Οι πολυσακχαρίτες από το Cistanche μπορούν να καθυστερήσουν σημαντικά τη γήρανση της πνευμονικής λειτουργίας

Επικοινωνία: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com

Sun Yun Wang Dejun Liu Xiaomei Shi Le Zhang Hongquan

(Ινστιτούτο Ιατρικής, Πανεπιστήμιο Yangzhou, Yangzhou 225001)

Γηράσκωνείναι μια διαδικασία κατά την οποία ιστοί και όργανα του σώματος υφίστανται λειτουργικό και μορφολογικό εκφυλισμό και ακόμη και γήρανση κατά τη διάρκεια της ζωής. Ο πνεύμονας συνδέεται άμεσα με το εξωτερικό περιβάλλον και δέχεται την κυκλοφορία του αίματος από ολόκληρο το σώμα. Είναι πιο ευάλωτο σε διάφορους επιβλαβείς παράγοντες στο περιβάλλον και στον οργανισμό. Είναι ένα από τα πιο πρώιμα όργανα του σώματος όπου συμβαίνει η γήρανση. Ο ρόλος των ελεύθερων ριζών στη διαδικασία της γήρανσης έχει επιβεβαιωθεί από έρευνες πολλών μελετητών. Αυτό το πείραμα χρησιμοποιεί το όζον για να δημιουργήσει ένα πειραματικό μοντέλο γήρανσης προς παρατήρησηοι επιδράσεις των πολυσακχαριτών από το Cistanche στην ανοχή στην υποξία, στην αντιοξειδωτική λειτουργία και στην υπερδομή των πνευμόνων των ηλικιωμένων ποντικών. Επιρροή. Αναμένεται να τεθούν τα ερευνητικά θεμέλια γιαπολυσακχαρίτες από το Cistancheστην καθυστέρηση των πνευμονικών εκφυλιστικών αλλαγών και της υγειονομικής περίθαλψης του αναπνευστικού συστήματος των ηλικιωμένων.

Ο σκοπός αυτής της μελέτης είναι να παρατηρήσει τις εκφυλιστικές αλλαγές στην υπερδομή των κυττάρων του πνευμονικού ιστού σε πειραματικούς γερασμένους ποντικούς και την επίδραση τηςπολυσακχαρίτες από το Cistancheπάνω του. Χρησιμοποιώντας συνεχή εισπνοή όζοντος (Ozone, Ob) για 4 εβδομάδες για την πρόκληση της μεθόδου μοντέλου γήρανσης του πνεύμονα, χρησιμοποιώντας πολυσακχαρίτη από Cistanche 50 και 100 γραμμάρια για τη χορήγηση ποντικών μοντέλων για 6 εβδομάδες για ανίχνευση ανοχής υποξίας, πνεύμονα και υπεροξείδιο ορού σε γηρασμένα ποντίκια Δισμουτάση (SOD ) δραστηριότητα και περιεκτικότητα σε μηλονοδιαλδεΰδη (MDA). Οι αλλαγές των οργανιδίων του πνευμονικού ιστού και της υπερδομής παρατηρήθηκαν με ηλεκτρονικό μικροσκόπιο. Αποτελέσματα Τα πειραματικά γερασμένα ποντίκια που προκλήθηκαν από το όζον μείωσαν σημαντικά την ανοχή στην υποξία. το SOD του πνεύμονα και του ορού μειώθηκε και το MDA αυξήθηκε. Σε σύγκριση με την ομάδα μοντέλων, ο πολυσακχαρίτης από το Cistanche μπορεί να παρατείνει σημαντικά τον χρόνο ανοχής στην υποξία των ηλικιωμένων ποντικών (P<0.01), improve="" the="" activity="" of="" sod="" in="" the="" serum,="" reduce="" the="" content="" of="" mda=""><0.01), and="" delay="" the="" degeneration="" of="" mitochondria="" and="" lamellar="" bodies="" in="" the="" lung="" cells="" of="" aging="" mice=""><0.01). conclusion="">Οι πολυσακχαρίτες από το Cistanche μπορούν σημαντικάκαθυστέρηση του πειράματος Φυσιολογική εκφύλιση και μορφολογία κυττάρων των πνευμόνωνποντικών που γερνούν σεξουαλικά.

1 υλικό

1.1 Ζώα

3 καθαρά ποντίκια τύπου ICR, 18~22g, ¥^ κάθε μισό, παρέχονται από το Κέντρο Πειραματικών Ζώων του Πανεπιστημίου Yangzhou, αριθμός πιστοποιητικού: Su Dongzhi 98002^

1.2 Φάρμακα και αντιδραστήρια

Πολυσακχαρίτες από το Cistanche: Παρέχονται από το Nanjing Wild Plant Research Institute, παρασκευάζονται με απεσταγμένο νερό σε 2,5 g·LT, 5.0 gL-1; Τα κιτ δοκιμών SOD, MDA παρέχονται από το Nanjing Juli Biomedical Engineering Research Institute.

1.3 Όργανο

Φασματοφωτόμετρο υπεριώδους UV755B, προϊόν της Shanghai Analytical Instrument Factory. γεννήτρια όζοντος, προϊόν της Wuxi Medical Instrument Factory. Ηλεκτρονικό μικροσκόπιο μετάδοσης H-300, προϊόν της Hitachi, Ιαπωνία.

2 Μέθοδος

2 1 Προετοιμασία ενός πειραματικού μοντέλου γήρανσης του πνεύμονα με τραυματισμό οσμής Τα ποντίκια ICR ελήφθησαν από την ημέρα και τον πειραματικό σχεδιασμό και τα ποντίκια στην ομάδα μοντέλου και στην ομάδα θεραπείας ομαδοποιήθηκαν τυχαία.

Το πειραματικό μοντέλο γήρανσης δημιουργήθηκε για 4 εβδομάδες συνεχώς. Ταυτόχρονα, στην ομάδα ελέγχου (πάρτε τα κανονικά ποντίκια που αγοράστηκαν στην ίδια παρτίδα) και στην ομάδα μοντέλου δόθηκαν 20 ml-kg ^d'1 με φυσιολογικό ορό, Πολυσακχαρίτης από την ομάδα θεραπείας Cistanche Ι και Πολυσακχαρίτης II από Cistanche 50, Δόθηκαν 100 mg-kg-1-d-' με ενδογαστρική χορήγηση και η περίοδος χορήγησης ήταν 6 εβδομάδες. Μετά την τελευταία χορήγηση, πραγματοποιήθηκαν διάφορες δοκιμές δεικτών.

2.2 Μέθοδος δοκιμής ανοχής υποξίας (2)

Κάθε ομάδα ποντικών τοποθετήθηκε σε μια φιάλη λείανσης 250 ml που περιείχε 20 g ανθρακικού νατρίου. Η βαζελίνη σφραγίστηκε και ο χρόνος από την τοποθέτηση των ποντικών στο μπουκάλι μέχρι την ασφυξία και τον θάνατο καταγράφηκε υπό κανονική θερμοκρασία και πίεση.

2.3 Πνεύμονες και αίμα

Προσδιορισμός της περιεκτικότητας σε SOD^MDA για κάθε ομάδα ποντικών 1 ώρα μετά την τελευταία χορήγηση, αφαιρέστε τους οφθαλμικούς βολβούς και συλλέξτε αίμα για να διαχωριστεί ο ορός. στη συνέχεια τα ποντίκια θυσιάστηκαν, οι ιστοί του πνεύμονα αφαιρέθηκαν και προστέθηκε αλατούχο διάλυμα στον ομογενοποιητή γυαλιού για να παρασκευαστούν 100 g -f1 ομογενοποιητή πνευμονικού ιστού, η δραστηριότητα SOD του πνεύμονα και του ορού προσδιορίστηκε με τη μέθοδο οξειδάσης Huangsuyin και προσδιορίστηκε η περιεκτικότητα σε MDA με τη μέθοδο συμπύκνωσης θειοβαρβιτουρικού οξέος.

2.4 Μέθοδος προετοιμασίας δειγμάτων με ηλεκτρονική μικροσκοπία (3)

Το πείραμα χωρίζεται σε ομάδα ελέγχου, ομάδα μοντέλου και ομάδα υψηλής δόσης. Οι μέθοδοι μοντελοποίησης και χορήγησης είναι οι ίδιες όπως παραπάνω. Μετά την τελευταία χορήγηση, επιλέγονται τυχαία 3 ποντίκια από κάθε ομάδα και θανατώνονται με το λαιμό και παίρνονται οι δεξιές πλευρές αντίστοιχα. Πνευμονικός ιστός κορυφής, 0,4 mmol, L-1 γλουταραλδεΰδη και 0,04 mmol, διπλή στερέωση με L'1 OfeO4, αφυδάτωση βαθμίδωσης ακετόνης, ενσωμάτωση Epon 812, μόλυβδος-ουράνιο ηλεκτρονιακή χρώση, ηλεκτρονικό μικροσκόπιο μετάδοσης Hitachi H-300 με μεγέθυνση 10,{000 έως 20,{000 Παρατηρήστε τις αλλαγές και τις δομικές αλλαγές των κύριων οργανιδίων κάτω από πολλαπλάσια.

2.5 Τα αποτελέσματα της στατιστικής επεξεργασίας εκφράζονται σε δεκάδες εδάφη s, και η σύγκριση των δύο μέσων του δείγματος χρησιμοποιεί το t-test.

3 Αποτελέσματα

3.1 Η επίδραση του πολυσακχαρίτη από το Cistanche στην ανοχή στην υποξία σε ηλικιωμένους ποντικούς

Μία ώρα μετά την τελευταία χορήγηση ποντικών σε κάθε ομάδα, δοκιμάστηκε ο χρόνος ανοχής στην υποξία. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι ο χρόνος που τα γερασμένα ποντίκια μπορούσαν να ανεχθούν την υποξία ήταν σημαντικά μικρότερος από εκείνον των κανονικών ποντικών. Ο χρόνος είναι σημαντικά παρατεταμένος σε σύγκριση με την ομάδα μοντέλου, αλλά δεν υπάρχει σημαντική διαφορά σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου, υποδεικνύοντας ότι ο πολυσακχαρίτης από το Cistanche μπορεί να βελτιώσει σημαντικά την ανοχή στην υποξία των ηλικιωμένων ποντικών, βλέπε Πίνακα 1

3.2 Η επίδραση του πολυσακχαρίτη Cistanche στην αντιοξειδωτική λειτουργία των γηρασμένων ποντικών

Το αίμα (ορός) και ο πνευμονικός ιστός (ομογενοποίηση πνεύμονα) των ποντικών σε κάθε ομάδα συλλέχθηκαν μετά την τελευταία χορήγηση και προσδιορίστηκαν SOD και MDA. Αποτελέσματα Η δραστηριότητα SOD ορού και πνεύμονα των ηλικιωμένων ποντικών μειώθηκε και η περιεκτικότητα σε MDA αυξήθηκε. Σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου, η διαφορά ήταν σημαντική. Οι πολυσακχαρίτες από το Cistanche μπορούν να αυξήσουν τη δραστηριότητα του SOD του ορού και του πνεύμονα σε γηρασμένα ποντίκια και να μειώσουν την περιεκτικότητα σε MDA. Σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου, δεν υπάρχει σημαντική διαφορά και η διαφορά με την ομάδα μοντέλου γήρανσης είναι σημαντική, βλέπε Πίνακες 2 & 3.

3.3 Η επίδραση του Πολυσακχαρίτη από το Cistanche στο ενδοκυτταρικό σκοτάδι των κυψελιδικών επιθηλιακών κυττάρων⑷

Η μέθοδος κατασκευής του ηλεκτρονικού μικροσκοπίου είναι η ίδια όπως πριν. Μορφομετρική ανάλυση: Κάτω από το ηλεκτρονικό μικροσκόπιο, κάθε δείγμα παρατηρήθηκε σε 10 οπτικά πεδία για τη μέτρηση των οργανιδίων. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι τα μιτοχόνδρια και τα φυλλώδη σώματα της ομάδας μοντέλου μειώθηκαν, η βασική μεμβράνη ήταν παχύρρευστη και τα πολυσώματα αυξήθηκαν. Σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου, υπήρχαν σημαντικές διαφορές. Οι πολυσακχαρίτες από την ομάδα υψηλής δόσης Cistanche το βελτίωσαν. Σε σύγκριση με την ομάδα του μοντέλου, η διαφορά ήταν σημαντική και ήταν βασικά κοντά στην ομάδα ελέγχου. Δείτε την καρτέλα 4.

3.4 Αλλαγές στην υπερδομή των επιθηλιακών κυττάρων του πνεύμονα σε πειραματικά γηρασμένα ποντίκια και η επίδραση των πολυσακχαριτών Cistanche

Τα γερασμένα μοντέλα ποντικών μπορούν να φανούν κάτω από ένα ηλεκτρονικό μικροσκόπιο: τα κυψελιδικά επιθηλιακά κύτταρα τύπου Ι είναι ένα ενιαίο στρώμα πεπλατυσμένου τύπου με πάχος περίπου {{0}}.2 μ.μ. Ο πυρήνας είναι μικρός και πυκνός. Υπάρχουν λίγα μιτοχόνδρια, σύμπλεγμα Golgi και διάσπαρτο ενδοπλασματικό δίκτυο στο περιπυρηνικό κυτταρόπλασμα. Σχετικά αραιό, με λιγότερα μικρονήματα και μικροσωληνίσκους. Οι ιστολογικές αλλαγές στους πνεύμονες των ηλικιωμένων ποντικών παρατηρήθηκαν στο ηλεκτρονικό μικροσκόπιο. Οι κύριες αλλαγές ήταν κυψελιδικά επιθηλιακά κύτταρα τύπου ΙΙ. Οι μικρολάχνες στην ελεύθερη επιφάνεια των κυττάρων μειώθηκαν ή εξαφανίστηκαν, τα φυλλώδη σώματα ήταν αποδυναμωμένα, η δομή του φύλλου ήταν θολή και μερικά κύτταρα είχαν μικρά ελασματοειδή κύτταρα. Το σώμα εξαφανίζεται και είναι μια κούφια ή ομοιογενής άμορφη λωρίδα ουσία με χαμηλή πυκνότητα ηλεκτρονίων. Τα μιτοχόνδρια και το τραχύ ενδοπλασματικό δίκτυο μειώνονται στο κυτταρικό σώμα. Η βασική μεμβράνη των κυψελιδικών επιθηλιακών κυττάρων είναι εμφανώς παχύρρευστη και ο πολλαπλασιασμός των κυττάρων του διαφράγματος και των ινοβλαστών μπορεί να φανεί στο κυψελιδικό διάμεσο (Εικ. 1,2). Αν και η εσωτερική πυρηνική μεμβράνη και το μιτοχονδριακό οίδημα παρατηρήθηκαν στην ομάδα πολυσακχαρίτη Cistanche, ο βαθμός μειώθηκε σημαντικά σε σύγκριση με την ομάδα του μοντέλου (Εικ. 3.4). Η παρατήρηση κάτω από το ηλεκτρονικό μικροσκόπιο της ομάδας φαρμάκων έδειξε ότι τα επιθηλιακά κύτταρα του τύπου ήταν επίπεδα, με λεία επιφάνεια, χωρίς πυρήνα και μερικά είχαν πάχος περίπου 0,1. Υπήρχαν μερικά οργανίδια στον περιπυρήνα και ήταν ορατά σωματίδια ραδίου. Τα κύτταρα τύπου II έχουν κοντές λάχνες στην επιφάνεια, μεγάλο αριθμό μιτοχονδρίων, τραχύ ενδοπλασματικό δίκτυο και σύμπλεγμα Golgi στο κυτταρόπλασμα (Εικ. 5,6).

Το μοντέλο γήρανσης της βλάβης του όζοντος βασίζεται στη θεωρία της γήρανσης των ελεύθερων ριζών. Η βλάβη από ρίζες χωρίς οξυγόνο παίζει σημαντικό ρόλο στη διαδικασία της γήρανσης των πνευμόνων. Οι πνεύμονες είναι το μόνο όργανο που επικοινωνεί με το εξωτερικό περιβάλλον. Σε ένα ορισμένο χρονικό διάστημα, τα ζώα εισπνέονται συνεχώς με όζον. Οι πνεύμονες είναι οι πρώτοι που εκτίθενται στο όζον και είναι πιο ευάλωτοι σε βλάβες. Αφού το όζον εισέλθει στο σώμα, δημιουργεί γρήγορα ελεύθερες ρίζες ανιόντων υπεροξειδίου υψηλής ενεργότητας. Η περίσσεια ελεύθερων ριζών υπερβαίνει την ικανότητα σάρωσης του σώματος, καταστρέφει και καταναλώνει τα ένζυμα δέσμευσης ελεύθερων ριζών (όπως το SOD) στο σώμα και στη συνέχεια προκαλεί τη γήρανση των οργάνων και ακόμη και του σώματος. Σε αυτό το πείραμα, η αντιυποξική ικανότητα των γηρασμένων ποντικών που προκαλείται από το όζον μειώθηκε σημαντικά, η δραστηριότητα της αντιοξειδωτικής ουσίας SOD στον ορό και τον πνευμονικό ιστό μειώθηκε και ο μεταβολίτης υπεροξείδωσης των λιπιδίων MDA αυξήθηκε σημαντικά. Με τη χρήση συνεχούς έγχυσης Rongrong Duojing 50.100 mg-kg1 πειραματικών ηλικιωμένων ποντικών, τα ηλικιωμένα ποντίκια έχουν εμφανή ανοχή στην υποξία. Η περιεκτικότητα σε μεταβολίτες υπεροξείδωσης λιπιδίων μειώνεται, υποδεικνύοντας ότι οι πολυσακχαρίτες από το Cistanche μπορούν να ενισχύσουν την αντιοξειδωτική λειτουργία των γηρασμένων ποντικών.

Τα φυλλώδη σώματα στο κυτταρόπλασμα των κυψελιδικών επιθηλιακών κυττάρων τύπου n χρησιμοποιούνται συχνά για τη μέτρηση της λειτουργίας των επιθηλιακών κυττάρων. Οι εκκρίσεις των ελασματοειδών σωμάτων της πείνας ονομάζονται κυψελιδικά επιφανειοδραστικά, τα οποία υπάρχουν στη διεπιφάνεια αέρα-υγρού των κυψελίδων και μπορούν να μειώσουν την επιφανειακή τάση των κυψελίδων. Οι αλλαγές γήρανσης των ελασματοειδών σωμάτων μπορεί να οδηγήσουν στη μείωση των κυψελιδικών επιφανειοδραστικών ουσιών. Η επιφανειακή τάση των κυψελίδων είναι σχετικά υψηλή και η δύναμη συστολής των κυψελίδων αυξάνεται, με αποτέλεσμα τη συρρίκνωση των κυψελίδων. Παρατηρήσεις με ηλεκτρονικό μικροσκόπιο αποκάλυψαν ότι τα κυψελιδικά επιθηλιακά κύτταρα τύπου n των ηλικιωμένων ποντικών έχουν αλλάξει σημαντικά. Μπορεί να φανεί ότι τα φυλλώδη σωμάτια είναι αποδυναμωμένα, η δομή είναι θολή, τα μιτοχόνδρια διογκώνονται και μειώνονται, το τραχύ ενδοπλασματικό δίκτυο είναι επίσης μειωμένο και η βασική μεμβράνη είναι σημαντικά παχύρρευστη. Αν και παρόμοιες δομικές αλλαγές μπορούν να παρατηρηθούν μετά την εφαρμογή του Πολυσακχαρίτη από το Cistanche, ο βαθμός μειώνεται σημαντικά, υποδεικνύοντας ότι ο Πολυσακχαρίτης από το Cistanche μπορεί να βελτιώσει ή να καθυστερήσει σημαντικά τις μορφολογικές εκφυλιστικές αλλαγές στα φυλλώδη σώματα των επιθηλιακών κυττάρων του πνεύμονα και τον εκφυλισμό των μιτοχονδρίων σε γηρασμένα ποντίκια. Το μεγαλύτερο μέρος της κυτταρικής δομής είναι βασικά άθικτο, καθυστερώντας τις αλλαγές της υπερδομής του πνεύμονα. Τα αποτελέσματα αυτής της μελέτης υποδηλώνουν ότι οι πολυσακχαρίτες από το Cistanche μπορούν να μειώσουν τις δομικές και λειτουργικές αλλαγές που προκαλούνται από την οξειδωτική βλάβη των πνευμόνων που προκαλείται από το όζον, να καθυστερήσουν τη γήρανση των πνευμόνων και να παρέχουν πειραματικά στοιχεία για εφαρμοσμένη έρευνα.