Sarmentosamide, An Anti-aging Compound From A Marine-Derived Streptomyces Sp. APmarine042

Λέξεις-κλειδιά:κιστανάκι; Στρεπτομύκητεςsp. APmarine042;αντι γήρανση; MMP-1; UVB; TNF-

Κάντε κλικ εδώ για να λάβετε περισσότερες πληροφορίες σχετικά με το Cistanche For Aging Skin-Care

1. Εισαγωγή

Γήρανση του δέρματοςεπάγεται από δύο κύριες διεργασίες, οι οποίες προκύπτουν από εγγενείς και εξωγενείς παράγοντες.Εξωγενής γήρανσηπροκαλείται κυρίως από την έκθεση σε περιβαλλοντικούς παράγοντες όπως η ατμοσφαιρική ρύπανση [1] και υπεριώδη (UV) ακτινοβολία [2]. Το φως UV αποτελείται από UVA (315–400 nm), UVB (280–315 nm),και UVC (200–280 nm), εκ των οποίων οι ακτίνες UVB είναι γνωστό ότι διεισδύουν στην επιδερμίδα και συμβάλλουν στο δέρμαφωτογήρανση [3]. Η φωτογήρανση του δέρματος που προκαλείται από την UVB προκαλεί βλάβη στο DNA [4] και δραστικά είδη οξυγόνου(ROS) γενιά [5] και διαταράσσει την εξωκυτταρική μήτρα [6]. Η εγγενής γήρανση προκαλείται από τη φυσικήσυνέπειες φυσιολογικών αλλαγών, όπως γενετικοί παράγοντες, ορμόνες και μεταβολικές διεργασίες [7]. Επιπλέον, φλεγμονώδεις κυτοκίνες, όπως ο παράγοντας άλφα νέκρωσης όγκου (TNF ), ιντερλευκίνη 1 άλφα/βήτα(IL-1 / ), και η ιντερλευκίνη 6 (IL-6), αυξάνονται χρόνια με την ηλικία. Ειδικότερα, νέκρωση όγκουπαράγοντας- (TNF ) είναι γνωστό ότι επιταχύνει την αποικοδόμηση των συστατικών της εξωκυτταρικής μήτρας (ECM) μέσωρυθμίζοντας προς τα πάνω την έκφραση και τη δραστηριότητα των μεταλλοπρωτεϊνασών μήτρας (MMPs) σε ηλικιωμένο δέρμα [8]. MMP-1 είναιαπελευθερώνεται κυρίως από ινοβλάστες στο χόριο και η εκκρινόμενη ΜΜΡ-1 είναι υπεύθυνη για την αποικοδόμησηδερματικού κολλαγόνου, το οποίο υποστηρίζει τη δομή και τη λειτουργία του δέρματος. Επομένως, διαμόρφωση του MMP-1Η έκφραση σε δερματικούς ινοβλάστες θα μπορούσε να είναι ένας πολλά υποσχόμενος στόχος για την ανάπτυξη αντιγήρανσηςκαλλυντικά συστατικά.

Προηγούμενες μελέτες έχουν αναφέρει ότι η ακτινοβολία UVB προκαλεί ROS (παραγωγή αντιδραστικών ειδών οξυγόνου και οδηγεί στην ενεργοποίηση ενδοκυτταρικών οδών σηματοδότησης και παραγόντων μεταγραφής (π.χ. AP-1, NF-kB) [9. Αυτοί οι μεταγραφικοί παράγοντες ρυθμίζονται από το μιτογόνο -ενεργοποιημένες πρωτεϊνικές κινάσες MAPKs), οι οποίες επάγουν MMP-1 και προφλεγμονώδεις κυτοκίνες. Υπάρχουν τρεις διακριτές οικογένειες MAPK που εμπλέκονται στα ερεθίσματα UVB/ROS: εξωκυτταρικές κινάσες ρυθμιζόμενες με σήμα (ERKs), C-Jun N-τερματικό

κινάση (NK) και p38. Η μελέτη μας εντόπισε ένα Streptomyces sp. Εκχύλισμα APmarine042 που επέδειξε ισχυρό ανασταλτικό αποτέλεσμα στην έκφραση MMP-1. Στη συνέχεια, μια ανασταλτική ένωση ΜΜΡ-1 ταυτοποιήθηκε σε αυτό το Streptomyces sp. Το εκχύλισμα APmarine042 και η χημική του δομή ταυτοποιήθηκαν μέσω της βοήθειας ανάλυσης NMR (1), μιας ένωσης με ένα τμήμα εξαδιεναμιδίου 101. Στη συνέχεια διερευνούμε περαιτέρω εάν αυτή η ένωση ανέστειλε την έκφραση MMP-1 σε ακτινοβολούμενη από UVB και επαγόμενη από TNFa ανθρώπινο δερματικό ινοβλάστες καθώς και ο ρόλος του στη ρύθμιση των υποκείμενων οδών σηματοδότησης. Επιπλέον, εξετάσαμε το thαντιοξειδωτική δράση του κιστάνι(1) μέσω ενός 2,2-διφαινυλ-1-πικρυλυδραζυλίου (DPPHI)δοκιμασία ριζικού καθαρισμού.

2. Αποτελέσματα και Συζήτηση

2.1. cistanche (1) Απομόνωση και Ταυτοποίηση

Το cistanche (1) απομονώθηκε μέσω ενός συνδυασμού HPLC-UV και απομόνωσης καθοδηγούμενης από βιοδραστικότητα. Με βάση τη σύγκριση μεταξύ των δεδομένων NMR (Συμπληρωματικά Υλικά) της ένωσης που προσδιορίστηκε σε αυτή τη μελέτη (εφεξής θα αναφέρεται ως ένωση 1") με εκείνα των ενώσεων που αναφέρθηκαν προηγουμένως, η ένωση 1 αναγνωρίστηκε ως cistanche. Η τιμή οπτικής περιστροφής της ένωσης 1 ήταν συνάδει επίσης με προηγούμενες εκθέσεις, οι οποίες υποστήριξαν περαιτέρω τη βοήθεια της ένωσης 1 (Εικόνα 1).

2.2. Κυτταροτοξικές Επιδράσεις του Κίστανχου (1) στους Ανθρώπινους Δερματικούς Ινοβλάστες

Για τη διερεύνηση των κυτταροτοξικών επιδράσεων του cistanche, οι φυσιολογικοί ανθρώπινοι δερματικοί ινοβλάστες (NHDFor ανθρώπινα κύτταρα ινοβλαστών ακροποσθίας (Hs68) υποβλήθηκαν σε επεξεργασία με cistanche σε διαφορετικές συγκεντρώσεις (6, 12, 25, 50, 100 ug/mL) για 24 ώρες, μετά τις οποίες το κύτταρο Η ανάλυση του κιτ μέτρησης-8 (CCK-8) ​​πραγματοποιήθηκε για να ποσοτικοποιηθεί η βιωσιμότητα των κυττάρων. Το υδατοδιαλυτό άλας τετραζολίου (WST-8) σε διάλυμα CCK-8 μειώθηκε από τις δραστηριότητες αφυδρογονάσης σε κύτταρα για να δώσουν μια κίτρινου χρώματος χρωστική φορμαζάνη, η ποσότητα της οποίας ήταν ανάλογη με τον αριθμό των ζωντανών κυττάρων. Όπως φαίνεται στο Σχήμα 2, το cistanche δεν προκάλεσε παρατηρήσιμα κυτταροτοξικά αποτελέσματα ούτε στα κύτταρα NHDF ούτε στα κύτταρα Hs68 σε συγκεντρώσεις που κυμαίνονται από {{15} } ug/ml

Εικόνα 2. Δοκιμή κυτταρικής βιωσιμότητας του cistanche σε ινοβλάστες. (αβ) Η βιωσιμότητα των κυττάρων τουεπεξεργασμένα με κιστάνοςΚύτταρα φυσιολογικών ανθρώπινων δερματικών ινοβλαστών (NHDF) (α) και ανθρώπινων ινοβλαστικών κυττάρων ακροποσθίας (Hs68) (b) στις 24 ώρες μετρήθηκαν με δοκιμασία CCK (κιτ μέτρησης κυττάρων). * p < 0.05, ** p < 0,01 vs. ομάδα χωρίς θεραπεία).

2.3. cistanche (1) Αναστέλλει την έκφραση και έκκριση MMP-1 σε κύτταρα NHDF που ακτινοβολούνται με UVB

Στη συνέχεια, τα NHDF απουσία και παρουσία ακτινοβολίας UVB (25 mJ/cm2) υποβλήθηκαν σε επεξεργασία με cistanche (2,5 ug/mL) για σύντομες περιόδους και τα σχετικά επίπεδα έκφρασης mRNA MMP-1 ποσοτικοποιήθηκαν μέσω ποσοτικής σε πραγματικό χρόνο Ανάλυση PCR. Το cistanche βρέθηκε να μειώνει τα επίπεδα MMP-1 mRNA έως και 16 τοις εκατό και 17 τοις εκατό απουσία (Εικόνα 3α) και παρουσία (Εικόνα 3bof UVB, αντίστοιχα. Η ακτινοβολία UVB, ένας κύριος εξωτερικός παράγοντας κινδύνου γήρανσης του δέρματος, μπορεί διεισδύουν στην επιδερμίδα και φτάνουν στο ανώτερο χόριο, με αποτέλεσμα τη δημιουργία παραγωγής αντιδραστικών ειδών οξυγόνου (ROS)MMP και μείωση της σύνθεσης του κολλαγόνου. Ως εκ τούτου, η μελέτη μας προσπάθησε να διερευνήσει εάν η έκκριση MMP{12} αναστέλλεται από το cistanche σε ακτινοβολούμενη UVB Κύτταρα NHDF. Τα επίπεδα έκκρισης της MMP-1 σε μέσα κυτταροκαλλιέργειας μετρήθηκαν μέσω ELISA και οι σχετικές ποσότητες της έκκρισης MMP{15}}κανονικοποιήθηκαν σε οταλική πρωτεΐνη σε προϊόντα λύσης ολόκληρων κυττάρων, τα οποία μετρήθηκαν μέσω δικινχονικού ποσοτικός προσδιορισμός πρωτεϊνών οξέος (BCA). Η ακτινοβολία UVB (25 mJ/cm2) αύξησε αξιοσημείωτα την έκκριση MMP{18}} (8.3- φορές) σε σύγκριση με την ομάδα που δεν ακτινοβολήθηκε με UVB (Εικόνα 3γ) και το cistanche -ανέστειλε την έκκριση MMP-1 σε κύτταρα NHDF που ακτινοβολήθηκαν με UVB με δοσοεξαρτώμενο τρόπο.

Εικόνα 3. Επίδραση του cistanche στην έκφραση της μεταλλοπρωτεϊνάσης-1 (MMP-1) σε ακτινοβολημένα με UVB NHDF. (α, β) Τα σχετικά επίπεδα mRNA του MMP-1 σε κύτταρα NHDF ακτινοβολήθηκαν με UVB (25 mJ/cm2) ή υποβλήθηκαν σε επεξεργασία με σιτανχ (2,5 ug/mL) για 16 ώρες. Το γονίδιο RPLPO χρησιμοποιήθηκε ως εσωτερικός έλεγχος. * p < {{10}}.05.*** p < 0.001 (C) Μετά από ακτινοβολία UVB (25 mJ/cm2) , το cistanche σε μέσα χωρίς ορό υποβλήθηκε σε αγωγή για 48 ώρες και στη συνέχεια τα σχετικά επίπεδα έκκρισης της MMP-1 σε μέσα κυτταροκαλλιέργειας αναλύθηκαν με ELISA### p <0,001 (έναντι της ομάδας ελέγχου μη UVB). ** p < 0,01; *** p < 0,001 (ομάδα ελέγχου με ακτινοβολία UVB).

Ζήτα περισσότερα:

Διεύθυνση ηλεκτρονικού ταχυδρομείου:wallence.suen@wecistanche.com whatsapp: συν 86 15292862950