grΓλώσσα
Σπίτι / Η γνώση / Περιεχόμενο

Η γνώση

Μέρος 1: Αλληλεπιδράσεις ασκορβικού οξέος, 5-καφεοϋλκινικού οξέος και κερκετίνης-3-ρουτινοσίδης παρουσία και απουσία σιδήρου κατά τη διάρκεια της θερμικής επεξεργασίας και η επίδραση στην αντιοξειδωτική δράση

Mar 15, 2022

Για περισσότερες πληροφορίες επικοινωνήστεtina.xiang@wecistanche.com

Αφηρημένη: Οι βιοδραστικές ενώσεις στα φρούτα και τα λαχανικά επηρεάζουν η μία την άλληαντιοξειδωτικόδραστηριότητα. Καθαρά πρότυπα και μείγματα των κοινών φυτικών ενώσεων, συγκεκριμέναασκορβικό οξύ, {{0}}καφεοϋλοκινικό οξύ και κερκετίνη-3-ρουτινοσίδη (άθροισμα 0,3 mM), παρουσία και απουσία σιδήρου, αναλύθηκαν πριν και μετά τη θερμική επεξεργασία σε ένα υδατικό διάλυμα. Η αντιοξειδωτική δράση μετρήθηκε με ολική περιεκτικότητα σε φαινόλη (TPC), 1,1-διφαινυλ-2-πικρυυλυδραζύλιο (DPPH) και 2,2'-αζινο-δις (3-αιθυλβενζοθειαζολίνη{{14} }σουλφονικό οξύ) (TEAC) αναλύσεις δέσμευσης ριζών. Ο ιονικός σίδηρος (Fe2 plus) και ο σίδηρος σιδήρου (Fe) μετρήθηκαν φωτομετρικά. Για τον προσδιορισμό και τον ποσοτικό προσδιορισμό των προϊόντων αντίδρασης, χρησιμοποιήθηκε HPLC. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι η θερμική επεξεργασία δεν οδηγεί απαραίτητα σε μειωμένη αντιοξειδωτική δράση, ακόμη και αν οι συγκεντρώσεις της ένωσης μειώθηκαν, καθώς τότε τα ίδια τα προϊόντα αποδόμησης έχουν αντιοξειδωτική δράση. Σε όλες τις χρησιμοποιούμενες αντιοξειδωτικές δοκιμασίες η αναλογία 2:1 ασκορβικού οξέος και 5-καφεοϋλκινικού οξέος παρουσία σιδήρου είχε ισχυρά συνεργιστικά αποτελέσματα, ενώ η αναλογία 1:2 είχε ισχυρά ανταγωνιστικά αποτελέσματα. Ο προ-οξειδωτικός σίδηρος επηρέασε θετικά την αντιοξειδωτική δράση σε συνδυασμό με τα χρησιμοποιούμενα αντιοξειδωτικά, ενώ ο ίδιος ο σίδηρος αλληλεπιδρούσε με κοινές in vitro δοκιμές για τη συνολική αντιοξειδωτική δράση. Αυτά τα αποτελέσματα δείχνουν ότι η αντιοξειδωτική δράση των ενώσεων επηρεάζεται από παράγοντες όπως η αλληλεπίδραση με άλλα μόρια, η θερμοκρασία και τα μεταλλικά στοιχεία που υπάρχουν.

Λέξεις-κλειδιά: ABTS; ανταγωνισμός;ασκορβικό οξύ;βιοδραστικές ενώσεις;5-καφεοϋλοκινικό οξύ; Χηλικά σύμπλοκα; Σίδηρος σίδηρος? σίδηρος σιδήρου;HPLC; συνέργεια κουερσετίνης-3-ρουτινοσίδης. TPC

Κάντε κλικ εδώ για να λάβετε περισσότερες πληροφορίες

flavonoids antioxidant

1. Εισαγωγή

Στην ανθρώπινη διατροφή, πολλά διαφορετικά φυτικά προϊόντα καταναλώνονται κατά τη διάρκεια της ημέρας, ακόμη και στο ίδιο γεύμα. Τα φρούτα και τα λαχανικά συνδέονται με διάφορα οφέλη για την υγεία, λόγω της ποικιλίας των βιοδραστικών τους ενώσεων, π.χ. βιταμινών, μετάλλων και δευτερογενών φυτικών μεταβολιτών |1]. Σε σύγκριση με τις βιταμίνες και τα μέταλλα, οι δευτερογενείς μεταβολίτες των φυτών, όπως τα φαινολικά, δεν θεωρούνται απαραίτητοι για την ανθρώπινη υγεία από τις σημερινές γνώσεις[2]. Ωστόσο, πολλοί δευτερογενείς φυτικοί μεταβολίτες είναι ισχυρά αντιοξειδωτικά, τα οποία βοηθούν στην προστασία των βιολογικών συστημάτων από αντιδραστικά είδη οξυγόνου (ROS) και αντιδρώντα είδη αζώτου (RNS)[3]. Αυτές οι βιοδραστικές ενώσεις μπορούν να αλληλεπιδράσουν μεταξύ τους πριν από την κατανάλωση, με αποτέλεσμα πολλά επόμενα προϊόντα αντίδρασης ή σύμπλοκα. Κατά συνέπεια, η συμβολή τους στην υγεία των καταναλωτών και η αντιοξειδωτική τους δράση (AOA) μπορεί να αλλοιωθεί 4| ή χάνονται πριν από την πρόσληψη τροφής. Οι διαφορετικές μοριακές δομές των ενώσεων και οι διαφορετικοί συνδυασμοί τους μπορούν να οδηγήσουν σε πρόσθετα, συνεργιστικά ή ακόμα και ανταγωνιστικά αποτελέσματα μέσω αλληλεπιδράσεων. Οι επιδράσεις των αλληλεπιδράσεων μεταξύ των συστατικών των φυτών στην ικανότητα δέσμευσης ριζών δεν είναι ακόμη πλήρως κατανοητές, ειδικά λόγω των πολλών διαφορετικών σταδίων οξείδωσης και της ικανότητάς τους να δημιουργούν σύμπλοκα. Μια κύρια βιοδραστική ένωση, που βρίσκεται σε πολλά είδη φυτών, είναι το 5-καφεοϋλοκινικό οξύ (χλωρογενικό οξύ), ένας εστέρας του υδροξυκινναμικού οξέος του καφεϊκού οξέος και του κινικού οξέος. Μπορεί να σχηματίσει σύμπλοκα τρισθενούς σιδήρου, τα οποία γενικά σχετίζονται με μειωμένη απορρόφηση του μη αιμικού σιδήρου στον άνθρωπο[5,6]. Ο σίδηρος, ως συστατικό της αιμοσφαιρίνης, είναι απαραίτητο μέταλλο για τον ανθρώπινο οργανισμό, ενώ η περίσσεια σιδήρου μπορεί να προκαλέσει οξειδωτικό στρες στα κύτταρα [7]. Οι αλληλεπιδράσεις με άλλα θρεπτικά συστατικά μπορούν να αυξήσουν ή να μειώσουν την απορρόφηση του σιδήρου, για παράδειγμα, σχηματίζοντας σύμπλοκα. Επιπλέον, ο σίδηρος έχει την ικανότητα να δέχεται και να δίνει ηλεκτρόνια εύκολα.

Μια άλλη ενδιαφέρουσα βιοδραστική ένωση στα φυτά είναικουερσετίνη-3-ρουτινοσίδη(ρουτίνη), αφλαβονοειδές γλυκοσίδιο, το οποίο συντίθεται κυρίως από τα φυτά για να προστατευθούν από την υπεριώδη ακτινοβολία [8,9]. Έχει χαμηλή υδατική διαλυτότητα [10] και δεν μπορεί να εισέλθει απευθείας στην κυκλοφορία του αίματος του ανθρώπου, επομένως η βιοδραστική του δραστηριότητα αρχίζει μόνο έξι έως εννέα ώρες μετά την κατανάλωση, όταν περνά από το μικροβίωμα του εντέρου. Στα συμπληρώματα διατροφής, η κερκετίνη-3-ρουτινοσίδη συχνά συνδυάζεται με ασκορβικό οξύ [11].Ασκορβικό οξύείναι μια απαραίτητη βιταμίνη για τον ανθρώπινο οργανισμό και είναι απαραίτητη σε πολλές μεταβολικές διεργασίες. Είναι επίσης ένα ισχυρό υδατοδιαλυτό αντιοξειδωτικό, αλλά μπορεί επίσης να δράσει ως προοξειδωτικό, γεγονός που οφείλεται στην ικανότητά του να μειώνει τον σίδηρο σιδήρου μέσω σχηματισμού χηλικού συμπλόκου, ακολουθούμενο από τον μετασχηματισμό του δισθενούς σιδήρου και μιας ασκορβικής ρίζας[12]. Βρέθηκε αυξημένη απορρόφηση στο ανθρώπινο σώμα των βιοδραστικών ενώσεων κερκετίνη-3-ρουτινοσίδη, 5-καφεοϋλκινικό οξύ ή σίδηρος με την προσθήκη ασκορβικού οξέος [12], ενώ το 5-καφεοϋλοκινικό οξύ μείωσε την απορρόφηση σιδήρου με συμπλοκοποίηση [6]. Για την πρόβλεψη των οφελών για την υγεία διαφορετικών προϊόντων, όσον αφορά τις βιοδραστικές ενώσεις, χρησιμοποιούνται συνήθως in vitro αντιοξειδωτικές δοκιμασίες. Αυτή η πρόβλεψη των επιπτώσεων στην υγεία είναι περιορισμένη λόγω της μεταβλητής βιοδιαθεσιμότητας των ενώσεων, του μεταβολισμού και των διαφορετικών αντιοξειδωτικών μηχανισμών|13]. Ωστόσο, αυτές οι δοκιμασίες εξακολουθούν να είναι χρήσιμες για τη δοκιμή βιοδραστικών ενώσεων, όπως οι πολυφαινόλες, ή, όπως σε αυτή τη μελέτη, για την αξιολόγηση της ΑΟΑ μεμονωμένων ενώσεων και των αλληλεπιδράσεων τους. Τα φρούτα και τα λαχανικά περιέχουν ένα ποικίλο σύνολο βιοδραστικών ενώσεων, οι οποίες μπορούν να σχηματίσουν σύμπλοκα με άλλες ενώσεις και πρωτεΐνες που μπορούν να αλληλεπιδράσουν μαζί τους. Αυτές οι αλληλεπιδράσεις μπορούν να επηρεάσουν τη συμπεριφορά των ενώσεων και την προκύπτουσα ΑΟΑ. Ωστόσο, αυτή η εργασία προορίζεται να συμβάλει στη γνώση του τρόπου με τον οποίο οι βιοδραστικές ενώσεις αλληλεπιδρούν μεταξύ τους και τον αντίκτυπό τους στο AOA. Η καινοτομία αυτής της μελέτης είναι οι αλληλεπιδράσεις κοινών φαινολικών ενώσεων, συγκεκριμένα ασκορβικού οξέος, 5-καφεοϋλκινικού οξέος, κερκετίνης-3-ρουτινοσίδης, μεταξύ τους και του ορυκτού σιδήρου προ και μετα-θερμική επεξεργασία. Πριν από αυτή τη μελέτη, αυτοί οι παράγοντες αξιολογήθηκαν χωριστά, όχι σε συνδυασμό. Η εστίαση εστιάστηκε στο AOA και στην ικανότητά του να κατασκευάζει συγκροτήματα. Οι υποθέσεις ήταν (1) η θερμική επεξεργασία επηρεάζει αρνητικά το AOA λόγω αποικοδόμησης των αντιοξειδωτικών, (2) μίγματα σε διαφορετικές αναλογίες ασκορβικού οξέος, 5-καφεοϋλκινικού οξέος και κερκετίνης-3-ρουτινοσίδης οδηγούν σε συνεργιστική δράση επίδραση σχετικά με το AOA, και (3) η προσθήκη του ορυκτού και του προοξειδωτικού σιδήρου θα μειώσει την αντιοξειδωτική δράση των αντιοξειδωτικών μόνα τους ή σε μείγματα.

flavonoids clear free radicals

2. Αποτελέσματα

2.1.Επίδραση της θερμικής επεξεργασίας στην αντιοξειδωτική δράση του ασκορβικού οξέος,5-καφεοϋλκινικού οξέος και κερκετίνης-3-Πρότυπα ρουτινοσίδης και ο ορυκτός σίδηρος

Σε κανένα από τα καθαρά δείγματα ασκορβικού οξέος, 5-καφεοϋλοκινικό οξύ ήκουερσετίνη-3-ρουτινοσίδη(Εικόνα 1) ή μείγματα αυτών (Εικόνες 2 και 3,) ήταν μια επίδραση των χρόνων μαγειρέματος μεταξύ 0 και 40 λεπτών στην παρατηρούμενη ΑΟΑ, εκτός από το συνδυασμό ασκορβικού οξέος και σιδήρου. Το AOA ήταν χαμηλότερο στις αναλύσεις TEAC και DPPH μετά από 40 λεπτά μαγειρέματος σε σύγκριση με τα άψητα δείγματα (Εικόνα 1). Τα δείγματα που περιέχουν ασκορβικό οξύ τείνουν να μειώνονται στο AOA τους, ενώ τα δείγματα που περιέχουν κερκετίνη-3-ρουτινοσίδη τείνουν να αυξάνουν το AOA τους με παρατεταμένο χρόνο μαγειρέματος (Εικόνες 1-3).

Influence of cooking time (0, 10, 20, and 40 min) on ascorbic acid (AsA; yellow), 5-caffeoylquinic acid (CQA; red), quercetin-3-rutinoside (Rutin; blue) with (solid lines) and without (dashed lines) iron (Fe) on antioxidant activity (AOA); standard deviation not shown. All samples were tested using (a) TEAC, (b) DPPH, and (c) TPC assays. Significant differences (p ≤ 0.05 by Tukey's HSD test (n = 3)) with different cooking times of the same substance and between samples with and without iron are marked with an asterisk *. Differences to 0 min cooked samples of the same substance are marked with a triangle ▲. Letters indicate differences between the three substances as mean values over all measured times and are comparable to results of the same test assay in Figures 2 and 3. In binary mixtures, detected by the TEAC assay (Figure 2a–c), iron led to a significant or trending increase in AOA. Among samples without iron, no differences between AOA of mixtures or ratios were found. In the presence of iron at a cooking time of 0 min, the ratios 1:1 and 1:2 of ascorbic acid and 5-caffeylquinic acid, and a 2:1 ratio of the 5- caffeylquinic acid and queretin-3-rutinoside mixture, were higher in their AOA than their iron-free counterparts. In the DPPH assay (Figure 2d–f), the combination of ascorbic acid with 5-caffeoylquinic acid, as well as with quercetin-3-rutinoside, showed in the presence of iron in all ratios a higher AOA than the AOA of pure ascorbic acid. However, ascorbic acid combined with quercetin-3-rutinoside showed a higher AOA in the absence of iron, being comparable to pure quercetin-3-rutinoside. In the TPC assay (Figure 2g–i), the AOA of all three binary mixtures showed identical patterns. There was no influence of iron or cooking time on AOA. These results correspond with previous findings in pure substances (Figure 1): the lowest AOA was detected in ascorbic acid and 5-caffeoylquinic acid mixtures, followed by ascorbic acid with quercetin-3-rutinoside, and the highest AOA was found in the combination of 5-caffeoylquinic acid and quercetin-3-rutinoside. Figure 1. Influence of cooking time (0, 10, 20, and 40 min) on ascorbic acid (AsA; yellow), 5-caffeoylquinic acid (CQA; red), quercetin-3-rutinoside (Rutin; blue) with (solid lines) and without (dashed lines) iron (Fe) on antioxidant activity (AOA); standard deviation not shown. All samples were tested using (a) TEAC, (b) DPPH, and (c) TPC assays. Significant differences (p ≤ 0.05 by Tukey's HSD test (n = 3)) with different cooking times of the same substance and between samples with and without iron are marked with an asterisk *. Differences to 0 min cooked samples of the same substance are marked with a triangle N . Letters indicate differences between the three substances as mean values over all measured times and are comparable to results of the same test assay in Figures 2 and 3.

Influence of cooking time (0, 10, 20, and 40 min) on binary mixtures of ascorbic acid (AsA), 5-caffeoylquinic acid (CQA), quercetin-3-rutinoside (Rutin) with (solid lines) and without (dashed lines) iron (Fe) on antioxidant activity (AOA); standard deviation not shown. All samples tested using (a–c) TEAC, (d–f) DPPH, and (g–i) TPC assays. Colors indicate the different mixing ratios: equimolar mixtures are yellow, 1:2 ratios are red, and 2:1 ratios are blue. Significant differences (p ≤ 0.05 by Tukey's HSD test (n = 3)) within different cooking times of the same substance and between samples with and without iron are marked with an asterisk *. Differences to 0 min cooked samples of the same substance are marked with a triangle ▲. Letters indicate differences between substance mixtures and ratios as mean values over all measured times and are comparable to results of the same test assay in Figures 1 and 3. In all ternary mixtures, no differences between ratios, regardless of the presence of iron, in TEAC and DPPH assays were found (Figure 3a–f). Higher AOAs were found in the TEAC assay (Figure 3a–c) in the presence of iron. At 0 min cooking time the AOAs of the equimolar mixture and the 1:2:1 ratio of ascorbic acid, 5-caffeoylquinic acid, and quercetin-3-rutinoside were higher in the presence of iron. The DPPH assay revealed higher Figure 2. Influence of cooking time (0, 10, 20, and 40 min) on binary mixtures of ascorbic acid (AsA), 5-caffeoylquinic acid (CQA), quercetin-3-rutinoside (Rutin) with (solid lines) and without (dashed lines) iron (Fe) on antioxidant activity (AOA); standard deviation not shown. All samples tested using (a–c) TEAC, (d–f) DPPH, and (g–i) TPC assays. Colors indicate the different mixing ratios: equimolar mixtures are yellow, 1:2 ratios are red, and 2:1 ratios are blue. Significant differences (p ≤ 0.05 by Tukey's HSD test (n = 3)) within different cooking times of the same substance and between samples with and without iron are marked with an asterisk *. Letters indicate differences between substance mixtures and ratios as mean values over all measured times and are comparable to results of the same test assay in Figures 1 and 3.

2.2. Επίδραση του σιδήρου και των διαφορετικών συνδυασμών ασκορβικού οξέος,5-καφεοϋλκινικού οξέος και κερκετίνης-3-Πρότυπα ρουτινοσίδης στην αντιοξειδωτική δράση

Οι αναλύσεις με μια δοκιμασία TEAC (Εικόνα la) έδειξαν ότι το AOA του καθαρού ασκορβικού οξέος ήταν χαμηλότερο από το AOA της κερκετίνης{{0}}ρουτινοσίδης. Παρουσία σιδήρου, το AOA του ασκορβικού οξέος ήταν ακόμη χαμηλότερο από το AOA της κερκετίνης-3-ρουτινοσίδης και5-καφεοϋλκινικού οξέος. Η προσθήκη σιδήρου αύξησε την ΑΟΑ της κερκετίνης-3-ρουτινοσίδης και του 5-καφεοϋλκινικού οξέος. Σε χρόνο μαγειρέματος 0λεπτών, μόνο το AOA του 5-καφεοϋλοκινικού οξέος ήταν υψηλότερο παρουσία και απουσία σιδήρου. Η δοκιμασία DPPH (Εικόνα 1β) ανίχνευσε υψηλότερη AOA της κερκετίνης-3-ρουτινοσίδης απουσία σιδήρου σε σύγκριση με το 5-καφεοϋλκινικό οξύ και το ασκορβικό οξύ. Η παρουσία σιδήρου οδήγησε σε αύξηση του AOA για το 5-καφεοϋλκινικό οξύ και ένα AOA μειώνεται για τα δείγματα κερκετίνης-3-ρουτινοσίδης. Στο χρόνο μαγειρέματος 0 λεπτά, μόνο η κουερσετίνη-3-ρουτινοσίδη ήταν υψηλότερη απουσία σιδήρου από ότι παρουσία σιδήρου. Μόνο στον προσδιορισμό TPC (Εικόνα lc), ο σίδηρος δεν επηρέασε την ΑΟΑ και η σειρά των τριών ουσιών παρέμεινε η ίδια.

Σε δυαδικά μείγματα, που ανιχνεύθηκαν με τη δοκιμασία TEAC (Εικόνα 2a-c), ο σίδηρος οδήγησε σε σημαντική ή τάση αύξησης του AOA. Μεταξύ των δειγμάτων χωρίς σίδηρο, δεν βρέθηκαν διαφορές μεταξύ AOA μειγμάτων ή αναλογιών. Παρουσία σιδήρου σε χρόνο μαγειρέματος 0 λεπτών, οι αναλογίες 1:1 και 1:2 ασκορβικού οξέος και 5-καφεοϋλκινικού οξέος και αναλογία 2:1 του {{10} Το μίγμα }καφεοϋλκινικού οξέος και κερκετίνης-3-ρουτινοσίδης ήταν υψηλότερα στο AOA από τα αντίστοιχα χωρίς σίδηρο. Στη δοκιμασία DPPH (Εικόνα 2δ-στ), ο συνδυασμός ασκορβικού οξέος με 5-καφεοϋλοκινικό οξύ, καθώς και με κουερσετίνη-3-ρουτινοσίδη, έδειξε παρουσία σιδήρου σε όλες τις αναλογίες υψηλότερη ΑΟΑ από το ΑΟΑ του καθαρού ασκορβικού οξέος. Ωστόσο, το ασκορβικό οξύ σε συνδυασμό με τη ρουτινοσίδη της κερκετίνης-3-εμφάνισε υψηλότερο AOA απουσία σιδήρου, συγκρίσιμο με την καθαρή κουερσετίνη-3-ρουτινοσίδη. Στον προσδιορισμό TPC (Σχήμα 2g-i), το AOA και των τριών δυαδικών μιγμάτων έδειξε πανομοιότυπα σχέδια. Δεν υπήρχε επίδραση του σιδήρου ή του χρόνου μαγειρέματος στο AOA. Αυτά τα αποτελέσματα αντιστοιχούν με προηγούμενα ευρήματα σε καθαρές ουσίες (Εικόνα 1): το χαμηλότερο AOA ανιχνεύθηκε σε μείγματα ασκορβικού οξέος και 5-καφεοϋλκινικού οξέος, ακολουθούμενο από ασκορβικό οξύ με ρουτινοσίδη κερκετίνης{{23} και το υψηλότερο AOA ήταν βρίσκεται στον συνδυασμό 5-καφεοϋλκινικού οξέος και κερκετίνης-3-ρουτινοσίδης.

Σε όλα τα τριμερή μείγματα, δεν βρέθηκαν διαφορές μεταξύ των αναλογιών, ανεξάρτητα από την παρουσία σιδήρου, στις δοκιμές TEAC και DPPH (Εικόνα 3a-f). Υψηλότερα AOAs βρέθηκαν στον προσδιορισμό TEAC (Εικόνα 3a-c) παρουσία σιδήρου. Σε 0λεπτό χρόνο μαγειρέματος, τα AOA του ισομοριακού μείγματος και η αναλογία 1:2:1 ασκορβικού οξέος,5-καφεοϋλκινικού οξέος και ρουτινοσίδης κερκετίνης-3- ήταν υψηλότερα παρουσία σιδήρου . Ο προσδιορισμός DPPH αποκάλυψε υψηλότερη ΑΟΑ σε δείγματα με σίδηρο για την αναλογία 1:2:1 (Εικόνα 3e). Σύμφωνα με τα δυαδικά μείγματα, ο προσδιορισμός TPC δεν επηρεάστηκε ούτε από τον σίδηρο ούτε από τον χρόνο μαγειρέματος (Εικόνα 3g-i). Επιπλέον, το ισομοριακό μίγμα απουσία σιδήρου είχε χαμηλότερο ΑΟΑ από την αναλογία 1:2:2. Σε μη ισομοριακά μείγματα με μία διπλασιασμένη ένωση, η αναλογία 1:1:2 ήταν υψηλότερη στο AOA σε σύγκριση με την αναλογία 2:1:1 (Εικόνα 3h) και στο μη ισομοριακό με δύο διπλασιασμένες ενώσεις, το 1:2: Η αναλογία 2 ήταν υψηλότερη στην ΑΟΑ σε σύγκριση με την αναλογία 2:1:2 και 2:2:1 (Εικόνα 3i) παρουσία και απουσία σιδήρου.

Influence of cooking time (0, 10, 20, and 40 min) on ternary mixtures of ascorbic acid (AsA), 5-caffeoylquinic acid (CQA), quercetin-3-rutinoside (Rutin) with (solid lines) and without (dashed lines) iron (Fe) on AOA; standard deviation not shown. All samples tested using (a–c) TEAC, (d–f) DPPH, and (g–i) TPC assays. Colors indicate different mixing ratios. Significant differences (p ≤ 0.05 by Tukey's HSD test (n = 3)) with different exposure times of the same substance and between samples with and without iron are marked with an asterisk *. Letters indicate differences between substance mixtures and ratios as mean values over all measured times and are comparable to results of the same test assay in Figures 1 and 2.

1flavonoids antioxidant

2.3. Συνεργικές και Ανταγωνιστικές Επιδράσεις της Αντιοξειδωτικής Δράσης

Όλες οι δοκιμασίες έδειξαν κυρίως ασθενή συνεργιστικά και ανταγωνιστικά αποτελέσματα με αλληλεπιδράσεις κάτω από 10 τοις εκατό (Εικόνα 4). Αξίζει να σημειωθεί, μεταξύ όλων των χρησιμοποιημένων δοκιμασιών, η αναλογία 2:1 ασκορβικού οξέος και 5-καφεοϋλκινικού οξέος παρουσία σιδήρου είχε ισχυρά συνεργιστικά αποτελέσματα, ενώ η αναλογία 1:2 ασκορβικού οξέος και 5-καφεοϋλκινικού οξέος οξύ είχε ισχυρά ανταγωνιστικά αποτελέσματα. Στη δοκιμασία TPC, αυτά τα φαινόμενα εμφανίστηκαν επίσης σε μείγματα χωρίς σίδηρο. Στον προσδιορισμό DPPH, ανιχνεύθηκε ένα άλλο ισχυρό ανταγωνιστικό αποτέλεσμα σε όλες τις αναλογίες δυαδικών μιγμάτων χωρίς 5-καφεοϋλκινικό οξύ και κερκετίνη-3-ρουτινοσίδη που περιέχουν σίδηρο (Εικόνα 4β). Για μίγματα τριμερούς ασκορβικού οξέος, 5-καφεοϋλκινικού οξέος και κερκετίνης-3-ρουτινοσίδης, η ανάλυση TEAC έδειξε ισχυρά ανταγωνιστικά αποτελέσματα για την αναλογία 2:2:1 με τον σίδηρο (Εικόνα 4α). Σε τριμερή μείγματα με σίδηρο, η ανάλυση DPPH αποκάλυψε ισχυρές ανταγωνιστικές επιδράσεις σε μαγειρεμένα δείγματα σε αναλογίες 1:2:1,1:1:2,2:1:1 και 2:2:1, καθώς και σε μείγματα χωρίς σίδηρο. στις αναλογίες 1:1:2, 1:2:2 και 2:1:1 (Εικόνα 4β). Η ανάλυση TPC εμφάνισε ισχυρά συνεργιστικά αποτελέσματα σε μείγματα χωρίς σίδηρο σε αναλογία 1:2:1 (Εικόνα 4γ).

demostraction as the chart

2.4.Σύνολο και λογική σίδηρο

Ο ιονικός σίδηρος προστέθηκε ως ισομοριακό μείγμα 50 τοις εκατό τρισθενούς σιδήρου (Fe3 plus ) και 50 τοις εκατό σιδήρου (Fe2 plus ) στα προαναφερθέντα καθαρά, δυαδικά και τριμερή μείγματα. Σε όλα τα δείγματα, η αναλογία τρισθενούς σιδήρου μετατοπίστηκε προς το σίδηρο σε σύγκριση με την αρχικά προστιθέμενη ισομοριακή αναλογία. Όποτε υπήρχε ασκορβικό οξύ στα δείγματα, ο δεσμευμένος σίδηρος μειώθηκε με το χρόνο μαγειρέματος και στη συνέχεια εξαφανίστηκε ή σταθεροποιήθηκε (Πίνακας 1). Μια συσχέτιση Pearson στα δεδομένα της ανάλυσης TEAC αποκάλυψε μια ισχυρή αρνητική συσχέτιση (-0.641, p Λιγότερο ή ίσο με 2,2*10-16) μεταξύ του AOA και των ιόντων σιδήρου, και μια θετική συσχέτιση μεταξύ AOA και σίδηρος σιδήρου (0,377, p<4.1*10-)over all="" samples.="" furthermore,="" the="" dpph="" assay="" showed="" a="" negative="" correlation="" (-0.429,p≤1.3*10-1l)="" between="" aoa="" and="" ferrous="" iron="" ions.="" meanwhile,="" aoa="" and="" ferric="" iron="" ions="" were="" only="" weakly=""><0.0006).in the="" tpcassay,="" aoa="" and="" ferrous="" iron="" ions="" were="" strongly="" negatively="" correlated="" (-0.772,="" p=""><2.2*10-16), and="" aoa="" and="" ferric="" iron="" ions="" were="" strongly="" positively="" correlated="" (0.685,=""><>

Measured ionic iron species, ferric iron (Fe3+) and ferrous iron (Fe2+), and calculated bound iron after mixing with ascorbic acid, 5-caffeoylquinic acid, and quercetin-3-rutinoside, and cooking for 0, 10, 20, and 40 min with equimolar concentrations of ferrous and ferric iron in percent; traces ≤ 5%

Σε δείγματα καθαρού ασκορβικού οξέος, μόνο ίχνη τρισθενούς σιδήρου ήταν ανιχνεύσιμα, ανεξάρτητα από το χρόνο μαγειρέματος. Επιπλέον, η ποσότητα του σιδήρου αυξήθηκε, ενώ ο δεσμευμένος σίδηρος μειώθηκε σε όλα τα δείγματα ασκορβικού οξέος μετά το μαγείρεμα. Σε δείγματα 5-καφεοϋλκινικού οξέος, ο σίδηρος σιδήρου μειώθηκε κατά 13,3 τοις εκατό μετά από 40 λεπτά θερμικής επεξεργασίας, ενώ ταυτόχρονα ο σίδηρος σίδηρος αυξήθηκε ελαφρά. Τα δείγματα ρουτινοσίδης κουερκετίνης-3-με σίδηρο οδήγησαν σε σχεδόν σταθερή ποσότητα σιδηρούχο σίδηρο. Το δεσμευμένο σίδηρο αυξήθηκε με τον παρατεταμένο χρόνο μαγειρέματος, ενώ ο σίδηρος σιδήρου μειώθηκε κατά 20,49 τοις εκατό μετά από 40 λεπτά μαγειρέματος (Πίνακας 1).

Παρουσία ασκορβικού οξέος, 0 λεπτά μαγειρεμένα δυαδικά δείγματα περιείχαν μεταξύ 18,9 τοις εκατό και 28,9 τοις εκατό δεσμευμένο σίδηρο, ο οποίος αποδεσμεύτηκε με το μαγείρεμα. Ο δεσμευμένος σίδηρος βρέθηκε σε δυαδικά μείγματα μετά από 20 και 40 λεπτά μαγειρέματος μόνο όταν απουσίαζε το ασκορβικό οξύ. Μείγματα ασκορβικού οξέος και 5-καφεοϋλκινικού οξέος περιείχαν υψηλότερη ποσότητα σιδήρου από τους συνδυασμούς ασκορβικού οξέος και κερκετίνης-3-ρουτινοσίδης. Ο συνδυασμός 5-καφεοϋλκινικού οξέος και κουερσετίνης-3-ρουτινοσίδης σε όλες τις αναλογίες έδειξε παρόμοια μοτίβα, ο σίδηρος σίδηρος αυξήθηκε ελαφρά και ο σίδηρος σίδηρος μειώθηκε με παρατεταμένο χρόνο μαγειρέματος. Σε αυτό το μείγμα βρέθηκε δεσμευμένος σίδηρος μόνο μετά από 20 και 40 λεπτά μαγειρέματος (Πίνακας 2).

Measured ionic iron species, ferric iron (Fe3+) and ferrous iron (Fe2+), and calculated bound iron after mixing with the double standard mixtures of ascorbic acid (AsA), 5-caffeoylquinic (CQA), and quercetin-3-rutinoside (Rutin), and cooking for 0, 10, 20, and 40 min with equimolar concentrations of ferrous and ferric iron in percent; traces ≤ 5%.

Στα τριμερή μείγματα, η ποσότητα του δισθενούς σιδήρου ήταν υψηλότερη και η ποσότητα του σιδήρου χαμηλότερη, από τις αρχικές ισομοριακές συγκεντρώσεις του καθενός. Η συνολική υψηλότερη περιεκτικότητα σε δισθενή σίδηρο βρέθηκε στα δείγματα όταν η συγκέντρωση ασκορβικού οξέος διπλασιάστηκε (αναλογίες 2:1:1, 2:1:1, 2:2:1). Η διαδικασία μαγειρέματος αύξησε περαιτέρω την ποσότητα δισθενούς σιδήρου και σιδήρου, ενώ ο δεσμευμένος σίδηρος μειώθηκε (Πίνακας 3).

Measured ionic iron species, ferric iron (Fe3+) and ferrous iron (Fe2+), and calculated bound iron after mixing with the ternary standard mixtures of ascorbic acid (AsA), 5-caffeoylquinic (CQA), and quercetin-3-rutinoside (Rutin), and cooking for 0, 10, 20, and 40 min with equimolar concentrations of ferrous and ferric iron in percent; traces ≤ 5 %

2.5. Ποιοτική και ποσοτική ανάλυση των μιγμάτων ουσιών με HPLC

Τα δεδομένα HPLC έδειξαν ότι σε όλα τα μαγειρεμένα δείγματα 0 λεπτά, παρουσία και απουσία σιδήρου, υπήρχαν μόνο οι αρχικά εισαγόμενες ουσίες ασκορβικού οξέος, 5-καφεοϋλκινικού οξέος και κερκετίνης-3-ρουτινοσίδης (τα δεδομένα δεν εμφανίζονται). Μετά το μαγείρεμα για 40 λεπτά, δύο επιπλέον κορυφές (κορυφές 3 και 4) προήλθαν από ασκορβικό οξύ, ανεξάρτητα από την παρουσία σιδήρου (Εικόνα 5). Παρουσία σιδήρου, δύο νέα προϊόντα 5-καφεοϋλκινικού οξέος (κορυφές 6 και 7) και ένα από κουερσετίνη-3-ρουτινοσίδη (αιχμή 8) ανιχνεύθηκαν (Εικόνα 5β).

Απουσία σιδήρου, οι συγκεντρώσεις του ασκορβικού οξέος μειώθηκαν σε όλα τα μείγματα σε σχέση δόσης-απόκρισης από μια αρχική συγκέντρωση 0,3 mM μετά από 40 λεπτά μαγειρέματος στο 26,79 τοις εκατό της αρχικής συγκέντρωσης και με αρχικό 0.2 mM μεταξύ 44.08 τοις εκατό και 51,67 τοις εκατό , με αρχικό 0.15 mM μεταξύ 60,49 τοις εκατό και 65,47 τοις εκατό , με αρχικό 0,1 mM 77,84 τοις εκατό και 86,41 τοις εκατό και αυξάνεται έως και 90,05 τοις εκατό με ένα αρχικό 0,06 mM (Πίνακας S1).

Παρουσία σιδήρου, μόνο σε δείγματα καθαρού ασκορβικού οξέος, διαπιστώθηκε μείωση της συγκέντρωσης μετά από 40 λεπτά μαγειρέματος, όντας υψηλότερη σε σύγκριση με το δείγμα ασκορβικού οξέος χωρίς σίδηρο (Πίνακας S1). Σε αντίθεση με τα δείγματα ασκορβικού οξέος χωρίς σίδηρο, υψηλότερες συγκεντρώσεις ασκορβικού οξέος οδήγησαν σε υψηλότερους λόγους αποικοδόμησης (Πίνακας S1). Σε όλα τα δυαδικά μείγματα, μόνο οι συγκεντρώσεις ασκορβικού οξέος μειώθηκαν σε μαγειρεμένα δείγματα 0 λεπτών. Μετά από 40 λεπτά μαγειρέματος, διαπιστώθηκε μείωση της συγκέντρωσης του 5-καφεοϋλοκινικού οξέος ή της κερκετίνης-3-ρουτινοσίδης όταν συνδυάστηκε με ασκορβικό οξύ. Και οι δύο ουσίες ελαχιστοποιούν τη μείωση της συγκέντρωσης του ασκορβικού οξέος. Οι υψηλότερες συγκεντρώσεις 5-καφεοϋλκινικού οξέος οδήγησαν στην ελαχιστοποίηση της αποικοδόμησης του ασκορβικού οξέος. Σε δυαδικά μείγματα 5-καφεοϋλκινικού οξέος και ρουτινοσίδης κερκετίνης-3-, το 5-καφεοϋλκινικό οξύ μειώθηκε στη συγκέντρωσή του, ενώ η κερκετίνη-3-ρουτινοσίδη παρέμεινε σταθερή μετά από 40 λεπτά μαγειρέματος. Σε τριμερή μείγματα, η ρουτινοσίδη της κερκετίνης-3-παρέμεινε σταθερή μετά από 40 λεπτά μαγειρέματος, ενώ οι συγκεντρώσεις ασκορβικού οξέος και 5-καφεοϋλκινικού οξέος μειώθηκαν.

HPLC-DAD chromatograms of the 1:1:1 ratio of ascorbic acid, 5-caffeoylquinic acid, and quercetin-3-rutinoside (a) after 40 min cooking in the absence of iron, and (b) after 40 min cooking in the presence of iron. 1: ascorbic acid, 2: insert peak, 3: ascorbic acid derivate, 4: ascorbic acid derivate, 5: 5-caffeoylquinic acid, 6: caffeic acid; 7: 5-caffeoylquinic acid derivate, 8: quercetin-3-rutinoside derivate, 9: quercetin-3-rutinoside, 10: impurity of the quercetin-3-rutinoside standard

Cistanche extract

Για περισσότερες πληροφορίες, κάντε κλικ στον παρακάτω σύνδεσμο για το μέρος 2:
https://www.xjcistanche.com/news/part2-interactions-of-ascorbic-acid-5-caffeo-54918073.html


Μπορεί επίσης να σας αρέσει