SLC37A2, ένα μόριο που σχετίζεται με τον φώσφορο αυξάνει στα κύτταρα λείου μυός στην ασβεστοποιημένη αορτή Ⅱ

Αποτελέσματα

Αναζήτηση για υποψήφια μόρια στοεπαγόμενη από φωσφορικά ασβεστοποιημέναAoSMC.Για την αναζήτηση μορίων των οποίων η έκφραση αυξάνεται στο ασβεστοποιημένο AoSMC, πραγματοποιήθηκε ανάλυση μικροσυστοιχίας DNA περίπου 26,000 γονιδίων χρησιμοποιώντας ασβεστοποιημένο AoSMC και μη ασβεστοποιημένο mRNA του AoSMC. Το Σχήμα 1 δείχνει το HeatMap διαφορετικών γονιδίων που εκφράζονται μεταξύ AoSMC που δεν καλλιεργήθηκε με 2,6 mM και εκείνων που καλλιεργήθηκαν με 2,6 mM P για 12 ημέρες. Συνολικά 3.066 γονίδια αυξήθηκαν περισσότερο από δύο φορές σε καλλιεργημένο έναντι μη καλλιεργημένο AoSMC. Τα γονίδια με αυξημένη έκφραση ήταν μόρια που σχετίζονται με τον σχηματισμό οστεοβλαστών όπως οστεοποντίνη, ειδικός για οστεοβλάστες παράγοντας περιοστίνης (POSTN), Wnt3, ιντερλευκίνη-6 (IL-6) καιαυξητικός παράγοντας ινοβλαστών23 (FGF23) καθώς και πολλά μόρια στην υπεροικογένεια SLC (Πίνακας 1). Μεταξύ αυτών των μορίων, εστιάσαμε στο SLC37A2 για το οποίο το mRNA αυξήθηκε περίπου 3,1 φορές σε AoSMC που καλλιεργήθηκε με 2,6 mM P για 12 ημέρες σε σύγκριση με το AoSMCnot που καλλιεργήθηκε με 2,6 mM P. Το SLC37A2 έχει αναφερθεί ότι σχετίζεται με τη ρύθμιση P, αλλά η λεπτομερής λειτουργία του είναι άγνωστη επίδρασή του φλεγμονής στην έκφραση SLC37A2.Αγγειακή ασβεστοποίησηέχει αναφερθεί ότι προάγεται από φλεγμονή, επομένως εξετάσαμε εάν το mRNA του SLC37A2 επηρεάζεται από τη φλεγμονώδη απόκριση. Στις 24 ώρες μετά τη θεραπεία με LPS, η IL-6 αυξήθηκε σημαντικά σε σύγκριση με το AoSMC που δεν υποβλήθηκε σε θεραπεία με LPS (Εικ. 2Α). Αυτά τα αποτελέσματα παρατηρήθηκαν επίσης 72 ώρες μετά τη θεραπεία με LPS. Δεν υπήρχαν σημαντικές διαφορές μεταξύ των ομάδων στην έκφραση SLC37A2mRNA (Εικ.2Β).

ΚΑΝΤΕ ΚΛΙΚ ΕΔΩ ΓΙΑ ΝΑ ΠΑΡΕΤΕ ΦΥΣΙΚΟ ΟΡΓΑΝΙΚΟ ΕΚΧΥΛΙΣΜΑ ΚΙΣΤΑΝΧΗΣ ΜΕ 25% ΕΧΙΝΑΚΟΣΙΔΗ ΚΑΙ 9% ΑΚΤΕΟΣΙΔΗ ΓΙΑ ΤΗ ΛΕΙΤΟΥΡΓΙΑ ΤΩΝ ΝΕΦΡΩΝ

Υποστήριξη της Wecistanche-Ο μεγαλύτερος εξαγωγέας κιστάνι στην Κίνα:

Διεύθυνση ηλεκτρονικού ταχυδρομείου:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Tel:+86 15292862950

Αγορά για περισσότερες λεπτομέρειες Λεπτομέρειες:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-κατάστημα

Έκφραση του SLC37A2 σε επαγόμενο από φωσφορικά ασβεστοποιημένο AoSMC. Για να προσδιορίσουμε εάν το SLC37A2 εμπλέκεται στην ασβεστοποίηση, εξετάσαμε την έκφραση του SLC37A2 mRNA σε μη ασβεστοποιημένο και ασβεστοποιημένο AoSMC (Εικ. 3). Παρατηρήθηκε ασβεστοποίηση σε AoSMC που καλλιεργήθηκε με 2,6 mM P για 6 ημέρες, και πιο προχωρημένη ασβεστοποίηση παρατηρήθηκε σε AoSMC που καλλιεργήθηκε με 2,6 mM P για 12 ημέρες (Εικ. 3Α). Το Runx2 mRNA αυξήθηκε σημαντικά στο ασβεστοποιημένο AoSMC σε σύγκριση με το μη ασβεστοποιημένο AoSMC (Εικ. 3Β). Το mRNA SLC37A2 άρχισε να αυξάνεται σημαντικά την ημέρα 3 στο ασβεστοποιημένο AoSMC και την ημέρα 9, το ασβεστοποιημένο AoSMC αυξήθηκε σημαντικά περίπου δύο φορές σε σύγκριση με το μη ασβεστοποιημένο AoS 3C). Η έκφραση της πρωτεΐνης SLC37A2 αυξήθηκε σημαντικά περίπου δύο φορές την ημέρα 6 στο ασβεστοποιημένο AoSMC σε σύγκριση με το μη ασβεστοποιημένο AoSMC (Εικ. 3D).

Έκφραση του SLC37A2 σε αρουραίους μοντέλου CKD.

Για να αποκαλύψουμε εάν το SLC37A2 εμπλέκεται στην αγγειακή ασβεστοποίηση in vivo, εξετάσαμε την έκφραση mRNA του SLC37A2 σε αγγεία αρουραίων ΧΝΝ που προκαλούνται από αδενίνη. Οι αρουραίοι CKD που προκαλούνται από αδενίνη δημιουργήθηκαν σύμφωνα με το πρωτόκολλο που φαίνεται στο Σχ. 4Α. Ο Πίνακας 2 δείχνει το σωματικό βάρος και τα βιοχημικά δεδομένα την ημέρα της θυσίας. Το σωματικό βάρος τωνΧΝΝ που προκαλείται από αδενίνηοι αρουραίοι ήταν σημαντικά χαμηλότεροι σε σύγκριση με τους αρουραίους χωρίς ΧΝΝ. Σε σύγκριση με την ομάδα που δεν ήταν ΧΝΝ, οι ομάδες ΧΝΝ είχαν υψηλότερα επίπεδα P και Cr στο πλάσμα και χαμηλότερα επίπεδα Caleves στο πλάσμα και 24-ωριαία απέκκριση P, Ca και Cr στα ούρα. Επιπλέον, αυτά τα αποτελέσματα ήταν πιο εμφανή στην ομάδα CKD-HP, όπως φάνηκε σε προηγούμενες μελέτες.37,39) Έτσι, η νεφρική λειτουργία μειώθηκε στην ομάδα CKD-HP, ιδιαίτερα στην ομάδα CKD-HP. Εξετάσαμε την έκφραση mRNA στα αορτικά αγγεία αρουραίων CKD (Εικ. 4). Αν και δεν υπήρχαν σημαντικές διαφορές στην έκφραση του Runx2 mRNA, ενός μεταγραφικού παράγοντα που κινείται νωρίς στον μηχανισμό της αγγειακής ασβέστωσης, μεταξύ των ομάδων (Εικ. 4Β) η έκφραση του mRNA οστεοποντίνης αυξήθηκε σημαντικά σε μια ομάδα theCKD-HP σε σύγκριση με την μη- ομάδα ΧΝΝ και ηΟμάδα CKD-LP(Εικ. 4C). Η έκφραση mRNA του SLC37A2 αυξήθηκε επίσης σημαντικά στην ομάδα CK D-HP σε σύγκριση με την ομάδα μη CKD και την ομάδα CKD-LP (Εικ. 4D). Επειδή υπήρχαν μεγάλες ατομικές διαφορές σε αυτούς τους αρουραίους, εξετάσαμε τη συσχέτιση μεταξύ οστεοποντίνης και SLC37A2 mRNA και βρήκαμε μια σημαντική συσχέτιση μεταξύ αυτών των μορίων (Εικ. 4Ε). Η ιστολογική εξέταση της θωρακοκοιλιακής αορτής αποκάλυψε έσω ασβεστοποίηση μόνο στην αορτή της ομάδας CKD-HP (Εικ. 5Α). Για να εξετάσουμε τη θέση έκφρασης του SLC37A2 στην αορτή, πραγματοποιήσαμε ανοσοχρώση της αορτής των CKD-HPrats. Το SLC37A2 εκφράστηκε έντονα στην περιοχή όπουαγγειακή ασβεστοποίησησυνέβη (Εικ. 5Β).

Εικ. 1. Ο Χάρτης θερμότητας των διαφορετικά εκφραζόμενων γονιδίων μεταξύ AoSMCnon-καλλιεργημένου με 2,6 mM P και AoSMC καλλιεργημένου με 2,6 mM P. Το κόκκινο αντιπροσωπεύει γονίδια με υψηλό επίπεδο σήματος και το πράσινο αντιπροσωπεύει γονίδια με χαμηλό επίπεδο σήματος. Αορτικά λεία μυϊκά κύτταρα AOSMC. Δείτε το σχήμα στην ηλεκτρονική έκδοση.

Συζήτηση

Διερευνήσαμε υποψήφια μόρια που σχετίζονται με το P που εμπλέκονται στην αγγειακή ασβεστοποίηση. Τα αποτελέσματά μας έδειξαν ότι το SLC37A2 είναι ένα από τα μόρια που αυξάνονται μεαγγειακή ασβεστοποίησηin vitro και in vivo.

Η οικογένεια SLC37 ανήκει στην υπεροικογένεια SLC και περιλαμβάνει πρωτεΐνες: SLC37A 1-440) Η οικογένεια SLC37 περιέχει διαμεμβρανικές πρωτεΐνες στη μεμβράνη του ενδοπλασματικού δικτύου και έχει μια αλληλουχία ομόλογη με τον αντιμεταφορέα βακτηριακών οργανοφωσφορικών φωσφορικών.(41) Το SLC37A4 είναι πιο γνωστό ως τομεταφορέας γλυκόζης6-φωσφορικών.(2-44 Ωστόσο, υπάρχουν λίγες αναφορές για το SLC37A2 και οι λεπτομέρειες σχετικά με τη λειτουργία του δεν είναι πλήρως κατανοητές. Το SLC37A2, γνωστό και ως SPX2, εκφράζεται σε αφθονία σε μακροφάγα ποντικού, σπλήνα, θύμο και λευκό λιπώδη ιστό (WAT ) γενετικά παχύσαρκων μοντέλων ποντικών και κυττάρων που μοιάζουν με οστεοκλάστες που προέρχονται από κύτταρα Raw264.7.(45.6) Η πρωτεΐνη SLC37A2 μεταφέρει και τις δύο ανταλλαγές γλυκόζης{{13}φωσφορικού/φωσφορικού και φωσφορικού/φωσφορικού.(4) Πρόσφατα, οι αναφορές έδειξαν συσχέτιση SLC37A2 με νόσο των ζώων. (47-49) Ένα ελάττωμα SLC37A2 προκαλείκρανιογναθική οστεοπάθεια(CMO), μια αυτοπεριοριζόμενη πολλαπλασιαστική ασθένεια των οστών, σε φυλές τεριέ. (47) Στα βοοειδή γαλακτοπαραγωγής, μια ομόζυγη μετάλλαξη SLC37A2 είναι υπεύθυνη για τον εμβρυϊκό θάνατο. (8.9) Επιπλέον. Το SLC37A2 έχει θεωρηθεί στόχος για τα γονίδια-στόχους της βιταμίνης D. (έτσι) Η πιθανότητα για το γονίδιο στόχου υποδοχέα προγεστερόνης φωσφόρου-Ser294 στην εξέλιξη του καρκίνου του μαστού έχει επίσης ληφθεί υπόψη (1) Έχει αναφερθεί ότι η φλεγμονή μπορεί να προκαλέσει και να επιδεινώσει την αγγειακή ασβεστοποίηση. (2s26) Επιπλέον. Το SLC37A2 εκφράζεται άφθονα σε μακροφάγα και WAT που επηρεάζονται από τη διήθηση μακροφάγων. (σ) Επομένως. θεωρήσαμε ότι το SLC37A2 μπορεί να είναι ένα μόριο που εκφράζεται κατά τη διάρκεια της φλεγμονής. Ωστόσο, τα ευρήματά μας δεν έδειξαν αύξηση στην έκφραση SLC37A2 στο AoSMC που εκτίθεται σε φλεγμονώδη απόκριση, αυτό το μόριο δεν φαίνεται να επηρεάζεται άμεσα από τη φλεγμονώδη διέγερση. Το SLC37A2 μπορεί να εμπλέκεται στην αγγειακή ασβεστοποίηση μέσω μηχανισμού διαφορετικού από τη φλεγμονή.

Έχει αναφερθεί ότι το SLC37A2 δρα ως P-συνδεδεμένοαντι-πορτιέρης. (41) Επιπλέον, αναφέρθηκε ότι το SLC37A2 είναι γονίδιο στόχος για τη βιταμίνη D και το γονίδιο SLC37A2 περιέχει μια κύρια θέση(ss2) δέσμευσης του υποδοχέα βιταμίνης (ss2) Συστηματικά συσχετισμένες αλλαγές στην έκφραση των γονιδίων SLC37A2 και στις κυκλοφορούσες μορφές βιταμίνης D. έχει παρατηρηθεί σε μονοπύρηνα κύτταρα ανθρώπινου περιφερικού αίματος. (50)Οι υποδοχείς της βιταμίνης D συνδέονται με την 1a, 25-διυδροξυ βιταμίνη D, η οποία είναι μεταβολίτης της βιταμίνης D, και ρυθμίζουν την έκφραση των γονιδίων. lo, η 25διυδροξυβιταμίνη D, λειτουργεί στην απορρόφηση του Ca και του P στο έντερο, στην κινητοποίηση του Ca στα οστά και στην επαναρρόφηση του Cain στα νεφρά. (3) Υπάρχει μια αναφορά ότι σε αρουραίους τύπου ΧΝΝ που προκαλούνται από αδενίνη, ο ορός la, 25-διυδροξυβιταμίνη D, ήταν σημαντικά υψηλότερος σε αρουραίους με δίαιτα υψηλής πρόσληψης p, με προχωρημένη αγγειακή ασβεστοποίηση, σε σύγκριση με αρουραίους χαμηλής -p πρόσληψη δίαιτας.39) Το SLC37A2 μπορεί να σχετίζεται με τη ρύθμιση του P μέσω της βιταμίνης D. Απαιτούνται περαιτέρω μελέτες για να διευκρινιστεί ότι η βιταμίνη D επηρεάζει την έκφραση του SLC37A2 in vitro και Vivo.

Έχει αποδειχθεί ότι ο μηχανισμός της αγγειακής ασβεστοποίησης είναι παρόμοιος με αυτόν του σχηματισμού οστού. Η ανεπάρκεια του SLC37A2 που προκαλείται από την CMO είναι κλινικά συγκρίσιμη με τη βρεφική υπερόστωση του φλοιού του ανθρώπου, επίσης γνωστή ως νόσος του Caffey.7 Επιπλέον, υπάρχουν αναφορές ότι το SLC37A2 εκφράζεται στο μυελό των οστών και στους οστεοκλάστες. o Hytone et al.(7 υπέθεσαν ότι μια δυσλειτουργία του Το SLC37A2 θα προκαλούσε ανισορροπία στη λειτουργία του σχηματισμού οστεοβλαστικών και οστεοκλαστικών οστών, και ως αποτέλεσμα, θα οδηγήσει σε υπερόστωση.

Το Runx2 είναι ένας απαραίτητος μεταγραφικός παράγοντας για την αγγειακή ασβεστοποίηση. Αναφέρεται επίσης ότι το Runx2 είναι ένας μεταγραφικός παράγοντας διαφοροποίησης οστεοβλαστών που εκφράζεται στα αναπτυσσόμενα επιθηλιακά κύτταρα του μαστού. (s435) Το Runx2 φαίνεται να είναι απαραίτητο για τη ρύθμιση των γονιδίων-στόχων της προγεστερόνης φωσφόρου-Ser294, τα οποία σχετίζονται με την εξέλιξη του καρκίνου του μαστού. Το SLC37A2 θεωρείται υποψήφιο γονίδιο-στόχος υποδοχέα προγεστερόνης φωσφόρου-Ser294. (s1) Ως εκ τούτου, θεωρείται ότι το Runx2 μπορεί να ρυθμίζει το SLC37A2 Στην παρούσα μελέτη, η έκφραση του mRNA του SLC37A2 στην αορτή των αρουραίων CkD συσχετίστηκε με το mRNA της οστεοποντίνης, το οποίο στοχεύει το γονίδιο του Runx2.