Προετοιμασία και σταθερότητα του γαλακτώματος που έχει φορτωθεί με ρεσβερατρόλη σταθεροποιημένο από σύνθετα νανοσωματίδια από πρωτεΐνη καρυδιού/ cistanche deserticola deserticola polysaccharide
Dec 05, 2024
Περίληψη:
Σε αυτή τη μελέτη, πρωτεΐνη καρυδιού/Cistanche deserticola πολυσακχαρίτη(WP/CDPS) Τα σύνθετα νανοσωματίδια κατασκευάστηκαν και χρησιμοποιήθηκαν ως σταθεροποιητής για την προετοιμασία ενός γαλακτώματος Pickering. Τα νανοσωματίδια και το γαλάκτωμα Pickering αξιολογήθηκαν από την άποψη του μεγέθους των σωματιδίων, του δείκτη πολυδιασποράς και του δυναμικού Zeta. Εξετάστηκε η επίδραση της αναλογίας μάζας WP/CDPS στη διεπιφανειακή τάση, στη σταθερότητα αποθήκευσης, στη θερμική σταθερότητα, στην αποτελεσματικότητα της ενθυλάκωσης, στη μικροδομή και στη σταθερότητα της οξείδωσης του γαλακτώματος Pickering. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι με την αύξηση του ποσοστού των CDPs, το δυναμικό Zeta των νανοσωματιδίων WP/CDPS μειώθηκε σταδιακά από -22 σε -37 mV. Το γαλάκτωμα Pickering (C1W1R) με αναλογία μάζας WP προς CDPs 1: 1 είχε το μικρότερο μέσο μέγεθος σωματιδίων (5,927 μm), τη χαμηλότερη διεπιφανειακή τάση (11,88 mn/m), καλή σταθερότητα αποθήκευσης και θερμική σταθερότητα. Μετά από 480 ώρες αποθήκευσης, το ποσοστό του γαλακτωματοποιημένου στρώματος ήταν 95,6%. Το μέγεθος των σωματιδίων του C1W1R είχε τη μικρότερη αλλαγή με τη θερμοκρασία. Τα αποτελέσματα της ομοεστιακής μικροσκοπίας σάρωσης με λέιζερ (CLSM) έδειξαν ότι το σταθεροποιημένο με WP/CDPS γαλάκτωμα θα μπορούσε να ενσωματώσει αποτελεσματικά την ρεσβερατρόλη (RT) με αποτελεσματικότητα ενθυλάκωσης άνω του 85%, η οποία ήταν υψηλότερη από αυτή του γαλακτώματος με σταθεροποιημένο με WP και η αποδοτικότητα της εγκλεισμού έφτασε το 92,9% μετά από 35 ημέρες αποθήκευσης. Τα γαλακτώματα Pickering που σταθεροποιούνται από το WP/CDPs προσφέρουν έναν υποσχόμενο εναλλακτικό μεταφορέα για την παροχή ρεσβερατρόλης σε σταθερή κατάσταση στη βιομηχανία λειτουργικών τροφίμων και σε άλλες σχετικές βιομηχανίες.
Λέξεις -κλειδιά:Πρωτεΐνη καρυδιού;Cistanche deserticola πολυσακχαρίτη; ρεσβερατρόλη; Pickering γαλάκτωμα? σταθερότητα
Συμπληρώματα Cistanche Heral με υψηλή εχινακοσίδη και Acteoside
Η ρεσβερατρόλη (RT) είναι μια μη φυλλώδη φυσική πολυφαινόλη οργανική ένωση που εξάγεται από φυτά. Χρησιμοποιείται ευρέως για τις διάφορες φαρμακολογικές του δραστηριότητες, όπως οι αντιφλεγμονώδεις, αντιοξειδωτικές, αντι-όγκο, νευροπροστασία και βελτίωση της ισχαιμικής βλάβης. ευρέως διαδεδομένη ανησυχία [1-2]. Τα τελευταία χρόνια, η RT έχει χρησιμοποιηθεί ευρέως σε τρόφιμα, φαρμακευτικά, καλλυντικά και άλλες βιομηχανίες. Μεταξύ των διαφόρων λειτουργικών παραγόντων, η διαμεσολαβητική δομή του RT περιέχει λειτουργικές ομάδες όπως αρωματικούς δακτυλίους, φαινολικές υδροξυλικές ομάδες και διπλούς δεσμούς, οι οποίες έχουν υψηλότερη βιολογική δραστικότητα [3-4]. Ωστόσο, αναφέρεται ότι το φαινόμενο ισομερισμού και η κακή υδατοδιαλυτότητα της RT περιορίζουν την ανάπτυξη και χρήση της στην επεξεργασία τροφίμων, την παρασκευή φαρμάκου και την παρασκευή ενεργού μεμβράνης. Η ενθυλάκωση στα συστήματα παράδοσης, όπως τα νανοσωματίδια και τα γαλακτώματα, μπορεί να βελτιώσει σημαντικά τη σταθερότητα και τη διαλυτότητα του υδατοδιαλυτού και μπορεί να ελέγξει αποτελεσματικά την αργή και παρατεταμένη απελευθέρωση της RT σε ένα συγκεκριμένο περιβάλλον της γαστρεντερικής οδού, βελτιώνοντας έτσι τη βιοδιαθεσιμότητα του RT [5-6].
Η πρωτεΐνη των φυτών έχει καλή βιοσυμβατότητα και επιφανειακή δραστηριότητα και χρησιμοποιείται στον τομέα των τροφίμων [7]. Επί του παρόντος, όλο και περισσότερες μελέτες έχουν διαπιστώσει ότι τα νανοσωματίδια πρωτεϊνών με νερό είναι εξαιρετικά υλικά φορέα για την παρασκευή γαλακτώματος Pickering [8]. Η πρωτεΐνη καρυδιού (WP) μπορεί να γίνει σε νανοσωματίδια πρωτεΐνης καρυδιού (WPN) μέσω αυτοσυναρμολόγησης. Το WPN έχει καλή βιοσυμβατότητα και βιοαγωγία και είναι ένα ιδανικό υλικό φορέα [9]. Ωστόσο, λόγω της κακής υδατοδιαλυτότητας του WPN, τα γαλακτώματα Pickering σταθεροποιημένα με WPN είναι συχνά ασταθή. Τα σύνθετα νανοσωματίδια παρασκευάζονται μέσω συνδυασμού πρωτεΐνης-πολυσακχαρίτη για να ρυθμίσετε την υδατοδιαλυτότητα του WPN, όπως η stevia, η νανοκυτταρίνη, η χιτοζάνη, κλπ. Σε συνδυασμό με τη σύζευξη πρωτεϊνών έχει αποδειχθεί ότι είναι μια αποτελεσματική μέθοδος για τη βελτίωση των διεπιφανειακών ιδιοτήτων των γαλάσματος pickering [{{7}. Λαμβάνοντας υπόψη την υψηλή σταθερότητα και τα υψηλά χαρακτηριστικά ασφαλείας του γαλακτοπαραγωγού στερεού σωματιδίου με στερεά σωματίδια που παρασκευάζεται από φυτική πρωτεΐνη, μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την προστασία και την παροχή RT, διευρύνοντας το πεδίο εφαρμογής της RT στον τομέα των τροφίμων.
Ο πολυσακχαρίτης Cistanche Deserticola (CDPS) είναι το κύριο συστατικό της Cistanche Deserticola. Πρόκειται για ένα όξινο ετεροπολυσακχαρίτη που αποτελείται από γλυκόζη, γαλακτόζη, ριανόζη, αραβινόζη, φρουκτόζη και άλλους μονοσακχαρίτες. Έχει τις λειτουργίες της προστασίας των νεύρων και της βελτίωσης της εντερικής λειτουργίας. Flora Tract, ρυθμίζοντας την ασυλία
Έχει λειτουργίες όπως η πρόληψη των επιδημιών και η βελτίωση της μνήμης και μπορούν να χρησιμοποιηθούν ως πρώτες ύλες για προϊόντα υγείας ή φάρμακα [13]. ˆ
Ο συνδυασμός CDP και πρωτεογλυκάνης του δίνει μια ορισμένη σταθερότητα γαλακτωματοποίησης και μπορεί να χρησιμοποιηθεί στην επεξεργασία τροφίμων αντί για ορισμένους γαλακτωματοποιητές. Επομένως, εκμεταλλευόμενοι το ισχυρό αρνητικό φορτίο, την ενισχυμένη υδροφιλικότητα και την καλύτερη διασπορά των CDPs, μπορεί κανείς να προσπαθήσει να προετοιμάσει σύνθετα σωματίδια με την ανάμειξη με θετικά φορτισμένο WP για να σταθεροποιήσει τα γαλακτώματα ickering. Ωστόσο, λίγες μελέτες προσπάθησαν να προετοιμάσουν σύνθετα νανοσωματίδια WP/CDPS με διαφορετικές αναλογίες μάζας WP και CDPs για τη σταθεροποίηση των γαλακτωμάτων Pickering.
Με βάση αυτό, αυτή η μελέτη προετοίμασε σύνθετα νανοσωματίδια WP/CDPS αλλάζοντας την αναλογία μάζας των WP και CDPs και τα χρησιμοποίησε για να σταθεροποιήσει το RT. Μελετήστε τις φυσικές ιδιότητες των διαφορετικών σύνθετων νανοσωματιδίων WP/CDPS και μελετήστε τις επιδράσεις των διαφορετικών σύνθετων νανοσωματιδίων WP/CDPS για την απόδοση του γαλακτώματος Pickering, προκειμένου να δοθεί μια θεωρητική βάση για τη βελτίωση της απόδοσης γαλακτωματοποίησης και της σταθερότητας του γαλακτώματος των σωματιδίων WP/CDPS και για τη χρήση του WP/CDPs παρέχει αναφορά ως πυρηνικό υλικό για προστασία και παροχή RT.

Συμπληρώματα Cistanche Heral με υψηλή εχινακοσίδη και Acteoside
1 Υλικά και Μέθοδοι
1.1 Υλικά και αντιδραστήρια
WP σκόνη (καθαρότητα 90%) πεπτίδιο Love Biotechnology (XI'AN) Co., Ltd.; NaOH, HCI, άνυδρη αιθανόλη, RT (καθαρότητα 99%), χλωριούχο νάτριο (αναλυτικός βαθμός) Xinjiang Hongdao Instrument Co., Ltd.; RT Standard (HPLC μεγαλύτερο ή ίσο με 98%, μοριακό βάρος 228.24 DA) Chengdu Dester Biotechnology Co., Ltd.; CDPS (σκόνη μετά από 80-120 κόσκινο πλέγματος, καθαρότητα 98%, κύρια συστατικά: φαινυλαιθυλο γλυκοσίδες, εχινακοσίδη, verbascoside, eugenol glycoside, cistancheside Α, κλπ. Nile Red Dye Sigma-Aldrich (Shanghai) Trading Co., Ltd.; Fluorescein Isothiocyanate Ester (FITC) Πεκίνο Solebow Technology Co., Ltd.; Μη εστεροποιημένο κιτ λιπαρών οξέων Suzhou Keming Biotechnology Co., Ltd.; Μεθανόλη, Ν-εξάνιο, διχλωρομεθάνιο (χρωματογραφικός βαθμός) Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd.
1.2 όργανα και εξοπλισμό
Cientz -30 nd στεγνωτήριο κατάψυξης, JY 92- Iine Ultrasonic Cell θραυστήρας Ningbo Xinzhi Biotechnology Co., Ltd.; DF -101 S μαγνητικό αναδευτήρα Shanghai Lichen Bangxi Instrument Technology Co., Ltd.; PHS -3 CE Meter Meter Shanghai Yidian Scientific Instrument Co., Ltd.; WINNER2005E Αναλυτής μεγέθους σωματιδίων λέιζερ Jinan Micro-Nano Particle Instrument Co., Ltd.; JS94H Zeta Δυναμικό μετρητή Shanghai Zhongchen Digital Technology Equipment Co., Ltd.; AXRP Confocal Laser Scanning Microscopy (CLSM) Nikon Corporation, Ιαπωνία.

1.3 Μέθοδοι
1.3.1 Προετοιμασία του WPN
Το WPN παρασκευάστηκε με μέθοδο κατακρήμνισης κατά του διαλύτη [14]. 2 g WP διαλύθηκε σε 1 0 0 ml 0 5 mol/l διάλυμα NaCl και αναδεύτηκε σε 75 μοίρες και 300 r/min για 12 έως 24 ώρες μέχρι να διαλυθεί πλήρως. Στη συνέχεια, φυγοκεντρητή σε 3 000 r/min για 10 λεπτά για να απομακρυνθούν μεγάλα σωματίδια και άλλες αδιάλυτες ουσίες. Τέλος, η τιμή ρΗ του ληφθέντος υπερκείμενου ρυθμίστηκε σε 12,0 με διάλυμα 0,1 mol/L HCl ή NaOH και η διασπορά ήταν προ-παγωμένη σε ψυγείο σε -80 βαθμό για 12 ώρες και στη συνέχεια λυθεί με κενό σε -50 για 72 h για να ληφθεί WPN.
1.3.2 Παρασκευή σύνθετων νανοσωματιδίων WP/CDPS
1. Στη συνέχεια, η ανάρτηση WP προστέθηκε στην ανάρτηση CDPS σε διαφορετικές αναλογίες μάζας CDPs προς WP (4: 1, 3: 2, 1: 1, 2: 3 και 1: 4) και ελήφθη ένα μείγμα WP και CDPs ελήφθη υπό ανάδευση. Η περίσσεια νερού εξατμίστηκε με περιστροφική εξάτμιση υπό κενό (-0. 1 MPa) σε 40 μοίρες. Η διασπορά των νανοσωματιδίων ήταν προ-παγωμένη σε ένα ψυγείο σε βαθμό -80 για 12 ώρες και στη συνέχεια κατάψυξη κενού που ξηράνθηκε σε -50 βαθμό για 72 ώρες για να ληφθούν νανοσωματίδια WP/CDPS. Τα σύνθετα νανοσωματίδια WP/CDPS με αναλογία μάζας CDPS προς WP 4: 1, 3: 2, 1: 1, 2: 3 και 1: 4 ονομάστηκαν C4W1, C3W2, C1W1, C2W3 και C1W4, αντίστοιχα.
1.3.3 Μέγεθος σωματιδίων, δείκτης πολυδιασποράς (μέγεθος σωματιδίων, PDI) και προσδιορισμός δυναμικού zeta
Σύμφωνα με τη βιβλιογραφία [15] με ελαφρές τροποποιήσεις, το μέγεθος των σωματιδίων των σύνθετων νανοσωματιδίων WPN και WP/CDPS μετρήθηκε χρησιμοποιώντας μια μέθοδο αναλυτή μεγέθους σωματιδίων λέιζερ. Το PDI προσδιορίστηκε χρησιμοποιώντας ένα όργανο δυναμικής φωτεινής σκέδασης. Το δυναμικό Zeta του γαλακτώματος Pickering μετρήθηκε χρησιμοποιώντας έναν αναλυτή δυναμικού Zeta. Πριν από την ανάλυση, το δείγμα αραιώθηκε 100 φορές με εξαιρετικά νερό για να αποφευχθούν πολλαπλά αποτελέσματα σκέδασης.
1.3.4 Προετοιμασία των γαλακτωμάτων Pickering
Παρασκευάστηκαν 100 mL εναιωρήματα WPN και διαφορετικά σύνθετα νανοσωματίδια WP/CDPS (κλάσμα μάζας 1%). Το RT (κλάσμα όγκου 10%) αναμίχθηκε με κάθε εναιώρημα. Η υπερηχητική διαταραχή των κυττάρων πραγματοποιήθηκε στα 250 W για 4 λεπτά. Σύμφωνα με τα διάφορα σύνθετα νανοσωματίδια WP/CDPS, τα γαλακτώματα Pickering ονομάστηκαν C4W1R, C3W2R, C1W1R, C2W3R και C1W4R. Η ίδια μέθοδος χρησιμοποιήθηκε για την παρασκευή του γαλακτώματος Pickering σταθεροποιήθηκε από το WPN και ονομάστηκε WPR.
1.3.5 Προσδιορισμός της διεπιφανειακής τάσης των γαλακτώματος Pickering
Η διεπιφανειακή τάση των γαλακτωμάτων Pickering σταθεροποιήθηκε με σύνθετα νανοσωματίδια WP/CDPS προσδιορίστηκε σύμφωνα με τη μέθοδο αναφοράς [16] με ορισμένες τροποποιήσεις.
20 μΐ γαλακτώματος Pickering προστέθηκαν στη σύριγγα και μετρήθηκε η δυναμική διεπιφανειακή τάση σε 25 βαθμούς. Η διεπιφανειακή τάση κάθε δείγματος μετρήθηκε 3 φορές.

1.3.6 Προσδιορισμός του ποσοστού ενσωμάτωσης RT
Ο ρυθμός ενσωμάτωσης της RT προσδιορίστηκε με υπεριώδη φασματοφωτομετρία χρησιμοποιώντας τη μέθοδο των Mei Yuqi et αϊ. [17]. Το αραιωμένο γαλάκτωμα (κλάσμα όγκου 1%) φυγοκεντρήθηκε στα 9, 000 r/min για 10 λεπτά σε 25 μοίρες. Το υπερκείμενο συλλέχθηκε και η απορρόφηση μετρήθηκε στα 306 nm. Αφού η RT διαλύθηκε πλήρως, ήταν κατάλληλα αραιωμένη και το περιεχόμενο της RT υπολογίστηκε σύμφωνα με την τυπική καμπύλη της (y=0 124 2 x + 0. Ο ρυθμός ενσωμάτωσης υπολογίστηκε χρησιμοποιώντας τον τύπο (1):







