SLC37A2, ένα μόριο που σχετίζεται με τον φώσφορο αυξάνει στα κύτταρα λείων μυών στην ασβεστοποιημένη αόρμα

Αγγειακή ασβεστοποίησηαποτελεί σημαντική πηγήκαρδιαγγειακή νόσοσε ασθενείς με χρόνια νεφρική νόσο.Υπερφωσφαταιμίαοδηγεί σε αυξημένη ενδοκυτταρική εισροή φωσφόρου, η οποία οδηγεί σε αύξηση των κυττάρων που μοιάζουν με οστεοβλάστες στα αγγειακά λεία μυϊκά κύτταρα. Το PiT-1 μεταφέρει φωσφορικά στα αγγειακά λεία μυϊκά κύτταρα. Ωστόσο, ο μηχανισμός της αγγειακής ασβεστοποίησης δεν είναι πλήρως κατανοητός. Αυτή η μελέτη διερεύνησε υποψήφια μόρια που σχετίζονται με τον φώσφορο εκτός από το PiT-1. Υποθέσαμε ότι τα μόρια που σχετίζονται με τον φώσφορο που ανήκουν στοδιαλυμένη ουσία-φορέαςΗ υπεροικογένεια (SLC) θα εμπλέκεται στην αγγειακή ασβεστοποίηση. Ως αποτέλεσμα της ανάλυσης μικροσυστοιχίας DNA, εστιάσαμε στο SLC37A2 και δείξαμε ότι η έκφραση mRNA αυτών των κυττάρων αυξήθηκε στα ασβεστοποιημένα κύτταρα λείου μυός της αορτής (AoSMC). Το SLC37A2 έχει αναφερθεί ότι μεταφέρει τόσο τις ανταλλαγές γλυκόζης-6-φωσφορικών/φωσφορικών όσο και φωσφορικών/φωσφορικών. Η ανάλυση in vitro έδειξε ότι η έκφραση SLC37A2 δεν επηρεάστηκε από τη φλεγμονή στο AoSMC. Η έκφραση του SLC37A2 mRNA και της πρωτεΐνης αυξήθηκε στο ασβεστοποιημένο AoSMC. In vivo, η ανάλυση έδειξε ότι η έκφραση mRNA του SLC37A2 στην αορτή τουχρόνια νεφρική νόσοςαρουραίους συσχετίστηκε με γονίδια οστεογονικών δεικτών. Επιπλέον, το SLC37A2 εκφράστηκε στην περιοχή αγγειακής ασβεστοποίησηςαρουραίους χρόνιας νεφρικής νόσου. Ως αποτέλεσμα, δείξαμε ότι το SLC37A2 είναι ένα από τα μόρια που αυξάνονται μεαγγειακή ασβεστοποίησηin vitro και in vivo.

Λέξεις-κλειδιά: SLC37A2,αγγειακή ασβεστοποίηση, λεία μυϊκά κύτταρα της αορτής,χρόνια νεφρική νόσος, υπερφωσφαταιμία

ΚΑΝΤΕ ΚΛΙΚ ΕΔΩ ΓΙΑ ΝΑ ΠΑΡΕΤΕ ΦΥΣΙΚΟ ΟΡΓΑΝΙΚΟ ΕΚΧΥΛΙΣΜΑ ΚΙΣΤΑΝΧΗΣ ΜΕ 25% ΕΧΙΝΑΚΟΣΙΔΗ ΚΑΙ 9% ΑΚΤΕΟΣΙΔΗ ΓΙΑ ΤΗ ΛΕΙΤΟΥΡΓΙΑ ΤΩΝ ΝΕΦΡΩΝ

Υποστήριξη της Wecistanche-Ο μεγαλύτερος εξαγωγέας κιστάνι στην Κίνα:

Διεύθυνση ηλεκτρονικού ταχυδρομείου:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Tel:+86 15292862950

Αγορά για περισσότερες λεπτομέρειες Λεπτομέρειες:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-κατάστημα

Καθώς ο αριθμός των ασθενών μεχρόνια νεφρική νόσος(ΧΝΝ) αυξάνεται, ο αριθμός των ασθενώνπου απαιτούν αιμοκάθαρσηθα αυξηθεί επίσης. Οι περισσότεροι θάνατοι σε ασθενείς που υποβάλλονταιδιάλυσηοφείλονται σεκαρδιαγγειακές παθήσειςόπωςκαρδιακή ανακοπή, εγκεφαλοαγγειακές διαταραχέςή έμφραγμα του μυοκαρδίου. (,2) Μια σημαντική πηγήκαρδιαγγειακή νόσοείναι η έκτοπη ασβεστοποίηση,() μια ανωμαλία που προκαλείται από το σχηματισμό και την εναπόθεση κρυστάλλων φωσφορικού ασβεστίου στους μαλακούς ιστούς. (4 6) Διάφοροι παράγοντες όπως η φλεγμονή. Το οξειδωτικό στρες και οι αυξήσεις στα επίπεδα ασβεστίου (Ca) και φωσφόρου (P) στο πλάσμα εμπλέκονται στην εξέλιξη της αγγειακής ασβεστοποίησης. Μεταξύ αυτών των παραγόντων, η υπερφωσφαταιμία συνδέεται πιο έντονα με την αγγειακή ασβεστοποίηση. (7.8) Η υπερφωσφαταιμία προκαλείται από υπερβολική πρόσληψη P παρουσία μειωμένης νεφρικής λειτουργίας. Επομένως, οι ασθενείς που υποβάλλονται σε αιμοκάθαρση πρέπει να περιορίσουν τη λήψη του P. (79-12) Ωστόσο, έχει αναφερθεί ότιαγγειακή ασβεστοποίησηπροχωρά ήδη όταν ξεκινήσει η αιμοκάθαρση. Έχει επίσης παρατηρηθεί σε ασθενείς με ΧΝΝ σε πρώιμο στάδιο όταν δεν είναι εμφανής η υπερφωσφαταιμία. (3) Συνεπώς, είναι σημαντικό να προληφθεί η αγγειακή ασβεστοποίηση σε ασθενείς με ΧΝΝ σε πρώιμο στάδιο για τη βελτίωση της πρόγνωσης της ζωής.

που οδηγεί σε αυξημένη εισροή P στα αγγειακά λεία μυϊκά κύτταρα (VSMC). Η εισροή P πραγματοποιείται μέσω PiT-1, ενός μεταφορέα στην επιφάνεια της κυτταρικής μεμβράνης του VSMC. Το PiT- είναι μέλος της υπεροικογένειας του φορέα διαλυμένης ουσίας (SLC), η οποία περιλαμβάνει έναν μεταφορέα φωσφορικού νατρίου που κωδικοποιείται από SLC20A1.04 Το PiT- μεταφέρει φωσφορικά άλατα μέσω των εξαρτώμενων από Na κυτταρικές μεμβράνες και στη συνέχεια ανοργανοποίησης της μήτρας λόγω των αυξημένων επιπέδων p.s) Ως ενδοκυτταρικό Τα επίπεδα P αυξάνονται, το VSMC αρχίζει να εκφράζει οστεογονικούς μεταγραφικούς παράγοντες, όπως ο μεταγραφικός παράγοντας 2 (Runx2) (16) που σχετίζεται με το τρύπημα. Επιπλέον, μείωσε την έκφραση των ειδικών για τους λείους μυς πρωτεϊνών. όπως η πρωτεΐνη λείου μυός 22-0 (SM22-0), εμφανίζεται. Ως αποτέλεσμα, το VSMC μετασχηματίζεται σε κύτταρα που μοιάζουν με οστεοβλάστες. (1718) Πρόσφατες κλινικές μελέτες έχουν δείξει ότι τα επίπεδα ασβεστίου στο αίμα. τα σωματίδια πρωτεΐνης (CPP), τα οποία αντιπροσωπεύουν κολλοειδή σωματίδια φωσφορικού ασβεστίου, αυξάνονται με τη μείωση της νεφρικής λειτουργίας. (19-21)Επιπλέον, έχουν αναφερθεί συσχετίσεις με τα επίπεδα CPP και P στο αίμα.2o2i) Είναι πιθανό η CpP να πυροδοτήσει την εξέλιξη της αγγειακής ασβεστοποίησης.22-24)

Ωστόσο, αγγειακή ασβεστοποίηση έχει παρατηρηθεί σε ασθενείς με ΧΝΝ σε πρώιμο στάδιο με φυσιολογικά επίπεδα P στο πλάσμα. (13) Επιπλέον.PiT-1 mRNA εκφράζεται πανταχού παρόν σε όλους τους ιστούς. Έτσι ένα άλλο μόριο μπορεί να δράσει κυρίως στην περιοχή της αγγειακής ασβεστοποίησης. Υπάρχουν αναφορές ότιφλεγμονήπροάγει την αγγειακή ασβεστοποίηση. Φλεγμονώδεις παράγοντες όπως η ιντερλευκίνη (IL)-1B, IL-6 και ο παράγοντας νέκρωσης όγκου-άλφα (TNF-a) που επάγουν τη διαφοροποίηση του VSMC σε κύτταρα παρόμοια με οστεοβλάστες (2s26) Το TNF-a επάγει την αγγειακή ασβεστοποίηση μέσω της οδού cAMP, η οποία παίζει ρόλο στη διαφοροποίηση των οστεοβλαστών.2728) Η IL-6 ρυθμίζει διάφορες οδούς που οδηγούν σε αγγειακή ασβεστοποίηση του VSMC2-31) Επιπλέον. Τα IllB, IL-6 και TNF-a είναι επίσης παράγοντες που σχετίζονται με αυξημένη αγγειακή ασβεστοποίηση που προκαλείται από υψηλά επίπεδα p.3233) Ωστόσο. Τα τρέχοντα δεδομένα δεν εξηγούν πλήρως τον μηχανισμό των αγγειακών

ασβεστοποίηση που προκαλείται από αυτούς τους παράγοντες. Υποθέσαμε ότι μπορεί να υπάρχουν άλλα μόρια που σχετίζονται με το P, όπως αυτά στην υπεροικογένεια SLC, που εμπλέκονται στην αγγειακή ασβεστοποίηση. Εστιάσαμε σε πρωτεΐνες μεμβράνης στην υπεροικογένεια SLC και διερευνήσαμε πιθανά υποψήφια μόρια που σχετίζονται με το P εκτός από το PiT-1 για συμμετοχή στην αγγειακή ασβεστοποίηση. Επιπλέον, εξετάσαμε τη σχέση μεταξύ υποψηφίων μορίων και αγγειακής ασβεστοποίησης σε βίντεο και in vivo.

Υλικά και μέθοδοι

Κυτταρικής καλλιέργειας. Λήφθηκαν φυσιολογικά ανθρώπινα μυϊκά κύτταρα (AoSMC) από τη Lonza (Βασιλεία, Ελβετία) Το AoSMC καλλιεργήθηκε σύμφωνα με τις οδηγίες του κατασκευαστή. Τα AoSMC διατηρήθηκαν σε ένα μέσο ανάπτυξης (βασικό μέσο κυττάρων λείων μυών συμπληρωμένο με 5% εμβρυϊκό βόειο ορό (FBS), επιδερμικό αυξητικό παράγοντα, ινσουλίνη, αυξητικό παράγοντα ινοβλαστών-Β και γενταμικίνη/αμφοτερικίνη-Β). Τα μέσα άλλαζαν κάθε δεύτερη μέρα. Τα AoSMC αναπτύχθηκαν σε επωαστήρα υγροποιημένου 5% CO στους 37 βαθμούς και διατηρήθηκαν μέχρι να επιτευχθεί συρροή και στη συνέχεια χρησιμοποιήθηκαν σε πειράματα.

Ασβεστοποιημένο AoSMC. Η ασβεστοποίηση του AoSMC προκλήθηκε όπως περιγράφηκε προηγουμένως.435) Τα AOSMC καλλιεργήθηκαν σε τροποποιημένο με Dulbecco μέσο Eagle συμπληρωμένο με 15% FBS και πενικιλλίνη-στρεπτομυκίνη και καλλιεργήθηκαν με 2,6 mM Ρ για 3, 6, 9, 12 ημέρες και. Η συγκέντρωση του Ρ ρυθμίστηκε από τα ρυθμιστικά διαλύματα PNaH, PO/Na και HPO. pH 7,2). Άλλα AoSMC δεν καλλιεργήθηκαν με 2,6 mM P.

Μικροσυστοιχία DNA. Χρησιμοποιήθηκε ολικό RNA δειγμάτων AoSMC που καλλιεργήθηκαν και δεν καλλιεργήθηκαν με 2,6 mM Ρ. Ολικό RNA 5.0 ug αναλύθηκε χρησιμοποιώντας μια μικροσυστοιχία DNA (Agilent Technologies, Τόκιο. Ιαπωνία). SurePrint G3 Human GE 8 x 60k έκδοση. 2 Microarray χρησιμοποιήθηκε για την εξέταση περίπου 26,000 γονιδίων. Η αναλογία υπολογίστηκε διαιρώντας το επίπεδο έκφρασης του AoSMC που καλλιεργήθηκε με 2,6 mM για 12 ημέρες με το επίπεδο έκφρασης του AoSMC μη-καλλιεργημένο με 2,6 mM P

Μικροσυστοιχία DNA

Χρησιμοποιήθηκε ολικό RNA δειγμάτων AoSMC που καλλιεργήθηκαν και δεν καλλιεργήθηκαν με 2,6 mM Ρ. Ολικό RNA 5.0 ug αναλύθηκε χρησιμοποιώντας μια μικροσυστοιχία DNA (Agilent Technologies, Τόκιο. Ιαπωνία). SurePrint G3 Human GE 8 x 60k έκδοση. 2 Microarray χρησιμοποιήθηκε για την εξέταση περίπου 26,000 γονιδίων. Η αναλογία υπολογίστηκε διαιρώντας το επίπεδο έκφρασης σε AoSMC που καλλιεργήθηκε με 2,6 mM για 12 ημέρες με το επίπεδο έκφρασης σε AoSMC μη-καλλιεργημένο με 2,6 mM P. Έκφραση SLC37A2 σε αγγειακή φλεγμονή. Για να προκληθεί μια φλεγμονώδης απόκριση στο AoSMC, τα κύτταρα καλλιεργήθηκαν με μέσο ανάπτυξης μέχρι να φτάσουν στη συρροή και στη συνέχεια υποβλήθηκαν σε επεξεργασία με 1 ugmL λιποπολυσακχαρίτες (LPS) (LPS από escherichia coli O111:B4, Sigma, St. Louis, MO) για 24 και 72 χωρίς 2,6 mM Ρ. Άλλα AoSMC δεν καλλιεργήθηκαν με ανάλυση αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης (PCR) σε πραγματικό χρόνο. Ολικό RNA εκχυλίστηκε από AoSMC που υποβλήθηκε σε επεξεργασία με LPS για 24 και 72 ώρες και κύτταρα που δεν υποβλήθηκαν σε επεξεργασία με LPS. Πραγματοποιήθηκε ποσοτική PCR σε πραγματικό χρόνο με βάση το πράσινο SYBR χρησιμοποιώντας συντεθειμένο cDNA και ένα κατάλληλο σύνολο εκκινητών για κάθε γονίδιο στόχο με σύστημα PCR πραγματικού χρόνου aStepOnePlus (Applied Biosystems, FosterCity, CA). Οι αλληλουχίες εκκινητών ήταν οι εξής: ανθρώπινη IL-6.5-AATTCGGTACATCCTCGACGG-3' και 5-GCCATCTTTGGAAGGTTCAGG-3'; ανθρώπινο SLC37A2,5TCACTTTAGTGCCAAGGAGGC-3' και 5CCATTGGTGTAGTCAGAGACG-3'; γλυκεραλδεΰδη-3-φωσφορική αφυδρογονάση (GAPDH5'-CTGCACCACCAACTAACTGCTTAGC- και 5-CTTCTGGGIGGCAGTGATGGC-3. IL-6 και SLC37A2 mRNA επίπεδα έκφρασης υπολογίστηκαν μετά από κανονικοποίηση της έκφρασης GAPD σε κανονικοποίηση CLCEx AoSMC Το σύνολο εκχυλίστηκε από AoSMC που δεν καλλιεργήθηκε με 2,6 mM P και κύτταρα AoSMC καλλιεργήθηκαν με 2,6 mM P για 3, 6, 9, 12 και 14 ημέρες. Η PCR πραγματικού χρόνου πραγματοποιήθηκε χρησιμοποιώντας το συντιθέμενο cDNA. Οι αλληλουχίες εκκινητών ήταν όπως ακολουθεί: ανθρώπινο Runx2, 5-TGAGAGCCGCTTCTCCAACCC-3' και 5-CTCTGGCTTTGGGAAGAGCCG-3. Τα επίπεδα έκφρασης mRNA Runx2 και SLC37A2 υπολογίστηκαν μετά την κανονικοποίηση με APPH.

Ανάλυση Western blotting.

Η ολική πρωτεΐνη συλλέχθηκε από δείγματα AoSMC που καλλιεργήθηκαν υπό τις ίδιες συνθήκες που χρησιμοποιήθηκαν για ανάλυση PCR σε πραγματικό χρόνο. Αυτά τα δείγματα λύθηκαν χρησιμοποιώντας αλατούχο διάλυμα ρυθμισμένο με Tris (ρΗ 75) συμπληρωμένο με 5% NP-40 και ένα κοκτέιλ αναστολέα πρωτεάσης 1%. Τα δείγματα συγκέντρωσης πρωτεΐνης μετρήθηκαν χρησιμοποιώντας το κιτ δοκιμασίας πρωτεΐνης BCA (Thermo FisherScientific. Waltham, ΜΑ). και η συγκέντρωση ρυθμίστηκε με στύπωμα western, 10 μ§ πρωτεΐνης διαχωρίστηκαν σε ένα πήκτωμα πολυακρυλαμιδίου 10% χρησιμοποιώντας ηλεκτροφόρηση γέλης δωδεκυλοθειικού νατρίου-πολυακρυλαμιδίου. Η μεμβράνη υποβλήθηκε σε επεξεργασία με αντίσωμα SLC37A2 (Novus Biologicals, Centennial, CO) ή αντίσωμα GAPDH (GeneTex, Irvine, CA) ως τα πρωτεύοντα αντισώματα, επωάστηκαν με αντίσωμα συζευγμένο με Rabbit lgG Horseradish peroxidase (R&D Systems, Minnea secondary as) και οπτικοποιήθηκε χρησιμοποιώντας Amersham ECL Select (GE Healthcare. Buckinghamshire, Αγγλία) και αναλυτή εικόνας φωταύγειας (LAS-1000 plus, FUNIFILM, Τόκιο, Ιαπωνία). Η ζώνη ποσοτικοποιήθηκε χρησιμοποιώντας lmagel.

Πειραματικός

Όλα τα πρωτόκολλα μελέτης εγκρίθηκαν από την Επιτροπή Δεοντολογίας του Πανεπιστημίου του Hyogo, School of Human Science and Environment. Αρσενικοί αρουραίοι Sprague-Dawley ηλικίας δώδεκα εβδομάδων αγοράστηκαν από την Japan SLC (Shizuoka, Ιαπωνία). Οι αρουραίοι διατηρήθηκαν σε έναν 12-φωτεινό, 12-ωρο κύκλο σκότους (09:00-21:00) και επέτρεψαν ελεύθερη πρόσβαση σε τροφή και εξαιρετικά καθαρό νερό.

Οι πειραματικές δίαιτες περιλαμβάνουν μια δίαιτα ελέγχου P (1.0% P, 0.6 Ca, 20% πρωτεΐνη), μια δίαιτα αδενίνης (0.75% αδενίνη , 1.0% P, 0.6%Ca, 2,5% πρωτεΐνη), δίαιτα χαμηλής περιεκτικότητας σε P (LP) (0.2% P,0 0,6% Ca, 10%πρωτεΐνη) και δίαιτα υψηλής περιεκτικότητας σε P (HP) (1,0% P, 0,6% Ca, 10% πρωτεΐνη) με βάση τη δίαιτα AIN93-G (Ανατολίτικο Ζυμομύκητα, Τόκιο, Ιαπωνία) με την καζεΐνη ως πηγή πρωτεΐνης. 3637) Μια δίαιτα χαμηλή σε πρωτεΐνη έχει αναφερθεί ότι προάγει την αγγειακή ασβεστοποίηση σε αρουραίους με νεφρική ανεπάρκεια που προκαλείται από αδενίνη, επομένως πραγματοποιήθηκε περιορισμός πρωτεΐνης.3738) Πριν από την ομαδοποίηση, όλοι οι αρουραίοι (n=23) τράφηκαν με μια τυπική δίαιτα MF (Oriental Yeast) για μια εβδομάδα για να εγκλιματιστούν. Στην ηλικία των 13 εβδομάδων, οι αρουραίοι χωρίστηκαν σε 2 ομάδες: την ομάδα ελέγχου (n=5) και την ομάδα ΧΝΝ που προκαλείται από αδενίνη (n=18). Η ομάδα ελέγχου έλαβε τη δίαιτα ελέγχου P για 6 εβδομάδες . Η επαγόμενη από αδενίνη ομάδα ΧΝΝ έλαβε τη δίαιτα αδενίνης για περίπου 3 εβδομάδες και στη συνέχεια χωρίστηκε περαιτέρω σε 2 υποομάδες: την ομάδα CKD-LP (n=8) ή την ομάδα CKDHP (n=10). Οι αρουραίοι της ομάδας CKD-LP και της ομάδας CKD-HP έλαβαν τη δίαιτα LP και τη δίαιτα HP για 3 εβδομάδες, αντίστοιχα κατά τη διάρκεια της πειραματικής περιόδου, η πρόσληψη τροφής καταγράφηκε καθημερινά. Κατά τη διάρκεια της δίαιτας αδενίνης, συλλέχθηκαν δείγματα αίματος από την ουραία φλέβα μεταξύ 10:00 π.μ. και 11:00 π.μ. μία φορά την εβδομάδα έως τη δεύτερη εβδομάδα και στη συνέχεια μία φορά κάθε 2 ημέρες για την παρακολούθηση των επιπέδων στο πλάσμα. Κατά τη διάρκεια της δίαιτας LP ή της δίαιτας HP, συλλέγονταν δείγματα αίματος μία φορά την εβδομάδα. Συλλέχθηκαν δείγματα ούρων και καταγραφόταν ο όγκος ούρων μία φορά την εβδομάδα. Οι αρουραίοι θυσιάστηκαν με αναισθητικό χρησιμοποιώντας ισοφλουράνιο (Wako Pure Chemical Industries. Osaka Japan) και λαπαροτομές. Δείγματα αίματος που ελήφθησαν από την κάτω κοίλη φλέβα και τη θωρακοκοιλιακή αορτή συλλέχθηκαν για ανάλυση.

Έκφραση SLC37A2 στην αορτή.

Περίπου το ένα τρίτο της συλλεχθείσας θωρακοκοιλιακής αορτής χρησιμοποιήθηκε για την οπτικοποίηση της ασβεστοποίησης και τη διεξαγωγή ανοσοχρώσης. Η αορτή ενσωματώθηκε σε παραφίνη και κόπηκαν τμήματα 4-um. Οι τομές χρωματίστηκαν χρησιμοποιώντας μια μέθοδο Von Kossa για κιτ ασβεστίου (Polysciences. Warrington, ΡΑ) σύμφωνα με τις οδηγίες του κατασκευαστή. πραγματοποιήθηκε ανάλυση ανοσοχρώσης με σειριακές τομές. Οι τομές επωάστηκαν με αντίσωμα SLC37A2 όλη τη νύχτα στους 4 βαθμούς και στη συνέχεια υποβλήθηκαν σε επεξεργασία με Histofine Simple Stain Rat MAX-POMULTI) (Nichirei Biosciences, Τόκιο, Ιαπωνία) για 30 λεπτά σε θερμοκρασία δωματίου. Στη συνέχεια, οι τομές υποβλήθηκαν σε επεξεργασία με κιτ υποστρώματος DAB (Nichirei).

Το ολικό RNA εκχυλίστηκε από την υπόλοιπη παγωμένη θωρακοκοιλιακή αορτή. Πραγματοποιήθηκε PCR σε πραγματικό χρόνο χρησιμοποιώντας το συντιθέμενο cDNA. Οι αλληλουχίες εκκινητών ήταν οι εξής: οστεοποντίνη αρουραίου, 5ACCCATCTCAGAAGCAGAATC-3' και 5ATCCATGTGGTCATGGCTTTTC-3' και; αρουραίου SLC37A2,5-TAGTCCCAGCTTCGAGTACGG-3' και 5'-CTGATGGGCTTTCTGGACATG-3. Τα επίπεδα έκφρασης mRNA οστεοποντίνης και SLC37A2 υπολογίστηκαν μετά από κανονικοποίηση με GAPDH

Στατιστική ανάλυση.

Τα δεδομένα παρουσιάζονται ως μέσος όρος + SE. Οι διαφορές μεταξύ των ομάδων αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας το t-test. Σε πειράματα ασβεστοποιημένης AoSMC που προκλήθηκαν από φωσφορικά, οι διαφορές αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας μια μονόδρομη ανάλυση διακύμανσης ακολουθούμενη από τη μέθοδο του Dunnett. Στα πειράματα του μοντέλου CKD, οι διαφορές αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας τη δοκιμή K ruskal-Wallis ακολουθούμενη από τη μέθοδο Steel-Dwass. Οι συντελεστές συσχέτισης (rs) προσδιορίστηκαν χρησιμοποιώντας τη δοκιμή κατάταξης συντελεστών συσχέτισης Spearman. Για όλες τις εξετάσεις. τιμές p δύο ουρών<0.05 were considered statistically significant.