κοινή αλυσίδα και των δύο IL{{7 }} και σύμπλοκα υποδοχέα IL-22 (σχετιζόμενα με IL- 10-προερχόμενο από κύτταρα Τ επαγώγιμου παράγοντα, IL-TIF). J. Biol. Chem. 276, 2725–2732. https://doi.org/10.1074/jbc.M0078 37200.
31. Ouyang, W., and O'Garra, A. (2019). IL-10 Οικογενειακές Κυτοκίνες IL-10 και IL- 22: από τη βασική επιστήμη στην κλινική μετάφραση. Immunity 50, 871-891. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2019.03.020.
32. Kempski, J., Giannou, AD, Riecken, K., Zhao, L., Steglich, B., L€ ucke, J., Garcia-Perez, L., Karstens, KF, Wo¨ stemeier, A. , Nawrocki, Μ., et αϊ. (2020). Η IL22BP μεσολαβεί στις αντικαρκινικές επιδράσεις της λεμφοτοξίνης κατά των όγκων του παχέος εντέρου σε ποντίκια και ανθρώπους. Gastroenterology 159, 1417– 1430.e3. https://doi.org/10.1053/j.gastro.2020.06.033.
33. Kotenko, SV, Izotova, LS, Mirochnitchenko, OV, Esterova, E., Dickensheets, H., Donnelly, RP, and Pestka, S. (2001). Αναγνώριση, κλωνοποίηση και χαρακτηρισμός ενός νέου διαλυτού υποδοχέα που δεσμεύει την IL-22 και εξουδετερώνει τη δραστηριότητά της. J. Immunol. 166, 7096–7103. https://doi. org/10.4049/jimmunol.166.12.7096.
34. Dudakov, JA, Hanash, AM, and van den Brink, MRM (2015). Ιντερλευκίνη-22: ανοσοβιολογία και παθολογία. Annu. Rev. Immunol. 33, 747–785. https://doi.org/10.1146/annurev-immunol-032414-112123.
35. Wolk, K., Kunz, S., Witte, E., Friedrich, M., Asadullah, K., and Sabat, R. (2004). Η IL-22 αυξάνει την έμφυτη ανοσία των ιστών. Immunity 21, 241-254. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2004.07.007.
36. Sabat, R., Ouyang, W., and Wolk, K. (2014). Θεραπευτικές ευκαιρίες του συστήματος IL-22-IL-22R1. Nat. Rev. Drug Discov. 13, 21–38. https://doi. org/10.1038/nrd4176.
37. Zenewicz, LA, Yancopoulos, GD, Valenzuela, DM, Murphy, AJ, Stevens, S., and Flavell, RA (2008). Η έμφυτη και προσαρμοστική ιντερλευκίνη-22 προστατεύει τα ποντίκια από τη φλεγμονώδη νόσο του εντέρου. Immunity 29, 947-957. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2008.11.003.
38. Gronke, K., Herna´ ndez, PP, Zimmermann, J., Klose, CSN, Kofoed Branzk, M., Guendel, F., Witkowski, M., Tizian, C., Amann, L., Schumacher, F., et al. (2019). Η ιντερλευκίνη-22 προστατεύει τα βλαστοκύτταρα του εντέρου από το γονιδιοτοξικό στρες. Nature 566, 249–253. https://doi.org/10.1038/ s41586-019-0899-7.
39. Saxton, RA, Henneberg, LT, Calafiore, M., Su, L., Jude, KM, Hanash, AM και Garcia, KC (2021). Οι προστατευτικές λειτουργίες των ιστών της ιντερλευκίνης-22 μπορούν να αποσυνδεθούν από τις προφλεγμονώδεις δράσεις μέσω του σχεδιασμού που βασίζεται στη δομή. Ανοσία 54, 660–672.ε9. https://doi.org/10. 1016/j.immuni.2021.03.008.
40. Dumoutier, L., Louahed, J., and Renauld, JC (2000). Κλωνοποίηση και χαρακτηρισμός επαγώγιμου παράγοντα που προέρχεται από Τ κύτταρα (IL-TIF) που σχετίζεται με την IL-10-, μιας νέας κυτοκίνης που σχετίζεται δομικά με την IL-10 και επάγεται από την IL-9. J. Immunol. 164, 1814–1819. https://doi.org/10.4049/jimmunol.164. 4.1814.
41. Lejeune, D., Dumoutier, L., Constantinescu, S., Kruijer, W., Schuringa, JJ, and Renauld, JC (2002). Η ιντερλευκίνη-22 (IL-22) ενεργοποιεί τις οδούς κινάσης JAK/ STAT, ERK, JNK και p38 MAP σε μια κυτταρική σειρά ηπατώματος αρουραίου. Διαδρομές που είναι κοινές και διαφορετικές από το IL-10. J. Biol. Chem. 277, 33676–33682. https://doi.org/10.1074/jbc.M204204200.
42. Nagalakshmi, ML, Rascle, A., Zurawski, S., Menon, S., and de Waal Malefyt, R. (2004). Η ιντερλευκίνη-22 ενεργοποιεί το STAT3 και επάγει την IL-10 από τα επιθηλιακά κύτταρα του παχέος εντέρου. Int. Immunopharmacol. 4, 679–691. https://doi. org/10.1016/j.intimp.2004.01.008.
43. Mitra, A., Raychaudhuri, SK, and Raychaudhuri, SP (2012). Ο κυτταρικός πολλαπλασιασμός που προκαλείται από την IL ρυθμίζεται από τον καταρράκτη σηματοδότησης PI3K/Akt/mTOR. Κυτοκίνη 60, 38-42. https://doi.org/10.1016/j.cyto.2012.06.316.
44. Bachmann, M., Ulziibat, S., H€ ardle, L., Pfeilschifter, J., and M€ uhl, H. (2013). Το IFNalpha μετατρέπει το IL-22 σε μια κυτοκίνη που ενεργοποιεί αποτελεσματικά το STAT1 και τους κατάντη στόχους του. Biochem. Pharmacol. 85, 396–403. https://doi.org/10.1016/j.bcp.2012.11.004.
45. Zheng, Y., Valdez, PA, Danilenko, DM, Hu, Y., Sa, SM, Gong, Q., Abbas, AR, Modrusan, Z., Ghilardi, N., de Sauvage, FJ και Ouyang , W. (2008). Η ιντερλευκίνη-22 μεσολαβεί στην πρώιμη άμυνα του ξενιστή έναντι της προσκόλλησης και της εξάλειψης βακτηριακών παθογόνων. Nat. Med. 14, 282–289. https://doi. org/10.1038/nm1720.
46. Andoh, A., Zhang, Z., Inatomi, O., Fujino, S., Deguchi, Y., Araki, Y., Tsujikawa, T., Kitoh, K., Kim-Mitsuyama, S., Takayanagi , Α., et αϊ. (2005). Η ιντερλευκίνη-22, μέλος της υποοικογένειας της IL-10, προκαλεί φλεγμονώδεις αποκρίσεις σε υποεπιθηλιακούς μυοϊνοβλάστες του παχέος εντέρου. Gastroenterology 129, 969-984. https://doi.org/10.1053/j.gastro.2005.06.071.
47. Tufman, A., Huber, RM, Vo¨ lk, S., Aigner, F., Edelmann, M., Gamarra, F., Kiefl, R., Kahnert, K., Tian, F., Boulesteix, AL, et αϊ. (2016). Η ιντερλευκίνη-22 είναι αυξημένη κατά την πλύση από ασθενείς με καρκίνο του πνεύμονα και άλλες πνευμονικές παθήσεις. BMC Cancer 16, 409. https://doi.org/10.1186/s12885-016- 2471-2.
48. Voigt, C., May, P., Gottschlich, A., Markota, A., Wenk, D., Gerlach, I., Voigt, S., Σταθόπουλος, GT, Arendt, KAM, Heise, C., et al. (2017). Τα καρκινικά κύτταρα επάγουν την παραγωγή ιντερλευκίνης-22 από CD4(+) Τ κύτταρα μνήμης μέσω ιντερλευκίνης-1 για την προώθηση της ανάπτυξης του όγκου. Proc. Natl. Ακαδ. Sci. ΗΠΑ 114, 12994–12999. https://doi.org/10.1073/pnas.17051 65114.
49. Markota, A., Endres, S., and Kobold, S. (2018). Στόχευση ιντερλευκίνης-22 για θεραπεία καρκίνου. Βουητό. Εμβόλιο. Άλλο ανοσοποιητικό. 14, 2012–2015. https:// doi.org/10.1080/21645515.2018.1461300.
50. Ewens, A., Mihich, E., and Ehrke, MJ (2005). Απομακρυσμένη μετάσταση από υποδορίως αναπτυσσόμενο E0771 μυελικό αδενοκαρκίνωμα μαστού. Anticancer Res. 25, 3905–3915.
51. Sugiura, Κ., and Stock, CC (1952). Μελέτες σε φάσμα όγκου. I. Σύγκριση της δράσης της μεθυλ δις (2-χλωροαιθυλ)αμίνης και 3-δις(2-χλωροαιθυλ)αμινομεθυλ-4-μεθοξυμεθυλ -5-υδροξυ{{7} }μεθυλπυριδίνη στην ανάπτυξη μιας ποικιλίας όγκων ποντικών και αρουραίων. Cancer 5, 382-402. https://doi.org/10.1002/1097-0142(195203) 5:2<382::aidcncr2820050229>3.0.co;2-3.
52. Renier, N., Wu, Z., Simon, DJ, Yang, J., Ariel, P., and Tessier-Lavigne, M. (2014). iDISCO: μια απλή, γρήγορη μέθοδος για την ανοσοσήμανση μεγάλων δειγμάτων ιστού για απεικόνιση όγκου. Cell 159, 896–910. https://doi.org/10. 1016/j.cell.2014.10.010.
53. Kleinschmidt, D., Giannou, AD, McGee, HM, Kempski, J., Steglich, B., Huber, FJ, Ernst, TM, Shiri, AM, Wegscheid, C., Tasika, E., et al.
54. O'Donnell, JS, Madore, J., Li, XY και Smyth, MJ (2020). Εγγενείς και εξωγενείς ανοσολογικές λειτουργίες του όγκου του CD1
55. Σεμιν. Cancer Biol. 65, 189–196. https://doi.org/10.1016/j.semcancer.2019.11.013. 55. Molfetta, R., Zitti, B., Lecce, M., Milito, ND, Stabile, H., Fionda, C., Cippitelli, M., Gismondi, A., Santoni, A., and Paolini, R (2020). CD155: ένα πολυλειτουργικό μόριο στην εξέλιξη του όγκου. Int. J. ΜοΙ. Sci. 21, 922. https://doi.org/10.3390/ijms21030922.
56. Gao, J., Zheng, Q., Xin, N., Wang, W., and Zhao, C. (2017). CD155, ένα ογκο-ανοσολογικό μόριο σε ανθρώπινους όγκους. Cancer Sci. 108, 1934– 1938. https://doi.org/10.1111/cas.13324.
57. Morimoto, K., Satoh-Yamaguchi, K., Hamaguchi, A., Inoue, Y., Takeuchi, M., Okada, M., Ikeda, W., Takai, Y., and Imai, T. ( 2008). Η αλληλεπίδραση των καρκινικών κυττάρων με τα αιμοπετάλια με τη μεσολάβηση του υποδοχέα Necl-5/πολιοϊού ενισχύει τη μετάσταση των καρκινικών κυττάρων στους πνεύμονες. Oncogene 27, 264-273. https://doi.org/10.1038/sj.onc.1210645.
58. Chan, CJ, Martinet, L., Gilfillan, S., Souza-Fonseca-Guimaraes, F., Chow, MT, Town, L., Ritchie, DS, Colonna, M., Andrews, DM και Smyth, MJ (2014). Οι υποδοχείς CD96 και CD226 αντιτίθενται ο ένας στον άλλο στη ρύθμιση των λειτουργιών των φυσικών φονικών κυττάρων. Nat. Immunol. 15, 431–438. https://doi.org/10.1038/ni.2850.
59. Fuchs, A., Cella, M., Giurisato, E., Shaw, AS, and Colonna, M. (2004). Αιχμή: Το CD96 (απτικό) προάγει την προσκόλληση κυττάρου ΝΚ-στόχου κυττάρων αλληλεπιδρώντας με τον υποδοχέα του ιού της πολιομυελίτιδας (CD155). J. Immunol. 172, 3994– 3998. https://doi.org/10.4049/jimmunol.172.7.3994.
60. Jarosch, S., Ko¨ hlen, J., Wagner, S., D'Ippolito, E., and Busch, DH (2022). ChipCytometry για πολυπλεγμένη ανίχνευση πρωτεϊνών και δεικτών mRNA σε δείγματα ανθρώπινου ιστού FFPE. STAR Πρωτοκ. 3, 101374. https://doi.org/10.1016/j.xpro.2022.101374.
61. Chauvin, JM, Ka, M., Pagliano, O., Menna, C., Ding, Q., DeBlasio, R., Sanders, C., Hou, J., Li, XY, Ferrone, S., et al. (2020). Η διέγερση της IL15 με αποκλεισμό TIGIT αναστρέφει τη διαμεσολαβούμενη από CD155-δυσλειτουργία ΝΚ-κυττάρων στο μελάνωμα. Clin. Cancer Res. 26, 5520–5533. https://doi.org/10.1158/ 1078-0432.CCR-20-0575.
62. Weulersse, M., Asrir, A., Pichler, AC, Lemaitre, L., Braun, M., Carrie´, N., Joubert, MV, Le Moine, M., Do Souto, L., Gaud, G., et al. (2020). Η εξαρτώμενη από την εμφάνισή της απώλεια του συνενεργοποιητικού υποδοχέα CD226 περιορίζει τις αντικαρκινικές λειτουργίες των Τ κυττάρων CD8(+) και περιορίζει την αποτελεσματικότητα της ανοσοθεραπείας του καρκίνου. Immunity 53, 824–839.e10. https://doi.org/10.1016/j.immuni. 2020.09.006.
63. Braun, M., Aguilera, AR, Sundarrajan, A., Corvino, D., Stannard, K., Krumeich, S., Das, I., Lima, LG, Meza Guzman, LG, Li, K., et al. (2020). Το CD155 στα καρκινικά κύτταρα προκαλεί αντίσταση στην ανοσοθεραπεία επάγοντας την αποικοδόμηση του ενεργοποιητικού υποδοχέα CD226 στα CD8(+) Τ κύτταρα. Immunity 53, 805–823.e15. https://doi.org/10.1016/j.immuni. 2020.09.010.
64. Lepletier, A., Madore, J., O'Donnell, JS, Johnston, RL, Li, XY, McDonald, E., Ahern, E., Kuchel, A., Eastgate, M., Pearson, SA, et al. (2020). Η έκφραση του όγκου CD155 σχετίζεται με αντίσταση στην ανοσοθεραπεία antiPD1 στο μεταστατικό μελάνωμα. Clin. Cancer Res. 26, 3671–3681. https://doi.org/10.1158/1078-0432.CCR-19-3925.
65. Newman, AM, Steen, CB, Liu, CL, Gentles, AJ, Chaudhuri, AA, Scherer, F., Khodadoust, MS, Esfahani, MS, Luca, BA, Steiner, D., et al. (2019). Προσδιορισμός αφθονίας κυτταρικού τύπου και έκφρασης από ιστούς όγκου με ψηφιακή κυτταρομετρία. Nat. Biotechnol. 37, 773–782. https://doi.org/10.1038/s41587-019-0114-2.
66. Soriani, A., Zingoni, A., Cerboni, C., Iannitto, ML, Ricciardi, MR, Di Gialleonardo, V., Cippitelli, M., Fionda, C., Petrucci, MT, Guarini, A., et al. (2009). Η εξαρτώμενη από το ATM-ATR ανοδική ρύθμιση του DNAM-1 και των προσδεμάτων NKG2D σε κύτταρα πολλαπλού μυελώματος από θεραπευτικούς παράγοντες έχει ως αποτέλεσμα ενισχυμένη ευαισθησία στα ΝΚ-κύτταρα και σχετίζεται με έναν γηρασμένο φαινότυπο. Blood 113, 3503–3511. https://doi.org/10.1182/blood- 2008-08-173914.