Το πλούσιο σε πολυφαινόλες εκχύλισμα φύλλων Ocimum Gratissimum απέτρεψε τις τοξικές επιδράσεις της κυκλοφωσφαμίδης στη νεφρική λειτουργία των αρουραίων Wistar

Για περισσότερα επικοινωνήστε στο:oscar.xiao@wecistanche.com

Αφηρημένη

Ιστορικό:Η κυκλοφωσφαμίδη (CP) είναι μια από τις ισχυρές και χαμηλού κόστους χημειοθεραπείες που χρησιμοποιούνται σε κλινικά περιβάλλοντα ενάντια σε μια ποικιλία όγκων. Ωστόσο, η σχέση του με τη νεφροτοξικότητα περιορίζει τη θεραπευτική του χρήση. Το Ocimum gratis simum leaf είναι ένα φαρμακευτικό φυτό με πολυάριθμες φαρμακολογικές και θεραπευτικές δράσεις, όπως αντιοξειδωτικές, αντιφλεγμονώδεις και αντιαποπτωτικές ιδιότητες.

Μέθοδοι: Η παρούσα μελέτη σχεδιάστηκε για να αξιολογήσει την προστατευτική επίδραση του Ocimum gratissimum (OG) έναντι της νεφρικής δυσλειτουργίας που προκαλείται από CP σε αρουραίους. Οι αρουραίοι υποβλήθηκαν σε προ-αγωγή με 400 mg/kg σωματικού βάρους εκχυλίσματος φύλλων Ocimum gratissimum (Ocimum G.) για 4 ημέρες και στη συνέχεια 50 mg/kg σωματικού βάρους CP συγχορηγήθηκαν από την ημέρα 5 έως την ημέρα 7 μαζί με Ocimum G. Δείκτες νεφρικής λειτουργίας και το οξειδωτικό στρες, η πρόσληψη τροφής και νερού, οι ηλεκτρολύτες, η αλδοστερόνη, η διόγκωση λευκοκυττάρων, η φλεγμονή και η ιστοπαθολογική αλλοίωση αξιολογήθηκαν.

Αποτελέσματα:Εμφανής νεφρική φλεγμονή και νεφρικές βλάβες παρατηρήθηκαν σε ομάδες που έλαβαν CP. Ωστόσο, η χορήγηση εκχυλίσματος φύλλων Ocimum G. απέτρεψε το οξειδωτικό στρες, τους τραυματισμούς των νεφρών, την εξασθενημένη φλεγμονή, την αύξηση της παραγωγής αλδοστερόνης και τη μείωση της απώλειας ιόντων νατρίου και νερού σε αρουραίους. Η συγκέντρωση κρεατινίνης πλάσματος, ουρίας και λευκωματίνης ούρων ομαλοποιήθηκε μετά τη χορήγηση του εκχυλίσματος Ocimum G. σε αρουραίους που έλαβαν θεραπεία με CP. Το Ocimum G. μείωσε επίσης τις συγκεντρώσεις στο πλάσμα της ιντερλευκίνης-(IL)-6, της C-αντιδρώσας πρωτεΐνης και της δραστηριότητας της μυελοϋπεροξειδάσης και της μηλονοδιαλδεΰδης σε επίμυες που έλαβαν CP.

Συμπέρασμα: Το Ocimum G. απέτρεψε τη νεφρική βλάβη και ενίσχυσε τη νεφρική λειτουργία μέσω της αναστολής της φλεγμονής και της επαγόμενης από οξειδωτικά τοξικότητας CP. Η αποτελεσματικότητα του Ocimum G. σχετίζεται με την παρουσία διαφόρων φυτοχημικών στο φυτό.

Λέξεις-κλειδιά:Αντιοξειδωτικό, Κρεατινίνη, Κυκλοφωσφαμίδη, Ocimum gratissimum φύλλο, Νεφρά, Νάτριο.

Ιστορικό

Η κυκλοφωσφαμίδη (CP) είναι μια αντινεοπλασματική ένωση που σχετίζεται με τη μουστάρδα αζώτου. Χρησιμοποιείται στο κλινικό περιβάλλον για τη θεραπεία μιας μεγάλης ποικιλίας καρκινικών ασθενειών και σε ανοσοκατασταλτική θεραπεία μετά από μεταμοσχεύσεις οργάνων, θεραπεία αυτοάνοσων διαταραχών όπως η ρευματοειδής αρθρίτιδα, η κοκκιωμάτωση Wegener και το νεφρικό σύνδρομο στα παιδιά [1]. Ανεξάρτητα από το ευρύ φάσμα κλινικών χρήσεων του φαρμάκου, η CP είναι γνωστό ότι προκαλεί πολυάριθμους δοσοεξαρτώμενους τραυματισμούς οργάνων, οι οποίοι, ως εκ τούτου, περιορίζουν τη θεραπευτική της χρήση στο κλινικό περιβάλλον. Καθώς ήταν γνωστό ότι είναι ευεργετικό στη θεραπεία του νεφρωσικού συνδρόμου στα παιδιά [1], αντιστρόφως αναφέρθηκε σε ορισμένες προηγούμενες μελέτες ότι προκαλεί βλάβη της ουροδόχου κύστης [2, 3] και προκαλεί νεφρική τοξικότητα όταν χρησιμοποιείται ακατάλληλα λόγω της χρήσης CP υπερδοσολογία [4-6]. Ο ενεργός μεταβολίτης του CP, 4-Υδροξυκυκλοφωσφα-μίδιο, ταυτομερίζεται μερικώς σε αλδοφωσφαμίδη, η οποία με τη σειρά της διασπάται από τη φωσφατάση στην κυκλοφορία και στα ζωντανά κύτταρα και δημιουργεί δύο κυτταροτοξικούς μεταβολίτες, τη μουστάρδα φωσφοραμίδης και την ακρολεΐνη [6]. Η θεραπευτική δράση της μουστάρδας φωσφοραμίδης έχει αναφερθεί στο παρελθόν ότι είναι υπεύθυνη για αντικαρκινικά αποτελέσματα [6], ενώ η ακρολεΐνη είναι υπεύθυνη για κυτταροτοξικές επιδράσεις της CP, όπως η αιμορραγική κυστίτιδα κατά τη χορήγηση του φαρμάκου [2, 7]. Ο τοξικός μεταβολίτης του CP καταστρέφει τους ζωντανούς ιστούς μειώνοντας το ενδογενές αντιοξειδωτικό σύστημα των ιστών μέσω της δημιουργίας δραστικών ελεύθερων ριζών οξυγόνου που είναι μεταλλαξιογόνες στα ζωντανά κύτταρα. Η χορήγηση υψηλής δόσης CP έχει αναφερθεί ότι αυξάνει την υπεροξείδωση των λιπιδίων και προκαλεί μείωση των ενδογενών ενζυματικών και μη ενζυματικών αντιοξειδωτικών [7, 8]. Προηγούμενες μελέτες έχουν περιγράψει τις ευεργετικές χρήσεις των αντιοξειδωτικών ουσιών μαζί με τη χημειοθεραπεία για την πρόληψη των παρενεργειών του φαρμάκου στους ιστούς του σώματος [7, 9, 10]. Οι αντιοξειδωτικοί παράγοντες όπως το kolaviron αποδείχθηκαν αποτελεσματικοί στην πρόληψη της καρδιοτοξικότητας της CP σε αρουραίους [11]. Έτσι, ο συνδυασμός τωναντιοξειδωτικό παράγονταμαζί με φάρμακα χημειοθεραπείας μπορεί να είναι μια πιθανή θεραπευτική προσέγγιση για την πρόληψη ή τη διακοπή της κυτταροτοξικής ανάπτυξης της CP. Το Ocimum gratissimum (Ocimum G.) είναι μια οικογένεια Lamiaceae που ανήκουν σε ποώδη είδη φυτών. Είναι γνωστό ως γαρύφαλλο ή αφρικανικός βασιλικός σε πολλές χώρες με τροπικές περιοχές (Ασία, Ινδία, Βραζιλία και Δυτική Αφρική κ.λπ.). Βρίσκεται σε μεγάλο βαθμό στη Νιγηρία [12]. Πολλές πολιτείες αυτής της χώρας (Νιγηρία) χρησιμοποιούσαν το Ocimum G. ως σάλτσα και σούπα λαχανικών. Τα φύλλα και οι πτέρυγες του Ocimum G. έχουν βρεθεί ότι διαθέτουν πολυφαινόλες και άλλες βιοδραστικές ενώσεις [13, 14]. Τα φυτά Ocimum gratissimum χρησιμοποιούνται για τη θεραπεία διαφόρων ασθενειών όπως η διάρροια, η ελκώδης κολίτιδα, ο πυρετός και η καταρροή [14-17]. Το φυτό έχει πολλά φαρμακολογικά πλεονεκτήματα λόγω των αντιφλεγμονωδών, αντιοξειδωτικών, αντιβακτηριακών, αντιδιαβητικών και ανθελονοσιακών δυνατοτήτων του [14, 18-20]. Η αντιμικροβιακή δράση του εκχυλίσματος Ocimum G. έχει δοκιμαστεί in vitro έναντι διαφόρων ανθρώπινων παθογόνων όπως Klebsiella pneumonia, Staphylococcus aureus, Escherichia, Vibro spp, Enterobacter spp, Enterococcus faecalis κ.λπ. Η αντιμυκητιακή δράση του αιθέριου ελαίου του Ocimum Τα εκχυλίσματα έχουν σημειωθεί in vitro [19, 21, 22] και το Ocimum G. έχει χρησιμοποιηθεί ως κουνουπιών [23]. Μια πρόσφατη μελέτη σε ζώα πρότεινε τη σημασία της προστατευτικής δράσης των εκχυλισμάτων Ocimum G. στην πρόληψη των ανωμαλιών της αρτηριακής πίεσης έναντι της τοξικότητας από χλωριούχο κοβάλτιο [24] καθώς και στην άμβλυνση των καρδιακών ανωμαλιών που σχετίζονται με την ηπατική ίνωση με τη μείωση της ιντερλευκίνης-6 μονοπάτι σηματοδότησης [25] ή με πρόκληση αντιοξειδωτικών επιδράσεων [26]. Το υδατικό εκχύλισμα φύλλων των φύλλων Ocimum G. έδειξε αντιοξειδωτικά αποτελέσματα κατά της καρδιονεφρικής βλάβης που προκαλείται από το χλωριούχο κοβάλτιο [24] και απέτρεψε τα γαστρικά έλκη μειώνοντας την έκκριση γαστρικού οξέος και το έλκος [27]. Επίσης, το ουρσολικό οξύ από εκχυλίσματα Ocimum G. έδειξε αντιδρρεπανική δράση [28] και αντικαρκινική [29, 30]. Επιπλέον, τα αιθέρια έλαια του Ocimum G. έχουν αποδειχθεί ότι παρουσιάζουν εξαρτώμενες από το ενδοθήλιο, αγγειοχαλαρωτικές ιδιότητες σε αρουραίους [31]. Μελέτες in vivo και in vitro έχουν αξιολογήσει την ευγενόλη, ένα φαρμακευτικό συστατικό του Ocimum G., να μειώνει τα επίπεδα γλυκόζης στο αίμα μέσω της αναστολής της άλφα-γλυκοσιδάσης [32]. Επιπλέον, μια κλινική μελέτη κατέδειξε τη φαρμακολογική επάρκεια του Ocimum G. να παρουσιάζει παρόμοια δράση με τη χλωρεξιδίνη κατά της πλάκας και της ουλίτιδας [33]. Με όλα αυτά τα χαρακτηριστικά του Ocimum G., υποθέσαμε ότι το Ocimum G. μπορεί να είναι ένα πιθανό θεραπευτικό μέσο όταν χρησιμοποιείται μαζί με CP για την πρόληψη ή τη διακοπή των ανεπιθύμητων ενεργειών της CP. Επομένως, αυτή η μελέτη σχεδιάστηκε για να εξετάσει τα ευεργετικά αποτελέσματα ενός πλούσιου σε πολυφαινόλες εκχυλίσματος φύλλων Ocimum gratissimum στη νεφροτοξικότητα που προκαλείται από CP σε αρσενικούς αρουραίους Wistar.

Κάντε κλικ εδώ για να μάθετε περισσότερα

Υλικά και μέθοδοι

Η ένεση κυκλοφωσφαμίδης (200 mg/10 mL) ελήφθη από το Celon Laboratory (Hyderabad, Ινδία). Η ένεση υδροχλωρικής κεταμίνης (50 mg/10 mL) αγοράστηκε από την Popular Pharmaceuticals Ltd., (Gazipur, Bangladesh). Τα κιτ ανάλυσης για βιοχημικές παραμέτρους ελήφθησαν από την Randox Laboratories Limited, (Crumlin, UK), κ.λπ. Αγοράστηκαν 1-διφαινυλ-2-πικρυυλυδραζυλ (DPPH), μεθανόλη, ανθρακικό νάτριο, Trolox και αντιδραστήριο Folin-Ciocâlteu από τη Merck & Co., Kenilworth, NJ, Η.Π.Α. Τα όργανα που χρησιμοποιούνται περιλαμβάνουν το αέριο χρωματογραφία-φασματόμετρο μάζας (GCMS-QP2010 SE, Shimadzu Corporation, Kyoto, Japan) και το φασματοφωτόμετρο υπεριώδους ορατού (Beckman, DU 7400, ΗΠΑ), συσκευή Soxhlet, περιστροφικός εξατμιστής, μικροσκόπιο Olympus (Olympus , Τόκιο, Ιαπωνία); κάμερα (Leica DM 750).

Παρασκευή πολυφαινολικού εκχυλίσματος Ocimum gratissimumleaves

Τα φύλλα Ocimum gratissimum συλλέχθηκαν από έναν κήπο στο Usi, στην πολιτεία Ekiti, στη Νιγηρία. Λήφθηκαν σχετικές θεσμικές άδειες για τη συλλογή Ocimum gratissimum. Η παρούσα μελέτη συμμορφώνεται με τις διεθνείς, εθνικές ή/και θεσμικές οδηγίες για τη χρήση διαφορετικών τμημάτων του φυτού. Τα δείγματα του φυτού επικυρώθηκαν από τον κ. Omole, τον επιμελητή στο ερμπάριο του Τμήματος Βοτανικής του Πανεπιστημίου Obafemi Awolowo, Ile-Ife, όπου ένα δείγμα κουπονιού (1945) κατατέθηκε στο Herbarium του Πανεπιστημίου. Το πλούσιο σε πολυφαινόλες εκχύλισμα ελήφθη από τα φύλλα Ocimum G. (900g) σύμφωνα με τις προηγούμενες μεθόδους εκχύλισης του φυτού [14]. Χρησιμοποιήθηκε μεθανόλη για να ληφθεί το τελικό προϊόν εκχύλισης, πλούσιο σε πολυφαινόλες εκχύλισμα φύλλων Ocimum gratissimum (PREOG) υπό μειωμένη πίεση στους 40 βαθμούς χρησιμοποιώντας περιστροφικό εξατμιστή. Το προκύπτον συμπύκνωμα εκχυλίσματος λυοφιλοποιήθηκε με τη βοήθεια ενός λυοφιλοποιητή. Το υπόλειμμα (8{{0}},85 g) διατηρήθηκε σε τρυβλία Petri με σφιχτό κάλυμμα και αποθηκεύτηκε στους -2{0 βαθμούς μέχρι να χρειαστεί για τη μελέτη. Το εκχύλισμα OG που ελήφθη διαλύθηκε σε νερό (0,2 mL/χορήγηση) και δόθηκε σε αρουραίους σύμφωνα με τη σχεδιασμένη δόση. Ανάλυση αέριας χρωματογραφίας-φασματομετρίας μάζας (GC-MS) εκχυλισμάτων OG Η χημική σύνθεση του εκχυλίσματος που ελήφθη ελέγχθηκε χρησιμοποιώντας αέρια χρωματογραφία-φασματομετρία μάζας (GC-MS). Ο Chavez et al. Η μέθοδος [34] υιοθετήθηκε με ελαφρά τροποποίηση. Για τον προσδιορισμό των ενώσεων χρησιμοποιήθηκε μια τριχοειδής στήλη συντηγμένου πυριτίου (πάχος φιλμ 30×0,25 HP-5Ms, 0,25μm) που περιείχε ήλιο ως το φέρον αέριο (1/mL ρυθμός ροής). Η θερμοκρασία φούρνου στους 40 βαθμούς ρυθμίστηκε και διατηρήθηκε για 5 λεπτά, και στη συνέχεια αυξήθηκε σταδιακά κατά 3 βαθμούς/λεπτό στους 270 βαθμούς. Το 60:1 ορίστηκε ως αναλογία διαχωρισμού. Ορίστηκε μια θερμοκρασία 180 μοιρών για τα μέρη σύνδεσης και τις πηγές ιόντων και μια θερμοκρασία διεπαφής 240 μοιρών ορίστηκε για το φασματόμετρο μάζας. Για την ποσότητα ενέργειας ιονισμού χρησιμοποιήθηκαν 70 eV, ενώ η λειτουργία κρούσης ηλεκτρονίων (EI) επιλέχθηκε για να παραχθούν σταθερά και αναπαραγώγιμα φάσματα μάζας και χρησιμοποιήθηκε εύρος τιμών 50–650 m/z για τη λειτουργία των δειγμάτων. Ο χρόνος καθυστέρησης MS πριν από τη σάρωση ήταν 5 λεπτά. Οι ενώσεις που ελήφθησαν παρουσιάστηκαν στον Πίνακα 2. Προσδιορισμός της ολικής περιεκτικότητας σε φαινόλη Η συνολική περιεκτικότητα σε φαινολικό περιεχόμενο (TPC) των εκχυλισμάτων αξιολογήθηκε χρησιμοποιώντας την τεχνική Folin-Ciocâlteu όπως περιγράφεται από τους Gulcin et al. [35], με μερικές τροποποιήσεις. Εν συντομία, 100μL (0,5mg/mL) από τα πλούσια σε πολυφαινόλες εκχυλίσματα Ocimum G. τοποθετήθηκαν σε ξεχωριστούς απλούς σωλήνες. Περίπου 500 μL (1 τοις εκατό v/v) αντιδραστηρίου φαινόλης Folin–Ciocâlteu προστέθηκαν σε κάθε σωληνάριο που περιείχε το εκχύλισμα Ocimum G. και τα σωληνάρια αφέθηκαν να παραμείνουν για 5 λεπτά. και μετά στροβιλίστηκε. Αφού αφέθηκε ηρεμία για 5 λεπτά, περίπου 400 μL (20 τοις εκατό w/w) ανθρακικού νατρίου προστέθηκαν στα δείγματα, τα οποία στη συνέχεια επωάστηκαν στο σκοτάδι σε θερμοκρασία δωματίου για 90 λεπτά. Για την ανάπτυξη του χρώματος. Η απορρόφηση κάθε μίγματος αξιολογήθηκε με φασματοφωτόμετρο υπεριώδους-ορατού (Beckman, DU 7400, USA) στα 765 nm. Ως τυφλό χρησιμοποιήθηκε διάλυμα ανθρακικού νατρίου χωρίς προσθήκη αντιδραστηρίου φαινόλης Folin–Ciocâlteu. Για την καμπύλη βαθμονόμησης χρησιμοποιήθηκαν πρότυπα γαλλικού οξέος. Τα TPC των δειγμάτων προσδιορίστηκαν από τη γραμμική παλινδρόμηση των προτύπων του γαλλικού οξέος. Τα αποτελέσματα αντιπροσωπεύτηκαν ως το ισοδύναμο γαλλικού οξέος (GAE) ανά γραμμάριο ξηρού βάρους εκχυλίσματος Ocimum gratissimum (mg GAE/g). Η διαδικασία διεξήχθη εις τριπλούν (n=3). Δοκιμασία δέσμευσης ελεύθερων ριζών DPPH Προσδιορίστηκε η δράση δέσμευσης ελεύθερων ριζών του εκχυλίσματος σύμφωνα με τη μέθοδο που περιγράφεται από τους RakMai et al. [36], με μικρές τροποποιήσεις. Προστέθηκαν περίπου 2 mL διαλύματος DPPH– μεθανόλης (180 μmol/L) και αναμίχθηκαν με το εκχύλισμα στα 0,1 mg/mL. Τα κλάσματα επωάστηκαν στο σκοτάδι στους 25 βαθμούς. Η απορρόφηση του δείγματος προσδιορίστηκε χρησιμοποιώντας ένα φασματοφωτόμετρο στα 517 nm σε διαφορετικά χρονικά διαστήματα μεταξύ 0 και 60 λεπτών. Κλάσματα των εκχυλισμάτων χωρίς την προσθήκη διαλύματος DPPH– μεθανόλης χρησιμοποιήθηκαν ως τυφλά. Trolox, ένα συνθετικό ανάλογο τουβιταμίνηΕ, χρησιμοποιήθηκε ως θετικός έλεγχος. Η παρακάτω εξίσωση χρησιμοποιήθηκε για την αξιολόγηση των ιδιοτήτων καθαρισμού των εκχυλισμάτων. Η διαδικασία πραγματοποιήθηκε εις τριπλούν (n=3). Όπου ένα δείγμα είναι ένα εκχύλισμα συν DPPH, το Ablank είναι μόνο το εκχύλισμα, ένας έλεγχος είναι η απορρόφηση του διαλύματος ελέγχου (που περιέχει μόνο DPPH). Φροντίδα ζώων Είκοσι οκτώ (28) αρσενικοί αρουραίοι Wistar βάρους 120-180 g χρησιμοποιήθηκαν για τη μελέτη. Το προϊόν προμηθεύτηκε από το Animal Holding του College of Health Sciences, Obafemi Awolowo University, Ile-Ife. Όλοι οι αρουραίοι κρατήθηκαν σε συμβατικά κλουβιά για 1 εβδομάδα για να εγκλιματιστούν στις περιβαλλοντικές συνθήκες σε 28-32 βαθμό και τους επετράπη να έχουν ελεύθερη πρόσβαση σε δίαιτα και καθαρό πόσιμο νερό. Το πείραμα εγκρίθηκε από την Επιτροπή Δεοντολογίας της Έρευνας Υγείας (HREC) του Πανεπιστημίου Obafemi Awolowo και η μελέτη έχει περιγραφεί σύμφωνα με τις οδηγίες ARRIVE (ζώα στην έρευνα: αναφορά πειράματος in vivo) [37].

Cistanche για κατά της κούρασης

Ιστοπαθολογικές μελέτες

Οι ιστοί κόπηκαν σε τμήματα πάχους {{0}}μm με μικροτόμο, στερεώθηκαν στις πλάκες και χρωματίστηκαν με PAS. Παρατηρήθηκαν οι διαφάνειες κάτω από μικροσκόπιο φωτός (Olym pus CH; Olympus, Tokyo, Japan) και λήφθηκαν μικροφωτογραφίες με κάμερα Leica DM 750 σε ειδοποιήσεις ×400 mag. Η τομή των νεφρικών ιστών αξιολογήθηκε από πιστοποιημένο παθολόγο που τυφλώθηκε ως προς το πειραματικό πρωτόκολλο. Η σπειραματική βλάβη βαθμολογήθηκε μεταξύ των βαθμών 0 και 4 με την αξιολόγηση του μεσαγγειακού πολλαπλασιασμού, του πάχους της βασικής μεμβράνης και των ινοειδών αλλαγών. Η σωληναριακή βλάβη βαθμολογήθηκε μεταξύ των βαθμών 0 και 4 με την αξιολόγηση του εκφυλισμού κενοτοπίων, της απολέπισης, του εκφυλισμού των σωληναρίων, της εγγύς σωληναριακής νέκρωσης και του σχηματισμού γύψου. Οι σωληναρισιακές φλεγμονώδεις διηθήσεις βαθμολογήθηκαν μεταξύ των βαθμών 0 και 2 με την αξιολόγηση της ποικιλομορφίας των φλεγμονωδών κυττάρων στο μέσο και της παρουσίας διηθημάτων εντός του επιθηλίου των σωληναρίων (Πίνακας 1) [44]. Μια συνολική βαθμολογία νεφρικής βλάβης 0–2 αντιπροσώπευε καμία/ήπια νεφροτοξικότητα, 3–6 μέτρια νεφροτοξικότητα και 7–10 σοβαρή νεφροτοξικότητα [44].

Αποτελέσματα

Ανάλυση αέριας χρωματογραφίας-φασματομετρίας μάζας, περιεχόμενα φαινολών και ικανότητα σάρωσης DPPH του εκχυλίσματος φύλλων Ocimum gratissimum Η ανάλυση GC-MS αποκάλυψε ορισμένες βιοδραστικές ενώσεις του εκχυλίσματος φύλλων Ocimum gratissimum (Πίνακας 2). Τα πολυφαινολικά περιεχόμενα του εκχυλίσματος αναγνωρίστηκαν με τη χρήση της μεθόδου Folin–Ciocâlteu (Πίνακας 2). Τα Ολικά περιεχόμενα φαινολικών (TPC) (80.36±0.50 mg GAE/100 g) που ελήφθησαν στο εκχύλισμα Ocimum G. αποκάλυψαν ότι το εκχύλισμα Ocimum gratissimum είναι πλούσιο σε φαινολικά περιεχόμενα. Η ικανότητα σάρωσης DPPH του εκχυλίσματος αξιολογήθηκε επίσης με τον υπολογισμό της τιμής IC50, η οποία σχετίζεται με την ποσότητα του εκχυλίσματος που είναι ικανό να δεσμεύσει το 50 τοις εκατό των ελεύθερων ριζών που περιέχονται στο μίγμα της αντίδρασης. Η τιμή IC50 (22,12±0,43 mg/ml) του εκχυλίσματος ήταν υψηλή και αυτό υποδήλωνε την υψηλήαντιοξειδωτικόδραστηριότητα των φύλλων Ocimum gratissimum. Έτσι, η λειτουργία της υψηλής περιεκτικότητας του φυτού σε φαινολικά φαινόταν στην ικανότητά του να καθαρίζει τη δραστηριότητα των ελεύθερων ριζών (Πίνακας 2).

Επίδραση του PREOG και της κυκλοφωσφαμίδης στην κάθαρση κρεατινίνης

Σημαντική μείωση στη νεφρική κάθαρση κρεατινίνης παρατηρήθηκε στην ομάδα CP μόνο σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου (p<0.05). however,="" the="" preog-treated="" groups="" revealed="" a="" significant="" increase="" in="" the="" creatinine="" clearance="" when="" compared="" with="" cp="" alone="" treated="" group=""><0.05)>

Συζήτηση

Στην παρούσα μελέτη, υπάρχουν ενδείξεις αυξημένων επιπέδων στις παραμέτρους του οξειδωτικού στρες, όπως η υπεροξείδωση των λιπιδίων, το υπεροξείδιο του υδρογόνου (H2O2) και το μονοξείδιο του αζώτου (NO), υποδηλώνοντας ότι τα λιπίδια της μεμβράνης και η πρωτεΐνη του νεφρού των αρουραίων που έλαβαν θεραπεία με Μόνο το CP υπέστη ζημιά. Επίσης, οι δραστηριότητες αντιοξειδωτικών ενζύμων όπως η υπεροξειδική δισμουτάση και η καταλάση και το επίπεδο μη ενζυματικού αντιοξειδωτικού, μειωμένης γλουταθειόνης μειώθηκαν στην ομάδα που έλαβε θεραπεία μόνο με CP. Η μείωση των αντιοξειδωτικών στα νεφρικά κύτταρα των αρουραίων που έλαβαν θεραπεία μόνο με CP ήταν ένδειξη ανισορροπίας οξειδοαναγωγής-ομοιόστασης. Η CP έχει αποδειχθεί προηγουμένως ότι προκαλεί οξειδωτική βλάβη, φλεγμονή και κυτταρική νέκρωση ή απόπτωση μετά την ενεργοποίηση και προώθηση των αντιδρώντων ειδών οξυγόνου (ROS) μέσω του μεταβολίτη της, ακρολεΐνης [7, 11, 14], η οποία στη συνέχεια ενεργοποιεί την απενεργοποίηση και τη μείωση τουαντιοξειδωτική άμυναικανότητες των προσβεβλημένων οργανισμών [10, 11, 45]. Σε αυτή τη μελέτη, η υπερπαραγωγή ROS υπερτερεί της ενδογενούςαντιοξειδωτική ικανότητα, πυροδοτεί το οξειδωτικό στρες και στη συνέχεια βλάπτει τα νεφρικά κύτταρα των αρουραίων που έλαβαν θεραπεία με CP, όπως επηρεάστηκε από τα αυξημένα επίπεδα δεικτών οξειδωτικού στρες και τα μειωμένα επίπεδααντιοξειδωτικές παραμέτρους. Επίσης, η ιστολογική άποψη αυτών των αρουραίων έδειξε σπειραματική βλάβη και σωληναριακή νέκρωση των νεφρικών κυττάρων. Επιπλέον, η ανισορροπία οξειδοαναγωγής προκαλεί υπερπαραγωγή προφλεγμονωδών κυτοκινών [3, 14]. Παρατηρήθηκε ότι η υπερπαραγωγή ROS πυροδότησε υπεροξείδωση λιπιδίων και κινητοποίηση προφλεγμονωδών κυτοκινών και ταυτόχρονα άσκησε φλεγμονώδη βλάβη των νεφρικών κυττάρων. Η αξιολόγηση της IL-6 σε αυτή τη μελέτη ήταν σημαντικά αυξημένη σε αρουραίους που έλαβαν θεραπεία με CP, γεγονός που υποδεικνύει προσβολή οξειδωτικού στρες και φλεγμονή των νεφρικών κυττάρων. Η αύξηση της IL-6 έχει βρεθεί ότι πυροδοτεί και/ή διεγείρει το ήπαρ για να ξεκινήσει απόκριση οξείας φάσης που οδηγεί σε αύξηση της παραγωγής C-αντιδρώσας πρωτεΐνης (CRP) και άλλων βιοδραστικών μεσολαβητών [46]. Η CRP αυξήθηκε σημαντικά σε αρουραίους που έλαβαν CP και το αυξημένο επίπεδο αυτού του βιοδείκτη ήταν ένδειξη πρώιμου αμυντικού συστήματος έναντι λοιμώξεων, πληροφοριών και βλάβης ιστού [47, 48]. Η αύξηση του επιπέδου της CRP σε αυτή τη μελέτη επιβεβαίωσε περαιτέρω ότι υπέστησαν φλεγμονή στους αρουραίους που έλαβαν θεραπεία μόνο με CP. Έχει παρατηρηθεί ότι η CP προκαλεί τη μείωση των ενδογενών αντιοξειδωτικών του νεφρού, όπως η υπερχρησιμοποίηση της GSH από τους νεφρούς λόγω της συσσώρευσης προϊόντων μεταβολίτη κυκλοφωσφαμίδης στα νεφρικά σωληναριακά κύτταρα [9]. Ως αποτέλεσμα αυτής της διαδικασίας, ο νεφρός των αρουραίων που έλαβαν θεραπεία μόνο με CP θα μπορούσε να αυξήσει την ανοσολογική απόκριση έναντι των κυττάρων του, η οποία στη συνέχεια οδήγησε σε φλεγμονή, όπως φαίνεται από την αύξηση της CRP στο πλάσμα. Συμφωνώντας, η CP έχει τη δυνατότητα να προκαλέσει φλεγμονή και πιθανή ανοσολογική βλάβη στους νεφρούς των αρουραίων που έλαβαν CP.

συμπέρασμα

Συμπερασματικά, τα αποτελέσματα από τα παρόντα ευρήματα έδειξαν ότι το πλούσιο σε πολυφαινόλες εκχύλισμα Ocimum gratissimum απέτρεψε τις ανεπιθύμητες παρενέργειες της CP στη νεφρική λειτουργία μέσω της μείωσης του οξειδωτικού στρες, απέτρεψε την υπερπαραγωγή προφλεγμονωδών κυτοκινών και τη διόγκωση λευκοκυττάρων και τη βελτίωση των αντιοξειδωτικών ενζυματικών δραστηριότητα των νεφρικών ιστών. Επιπλέον, επιβεβαιώθηκε ότι η CP προκάλεσε μείωση στην έκκριση αλδοστερόνης και διευκόλυνε την υπερβολική απώλεια νατρίου και νερού μέσω των ούρων στους αρουραίους. Ωστόσο, το εκχύλισμα Ocimum G. βελτίωσε τη νεφρική λειτουργία αύξησε την παραγωγή αλδοστερόνης και απέτρεψε την υπερβολική απώλεια νατρίου και νερού σε αρουραίους που έλαβαν CP. Η παρουσία πολυφαινόλης και αντιοξειδωτικών στα φύλλα του Ocimum gratissimum το καθιστούν τέλειο υποψήφιο για τη θεραπεία ή/και την πρόληψη της νεφροτοξικής δράσης της κυκλοφωσφαμίδης.

βιβλιογραφικές αναφορές

1. Chabner BA, Ryand DP, Pax-Ares L, Garcis-Carbonero, Calaresi P. Αντινεοπλασματικοί παράγοντες. Στο: Harnam JG, Libmirde LE, συντάκτες. Ο Goodman και ο Gilman αποτελούν τη φαρμακολογική βάση της θεραπευτικής. 10η έκδ. Νέα Υόρκη: McGraw Hill; 2001. Σελ. 1389–459.

2. Chabner BA, et al. Αντινεοπλασματικοί παράγοντες. Σε: Brunton LL, Lazo JS, Parker KL, συντάκτες. Ο Goodman και ο Gilman αποτελούν τη φαρμακολογική βάση της θεραπευτικής. 11η έκδ. Νέα Υόρκη: McGraw Hill; 2006. Σελ. 1322–8. 1694.
3. Ge B, Yang D, Wu X, Zhu J, Wei W, Yang B. Κυτταροπροστατευτικά αποτελέσματα λιποσώματος γλυκυρρητινικού οξέος έναντι κυστίτιδας που προκαλείται από κυκλοφωσφαμίδιο μέσω αναστολής του φλεγμονώδους στρες. Int Immunopharmacol. 2018; 54:139–44.
4. Sinanoglu O, Yener AN, Ekici S, Midi A, Aksungar FB. Οι προστατευτικές επιδράσεις της σπιρουλίνας σε νεφροτοξικότητα και ουροτοξικότητα που προκαλείται από κυκλοφωσφαμίδη σε αρουραίους. Basic Transl Sci. 2012.
5. Caglayan C, Temel Y, Kandemir FM, Yildirim S, Kucukler S. Το Naringin προστατεύει από την επαγόμενη από την κυκλοφωσφαμίδη ηπατοτοξικότητα και νεφροτοξικότητα μέσω της ρύθμισης του οξειδωτικού στρες, της φλεγμονής, της απόπτωσης, της αυτοφαγίας και της βλάβης του DNA. Environ Sci Pollut Res Int. 2018;25(21):20968–84.
6. Zhang J, Tian Q, Yung S, Chuen S, Zhou S, Duan W, et al. Μεταβολισμός και μεταφορά οξαζαφωσφορινών και κλινικές επιπτώσεις. Drug Metab Rev. 2005; 37:611-703.
7. Famurewa AC, Edeogu CO, Ofor FI, Besong EE, Akunna GG, Maduagwuna EK. Η μείωση της ανισορροπίας οξειδοαναγωγής και της σηματοδότησης iNOS/NF-ĸB/κασπάσης-3 με συμπλήρωμα ψευδαργύρου αποτρέπει την ουροτοξικότητα της αιμορραγικής κυστίτιδας που προκαλείται από κυκλοφωσφαμίδιο σε αρουραίους. Life Sci. 2021; 266:118913.
8. Oyagbemi AA, Omobowale TO, Saba AB, Olowu ER, Dada RO, Akinrinde AS. Το γαλλικό οξύ βελτιώνει τη νευροτοξικότητα που προκαλείται από την κυκλοφωσφαμίδη σε αρουραίους Wistar μέσω της δραστηριότητας σάρωσης των ελεύθερων ριζών και της βελτίωσης του αντιοξειδωτικού αμυντικού συστήματος. J Diet Suppl. 2016; 13:402–19.
9. Abraham P, Isaac B. Οι επιδράσεις της γλουταμίνης από το στόμα στη νεφροτοξικότητα που προκαλείται από κυκλοφωσφαμίδιο σε αρουραίους. Hum Exp Toxicol. 2010; 30 (7): 616–23.
10. Sherif IO. Νευροπροστατευτικός μηχανισμός τουκερσετίνηκατά της ουροτοξικότητας που προκαλείται από κυκλοφωσφα-ποντίκια: επίδραση στο οξειδωτικό στρες και στους δείκτες φλεγμονής. J Cell Biochem. 2018; 119(9):7441–8. 11. Omole JG, et αϊ. Προστατευτική επίδραση του kolaviron στην καρδιακή τοξικότητα που προκαλείται από κυκλοφωσφαμίδη σε αρουραίους. J Evid Based Integr Med. 2018; 23:1
11. Efraim KD, Jacks TW, Sodipo OA. Ιστοπαθολογικές μελέτες σχετικά με την τοξικότητα του εκχυλίσματος Ocimum gratissimum σε ορισμένα όργανα κουνελιών. Afr J Biomed Res. 2003; 6:21-5.
12. Akinmoladun AC, Ibukun EO, Emmanuel A, Obuotor EM, Farombi EO. Φυτοχημικό συστατικό και αντιοξειδωτική δράση εκχυλίσματος από τα φύλλα του Ocimum gratissimum. Sci Res Essays. 2007; 2:163–6.
13. Alabi QK, Akomolafe RO, Omole JG, Adefsayo ΜΑ, Ogundipe OL, Aturamu Α, et al. Το πλούσιο σε πολυφαινόλες εκχύλισμα φύλλων Ocimum gratissimum βελτιώνει την κολίτιδα μέσω της άμβλυνσης του βλεννογόνου του παχέος εντέρου και της ρύθμισης της παραγωγής προφλεγμονωδών κυτοκινών και του οξειδωτικού στρες σε αρουραίους. Biomed Pharmacother. 2018; 103:812–22.
14. Ofah VN, Chikwendu UA. Αντιδιαρροϊκές επιδράσεις του εκχυλίσματος φύλλων Ocimum gratissimum σε πειραματόζωα. J Ethnopharmacol. 1999; 68:327-30.