Ταχύτατος ταυτόχρονος προσδιορισμός έξι αποτελεσματικών συστατικών στο Cistanche Tubulosa με φασματοσκοπία εγγύς υπέρυθρης ακτινοβολίας

1. Εισαγωγή

Το Cistanche (Hoffmg. Et Link) είναι ένα πολυετές φανερογαμικό γένος της οικογένειας των φυτών Orobanchaceae. Τα περισσότερα είδη που ανήκουν στο γένος Cistanche έχουν χρησιμοποιηθεί ως φαρμακευτικό φυτό εδώ και χιλιετίες στην Κίνα. έχουν τη φήμη του ανώτερου τονωτικού. και είναι γνωστά ως «Ginseng of the Deserts». Το Cistanche tubulosa είναι ένα υποχρεωτικό παράσιτο των ριζών του πολυετούς φυτού Tamarix chinensis. Έχει τεκμηριωθεί στην Κινεζική Φαρμακοποιία ως η αυθεντική πηγή τουCistanches Herba(Κινεζική ονομασία: Roucongrong) από την έκδοση του 2005. Η σύγχρονη φαρμακολογική έρευνα για τα είδη Cistanche ξεκίνησε τη δεκαετία του 1980. Φαρμακολογικές έρευνες έδειξαν ότι τα εκχυλίσματα φυτών Cistanche διαθέτουν ένα ευρύ φάσμα δράσεων, όπως θεραπεία νεφρικής ανεπάρκειας και γεροντικής δυσκοιλιότητας, προώθηση της ικανότητας μάθησης και απομνημόνευσης, κατά της νόσου Alzheimer, ενίσχυση της ανοσίας, αντιγήρανση, κατά της κούρασης κ.λπ. Τις τελευταίες τρεις δεκαετίες, έχουν συνδυαστεί περιεκτικές και συστηματικές φαρμακολογικές μελέτες με φυτοχημικές έρευνες για να διαφωτιστεί η υλική βάση των ευεργετικών επιδράσεων των ριζών των φυτών Cistanche. Αυτές οι έρευνες υποδεικνύουν ότι οι φαινυλαιθανοειδείς γλυκοσίδες (PhGs) ήταν τα κύρια αποτελεσματικά συστατικά στα φυτά Cistanche που διαδραματίζουν βασικό ρόλο στη θεραπεία της νεφρικής ανεπάρκειας, της ανικανότητας, της αντιγήρανσης και της νόσου του Alzheimer. Τα περιεχόμενα δύο PhG (εχινακοσίδη και βερμπασκοσίδη) απαιτούνταν στην Κινεζική Φαρμακοποιία. Εν τω μεταξύ, οι υδατάνθρακες όπως η μαννιτόλη, η σακχαρόζη, η γλυκόζη και η φρουκτόζη στα φυτά Cistanche διαθέτουν την καθαρτική λειτουργία και τις ομάδες υδατανθράκων τουΦυτά κιστάνιέχουν χρησιμοποιηθεί για τη θεραπεία της δυσκοιλιότητας.

NATURAL CISTANCHE TUBULOSA ΓΙΑ ΕΝΙΣΧΥΣΗ ΤΕΣΤΟΣΤΕΡΟΝΗΣ PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Οι άγριοι πόροι του C. tubulosa διανέμονται κυρίως στην περιοχή γύρω από την έρημο Taklamakan στη νότια αυτόνομη περιοχή Xinjiang στην Κίνα. Παρόμοια με πολλά άλλα είδη που χρησιμοποιούνται ως παραδοσιακά κινέζικα φάρμακα (TCM), το C. tubulosa έχει μεγάλη οικονομική αξία και έχει σχεδόν εξαφανιστεί στον άγριο βιότοπό του λόγω υπερβολικής συλλογής. Η καλλιέργεια του C. tubulosa ξεκίνησε τη δεκαετία του 1990 στην Κίνα για να εξασφαλιστεί η προμήθεια πρώτων υλών για το Cistanches Herba καθώς και η προστασία των πόρων των άγριων φυτών. Από το 2017, σχεδόν 13 χιλιάδες εκτάρια καλλιεργούμενης C. tubulosa υπάρχουν στην επαρχία Hotan στο Xinjiang. Απαιτούνται πρόοδοι στην τεχνολογία φύτευσης για την επέκταση της καλλιέργειας καθώς και για τη βελτίωση της ποιότητας του C. tubulosa.

Ο πρωταρχικός σκοπός της καλλιέργειας του C. tubulosa είναι η παραγωγή Cistanches Herba, που είναι πλούσια σε αυτά τα αποτελεσματικά συστατικά. Ωστόσο, τα περιεχόμενα των αποτελεσματικών συστατικών σεCistanches Herba, όπως τα PhG και οι ολιγοσακχαρίτες, μπορούν να επηρεαστούν σημαντικά από πολλούς παράγοντες κατά την παραγωγή. Θα πρέπει να διερευνηθεί ένα σύστημα ανίχνευσης σε πραγματικό χρόνο της ποιότητας του C. tubulosa. Ως εκ τούτου, είναι απαραίτητο να αναπτυχθεί μια μέθοδος υψηλής απόδοσης για την εκπλήρωση της απαίτησης της ανάλυσης μεγάλου αριθμού δειγμάτων σε σύντομο χρονικό διάστημα. Παραδοσιακά, ο προσδιορισμός αυτών των πρωταρχικών αποτελεσματικών συστατικών, όπως τα PhGs και οι υδατάνθρακες, στο C. tubulosa συνήθως επιτυγχανόταν χρησιμοποιώντας υγρή χρωματογραφία υψηλής απόδοσης (HPLC). Αν και είναι ακριβές και αξιόπιστο, είναι χρονοβόρο και επίπονο για τη συλλογή και την επεξεργασία δεδομένων. Επιπλέον, απαιτείται επίσης πολύς χρόνος και προσπάθεια για την προετοιμασία του δείγματος, η οποία συνήθως περιλαμβάνει κονιοποίηση, εκχύλιση και διήθηση των αναλύσεων HPLC. Επομένως, απαιτείται μια σαφής αρχή και ένα εύκολο στη χρήση εργαλείο για τη λήψη σχετικά μεγάλου όγκου δεδομένων. Ευτυχώς, η φασματοσκοπία εγγύς υπέρυθρη ακτινοβολία (NIRS) έχει χρησιμοποιηθεί εκτενώς για την αξιολόγηση γεωργικών προϊόντων, τροφίμων, ιατρικών δειγμάτων και φαρμακευτικών προϊόντων, επειδή είναι γρήγορη καθώς και μη καταστροφική. Επομένως, το NIRS θα μπορούσε να ανταποκρίνεται ακριβώς στις απαιτήσεις για αποτελεσματικές μετρήσεις των TCM και, όπως ήταν αναμενόμενο, το NIRS έχει εφαρμοστεί για ποιοτική αναγνώριση και ποσοτικοποίηση των ενώσεων σε TCM.

Σε αυτή τη μελέτη, τα περιεχόμενα έξι αποτελεσματικών συστατικών, συμπεριλαμβανομένωνεχινακοσίδη, βερμπασκοσίδη, μαννιτόλη, σακχαρόζη, γλυκόζη και φρουκτόζησε 116 παρτίδες δειγμάτων C. tubulosa που συλλέχθηκαν από την επαρχία Hotan στο Xinjiang το 2013–2015 προσδιορίστηκαν για πρώτη φορά με HPLC. Στη συνέχεια, τα μοντέλα βαθμονόμησης αυτών των έξι συνιστωσών καθιερώθηκαν με τη μέθοδο μερικής παλινδρόμησης ελαχίστων τετραγώνων (PLSR). Αυτά τα μοντέλα στη συνέχεια επικυρώθηκαν με τους συντελεστές συσχέτισης και τα σφάλματα πρόβλεψης στα σύνολα βαθμονόμησης. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι η αναπτυγμένη μέθοδος θα μπορούσε να χρησιμοποιηθεί ως αξιόπιστη μέθοδος για την ποσοτική ανάλυση του C. tubulosa.

2. Αποτελέσματα

2.1. Ανάλυση HPLC

Τα περιεχόμενα τουεχινακοσίδη και βερμπασκοσίδηπροσδιορίστηκαν με μια καλά καθορισμένη μέθοδο HPLC-UV στη βιβλιογραφία και τέσσερις υδατάνθρακες (μαννιτόλη, σακχαρόζη, γλυκόζη και φρουκτόζη) προσδιορίστηκαν με μια καλά καθορισμένη μέθοδο HPLC-ELSD στη βιβλιογραφία και για τα 116 δείγματα. Οι μέθοδοι προετοιμασίας και προσδιορισμού του δείγματος περιγράφηκαν στις Ενότητες 3.1 και 3.3. Το σχήμα 1 δείχνει τα χαρακτηριστικά χρωματογραφήματα των μικτών προτύπων. Μπορεί να φανεί ότι και τα έξι αποτελεσματικά συστατικά ήταν διαχωρισμένα με βάση τη γραμμή βάσης και επομένως μπορούσαν να ποσοτικοποιηθούν. Η μέθοδος HPLC επικυρώθηκε πριν από τη δοκιμή του δείγματος. Τα κύρια αποτελέσματα της μεθόδου HPLC παρατίθενται στον Πίνακα 1. Μια ευνοϊκή γραμμική σχέση (r=0.9998) και η ανάκτηση (98,5%) της μεθόδου προσδιορισμού της εχινακοσίδης φαίνονται στα αποτελέσματα, το ίδιο αποτέλεσμα με τις πέντε συστατικά. Επομένως, τα περιεχόμενα των έξι αποτελεσματικών συστατικών μπορούν να προσδιοριστούν με ακρίβεια. Όλες οι καθορισμένες περιοχές περιεχομένου συνοψίζονται στον Πίνακα 1.

2.2. Ανάλυση NIRS

Το σχήμα 2 δείχνει τα φάσματα NIR (4000–10,000 cm−1) των δειγμάτων C. tubulosa. Σημαντικές κορυφές απορρόφησης εμφανίστηκαν από 4000 cm−1 έως 7500 cm−1 σε όλα τα δείγματα, ενώ ήπιες διακυμάνσεις εμφανίστηκαν από 7500 cm−1 έως 10.000 cm−1. Η μετατόπιση της γραμμής βάσης των φασμάτων NIR συνέβη επειδή το δείγμα επηρεάστηκε εύκολα από παράγοντες όπως το μέγεθος και το χρώμα των σωματιδίων (Εικόνα 2Α). Χρησιμοποιήθηκαν μαθηματικές προεπεξεργασίες των φασμάτων για να μειώσουν την επίδραση των περιττών πληροφοριών σε κάποιο βαθμό. Οι μαθηματικές προεπεξεργασίες περιελάμβαναν την πρώτη παραγωγή (1η παραγωγή), τη δεύτερη παραγωγή (2η παραγωγή), την τυπική κανονική ποικιλία (SNV) και τη διόρθωση πολλαπλασιαστικής διασποράς (MSC). Το σχήμα 2Β δείχνει τη 2η παραγωγή των φασμάτων NIR του C. tubulosa και παρατηρούνται οι σημαντικές παραλλαγές που εμφανίστηκαν από τρεις περιοχές, 4000–4500 cm−1, 5000–5500 cm−1 και 7000–7500 cm−1.

2.3. Καθιέρωση Μοντέλων Ποσοτικής Βαθμονόμησης

Η μερική παλινδρόμηση ελαχίστων τετραγώνων (PLSR) είναι μια κλασική μέθοδος μοντελοποίησης και έχει εφαρμοστεί ευρέως σε ποσοτικά μοντέλα λόγω της υψηλής ποιότητας των αποτελεσμάτων. Τα πλεονεκτήματα του PLSR περιλαμβάνουν την καλή του ικανότητα πρόβλεψης και τη σχετική απλότητα. Το PLSR έχει επίσης εφαρμοστεί ευρέως στη δημιουργία μοντέλων ποσοτικής βαθμονόμησης TCM [25]. Με βάση τα προκατεργασμένα φάσματα NIR, δημιουργήθηκε ένα μοντέλο ποσοτικής ανάλυσης NIR για τα έξι αποτελεσματικά συστατικά στο C. tubulosa χρησιμοποιώντας τη μέθοδο PLSR με δεδομένα ανάλυσης HPLC ως πραγματικές τιμές. Τα 116 δείγματα χωρίστηκαν τυχαία σε σετ βαθμονόμησης και επικύρωσης με αναλογία 3:1. Οι καταλληλότερες συνθήκες για τη βαθμονόμηση επιλέχθηκαν με χαμηλό RMSEC και υψηλό συντελεστή συσχέτισης.

NATURAL CISTANCHE TUBULOSA ΓΙΑ ΒΕΛΤΙΩΣΗ ΤΗΣ ΣΕΞΟΥΑΛΙΚΗΣ ΛΕΙΤΟΥΡΓΙΑΣ PHGS75% ECH 30% ACT 12%

2.3.1. Επιλογή της ζώνης κυμάτων για τα μοντέλα βαθμονόμησης

Η επιλογή μιας κατάλληλης ζώνης κυμάτων ήταν ένα σημαντικό βήμα για τη δημιουργία μοντέλου βαθμονόμησης. Σε αυτήν τη μελέτη, συγκρίθηκαν τα φάσματα διαστήματος NIR 4000–7500 cm−1 (συνιστάται από το λογισμικό αναλυτών TQ) και 4000–10.000 cm−1. Παρατηρήθηκε ότι αυτό το εύρος είναι ακατάλληλο για τη βαθμονόμηση στο διάστημα μεταξύ 4000 cm−1 και 7500 cm−1 από τον Πίνακα 2. Ως εκ τούτου, στην τρέχουσα μελέτη, τα φασματικά διαστήματα για τα έξι χημικά συστατικά επιλέχθηκαν όλα από το διάστημα από 4000 έως 10.000 cm−1 συγκρίνοντας τις επιδόσεις του RMSEC και του συντελεστή συσχέτισης.

2.3.2. Επιλογή του βέλτιστου αριθμού παραγόντων για τα μοντέλα βαθμονόμησης

Το PLSR εξηγεί το μέγιστο ποσό μεταβλητότητας στα δεδομένα μειώνοντας τη διάσταση των δεδομένων φασμάτων με τον υπολογισμό των παραγόντων. Το πρόβλημα της «ανεπάρκειας» εμφανίστηκε λόγω ανεπαρκών πληροφοριών που προέκυψαν από περιορισμένο αριθμό παραγόντων. Ωστόσο, η επιλογή των παραγόντων μεγαλύτερων από τις βέλτιστες τιμές που εισάγονται στο μοντέλο θα επιφέρει το πρόβλημα της «υπερβολικής προσαρμογής». Είτε η "ακατάλληλη" είτε η "υπερβολική προσαρμογή" θα μειώσει την προγνωστική ισχύ των καθιερωμένων μοντέλων [22]. Το Σχήμα 3 δείχνει τη σχέση μεταξύ RMSECV και παραγόντων και για τις έξι ενώσεις. Επομένως, επιλέξαμε εκείνους τους παράγοντες που αντιστοιχούν στις χαμηλότερες τιμές του RMSECV. Η βέλτιστη επιλογή παραγόντων για τα μοντέλα βαθμονόμησης παρατίθεται στον Πίνακα 3.

2.3.3. Επιλογή Φασματικής Προεπεξεργασίας για τα Μοντέλα Βαθμονόμησης

Ένας άλλος κρίσιμος παράγοντας επιρροής για τα μοντέλα βαθμονόμησης είναι η φασματική προεπεξεργασία που στοχεύει στη μείωση της επίδρασης της σκέδασης και της μετατόπισης της γραμμής βάσης, στη βελτίωση των αναλογιών σήματος προς θόρυβο και στην εξάλειψη των ακανόνιστων διακυμάνσεων. Χρησιμοποιήθηκαν μέθοδοι πολλαπλασιαστικής διόρθωσης σκέδασης (MSC) και τυπικής κανονικής μεταβλητής (SNV) για την εξάλειψη της επίδρασης της σκέδασης ακτινοβολίας. Για την επίλυση των επιπτώσεων της μετατόπισης της γραμμής βάσης, συγκρίθηκαν τα φάσματα 1ου και 2ου παραγώγου και επιλέχθηκε η 2η παραγωγή. Για το επιθυμητό αποτέλεσμα, εξομαλύναμε τα φάσματα με τον αλγόριθμο φίλτρου Savitzky–Golay (SG) πριν από την παραγωγή για να αποτρέψουμε τη μεγέθυνση του θορύβου. Ο Πίνακας 3 δείχνει τις πληροφορίες για τη φασματική προεπεξεργασία και τα αποτελέσματά της για τα μοντέλα βαθμονόμησης.

2.4. Αξιολόγηση των Καθιερωμένων Μοντέλων

Ένα καλό μοντέλο βαθμονόμησης NIRS θα πρέπει να έχει χαμηλές τιμές RMSEC και RMSEP, καθώς και υψηλό συντελεστή συσχέτισης (r) και μικρές διαφορές μεταξύ RMSEC και RMSEP. Τα μοντέλα βαθμονόμησης των έξι επιλεγμένων ενώσεων καθιερώθηκαν σύμφωνα με τις διαδικασίες που αναφέρονται παραπάνω (Πίνακας 3). Οι τιμές RMSEC και r για το σύνολο βαθμονόμησης της εχινακοσίδης ήταν 27,6 και 0,9808, αντίστοιχα. Οι παράμετροι απόδοσης άλλων μοντέλων χημικών ενώσεων παρατίθενται στον Πίνακα 3, από τον οποίο μπορούμε να συμπεράνουμε ότι τα καθιερωμένα μοντέλα προκύπτουν ικανοποιητικά αποτελέσματα πρόβλεψης και μπορούν να χρησιμοποιηθούν για την ταχεία ποσοτική ανάλυση του C. tubulosa. Τα διαγράμματα διασποράς των έξι χημικών ενώσεων φαίνονται στο Σχήμα 4 για να κάνουν τα μοντέλα βαθμονόμησης πιο περιγραφικά και να παρατηρούνται οπτικά. Όπως φαίνεται στο Σχήμα 4, υπήρξαν μικρές διαφορές μεταξύ των προγνωστικών και των μετρούμενων τιμών, επειδή οι περισσότερες κουκκίδες κατανεμήθηκαν γύρω από την παλινδρομική καμπύλη με μια εξίσωση ως y=x. Επομένως, άριστες προγνωστικές επιδόσεις παρατηρήθηκαν στο Σχήμα 4.

3. Υλικά και Μέθοδοι

3.1. Η προετοιμασία των δειγμάτων

Εκατόν δεκαέξι δείγματα C. tubulosa συλλέχθηκαν από την επαρχία Hotan στην αυτόνομη περιοχή Xinjiang από το 2013 έως το 2015. Όλα τα δείγματα καλλιεργήθηκαν, αλλά συλλέχθηκαν σε διαφορετικά στάδια ανάπτυξης. Το φρέσκο ​​βάρος των δειγμάτων κυμαινόταν από 20 g έως 1000 g. Μετά την ξήρανση στον ήλιο, τα αποξηραμένα δείγματα συνθλίβονται και κοσκινίζονται μέσω κόσκινου 60-πλέγματος.

3.2. Συλλογή Φασματοσκοπικών Δεδομένων NIR

Τα φάσματα NIR των δειγμάτων συλλέχθηκαν σε διάστημα 8 cm−1 στη φασματική περιοχή 4000–10.000 cm−1 με σύστημα Antaris MXFT-NIR (Thermo Scientific, Madison, WI, ΗΠΑ) εξοπλισμένο με ένας φορητός προσαρμογέας ανάκλασης οπτικών ινών. Κάθε φάσμα ελήφθη με κατά μέσο όρο 64 σαρώσεις. Όλα τα δείγματα αφέθηκαν να εξισορροπηθούν σε θερμοκρασία δωματίου (25 ◦C) πριν από τη σάρωση των φασμάτων NIR για να διασφαλιστεί ότι τα δείγματα αναλύθηκαν στην ίδια θερμοκρασία. Η υγρασία στο εργαστήριο διατηρήθηκε σε επίπεδο περιβάλλοντος.

NATURAL CISTANCHE TUBULOSA ΓΙΑ ΒΕΛΤΙΩΣΗ ΤΗΣ ΝΕΦΡΙΚΗΣ ΛΕΙΤΟΥΡΓΙΑΣ PHGS75% ECH 30% ACT 12%

3.3. Συλλογή δεδομένων HPLC

3.3.1. Προετοιμασία εκχύλισης

Ένα γραμμάριο σκόνης C. tubulosa εκχυλίστηκε με 50 mL μεθανόλης 50% σε κωνική φιάλη με υπερήχους (500 W, 40 KHz) για 30 λεπτά. Το εκχύλισμα φυλάχθηκε στους 4 ◦C. Το υπερκείμενο του εκχυλίσματος διηθήθηκε για να ληφθεί δείγμα για ανάλυση HPLC.

3.3.2. Ταυτόχρονος Προσδιορισμός Εχινακοσίδης και Βερμπασκοσίδης με HPLC-UV

Η υγρή χρωματογραφική ανάλυση διεξήχθη σε σύστημα Shimadzu UHPLC (Shimadzu, Kyoto, Ιαπωνία) που αποτελείται από δύο μονάδες παροχής διαλύτη LC-20ADXR, μια αντλία LC-20AD, μια αυτόματη SIL-20ACXR δειγματολήπτης, ένας φούρνος στήλης CTO-20AC, ένας ανιχνευτής DAD SPD-M20A, ένας απαερωτήρας DGU-20A3R και ένας ελεγκτής CBM-20.

Μια στήλη Grace Prevail Carbohydrate ES (150 × 2,1 mm, 2,7 mm) που χρησιμοποιήθηκε για τους χρωματογραφικούς διαχωρισμούς διατηρήθηκε στους 35 ◦C. Η κινητή φάση αποτελούνταν από ακετονιτρίλιο (Α) και 0.1% υδατικό μυρμηκικό οξύ (Β) και χορηγήθηκε ακολουθώντας το πρόγραμμα βαθμίδωσης ως εξής: 0–7 λεπτά, γραμμική κλίση 10–20% ΕΝΑ; 7–15 λεπτά, 20% Α; και 15–20 λεπτά, γραμμική κλίση 20–10% Α. Ο ρυθμός ροής της κινητής φάσης ήταν 0,4 mL/min. Η παρακολούθηση UV πραγματοποιήθηκε στα 330 nm.

3.3.3. Ταυτόχρονος προσδιορισμός μαννιτόλης, σακχαρόζης, γλυκόζης και φρουκτόζης με HPLC-ELSD

Η HPLC πραγματοποιήθηκε σε σύστημα LC σειράς Agilent 1100 (Palo Alto, CA, USA) που αποτελείται από έναν απαερωτή G1322A, μια τεταρτοταγή αντλία G1311A, έναν αυτόματο δειγματολήπτη G1311A, έναν ελεγκτή θερμοκρασίας στήλης G1316A και έναν ανιχνευτή DAD G1315B.

Μια στήλη Sigma Prevail Carbohydrate ES (4,6 × 250 mm, 5 μm) χρησιμοποιήθηκε για χρωματογραφικούς διαχωρισμούς και διατηρήθηκε σε θερμοκρασία στήλης 25 ◦C. Η κινητή φάση αποτελούνταν από ακετονιτρίλιο και νερό (77:23, ν/ν) και ισοκρατικό σύμμαχο παρεχόταν με ρυθμό ροής 0,7 mL/min. Τα λύματα παρακολουθήθηκαν χρησιμοποιώντας ανιχνευτή σκέδασης φωτός εξάτμισης (ELSD) με προεπιλεγμένες παραμέτρους.

3.4. Επεξεργασία δεδομένων

Το TQ Analyst (έκδοση 8.0, Thermo Scientific, Madison, WI, USA) χρησιμοποιήθηκε για τη διαίρεση των συνόλων βαθμονόμησης και επικύρωσης, τη μαθηματική προεπεξεργασία των φασμάτων, τη δημιουργία των μοντέλων βαθμονόμησης και άλλους υπολογισμούς . Το Origin (έκδοση 9.1) χρησιμοποιήθηκε για τη δημιουργία των φιγούρων.

4. Συμπεράσματα

Σε αυτή τη μελέτη, προτείναμε μια γρήγορη και μη καταστροφική μέθοδο για την ταυτόχρονη ανάλυσηεχινακοσίδη, βερμπασκοσίδη, μαννιτόλη, σακχαρόζη, γλυκόζη και φρουκτόζησεC. tubulosaαπό το NIRS. Οι αναλύσεις των τιμών RMSEC, συντελεστή συσχέτισης, RMSEP και Rp έδειξαν ότι τα καθιερωμένα ποσοτικά μοντέλα NIR θα μπορούσαν να χρησιμοποιηθούν για την ακριβή πρόβλεψη των περιεχομένων των έξι επιλεγμένων αποτελεσματικών συστατικών στοC. tubulosa. Σε σύγκριση με την HPLC, η μέθοδος NIRS που αναφέρεται σε αυτή τη μελέτη μπορεί να εξοικονομήσει σημαντική εργασία και χρόνο, διατηρώντας παράλληλα ικανοποιητική ικανότητα ποσοτικής ανάλυσης. Επομένως, η μέθοδος που αναφέρεται εδώ έχει τη δυνατότητα να χρησιμοποιηθεί στον ποιοτικό έλεγχο τουC. tubulosaκαι έτσι να καθοδηγήσει την ανάπτυξη της καλλιέργειας και της τεχνολογίας επεξεργασίας γιαC. tubulosa.

NATURAL CISTANCHE TUBULOSA ΓΙΑ ΒΕΛΤΙΩΣΗ ΤΗΣ ΣΕΞΟΥΑΛΙΚΗΣ ΛΕΙΤΟΥΡΓΙΑΣ PHGS75% ECH 30% ACT 12%