Μέρος 2: 3-Υδροξυφαινυλοξικό οξύ: Ένας μεταβολίτης φλαβονοειδών που μειώνει την πίεση του αίματος

Για περισσότερες πληροφορίες, επικοινωνήστε με:tina.xiang@wecistanche.com

Κάντε κλικ στον παρακάτω σύνδεσμο για να λάβετε μέρος 1:https://www.xjcistanche.com/news/part1-3-hydroxyphenylacetic-acid-a-blood-pre-54725426.html

4. Συζήτηση

Έλεγχος διαφορετικών φαινολικών μεταβολιτών τουφλαβονοειδήέδειξε ότι 4 από τα 22 ήταν ισχυρά αγγειοδιασταλτικά. Σε συνέχεια αυτών των αποτελεσμάτων, τοκαρδιαγγειακάΟι επιδράσεις του 3-(3-υδροξυφαινυλ)προπιονικού οξέος, του 34-διυδροξυφαινυλοξικού οξέος (DHPA) και της 4-μεθυλοκατεχόλης επιβεβαιώθηκαν in vivo και μελετήθηκαν πιθανοί μηχανισμοί της δράσης τους ex vivo [14,15]. Ένας άλλος μεταβολίτης φλαβονοειδών, ο 3-HPAA, αποκλείστηκε προσωρινά από περαιτέρω έρευνα, καθώς δεν ήταν σε θέση να προκαλέσει πλήρη χαλάρωση στον αρχικό έλεγχο της αορτής του αρουραίου. Σε αυτήν την εργασία, αποφασίσαμε να επεκτείνουμε τις προηγούμενες μελέτες μας και να επικεντρωθούμε στο 3-HPAA επίσης. Επιδιώξαμε (1) να επιβεβαιώσουμε την αγγειοδιασταλτική του δράση τόσο in vivo σε αυθόρμητα υπερτασικούς αρουραίους όσο και ex vivo σε άλλο πειραματικό μοντέλο (στεφανιαίες αρτηρίες χοίρου) και (2) να μελετήσουμε τον μηχανισμό αυτής της δράσης.

Κάντε κλικ για να μάθετε περισσότερες πληροφορίες προϊόντος.

Επίδραση του 3-HPAA στην αρτηριακή πίεση και τον καρδιακό ρυθμό in Vivo σε SHR

Ενώ το 3-HPAA ήταν ένα λιγότερο ισχυρό αγγειοδιασταλτικό στην προηγούμενη ex vivo εξέταση [14], σε αυτήν την εργασία, επιβεβαιώθηκε ξεκάθαρα ότι μπορεί να μειώσειπίεση αίματοςin vivo σε αυθόρμητα υπερτασικούς αρουραίους μετά από ενδοφλέβια χορήγηση. Όταν χορηγήθηκε ως bolus, η μέση, η συστολική και η διαστολική αρτηριακή πίεση μειώθηκαν. Εντελώς απροσδόκητα, μια σημαντική επίδραση στη διαστολική αρτηριακή πίεση παρατηρήθηκε ήδη μετά από μια πολύ χαμηλή δόση 10 μg.kg-1. Η έκταση αυτής της απόκρισης ήταν σχετικά υψηλή (περίπου 20 τοις εκατό ). Με αυξανόμενες δόσεις 3-HPAA, το αποτέλεσμα αυξήθηκε ελαφρά μόνο σε περίπου 25 τοις εκατό . Το ίδιο ίσχυε και στην περίπτωση της συστολικής αρτηριακής πίεσης όταν υπήρχε σημαντική μείωση (περίπου 15 τοις εκατό) μετά τη δόση των 100 μg.kg-I, και η μέγιστη μείωση που βρέθηκε ήταν περίπου 25 τοις εκατό. Υπήρχε μεταβλητότητα μεταξύ των ζώων με αποτέλεσμα μεταβλητές τιμές. Ωστόσο, η εξάρτηση από τη δόση του αποτελέσματος ήταν προφανής. Αντίθετα, δεν παρατηρήθηκαν αλλαγές στον καρδιακό ρυθμό μετά από ενδοφλέβια εφαρμογή bolus. Αυτό μπορεί να σημαίνει ότι η καρδιά δεν εμπλέκεται στο αποτέλεσμα μείωσης της αρτηριακής πίεσης και το αποτέλεσμα βασίστηκε αποκλειστικά στην περιφερική χαλάρωση. Η απουσία αλλαγών του καρδιακού ρυθμού είναι επίσης σημαντική από την άποψη της ασφάλειας, καθώς η ανατροφοδότηση αύξηση του καρδιακού ρυθμού που προκαλείται από το συμπαθητικό νευρικό σύστημα, η οποία ακολουθεί μια έντονη μείωση της αρτηριακής πίεσης, είναι κλινικά ακατάλληλη, όπως αναφέρθηκε καλά με το ασβέστιο αναστολέας καναλιών νιφεδιπίνη [24].

Σε πραγματικές καταστάσεις, οι μεταβολίτες του παχέος εντέρου των λαμβανόμενων φλαβονοειδών απορροφώνται συνεχώς από το GIT. Για να μιμηθεί αυτό, χορηγήθηκαν αργές ενδοφλέβιες εγχύσεις 3-HPAA σε διαφορετικούς ρυθμούς σε ένα άλλο σύνολο πειραμάτων. Ανάλογα με την προηγούμενη εφαρμογή bolus, παρατηρήθηκε μείωση της μέσης, συστολικής και διαστολικής αρτηριακής πίεσης. Το αποτέλεσμα ήταν δοσοεξαρτώμενο και ένα σημαντικό αποτέλεσμα προέκυψε από τις δόσεις του 1 και των 5 mg.kg-1·λεπτό, με μέγιστη πτώση περίπου 50 τοις εκατό της αρτηριακής πίεσης. Και πάλι, δεν παρατηρήθηκαν σημαντικές αλλαγές στον καρδιακό ρυθμό κατά τη διάρκεια της έγχυσης διάρκειας 5 λεπτών, ούτε κατά τη διάρκεια των επόμενων 10 λεπτών παρακολούθησης των ζώων.

Αυτή η επίδραση στην αρτηριακή πίεση μπορεί να έχει πραγματικό αντίκτυπο. Τα φλαβονοειδή από τη διατροφή απορροφώνται μάλλον ελάχιστα στο λεπτό έντερο. Φτάνουν στο κόλον και υφίστανται μικροβιακό μεταβολισμό. Η διαδικασία αποικοδόμησης βακτηρίων συνίσταται σε μείωση του διπλού δεσμού στη θέση 2,3-που ακολουθείται από τη σχάση του δακτυλίου C. Το επόμενο βήμα εξαρτάται από την παρουσία ή την απουσία της 3-υδροξυλικής ομάδας. Οι φλαβόνες που δεν διαθέτουν αυτό το υδροξύλιο δίνουν προέλευση σε παράγωγα υδροξυφαινυλοπροπιονικού οξέος, ενώ οι φλαβονόλες με το 3-υδροξυλικό προέρχονται από παράγωγα υδροξυφαινυλοοξικών οξέων [25]. Ωστόσο, το 3-HPAA προκύπτει ως προϊόν σχάσης δακτυλίου που προέρχεται από μικροβιακό καταβολισμό πολλών μητρικών φλαβονοειδών, όχι μόνο των φλαβονολών όπως π.χ.κερσετίνη. Επιπλέον, ένας σημαντικός μεταβολίτης με αγγειοδιασταλτική δράση, το DHPA, προκαλεί το 3-HPAA μετά την αφυδροξυλίωσή του και σε μικρότερο βαθμό σε μια άλλη αγγειοχαλαρωτική ένωση,3,4-διυδροξυβενζοϊκό οξύ/πρωτοκατεχουϊκό οξύ.{{3} }Το HPAA καταβολίζεται περαιτέρω σε αγγειο-αδρανές ιππουρικό και βενζοϊκό οξύ (Εικόνα 1)[15,26]. Γενικά, οι μικροί μεταβολίτες φλαβονοειδών εμφανίζουν υψηλότερα επίπεδα στο πλάσμα από τα μητρικά τους φλαβονοειδή και μπορούν να φτάσουν σε μέγιστες συγκεντρώσεις συνήθως στην περιοχή από 1 έως 615 nM ή ακόμη και 42,9 μΜ σε ορισμένες περιπτώσεις [17]. Το ίδιο φαίνεται να ισχύει για το 3-HPAA. Σε μελέτες σε ζώα, η χορήγηση εκχυλίσματος μούρων Calafate (παρέχοντας~2,6 mg φαινολικών) μέσω καθετήρα σε γερβίλους είχε ως αποτέλεσμα μέγιστες συγκεντρώσεις στο πλάσμα 3-HPAA περίπου. 300 nM μετά από 4 ώρες[27]. Άλλοι συγγραφείς ανέφεραν ότι μια εφάπαξ 3-HPAA ενδοφλέβια βλωμός 2 και 4 mg. Οι αρουραίοι kg-Ito οδήγησαν σε μέγιστες συγκεντρώσεις στο πλάσμα περίπου 6 mg.L-1(~40 uM και 16 mg.L-1(~100 μM) 【28】. Στη μελέτη μας, η μέγιστη δόση που χορηγήθηκε ενδοφλεβίως ως bolus ήταν 10 mg.kg-1. Επομένως, μπορούμε να εκτιμήσουμε [28] ότι το μέγιστο επίπεδο στο πλάσμα που επιτεύχθηκε θα μπορούσε να είναι μεταξύ 100 και 200 ​​μM, που είναι 11-22 φορές υψηλότερο από ό,τι ήταν φυσιολογικά ανιχνεύθηκε [17]. Είναι σημαντικό ότι σημαντικές επιδράσεις στη διαστολική αρτηριακή πίεση παρατηρήθηκαν ήδη στη δόση των 10 ug.kg-1, η οποία θα μπορούσε χονδρικά να αντιστοιχεί σε μια επιτεύξιμη συγκέντρωση 100-200 nM. Το ανάλογο ισχύει για χορήγηση μέσω έγχυσης Μια δόση 1 mg·kg-I.min-θα μπορούσε να οδηγήσει σε συγκέντρωση στο πλάσμα περίπου 10 μM 【28】, η οποία βρίσκεται εντός του εύρους των συνολικών επιπέδων που παράγονται από τη διατροφή [17]. Αντίθετα, η δόση 5 mg.kg-.min-I θα ήταν δύσκολο να επιτευχθεί μέσω μιας διατροφής πλούσιας σε πολυφαινόλες, και σε αυτήν την περίπτωση, 3-Το HPAA ίσως, αντ' αυτού, μπορεί να εφαρμοστεί ως φάρμακο ή συμπλήρωμα. Παρέκταση του ζώου δεδομένα σε ανθρώπους δεν είναι εύκολο; Ωστόσο, αυτές οι συγκεντρώσεις μπορούν να επιτευχθούν στον άνθρωπο μετά την κατανάλωση μιας διατροφής πλούσιας σε φλαβονοειδή και μπορεί να σχετίζονται με την επίδραση στο αγγειακό σύστημα[17]. Δυστυχώς, τα κινητικά δεδομένα στο 3-HPAA εξακολουθούν να είναι περιορισμένα. Μια 8-εβδομαδιαία ελεγχόμενη με εικονικό φάρμακο διαιτητική δοκιμή με 72 συμμετέχοντες έδειξε σημαντική αύξηση στα επίπεδα πλάσματος του 3-HPAA (από~180 σε~250 nM) μετά την κατανάλωση μούρων, η οποία παρείχε περίπου 837 mg πολυφαινολών ανά ημέρα. Επιπλέον, υπήρξε επίσης μια αύξηση 87 τοις εκατό στην ούρα απέκκριση του 3-HPAA [29]. Μια άλλη μελέτη ανίχνευσε 60 διαφορετικούς φαινολικούς μεταβολίτες στο πλάσμα και στα ούρα σε 10 εθελοντές μετά από κατανάλωση χυμού cranberry που περιείχε 787 mg πολυφαινολών. 3-Το HPAA ήταν μεταξύ των μεταβολιτών που προσδιορίστηκαν στο πλάσμα και έφτασε σε μέγιστη συγκέντρωση ~600 nM μετά από 10 ώρες περίπου [17]. Μια άλλη κινητική μελέτη με εννέα υγιείς νεαρούς άνδρες έδειξε ότι η βιοδιαθεσιμότητα των (πολυ)φαινολών δεν εξαρτάται αποκλειστικά από την ποσότητα που λαμβάνεται. Η ποσότητα των 766 mg πολυφαινολών οδήγησε σε μέγιστες συγκεντρώσεις 3-HPAA στο πλάσμα~260 nM, ενώ η κατάποση μεγαλύτερη από τη διπλάσια ποσότητα οδήγησε σε ακόμη χαμηλότερα επίπεδα (~240 nM) [30]. Ωστόσο, και στις δύο περιπτώσεις, οι συγκεντρώσεις στο πλάσμα έφτασαν περίπου τα 250 nM.

Μηχανισμός των αγγειακών επιδράσεων του 3-HPAA Studied Ex Vivo

Πραγματοποιήσαμε αναζήτηση δεδομένων στη βάση δεδομένων PubMed με τη λέξη-κλειδί "3-υδροξυφαινυλοοξικό οξύ". Η ανάλυση των 110 άρθρων που βρέθηκαν μας επέτρεψε να συμπεράνουμε ότι τα δεδομένα σχετικά με τη φαρμακοκινητική του HPAA είναι περιορισμένα και οι φαρμακοδυναμικές μελέτες, οι καλύτερες γνώσεις μας, δεν υπάρχουν. Μόνο μία μελέτη έδειξε ότι το 3-HPAA μειώνει τα επίπεδα πρωτεΐνης COX-2 στα καρκινικά κύτταρα του παχέος εντέρου, αλλά χωρίς επίδραση στην παραγωγή PGE2 [31].

Όπως και στα in vivo πειράματά μας, 3-Το HPAA μείωσε την αρτηριακή πίεση ανάλογα με τη δόση και δεν είχε καμία επίδραση στον καρδιακό ρυθμό, υποθέσαμε ότι ο μηχανισμός των παρατηρούμενων επιδράσεων θα μπορούσε να βρίσκεται στην άμεση δράση του 3-HPAA στον τα αγγεία. Ως εκ τούτου, πραγματοποιήσαμε διάφορα συμπληρωματικά πειράματα ex vivo για να εξερευνήσουμε τον μηχανισμό δράσης. Καθώς υπάρχει προφανής έκκληση στην Τσεχική Δημοκρατία για μείωση της χρήσης πειραματόζωων σύμφωνα με τα 3Rs (Αντικατάσταση, Μείωση και Βελτίωση), επιλέξαμε ένα εναλλακτικό μοντέλο που αποτελείται από τη χρήση στεφανιαίων αρτηριών χοίρου από φρέσκες καρδιές, οι οποίες ήταν προέρχεται από τοπικό σφαγείο. Αυτό το μοντέλο δεν ήταν βέλτιστο. Πρώτον, παρατηρήθηκε αγγειοδιαστολή σε πολύ υψηλότερη συγκέντρωση από ό,τι στην αορτή του αρουραίου και, δεύτερον, αυτή η συγκέντρωση είναι περίπου 100 φορές υψηλότερη από τη συγκέντρωση που μπορεί να επιτευχθεί μέσω της διατροφής [17]. Παρά αυτόν τον περιορισμό, αυτή η ρύθμιση μας επέτρεψε να δούμε διαφορές μεταξύ των πειραματικών ομάδων και, ως εκ τούτου, χρησίμευσε επαρκώς για τον προσδιορισμό του μηχανισμού δράσης. Από την άλλη πλευρά, το πλεονέκτημα ήταν ότι οι χοίροι και οι άνθρωποι προφανώς μοιράζονται πολλές ομοιότητες σχετικά με το καρδιαγγειακό σύστημα [32]. Αποδείχθηκε ότι το 3-HPAA προκαλεί δοσοεξαρτώμενη αγγειοδιαστολή των στεφανιαίων αρτηριών χοίρου ex vivo. Αυτό το αποτέλεσμα διαμεσολαβήθηκε τουλάχιστον εν μέρει από το ενδοθήλιο με τη συμμετοχή του ΝΟ που προέρχεται από το ενδοθήλιο. Σε αντίθεση με το ΝΟ, δεν επιβεβαιώσαμε τη συμμετοχή των ενδοθηλιακών υποδοχέων Μ, των καναλιών COX, SKca και IKca, ούτε άμεσες επιδράσεις στα κανάλια Cay1.2 λείων μυών (τύπου L).

Το ΝΟ αναφέρθηκε προηγουμένως ως ένας παράγοντας χαλάρωσης που προέρχεται από το ενδοθήλιο και ο ρόλος του στην αγγειακή φυσιολογία είναι ευρέως γνωστός. Εν συντομία, αφού συντεθεί από το eNOS σε ενδοθηλιακά κύτταρα, το ΝΟ διαχέεται στα λεία μυϊκά κύτταρα των αγγείων όπου ενεργοποιεί τη διαλυτή γουανυλική κυκλάση (sGC) και την οδό cGMP-PKG (Εικόνα 8). Το PKG, με τη σειρά του, ενεργοποιεί διάφορα κανάλια Kt που υπάρχουν στον λείο μυ, συγκεκριμένα ενεργοποιημένο με ασβέστιο μεγάλης αγωγιμότητας (BKca), ευαίσθητο στο ATP (KATP), ανορθωτή προς τα μέσα (KIR) και πύλη τάσης (Kv), επιτρέποντας έτσι την μεταφορά ιόντων Κ συν. Αυτό οδηγεί σε αύξηση του αρνητικού δυναμικού της μεμβράνης με την επακόλουθη αναστολή των διαύλων ασβεστίου που καλύπτονται από τάση (κυρίως τύπου L) και αποκλεισμό της εισροής εξωκυτταρικού Ca2 συν. Τα επίπεδα του ενδοκυτταρικού Ca2 plus ρυθμίζονται επίσης μέσω της ενεργοποίησης του SERCA είτε από το PKG είτε απευθείας από το ΝΟ [33] και με την αναστολή των καναλιών IP3R. Η έλλειψη επιδράσεων που προκαλούνται από το ΝΟ σχετίζεται με διάφορες παθολογίες. Βρέθηκε μειωμένη έκφραση και δραστηριότητα του eNOS σε αορτές από SHR 34 και μειωμένη παραγωγή ΝΟ καταδείχθηκε σε ενδοθηλιακά και αγγειακά λεία μυϊκά κύτταρα από μεσεντέριες αρτηρίες και αορτή γενετικά τροποποιημένων υπερτασικών αρουραίων [35]. Σε μελέτες σε ανθρώπους, αναφέρθηκε μη φυσιολογική ενδοθηλιακή λειτουργία σε ασθενείς με ιδιοπαθή υπέρταση [36]. Η ενδοθηλιακή δυσλειτουργία έχει συσχετιστεί με μειωμένη αγγειακή βιοδιαθεσιμότητα του ΝΟ[37] χωρίς να διευκρινίζεται εάν αυτός ο μηχανισμός βασίζεται σε μείωση της σύνθεσης, απελευθέρωσης ή διάχυσης του ΝΟ. Πρόσφατα, οι μηχανισμοί που υποστηρίζονται περιλαμβάνουν επίσης μια αύξηση της οξειδωτικής κατάστασης που προάγει τη διάσπαση του ΝΟ [38,39]. Έτσι, οι μηχανισμοί που περιγράφονται παραπάνω ενδέχεται να συμβάλλουν στην αγγειοδιασταλτική δράση του 3-HPAA (Εικόνα 8) και στις πιθανές προστατευτικές αγγειακές επιδράσεις του. Είναι σημαντικό ότι αυτός μπορεί να είναι ο λόγος για τις μεγάλες διαφορές μεταξύ μιας πολύ υψηλής ευαισθησίας του SHR στις αγγειοδιασταλτικές επιδράσεις του 3-HPAA και της χαμηλής ευαισθησίας υγιών στεφανιαίων αγγείων από καρδιές χοίρου, αν και αυτή η θεωρία πρέπει να επιβεβαιωθεί σε πρόσθετες μελέτες.

Εάν αυτό ισχύει, τίθεται το ερώτημα της 3-επαγόμενης από το HPAA NO σύνθεσης. Η τιμή pKa του 3-HPAA είναι 4, πράγμα που σημαίνει ότι υπό φυσιολογικό pH, η ουσία είναι κυρίως ιονισμένη. Αυτό εμποδίζει την παθητική διαμεμβρανική μεταφορά. Ωστόσο, η παρουσία συστήματος μεταφοράς δεν επαληθεύτηκε και δεν μπορεί να αποκλειστεί. Η ενεργοποίηση του eNOS πυροδοτείται συχνά από μια αύξηση του κυτταροπλασματικού Ca2t. ​​Στα πειράματά μας, η 3-αγγειοδιαστολή του HPAA δεν εξαρτιόταν από τη δραστηριότητα των ενδοθηλιακών καναλιών IKCa και SKCa. Καθώς και οι δύο αυτοί δίαυλοι είναι ευαίσθητοι στο Ca2 plus [40, η προηγούμενη αύξηση στα επίπεδα του κυτταροπλασματικού Ca2 plus δεν είναι πιθανή. Αντίστοιχα, οι ενδοθηλιακοί υποδοχείς Μ, οι οποίοι είναι GPCR συζευγμένοι με τους δεύτερους αγγελιοφόρους'DAG συν IP,/PKC συν αύξηση του κυτταροπλασματικού Ca2 συν, δεν εμπλέκονται, καθώς ο αποκλεισμός τους από την ατροπίνη δεν τροποποιεί την αγγειοδιαστολή που προκαλείται από 3-HPAA . Αυτή η παρατήρηση, μαζί με το γεγονός ότι δεν σημειώθηκαν αλλαγές στον καρδιακό ρυθμό των αρουραίων, υποδηλώνει ότι μια άμεση χολινομιμητική δραστηριότητα για το 3-HPAA είναι απίθανη. Αξίζει να σημειωθεί, ότι υπάρχει μεγάλη ομολογία στους μουσκαρινικούς υποδοχείς που περιγράφονται μεταξύ των θηλαστικών: Μ1 προς Ms στους αρουραίους και Μ1 προς Μ στους χοίρους, έχουν αποκαλύψει ομολογία μεγαλύτερη από 90 τοις εκατό με τις ανθρώπινες αλληλουχίες αμινοξέων αυτών των υποδοχέων [41]. Τελευταίο αλλά εξίσου σημαντικό, εκτός από το ΝΟ, η ενδοθηλιακή αγγειοδιαστολή μπορεί επίσης να προκληθεί από άλλα ενδοθηλιακά προϊόντα, μεταξύ των οποίων ένας μεσολαβητής από την προστακυκλίνη της οδού κυκλοοξυγενάσης (PGI2). Αυτό δεν είναι πιθανό στην περίπτωση του 3-HPAA επειδή η παρουσία της ινδομεθακίνης, ενός αναστολέα της κυκλοοξυγενάσης, δεν είχε καμία επίδραση.

Προηγουμένως, μελετήσαμε έναν άλλο σημαντικό μεταβολίτη του παχέος εντέρου, τον DHPA, στην αορτή του αρουραίου ex vivo. Η αγγειοδιασταλτική του δράση εξαρτιόταν επίσης εν μέρει από το ενδοθήλιο, αλλά με τη συμμετοχή ενδοθηλιακών καναλιών IKc και COX, άρα εξαρτώμενη από την καλωδίωση [15]. Αυτό θα σήμαινε ότι οι αγγειοδιασταλτικοί μεταβολίτες του παχέος εντέρου των φλαβονοειδών μπορεί να δρουν μέσω διαφορετικών μηχανισμών δράσης. Σε πραγματικές συνθήκες, η παρουσία διαφορετικών μηχανισμών και η αλληλεπίδραση πολλών μεταβολιτών του παχέος εντέρου μπορεί να διευκολύνει την αγγειοδιαστολή. Αυτή η υπόθεση είναι σύμφωνη με τη in vivo μελέτη μας για μείγματα μεταβολιτών του παχέος εντέρου [42]. Είναι ενδιαφέρον ότι ορισμένες μελέτες απέδειξαν ότι το μητρικό φλαβονοειδές, η κερσετίνη, είναι επίσης αγγειοδραστικό. Ενεργοποιεί το eNOS και αυτή η δράση διαμεσολαβείται από την αύξηση του κυτταροπλασματικού Ca2, ενεργοποιώντας στη συνέχεια τα ενεργοποιημένα με Ca2 κανάλια K, κυρίως SKca, και προκαλώντας υπερπόλωση των ενδοθηλιακών κυττάρων[43,44]. Η κερσετίνη, επομένως, δρα με διαφορετικό τρόπο. Ωστόσο, η βιοδιαθεσιμότητα του γονέακερσετίνηείναι χαμηλό [45,46] και, επομένως, η άμεση επίδρασή του στην αγγειοδιαστολή δεν είναι πιθανώς κρίσιμη.

Η έρευνα που δημοσιεύεται στην παρούσα εργασία έχει αρκετούς περιορισμούς. Για παράδειγμα, η στεφανιαία αρτηρία χοίρου δεν είναι αγγείο αντίστασης, ενώ το αποτέλεσμα μείωσης της αρτηριακής πίεσης πιθανότατα σχετίζεται με τη διαστολή των αγγείων αντίστασης. Μια ενδοφλέβια χορήγηση μιας εφάπαξ βλωμού ή ακόμη και αργής ενδοφλέβιας έγχυσης δεν μιμείται ένα πραγματικό σενάριο έκθεσης στο οποίο οι άνθρωποι καταπίνουν πολλαπλές δόσεις φλαβονοειδών, κυρίως με τη μορφήγλυκοσίδες, καθόλη την μέρα. Έτσι, το προφίλ των μεταβολιτών στο πλάσμα μπορεί να διαφέρει. Είναι σημαντικό ότι τα φλαβονοειδή που λαμβάνονται μεταβολίζονται όχι σε ένα αλλά σε ένα μείγμα μεταβολιτών. Πολλά από αυτά μπορεί να είναι αγγειοδραστικά και η αλληλεπίδραση μεταξύ τους επηρεάζει το τελικό αποτέλεσμα. Επιπλέον, η ivapplication δεν επιτρέπει την αξιολόγηση του ρόλου της εντερικής μικροχλωρίδας και της μεταβλητότητας στην παραγωγή του 3-HPAA και άλλων μεταβολιτών από τα μητρικά φλαβονοειδή. Μελλοντικές μελέτες θα πρέπει να προσπαθήσουν να αντιμετωπίσουν αυτά τα ζητήματα για να κατανοήσουν καλύτερα τις βιοδραστηριότητες και τον μηχανισμό δράσης του 3-HPAA στο καρδιαγγειακό σύστημα, συμπεριλαμβανομένου του πιθανού ρόλου του ΝΟ.

5. Συμπεράσματα

Τα στοιχεία παρείχαν ισχυρές αποδείξεις ότι ηφλαβονοειδέςΟ μεταβολίτης, 3-HPAA, που σχηματίζεται από την ανθρώπινη μικροχλωρίδα του εντέρου, είναι αγγειοδραστικός και μειώνει την αρτηριακή πίεση. Επιπλέον, τα αποτελέσματα υποδηλώνουν ότι μπορεί να επιτευχθεί μείωση της αρτηριακής πίεσης σε επιτεύξιμες συγκεντρώσεις. Μαζί με αυτά τα ευρήματα, δείξαμε ότι η υποτασική επίδραση δεν ήταν αποτέλεσμα άμεσης δράσης στην καρδιά, αλλά ήταν πιο πιθανό να βασιζόταν στα αγγεία. Τέλος, η αγγειοδιαστολή που προκαλείται από 3-HPAA, τουλάχιστον εν μέρει, μεσολαβείτο από το ενδοθήλιο, όπου οι εξαρτώμενες από το ΝΟ επιδράσεις μπορεί να παίζουν ρόλο.

Συμπληρωματικά Υλικά: Μπορείτε να λάβετε τις ακόλουθες υποστηρικτικές πληροφορίες στη διεύθυνση: https://www.mdpi.com/article/1{{10}}.339{{20}}/nul4020328/s1. Εικόνα S1. Αλλαγές στη μέση αρτηριακή πίεση μετά από χορήγηση βλωμού iv του 3-HPAA. Εικόνα S2. Αλλαγές στον καρδιακό ρυθμό μετά από χορήγηση bolus iv του 3-HPAA.Εικόνα S3. Επίδραση των 3-εγχύσεων HPAA (0,05,0,25,1 και 5 mg.kg-1min-1) στη συστολική, διαστολική και μέση αρτηριακή πίεση σε αυθόρμητα υπερτασικούς αρουραίους. Εικόνα S4. Επίδραση των 3-εγχύσεων HPAA (0,05, 0,25,1 και 5 mg.kg-1.min-l) στον καρδιακό ρυθμό σε αυθόρμητα υπερτασικούς αρουραίους.

βιβλιογραφικές αναφορές

1. Παγκόσμιος Οργανισμός Υγείας. Διαθέσιμο στο διαδίκτυο: https://www.who.int/health-topics/cardiovascular-diseases#tab=tab_1 (πρόσβαση στις 10 Νοεμβρίου 2021).

2. Visseren, FLJ; Mach, F.; Smulders, YM; Carballo, D.; Κοσκινάς, KC; Bäck, Μ.; Μπενέτος, Α.; Biffifi, Α.; Boavida, J.-M.; Capodanno, D.; et al. 2021 Οδηγίες ESC για την πρόληψη καρδιαγγειακών παθήσεων στην κλινική πράξη: Αναπτύχθηκε από την Task Force για την πρόληψη καρδιαγγειακών παθήσεων στην κλινική πράξη με εκπροσώπους της Ευρωπαϊκής Καρδιολογικής Εταιρείας και 12 ιατρικών εταιρειών με την ειδική συμβολή της Ευρωπαϊκής Ένωσης Προληπτικής Καρδιολογίας (EAPC). Ευρώ. Heart J. 2021, 42, 3227–3337. [CrossRef]

3. Vasan, RS; Beiser, Α.; Seshadri, S.; Larson, MG; Kannel, WB; D'Agostino, RB; Levy, D. Υπολειπόμενος κίνδυνος ζωής για την ανάπτυξη υπέρτασης σε μεσήλικες γυναίκες και άνδρες: The Framingham Heart Study. JAMA 2002, 287, 1003–1010. [CrossRef]

4. Whelton, SP; McEvoy, JW; Shaw, L.; Psaty, BM; Λίμα, JAC; Budoff, Μ.; Nasir, Κ.; Szklo, Μ.; Blumenthal, RS; Blaha, MJ Association of Normal Systolic Blood Pressure Level with Cardiovascular Disease in Absence of Risk Factors. JAMA Cardiol. 2020, 5, 1011–1018. [CrossRef]

5. Jepps, TA Ξεδιπλώνοντας τις πολυπλοκότητες των καναλιών ιόντων των αγγείων λείων μυών: Βελτιστοποίηση της δραστηριότητας από βοηθητικές υπομονάδες. Pharmacol. Εκεί. 2017, 178, 57–66. [CrossRef]

6. Del Bo, C.; Bernardi, S.; Μαρίνο, Μ.; Porrini, Μ.; Tucci, Μ.; Guglielmetti, S.; Cherubini, Α.; Carrieri, Β.; Kirkup, Β.; Kroon, Ρ.; et al. Συστηματική ανασκόπηση σχετικά με την πρόσληψη πολυφαινόλης και τα αποτελέσματα για την υγεία: Υπάρχουν επαρκή στοιχεία για να καθοριστεί ένα διατροφικό πρότυπο πλούσιο σε πολυφαινόλες που προάγει την υγεία; Nutrients 2019, 11, 1355. [CrossRef]

7. Panche, AN; Diwan, μ.Χ. Chandra, SR Φλαβονοειδή: Μια επισκόπηση. J. Nutr. Sci. 2016, 5, e47. [CrossRef]

8. Mladenka, Ρ.; Zatloukalová, L.; Filipský, T.; Hrdina, R. Οι καρδιαγγειακές επιδράσεις των φφλλαβονοειδών δεν προκαλούνται μόνο από την άμεση αντιοξειδωτική δράση. Free Radic. Biol. Med. 2010, 49, 963-975. [CrossRef] [PubMed]

9. Cassidy, Α.; Minihane, Α.-Μ. Ο ρόλος του μεταβολισμού (και του μικροβιώματος) στον καθορισμό της κλινικής αποτελεσματικότητας των διαιτητικών φλαβονοειδών. Είμαι. J. Clin. Nutr. 2016, 105, 10–22. [CrossRef]

10. Williamson, G.; Kay, CD; Crozier, A. The Bioavailability, Transport, and Bioactivity of Dietary Flavonoids: A Review from a Historical Perspective. Σύνθ. Rev. Food Sci. Food Saf. 2018, 17, 1054–1112. [CrossRef] [PubMed]

11. Thilakarathna, SH; Rupasinghe, Βιοδιαθεσιμότητα φλαβονοειδών HPV και προσπάθειες για βελτίωση της βιοδιαθεσιμότητας. Nutrients 2013, 5, 3367–3387. [CrossRef] [PubMed]

12. Griffiths, LA; Smith, GE Μεταβολισμός μυρικετίνης και σχετικών ενώσεων στον αρουραίο. Σχηματισμός μεταβολίτη in vivo και από την εντερική μικροχλωρίδα in vitro. Biochem. J. 1972, 130, 141–151. [CrossRef]

13. Booth, AN; Deeds, F.; Jones, FT; Murray, CW Η μεταβολική μοίρα της ρουτίνης και της κερκετίνης στο σώμα των ζώων. J. Biol. Chem. 1956, 223, 251–257. [CrossRef]

14. Najmanová, I.; Pourová, J.; Vopršalová, M.; Pilaˇrová, V.; Semecký, V.; Nováková, L.; Mladˇenka, P. Φλαβονοειδής μεταβολίτης 3-(3- υδροξυφαινυλ)προπιονικό οξύ που σχηματίζεται από ανθρώπινη μικροχλωρίδα μειώνει την αρτηριακή πίεση στους αρουραίους. ΜοΙ. Nutr. Food Res. 2016, 60, 981–991. [CrossRef]

15. Pourova, J.; Najmanova, Ι.; Voprsalova, Μ.; Μίγκος, Τ.; Pilarova, V.; Applova, L.; Novakova, L.; Mladenka, P. Δύο φλαβονοειδή μεταβολίτες, το 3,4-διυδροξυφαινυλοξικό οξύ και η 4-μεθυλοκατεχόλη, χαλαρώνουν τις αρτηρίες ex vivo και μειώνουν την αρτηριακή πίεση in vivo. Vascul. Pharmacol. 2018, 111, 36–43. [CrossRef]

16. Appeldoorn, MM; Vincken, J.-P.; Aura, Α.-Μ.; Hollman, PCH; Gruppen, H. Procyanidin Dimers are Metabolized by Human Microbiota with 2-(3,4-Dihydroxyphenyl)acetic Acid and 5-(3,4-Dihydroxyphenyl)- - η βαλερολακτόνη ως οι κύριοι μεταβολίτες. J. Agric. Food Chem. 2009, 57, 1084–1092. [CrossRef]

17. Feliciano, RP; Boers, Α.; Massacessi, L.; Istas, G.; Ventura, MR; Nunes Dos Santos, C.; Heiss, C.; Rodriguez-Mateos, A. Προσδιορισμός και ποσοτικοποίηση νέων πλάσματος και (πολυ)φαινολών που προέρχονται από κράνμπερι. Αψίδα. Biochem. Biophys. 2016, 599, 31–41. [CrossRef]

18. Guadamuro, L.; Jiménez-Girón, AM; Delgado, S.; Flórez, AB; Suárez, Α.; Martín-Álvarez, PJ; Bartolomé, Β.; Moreno-Arribas, MV; Mayo, B. Προφίλ των φαινολικών μεταβολιτών στα κόπρανα από εμμηνοπαυσιακές γυναίκες μετά από μακροχρόνιο συμπλήρωμα ισοφφλλαβόνης. J. Agric. Food Chem. 2016, 64, 210–216. [CrossRef] [PubMed]

19. Olthof, MR; Hollman, PC; Buijsman, MN; van Amelsvoort, JM; Το Katan, το MB χλωρογενικό οξύ, η κερκετίνη-3-ρουτινοσίδη και οι φαινόλες μαύρου τσαγιού μεταβολίζονται εκτενώς στους ανθρώπους. J. Nutr. 2003, 133, 1806–1814. [CrossRef] [PubMed]

20. Serra, Α.; Macià, Α.; Romero, Μ.-Ρ.; Angles, Ν.; Morelló, J.-R.; Motilva, M.-J. Μεταβολικές οδοί του παχέος εντέρου μεταβολισμού προκυανιδινών (μονομερών και διμερών) και αλκαλοειδών. Food Chem. 2011, 126, 1127–1137. [CrossRef] 21. Rechner, AR; Smith, MA; Kuhnle, G.; Gibson, GR; Debnam, ES; Srai, SK; Moore, KP; Rice-Evans, CA Μεταβολισμός παχέος εντέρου των διαιτητικών πολυφαινολών: Επίδραση της δομής στα προϊόντα μικροβιακής ζύμωσης. Free Radic. Biol. Med. 2004, 36, 212-225. [CrossRef] [PubMed]

22. Serra, Α.; Macià, Α.; Romero, Μ.-Ρ.; Reguant, J.; Ortega, Ν.; Motilva, M.-J. Μεταβολικές οδοί του μεταβολισμού του παχέος εντέρου των φλαβονοειδών (φλαβονόλες, φλαβόνες και φλαβανόνες) και φαινολικών οξέων. Food Chem. 2012, 130, 383–393. [CrossRef]

23. Liu, C.; Vervoort, J.; Beekmann, Κ.; Baccaro, Μ.; Kamelia, L.; Wesseling, S.; Rietjens, IMCM Interindividual Differences in Human Intestinal Microbial Conversion of (−)-Epicatechin to Bioactive Phenolic Compounds. J. Agric. Food Chem. 2020, 68, 14168–14181. [CrossRef] [PubMed]