Η Swertiajaponin αναστέλλει τη μελάγχρωση του δέρματος με διπλούς μηχανισμούς για την καταστολή της τυροσινάσης Μέρος 2

Cistancheείναι ένα κοινό βότανο που είναι γνωστό ως «το θαυματουργό βότανο που παρατείνει τη ζωή». Το κύριο συστατικό του είναι η κιστανοζίδη, η οποία έχει διάφορες επιδράσεις όπως αντιοξειδωτικές, αντιφλεγμονώδεις και προαγωγή της ανοσοποιητικής λειτουργίας. Ο μηχανισμός μεταξύ του cistanche και της λεύκανσης του δέρματος έγκειται στην αντιοξειδωτική δράση των γλυκοσιδών του cistanche.

Η μελανίνη στο ανθρώπινο δέρμα παράγεται από την οξείδωση της τυροσίνης που καταλύεται από την τυροσινάση και η αντίδραση οξείδωσης απαιτεί τη συμμετοχή οξυγόνου, έτσι οι ρίζες ελεύθερες από οξυγόνο στο σώμα γίνονται ένας σημαντικός παράγοντας που επηρεάζει την παραγωγή μελανίνης.Cistancheπεριέχει σιστανοσίδη, η οποία είναι ένα αντιοξειδωτικό και μπορεί να μειώσει τη δημιουργία ελεύθερων ριζών στο σώμα, αναστέλλοντας έτσι την παραγωγή μελανίνης.

Κάντε κλικ στο Cistanche Tubulosa για τη βελτίωση της λεύκανσης του δέρματος

Ζήτα περισσότερα:

david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

Επιπλέον,κιστανάκιέχει επίσης τη λειτουργία της προώθησης της παραγωγής κολλαγόνου, το οποίο μπορεί να αυξήσει την ελαστικότητα και τη λάμψη του δέρματος και να βοηθήσει στην αποκατάσταση των κατεστραμμένων κυττάρων του δέρματος.

CistancheΟι γλυκοζίτες φαινυλαιθανόλης έχουν σημαντική ρυθμιστική επίδραση στη δραστηριότητα της τυροσινάσης και η επίδραση στην τυροσινάση αποδεικνύεται ότι είναι ανταγωνιστική και αναστρέψιμη αναστολή, η οποία μπορεί να προσφέρει μια επιστημονική βάση για την ανάπτυξη και τη χρήση των λευκαντικών συστατικών στο Cistanche.

Επομένως,κιστανάκιέχει βασικό ρόλο στηνλεύκανση δέρματος. Μπορεί να αναστείλει την παραγωγή μελανίνης για να μειώσει τον αποχρωματισμό και τη θαμπάδα. και προωθεί την παραγωγή κολλαγόνου για τη βελτίωση της ελαστικότητας και της λάμψης του δέρματος. Λόγω της ευρείας αναγνώρισης αυτών των επιδράσεων του cistanche, πολλά προϊόντα λεύκανσης δέρματος έχουν αρχίσει να εγχύουν φυτικά συστατικά όπως το Cistanche για να καλύψουν τη ζήτηση των καταναλωτών, αυξάνοντας έτσι την εμπορική αξία του Cistanche σε προϊόντα λεύκανσης δέρματος.

Εν ολίγοις, ο ρόλος του κιστάνου στη λεύκανση του δέρματος είναι καθοριστικός. Η αντιοξειδωτική του δράση και η επίδραση που παράγει κολλαγόνο μπορεί να μειώσει τον αποχρωματισμό και τη θαμπάδα, να βελτιώσει την ελαστικότητα και τη λάμψη του δέρματος και έτσι να επιτύχειλεύκανση αποτέλεσμα. Επίσης, η ευρεία εφαρμογή του Cistanche σε προϊόντα λεύκανσης δέρματος αποδεικνύει ότι ο ρόλος του στην εμπορική αξία δεν μπορεί να υποτιμηθεί.

Η Swertiajaponin αναστέλλει την επαγόμενη από την UVB ενεργοποίηση MAPK

Το οξειδωτικό στρες έχει αποδειχθεί ότι διεγείρει τη μελανογένεση μέσω της ρύθμισης προς τα πάνω του μεταγραφικού παράγοντα που σχετίζεται με τη μικροφθαλμία (MITF), ενός μεταγραφικού παράγοντα που επάγει την έκφραση γονιδίου τυροσινάσης [4, 14]. Μελετήσαμε εάν η αντιοξειδωτική δράση της swertiajaponin μπορεί να ρυθμίσει τη δραστηριότητα του MITF. Τα δεδομένα Western blotting έδειξαν ότι η έκθεση σε UVB αύξησε το φωσφορυλιωμένο MITF, μια ενεργή μορφή του MITF, ενώ η θεραπεία με swertiajaponin στα 10 μM το μείωσε (Εικόνα 6Α). Συνεπώς, μια αύξηση που προκαλείται από την UVB στο επίπεδο πρωτεΐνης τυροσινάσης μειώθηκε με τη θεραπεία με swertiajaponin (Εικόνα 6Α). Επειδή το οξειδωτικό στρες έχει αποδειχθεί ότι ενεργοποιεί το MITF μέσω της ενεργοποιημένης από μιτογόνο πρωτεϊνικής κινάσης (MAPK) [15, 16], διερευνήθηκε εάν η swertiajaponin μπορεί να ελέγξει τη σηματοδότηση MAPK. Η έκθεση σε UVB αύξησε δραματικά τη φωσφορυλίωση των ERK, JNK και p38 (Εικόνα 6Β), η οποία σχετίζεται με την επαγόμενη από την UVB παραγωγή ROS και ONOO στα κύτταρα B16F10 (Εικόνα 5C- 5D). Η θεραπεία με Swertiajaponin μόνο στα 10 μΜ μείωσε τα επίπεδα πρωτεΐνης των MAPKs (Εικόνα 6Β). Αυτό το αποτέλεσμα είναι συνεπές με την αντιοξειδωτική δράση της swertiajaponin επειδή η μείωση του κυτταρικού οξειδωτικού στρες που προκαλείται από την UVB ήταν σαφής μόνο στα 10 μM swertiajaponin (Εικόνα 5Γ-5D).

Αν και η swertiajaponin είναι η κύρια ένωση ολόκληρου του βοτάνου της Swertia japonica που έχει χρησιμοποιηθεί ως ιαπωνικό φάρμακο, η μελέτη μας δεν έδειξε οριστικά στοιχεία σχετικά με την ασφάλεια της swertiajaponin για την εφαρμογή της στο ανθρώπινο δέρμα. Ωστόσο, η swertiajaponin δεν εμφάνισε κυτταροτοξικότητα σε κυτταρικές σειρές Hs27 (ανθρώπινος ινοβλάστης), HaCat (ανθρώπινο κερατινοκύτταρο) και B16F10 (μελάνωμα ποντικού) στο πειραματικό μας περιβάλλον. Επιπλέον, δεν υπήρχαν ορατά σημάδια κυτταροτοξικότητας συμπεριλαμβανομένου του σχηματισμού κυτταρικών υπολειμμάτων ή της κυτταρικής αποκόλλησης με βάση μικροσκοπική παρατήρηση όταν η swertiajaponin υποβλήθηκε σε θεραπεία στο μοντέλο ανθρώπινου δέρματος με συγκεντρώσεις που δεν έδειξαν κυτταροτοξικότητα στις κυτταρικές σειρές. Λαμβάνοντας υπόψη ότι τα θέματα ασφάλειας είναι οι κύριες ανησυχίες των λευκαντικών ενώσεων του δέρματος που είναι διαθέσιμες επί του παρόντος, απαιτούνται περαιτέρω in vivo μελέτες για να εξεταστεί η ασφάλειά τους στη φυσιολογία.

Μαζί, η swertiajaponin ανέστειλε τη συσσώρευση μελανίνης έως ένα ικανοποιητικό όριο τόσο στα μοντέλα του κυττάρου όσο και στο ανθρώπινο δέρμα με διπλούς μηχανισμούς για την καταστολή της τυροσινάσης μέσω άμεσης δέσμευσης και ανταγωνιστικής αναστολής της τυροσινάσης και καταστολής της σηματοδότησης MAPK/MITF που προκαλείται από οξειδωτικό στρες (Εικόνα). Λαμβάνοντας υπόψη τις δυσμενείς επιπτώσεις και την έλλειψη μακροπρόθεσμης αποτελεσματικότητας των γνωστών λευκαντικών παραγόντων του δέρματος όπως το kojic acid και η arbutin [17], η swertiajaponin μπορεί να εφαρμοστεί με μεγαλύτερη ασφάλεια για την καταστολή της μελάγχρωσης του δέρματος και θα ήταν ένα νέο πρόσθετο για λευκαντικά καλλυντικά.

ΥΛΙΚΑ ΚΑΙ ΜΕΘΟΔΟΙ

Δοκιμασία δραστικότητας τυροσινάσης χρησιμοποιώντας τυροσινάση μανιταριού

Η Swertiajaponin και το kojic acid (50 μM) φορτώθηκαν σε μια μικροπλάκα 96- φρεατίου (Nunc, Δανία) σε ρυθμιστικό διάλυμα τυροσινάσης (200 μL) που περιείχε τυροσινάση μανιταριού (1000 U), 1 mM διάλυμα L-τυροσίνης και 50 mM φωσφορικό ρυθμιστικό διάλυμα (ρΗ 6,5) [5]. Η πλάκα επωάστηκε στους 37 βαθμούς για 15 λεπτά και η ντοπακινόνη αξιολογήθηκε με φασματοφωτομετρία (450 nm). Με βάση τη μέτρηση, το IC50 υπολογίστηκε χρησιμοποιώντας λογαριθμικές γραμμικές καμπύλες και τις εξισώσεις τους.

Προσομοίωση σύνδεσης swertiajaponin και τυροσινάσης

Το AutoDock Vina χρησιμοποιήθηκε για την προσομοίωση σύνδεσης πρωτεΐνης σε πυρίτιο-συνδέτη. Η τρισδιάστατη δομή της τυροσινάσης χρησιμοποιήθηκε στην κρυσταλλική δομή του Agaricus bisporus (PDB ID: 2Y9X). Η προκαθορισμένη θέση δέσμευσης τυροσίνης εφαρμόστηκε ως θύλακας σύνδεσης. Αφού πραγματοποιήθηκαν προσομοιώσεις σύνδεσης μεταξύ τυροσινάσης και swertiajaponin ή kojic acid, χρησιμοποιήθηκε το λογισμικό LigandScout 3.{4}} για την πρόβλεψη υπολειμμάτων δέσμευσης μεταξύ διαφορετικών ενώσεων και τυροσινάσης.

Κινητική ανάλυση της αναστολής της τυροσινάσης από swertiajaponin

Το L-DOPA παρασκευάστηκε σε συγκεντρώσεις 4, 2, 1, 0.5, 0.25, 0.125 και 0.0625 mM και swertiajaponin παρασκευάστηκε στα 20, 40 και 80 μΜ. Το διάλυμα του μίγματος αντίδρασης παρασκευάστηκε σε μια πλάκα 96-πηγαδιού, στην οποία 20 μL υποστρώματος τυροσινάσης (L-DOPA), 10 μL υδατικού διαλύματος τυροσινάσης μανιταριού (200 U) και ρυθμιστικό διάλυμα φωσφορικού καλίου 50 mM (pH 6,5) προστέθηκαν. Ο ρυθμός παραγωγής ντοπαχρωμίου του μίγματος αντίδρασης μετρήθηκε σε μήκος κύματος 450 nm χρησιμοποιώντας συσκευή ανάγνωσης μικροπλάκας. Ο ρυθμός αναστολής της τυροσινάσης της swertiajaponin στη συνέχεια υπολογίστηκε χρησιμοποιώντας ανάλυση διαγράμματος Lineweaver-Burk. Η σταθερά Michaelis (Km) και η μέγιστη ταχύτητα (Vmax) υπολογίστηκαν επίσης με διαγράμματα Lineweaver-Burk με διαφορετικές συγκεντρώσεις υποστρώματος L-DOPA [3].

Κυτταρική καλλιέργεια και δοκιμασία βιωσιμότητας

Τα κύτταρα μελανώματος B16F10 αγοράστηκαν από την Korea Cell Line Bank. Τα κύτταρα καλλιεργήθηκαν σε θρεπτικό μέσο Eagle's τροποποιημένο Dulbecco (DMEM) με 5 τοις εκατό εμβρυϊκό βόειο ορό (FBS) και 1 τοις εκατό πενικιλλίνη, στρεπτομυκίνη, L-γλουταμίνη και πυροσταφυλικό νάτριο. Τα κύτταρα διατηρήθηκαν στους 37 βαθμούς σε μια υγροποιημένη ατμόσφαιρα 95 τοις εκατό αέρα/5 τοις εκατό CO2. Για τον προσδιορισμό βιωσιμότητας των κυττάρων, τα κύτταρα σπάρθηκαν σε 96-πλάκες φρεατίων. Τα κύτταρα μελανώματος B16F10 υποβλήθηκαν σε επεξεργασία με swertiajaponin σε διάφορες συγκεντρώσεις για 48 ώρες. Ez-Cytox (10 μL) προστέθηκε σε κάθε φρεάτιο και επωάστηκε για 2 ώρες. Οι σχηματιζόμενοι κρύσταλλοι φορμαζάνης μετρήθηκαν με φασματοφωτομετρία στα 450 nm. Η βιωσιμότητα των κυττάρων υπολογίστηκε χρησιμοποιώντας κύτταρα χωρίς θεραπεία με swertiajaponin ως ομάδα ελέγχου.

Περιεκτικότητα σε μελανίνη στα κύτταρα B16F10

Το επίπεδο μελανίνης μετρήθηκε χρησιμοποιώντας τη μέθοδο που περιγράφηκε προηγουμένως με μικρές τροποποιήσεις [18]. Τα κύτταρα B16F10 αφέθηκαν να αναπτυχθούν σε 70-80 τοις εκατό συρροή σε 6-πλάκες φρεατίων. Τα κύτταρα υποβλήθηκαν σε προεπεξεργασία με swertiajaponin ή kojic οξύ για 2 ώρες. Στη συνέχεια, η MSH ή η UVB υποβλήθηκαν σε επεξεργασία με το μέσο που περιείχε swertiajaponin- ή kojic acid και επωάστηκαν για άλλες 48 ώρες. Μετά από πλύση με PBS, τα κύτταρα αποσπάστηκαν χρησιμοποιώντας θρυψίνη και διαλύθηκαν σε 90 μL διαλύματος NaOH 1 Ν που περιείχε DMSO (5 τοις εκατό). Μετά από επώαση στους 60 βαθμούς για 1 ώρα, η περιεκτικότητα σε μελανίνη προσδιορίστηκε με μέτρηση της απορρόφησης στα 405 nm. Ένας εμπορικά διαθέσιμος θάλαμος υπεριώδους ακτινοβολίας (Boteck UV X000, UV-AB, LAB24, Κορέα) χρησιμοποιήθηκε για την έκθεση σε UVB των κυττάρων B16F10.

Western blotting

Δείγματα πρωτεΐνης που απομονώθηκαν από κύτταρα B16F10 (30 ug) διαχωρίστηκαν με ηλεκτροφόρηση γέλης δωδεκυλοθειικού νατρίου-πολυακρυλαμιδίου χρησιμοποιώντας 10-12 τοις εκατό πηκτές ακρυλαμιδίου και μεταφέρθηκαν σε μεμβράνες φθοριούχου πολυβινυλιδενίου, οι οποίες στη συνέχεια τοποθετήθηκαν αμέσως σε ρυθμιστικό διάλυμα αποκλεισμού ( 5 τοις εκατό άπαχο γάλα) σε 10 mM Tris (pH 7,5), 100 mM NaCl και 0,1 τοις εκατό Tween 20. Η μεμβράνη πλύθηκε σε ρυθμιστικό διάλυμα TBS-Tween για 30 λεπτά και στη συνέχεια επωάστηκε με ειδικά πρωτογενή αντισώματα (1: 1{ {24}} αραίωση) που υποδεικνύεται στους μύθους των εικόνων στους 4 βαθμούς κατά τη διάρκεια της νύχτας. Μετά από πλύση με ρυθμιστικό διάλυμα TBS-Tween, η μεμβράνη επωάστηκε με ένα συζευγμένο με υπεροξειδάση χρένου αντίσωμα κατά ποντικού (Santa Cruz, 1: 10,000), ένα αντίσωμα κατά του κουνελιού (Santa Cruz, 1: 10, 000), ή ένα αντίσωμα κατά της κατσίκας (Santa Cruz, 1: 10.000) στους 25 βαθμούς για 1 ώρα. Οι ανοσοκηλίδες οπτικοποιήθηκαν χρησιμοποιώντας διάλυμα Western Bright Peroxide (Advansta, CA, USA) και σύστημα απεικόνισης ChemiDoc Touch (Bio-Rad, ΗΠΑ) σύμφωνα με τις οδηγίες του κατασκευαστή. Τα αντισώματα που χρησιμοποιούνται σε αυτή τη μελέτη είναι τα εξής: p-CREB (Santa Cruz{-81486), CREB (Santa Cruz{-81486), τυροσινάση (Cell Signaling-104976), pMITF (Abcam{{40 }}), MITF (Abcam-20663), p-p38 (Cell Signaling-921L), p38 (Cell Signaling-9212S), pERK (Cell Signaling-4370L ), ERK (Cell Signaling-9201L), pJNK (Cell Signaling-9251L), JNK (Cell Signaling-9252S) και -actin (Santa Cruz-47778) .

Μέτρηση επιπέδων ROS και ONOO-

Η αντιοξειδωτική δράση της swertiajaponin εξετάστηκε χρησιμοποιώντας φθορίζουσα διοξική 2,7-διχλωροδιϋδροφθοροσκεΐνη (DCFDA) για ROS και διυδροροδαμίνη (DHR) 123 για ONOO-. Εν συντομία, για τον προσδιορισμό του επιπέδου ROS, προστέθηκε DCFDA (25μM) σε ομογενοποιήματα κυττάρων για τελικό όγκο 250 ul. Για τη μέτρηση του επιπέδου ONOO-, 10 λίτρα ομογενοποιημάτων κυττάρων προστέθηκαν σε διάλυμα ροδαμίνης (50 mM ρυθμιστικό φωσφορικού νατρίου, 90 mM χλωριούχο νάτριο, 5 mM διαιθυλενοτριαμινοπενταοξικό οξύ [DTPA] και DHR123). Και για τις δύο δοκιμές, ο φθορισμός μετρήθηκε κάθε 5 λεπτά για 30 λεπτά σε συσκευή ανάγνωσης πλάκας φθορισμού, με μήκη κύματος διέγερσης και εκπομπής ρυθμισμένα στα 485 και 530 nm, αντίστοιχα.

Συσσώρευση μελανίνης σε μοντέλο ανθρώπινου δέρματος

Μια βιώσιμη, ανασυσταθείσα, τρισδιάστατη ανθρώπινη επιδερμίδα (Neoderm-ME, Tego Science) χρησιμοποιήθηκε για την εξέταση της αντιμελανογόνου δράσης της swertiajaponin σε ένα μοντέλο ανθρώπινου δέρματος. Το μοντέλο ανθρώπινου δέρματος υποβλήθηκε σε προεπεξεργασία με DMSO (όχημα) ή swertiajaponin για 1 ώρα και καλλιεργήθηκε στα μέσα συντήρησης που παρέχονται από την εταιρεία για 5 ημέρες με θεραπεία DMSO ή swertiajaponin. Πραγματοποιήθηκε μικροσκοπική ανάλυση από την ημέρα 1 έως την ημέρα 5 για να παρατηρηθεί η μελάγχρωση του δέρματος. Οι μικροσκοπικές εικόνες αναλύθηκαν με το λογισμικό Image J για να προσδιοριστεί ημιποσοτικά το σκουρόχρωμο δέρμα. Για τη χρώση Fontana-Masson, τα δείγματα δέρματος σταθεροποιήθηκαν σε 4 τοις εκατό παραφορμαλδεΰδης όλη τη νύχτα σε θερμοκρασία δωματίου και τα δείγματα αναλύθηκαν από μια εμπορικά διαθέσιμη εταιρεία (Garam Meditech, Νότια Κορέα).

Στατιστική ανάλυση

Όλα τα δεδομένα παρουσιάζονται ως μέσος όρος ± SEM. Διαφορετικές ομάδες συγκρίθηκαν χρησιμοποιώντας μια μονόδρομη ανάλυση διακύμανσης που ακολουθήθηκε από το μετα-τεστ του Dunnett. Το P < 0.05 θεωρήθηκε στατιστικά σημαντικό.

ΣΥΓΚΡΟΥΣΕΙΣ ΣΥΜΦΕΡΟΝΤΩΝ

Δεν υπάρχουν συγκρούσεις συμφερόντων για δήλωση.

ΧΡΗΜΑΤΟΔΟΤΗΣΗ

Αυτή η εργασία υποστηρίχθηκε από το Grant K17281 από το Korea Institute of Oriental Medicine, Υπουργείο Παιδείας, Επιστήμης και Τεχνολογίας (MEST), Δημοκρατία της Κορέας.

ΒΙΒΛΙΟΓΡΑΦΙΚΕΣ ΑΝΑΦΟΡΕΣ

1. Bradford PT. Καρκίνος του δέρματος στο χρώμα του δέρματος. Dermatol Nurs. 2009; 21: 170-7, 206.

2. Briganti S, Camera E, Picardo M. Χημικές και ενόργανες προσεγγίσεις για τη θεραπεία της υπερμελάγχρωσης. Pigment Cell Res. 2003; 16: 101-10.

3. Kang KH, Lee B, Son S, Yun HY, Moon KM, Jeong HO, Kim DH, Lee EK, Choi YJ, Kim DH, Chun P, Moon HR, Chung HY. Παράγωγα (Ζ)-2-(βενζο[d]θειαζολ-2-υλαμινο)-5- (υποκατεστημένο βενζυλιδενο) θειαζολ-4(5Η)-όνης ως νέοι αναστολείς τυροσινάσης. Biol Pharm Bull. 2015; 38: 1227-33.

4. Lee B, Moon KM, Kim SJ, Kim SH, Kim DH, An HJ, Jeong JW, Kim YR, Son S, Kim MJ, Chung KW, Lee EK, Chun P, et al. (Ζ)-5-(2,4-διυδροξυ βενζυλιδένιο) θειαζολιδίνη- 2,4-διόνη αποτρέπει τη μελανογένεση που προκαλείται από την UVB και το σχηματισμό ρυτίδων μέσω της καταστολής του οξειδωτικού στρες στο HRM{{7} } άτριχα ποντίκια. Oxid Med Cell Longev. 2016; 2016: 2761463.

5. Lee B, Moon KM, Son S, Yun HY, Han YK, Ha YM, Kim DH, Chung KW, Lee EK, An HJ, Ullah S, Chun P, Moon HR, et al. Το (2R/S,4R)-2-(2,4-διυδροξυ φαινυλ) θειαζολιδίνη- 4-καρβοξυλικό οξύ αποτρέπει το σχηματισμό ρυτίδων που προκαλείται από την υπεριώδη ακτινοβολία μέσω της αναστολής της φλεγμονής που προκαλείται από το NF-kappaB. J Dermatol Sci. 2015; 79: 313-6.

6. Kubo I, Kinst-Hori I, Chaudhuri SK, Kubo Y, Sanchez Y, Ogura Τ. Οι φλαβονόλες από την Heterotheca περιλαμβάνουν: ανασταλτική δράση τυροσινάσης και δομικά κριτήρια. Bioorg Med Chem. 2000; 8: 1749-55.

7. Olivares C, Garcia-Borron JC, Solano F. Ταυτοποίηση υπολειμμάτων ενεργού θέσης που εμπλέκονται στη δέσμευση μεταλλικού συμπαράγοντα και στη στερεοειδική αναγνώριση υποστρώματος στην τυροσινάση θηλαστικών. Επιπτώσεις στον καταλυτικό κύκλο. Βιοχημεία. 2002; 41: 679-86.

8. Kim D, Park J, Kim J, Han C, Yoon J, Kim N, Seo J, Lee C. Flavonoids as mushroom tyrosinase inhibitors: a fluorescence quenching study. J Agric Food Chem. 2006; 54: 935-41.

9. Orhan IE, Khan MT. Παράγωγα φλαβονοειδών ως ισχυροί αναστολείς τυροσινάσης - μια έρευνα των πρόσφατων ευρημάτων μεταξύ 2008-2013. Curr Top Med Chem. 2014; 14: 1486-93.

10. Komatsu M, Tomimori T, Makiguchi Y. Studies on the constituents of Swertia japonica. II. Απομόνωση και δομή του νέου φλαβονοειδούς, swertiajaponin. Chem Pharm Bull (Τόκιο). 1967; 15: 1567-72.

11. Kimura Y, Sumiyoshi Μ. Επιδράσεις του εκχυλίσματος Swertia japonica και της κύριας ένωσης του swertiamarin στην γαστρική κένωση και τη γαστρεντερική κινητικότητα σε ποντικούς. Φυτοθεραπεία. 2011; 82: 827-33.

12. Park JI, Lee HY, Lee JE, Myung CH, Hwang JS. Ανασταλτική επίδραση της 2-μεθυλ-ναφθο[1,2,3-δε]κινολίνης-8-one στη μεταφορά μελανοσώματος και τη μελάγχρωση του δέρματος. Sci Rep. 2016; 6: 29189.

13. Cotelle N. Ρόλος των φλαβονοειδών στο οξειδωτικό στρες. Curr Top Med Chem. 2001; 1: 569-90.

14. Sim MO, Ham JR, Lee MK. Τα νεαρά φύλλα του καλαμιού (Phragmites communis) καταστέλλουν τη μελανογένεση και το οξειδωτικό στρες στα κύτταρα μελανώματος B16F10. Biomed Pharmacother. 2017; 93: 165-71.

15. D'Mello SA, Finlay GJ, Baguley BC, Askarian-Amiri ME. Μονοπάτια σηματοδότησης στη μελανογένεση. Int J Mol Sci. 2016; 17.

16. Huang HC, Liao CC, Peng CC, Lim JM, Siao JH, Wei CM, Chen CC, Wu CS, Chang TM. Η διυδρομυρικετίνη από το Ampelopsis grossedentata αναστέλλει τη μελανογένεση μέσω της προς τα κάτω ρύθμισης των μονοπατιών σηματοδότησης MAPK, PKA και PKC. Chem Biol Interact. 2016; 258: 166-74.

17. Hsu KD, Chen HJ, Wang CS, Lum CC, Wu SP, Lin SP, Cheng KC. Εκχύλισμα μυκηλίου Ganoderma formosanum ως εξαιρετικά ισχυρός αναστολέας τυροσινάσης. Sci Rep. 2016; 6: 32854.

18. Bilodeau ML, Greulich JD, Hullinger RL, Bertolotto C, Ballotti R, Andrisani OM. Η BMP-2 διεγείρει την έκφραση του γονιδίου της τυροσινάσης και τη μελανογένεση σε διαφοροποιημένα μελανοκύτταρα. Pigment Cell Res. 2001; 14: 328-36.