Μέρος 3: Echinacoside που απομονώθηκε από το Cistanche Tubulosa Υποθετικά διεγείρει την έκκριση αυξητικής ορμόνης μέσω ενεργοποίησης του υποδοχέα γκρελίνης
Mar 06, 2022
Η εχινακοσίδη που απομονώθηκε από το σωληνάριο Cistanche υποθετικά διεγείρει την έκκριση αυξητικής ορμόνης μέσω ενεργοποίησης του υποδοχέα γκρελίνης
Chieh-Ju Wu 1, Mei-Yin Chien 2, Nan-Hei Lin 1, Yi-Chiao Lin 1, Wen-Ying Chen 3, Chao-Hsiang Chen 2,4,* και Jason TC Tzen 1,*
1 Μεταπτυχιακό Ινστιτούτο Βιοτεχνολογίας, Εθνικό Πανεπιστήμιο Chung-Hsing, Taichung 402, Ταϊβάν. baby159357520@gmail.com (C.-JW); CMNHEI@mohw.gov.tw (N.-HL); s9755702@gmail.com (Y.-CL)
2 Ko Da Pharmaceutical Co. Ltd., Taoyuan 324, Taiwan; rd1@koda.com.tw
3 Τμήμα Κτηνιατρικής, Εθνικό Πανεπιστήμιο Chung-Hsing, Taichung 402, Taiwan; wychen@dragon.nchu.edu.tw
4 Graduate Institute of Pharmacognosy, Taipei Medical University, Taipei 110, Taiwan
* Αλληλογραφία: gm@koda.com.tw (C.-HC); TCTZEN@dragon.nchu.edu.tw (JTCT); Τηλ.: συν 886-4-22840328 (εσωτ. 776) (JTCT); Φαξ: συν 886-4-22853527 (JTCT)
Ακαδημαϊκή επιμέλεια: Pinarosa Avato
Λήψη: 22 Ιανουαρίου 2019; Αποδοχή: 14 Φεβρουαρίου 2019; Δημοσιεύθηκε: 17 Φεβρουαρίου 2019
Επικοινωνία:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791
Αφηρημένη:Cistancheείδος, το ginseng της ερήμου, έχει καταγραφεί ότι διαθέτει πολλές βιολογικές δραστηριότητες στην παραδοσιακή κινεζική φαρμακοποιία και έχει χρησιμοποιηθεί ως αντιγηραντικό φάρμακο. Τρεις γλυκοζίτες φαινυλαιθανοειδών—εχινακοσίδη, τουμπουλοσίδη Α και ακτεοσίδη—ανιχνεύθηκαν στο υδατικό εκχύλισμα τουCistanche σωληνοειδής(Schenk) R. Wight και το κύριο συστατικό,εχινακοσίδη, καθαρίστηκε περαιτέρω.Εχινακοσίδησυγκέντρωσης υψηλότερη από 10_6 M εμφάνισε σημαντική δραστηριότητα για τη διέγερση της έκκρισης αυξητικής ορμόνης των κυττάρων της υπόφυσης αρουραίου. Παρόμοια με την ορμόνη απελευθέρωσης αυξητικής ορμόνης-6, ένα συνθετικό ανάλογο της γκρελίνης, η διέγερση της έκκρισης της αυξητικής ορμόνης από την εχινακοσίδη αναστέλλεται από την [D-Arg1, D-Phe5, D-Trp7,9, Leu11]-ουσία P , ένας αντίστροφος αγωνιστής του υποδοχέα γκρελίνης. Η μοριακή μοντελοποίηση έδειξε ότι και οι τρεις φαινυλαιθανοειδείς γλυκοσίδες αλληλεπιδρούν επαρκώς με τον θύλακα δέσμευσης του υποδοχέα γκρελίνης και η εχινακοσίδη εμφάνισε ελαφρώς καλύτερη αλληλεπίδραση με τον υποδοχέα από ότι η τουμπουλοσίδη Α και η ακτεοσίδη. Τα αποτελέσματα υποδεικνύουν ότι οι φαινυλαιθανοειδείς γλυκοσίδες, ιδιαίτερα η εχινακοσίδη, είναι ενεργά συστατικά που θεωρούνται υπεύθυνα για τις αντιγηραντικές επιδράσεις του C. tubulosa και μπορεί να θεωρηθεί ότι αναπτύσσονται ως μη πεπτιδυλικά ανάλογα της γκρελίνης.
Λέξεις-κλειδιά: κιστανάκιTubulosa;εχινακοσίδη; γκρελίνη; έκκριση αυξητικής ορμόνης?φαινυλαιθανοειδέςγλυκοσίδες
εχινακοσίδησεκιστανάκιέχει πολλά αποτελέσματα
Κάντε κλικ εδώ για το Μέρος 2
4. Υλικά και Μέθοδοι
4.1. Χημικά και Φυτικά Υλικά
CistancheΤο deserticola YC Ma ελήφθη από μια τοπική αγορά και πιστοποιήθηκε από τον Dr. Nan-Hei Lin.Cistanchetubulosa (Schenk) R. Wight αγοράστηκε από την Sinopharm Tian-Li Pharmaceutical Co., Ltd., (Hangzhou, Κίνα). Ακετονιτρίλιο ποιότητας HPLC, μυρμηκικό οξύ και μεθανόλη αγοράστηκαν από την ECHO Chemical Co., Ltd, (Miaoli, Taiwan). Το τροποποιημένο μέσο Eagle της Dulbecco (DMEM), ο εμβρυϊκός ορός βοοειδών που υποβάλλεται σε διαπίδυση (DFBS) και η Trypsin-EDTA αγοράστηκαν από την Invitrogen (Carlsbad, CA, USA). DNase Αγόρασα από την Worthington Biochemical (Lakewood, NJ, ΗΠΑ). Η ορμόνη απελευθέρωσης αυξητικής ορμόνης-6 (GHRP-6) ελήφθη από την Gen Way Biotech, Inc. (Σαν Ντιέγκο, Καλιφόρνια, ΗΠΑ). Η κολλαγενάση τύπου Ι και η [D-Arg1, D-Phe5, D-Trp7,9, Leu11]-ουσία Ρ αγοράστηκαν από τη Sigma-Aldrich Co. (St. Louis, ΜΟ, ΗΠΑ). Το κιτ ELISA αυξητικής ορμόνης αρουραίου αγοράστηκε από την Sunred Biological Technology Corporation (Σαγκάη, Κίνα).
4.2. HPLC/UV και LC{2}}MSn Analyses of the Water Extraction of Cistanche spp.
Αποξηραμένο στέλεχος (25 g) απόCistanchedeserticola YC Ma ήCistanchetubulosa (Schenk) R εκχυλίστηκε τρεις φορές με 500 mL απεσταγμένου νερού για 60 λεπτά στους 50 βαθμούς σε λουτρό νερού. Το διάλυμα διηθήθηκε μέσω συριακού φίλτρου 13 mm με φίλτρο μεμβράνης PP 0,45 um (Pall Corporation, Glen Cove, Νέα Υόρκη, ΗΠΑ) και υποβλήθηκε στις ακόλουθες αναλύσεις. Τα χημικά συστατικά στα εκχυλίσματα αναλύθηκαν
χρησιμοποιώντας μια στήλη Syncronis C18 (4,6 × 250 mm εσωτερική διάμετρος, 5 um, Thermo Scientific, Waltham, MA, USA) στο σύστημα HPLC σε συνδυασμό με έναν ανιχνευτή διάταξης φωτοδιόδου μοντέλου 600E (Waters Corporation,
Milford, MA, ΗΠΑ). Η κινητή φάση αποτελούνταν από (Α) νερό που περιείχε {{0}}.1 τοις εκατό μυρμηκικό οξύ και (Β) ακετονιτρίλιο. Η βαθμίδα έκλουσης ήταν η εξής: 0–60 λεπτά, γραμμική κλίση από 14 τοις εκατό Β. 0–3 λεπτά, 14 τοις εκατό έως 17 τοις εκατό B; 3–4 λεπτά, 17 τοις εκατό B; 4–15 λεπτά, 17 τοις εκατό έως 20 τοις εκατό B; 15–20 λεπτά, 20 τοις εκατό B; 20–50 λεπτά, 20 τοις εκατό έως 14 τοις εκατό B; 50–60
min, 14 τοις εκατό Β. Το μήκος κύματος ανίχνευσης απορρόφησης υπεριώδους (UV) ορίστηκε στα 330 nm. Ένα διαδοχικό φασματόμετρο μάζας γραμμικής τετραπολικής παγίδας (LTQ) (Thermo Electron, San Jose, CA, USA) εξοπλισμένο με διεπαφή ιονισμού ηλεκτροψεκασμού (ESI) συνδέθηκε σε σύστημα Surveyor LC (Thermo Electron)
με βρόχο δείγματος 5 uL. Η βαθμίδα έκλουσης ήταν η εξής: 0–90 min, γραμμική κλίση από 14 τοις εκατό B. 0–24 λεπτά, 14 τοις εκατό έως 17 τοις εκατό B; 24–25 λεπτά, 17 τοις εκατό B; 25–36 λεπτά, 17 τοις εκατό έως 20 τοις εκατό B; 36–37 λεπτά, 20 τοις εκατό B; 37–80 λεπτά,
20% to 14% B; 80–90 min, 14% B. The heated capillary temperature was set at 300℃ with a spray voltage of 4.5 kV. Negative ESI mode was firstly scanned ranging from m/z 400–1000. Data-dependent MSN was obtained using the high purity helium (>99,99 τοις εκατό) ως αέριο σύγκρουσης.
4.3. Απομόνωση εχινακοσίδης
Το υδατικό εκχύλισμα από το ξηρό στέλεχος (25 g) του C. tubulosa συμπυκνώθηκε υπό μειωμένη πίεση για να δώσει βαθύ καφέ σιρόπι. Η ακατέργαστη εκχύλιση εναιωρήθηκε με απεσταγμένο νερό και λυοφιλοποιήθηκε με ξηραντήρα ψύξης. Η σκόνη των 100 mg διαλύθηκε σε απεσταγμένο νερό των 5 mL και υποβλήθηκε σε καθαρισμό χρησιμοποιώντας στήλη Sephadex LH-20 (100 mL, GE Healthcare Bio-Sciences AB, Sweden) εκλούστηκε με 10 τοις εκατό υδατικό διάλυμα μεθανόλης και παρακολουθήθηκε με HPLC . Τα κλάσματα που περιείχαν εχινακοσίδη ανιχνεύθηκαν με ανάγνωση της απορρόφησης στα 245 nm και συλλέχθηκαν χρησιμοποιώντας έναν αυτόματο δειγματολήπτη.
4.4. Των ζώων
Τα πειράματα εγκρίθηκαν από την Επιτροπή Ιδρυματικής Φροντίδας και Χρήσης Ζώων του Εθνικού Πανεπιστημίου Chung_Hsing με τον αριθμό έγκρισης του IACUC 106-079. Αρσενικοί αρουραίοι Sprague_Dawley βάρους 250_300 g αγοράστηκαν από την BioLASCO, Taiwan Co., Ltd. (Taipei, Taiwan). Δύο ζώα ανά κλουβί διατηρήθηκαν σε ελεγχόμενο περιβάλλον 23 o2, 60 o 10 τοις εκατό υγρασία και 12 ώρες κύκλο φωτός/σκότους. Οι αρουραίοι τράφηκαν με μια τυπική δίαιτα τροφής (παρέχονταν θερμίδες
με 28,7 τοις εκατό πρωτεΐνη, 13,4 τοις εκατό λίπος και 57,9 τοις εκατό υδατάνθρακες, 5001 Rodent LabDiet, St. Louis, MO, ΗΠΑ) και απεσταγμένο νερό κατά βούληση.
4.5. Πρωτογενής καλλιέργεια κυττάρων υπόφυσης
Τα κύτταρα της υπόφυσης απομονώθηκαν σύμφωνα με μια τροποποιημένη μέθοδο ενζυματικής διασποράς που αναπτύχθηκε από τους Yamazaki et al. [29]. Εν συντομία, αρσενικοί αρουραίοι Sprague Dawley αναισθητοποιήθηκαν με Zoletil 50 (40 mg/kg, IP· Virbac Laboratories, Carros, Γαλλία) και οι πρόσθιοι αδένες της υπόφυσης αφαιρέθηκαν και διασκορπίστηκαν σε κύτταρα υπόφυσης σε εναιώρημα, όπως περιγράφηκε προηγουμένως [30].
4.6. Δοκιμασία Έκκρισης Αυξητικής Ορμόνης
Τα πρωτεύοντα πρόσθια κύτταρα της υπόφυσης 4 × 104 κύτταρα/φρεάτιο καλλιεργήθηκαν στους 37 βαθμούς κάτω από 5 τοις εκατό CO2 για 2 ημέρες πριν από τον προσδιορισμό έκκρισης αυξητικής ορμόνης σύμφωνα με το πρωτόκολλο που περιγράφηκε προηγουμένως [30].
Μετά την απομάκρυνση του μέσου καλλιέργειας, τα κύτταρα έμειναν ασιτία σε θρεπτικό μέσο Dulbecco's Modied Eagle (DMEM) χωρίς ορό για 90 λεπτά για να σταθεροποιηθεί η έκκριση βασικής ορμόνης. Το μέσο ασιτίας αντικαταστάθηκε με φρέσκο DMEM που περιέχει εχινακοσίδη (από 10_8 έως 10_5 M) ή GHRP-6 (αγωνιστής ενός ανθρώπινου υποδοχέα γκρελίνης, GHSR, 10_7 M) ως θετικός έλεγχος, και τα κύτταρα επωάστηκαν για 15 και 30 λεπτά στους 37 βαθμούς κάτω από 5 τοις εκατό CO2. Για ανίχνευση ανταγωνιστικού αποτελέσματος, τα κύτταρα επωάστηκαν με GHSR
αντίστροφος αγωνιστής, [D-Arg1, D-Phe5, D-Trp7,9, Leu11]-ουσία P (0.5 uM) και στη συνέχεια υποβλήθηκε σε αγωγή με DMEM που περιέχει εχινακοσίδη (10_5 M) ή GHRP-6 (10_7 M) για 30 λεπτά. Το μέσο συλλέχτηκε για
προσδιορισμός της έκκρισης αυξητικής ορμόνης από κιτ ELISA αυξητικής ορμόνης αρουραίου (Shanghai Sunred Biological Technology Corporation).
4.7. Στατιστική ανάλυση
Τα δεδομένα παρουσιάστηκαν ως μέσες τιμές o SD. Οι διαφορές αναλύθηκαν με T-Test. Οι στατιστικοί υπολογισμοί πραγματοποιήθηκαν από το GraphPad Prism 6 (GraphPad Software Inc., La Jolla, CA, USA). Ένα επίπεδο p < 0.05="" θεωρήθηκε="" στατιστικά="">
4.8. Μοντελοποίηση ομολογίας και προσάρτηση
Η μοντελοποίηση ομολογίας και η σύνδεση με έναν ανθρώπινο υποδοχέα γκρελίνης, τον υποδοχέα εκκριταγωγού αυξητικής ορμόνης (GHSR, αριθμός πρόσβασης AAI13548), καθιερώθηκε ακολουθώντας την προηγούμενη κατασκευή μας [21,24]. Εν συντομία, κρυσταλλικές δομές 1 και 2 αδρενεργικών υποδοχέων (PDB 2YCY και 3PDS) με δεσμευμένους συνδέτες, κυανοπινδολόλη και FAUC50 χρησιμοποιήθηκαν ως εκμαγεία για την κατασκευή της δομής GHSR [31,32]. Η δομή GHSR με τη χαμηλότερη συνολική ενέργεια PDF επιλέχθηκε για περαιτέρω σύνδεση με GHRP-6, εχινακοσίδη, τουμπουλοσίδη Α και ακτεοσίδη. Όλες οι διαδικασίες μοντελοποίησης πραγματοποιήθηκαν χρησιμοποιώντας την πλατφόρμα Discovery Studio 2.1 (http://accelrys.com/).
Η τρισδιάστατη δομή του GHRP-6 λήφθηκε από τη βάση δεδομένων σύνθετων Pub-Chem στον ιστότοπο του NCBI (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/). Οι τρισδιάστατες δομές του εχινακοσίδη, τουμπουλοσίδης Α και ακτεοσίδης κατασκευάστηκαν χρησιμοποιώντας το πρόγραμμα Chem3D (http://www.cambridgesoft.com/). Η θέση δέσμευσης συνδέτη του GHSR ορίστηκε ως ο σφαιρικός χώρος με ακτίνα 14 Α από το κέντρο του θύλακα σύνδεσης στην προσομοίωση σύνδεσης. Η προσάρτηση GHRP-6, εχινακοσίδης, τουμπουλοσίδης Α ή ακτεοσίδης στη θέση δέσμευσης του GHSR πραγματοποιήθηκε σε πυρίτιο χρησιμοποιώντας τη μονάδα LibDock στο πακέτο Discover Studio 2.1 και ελαχιστοποιήθηκε περαιτέρω με τον έξυπνο αλγόριθμο ελαχιστοποίησης με το πεδίο δύναμης CHARMm στο Ανακαλύψτε το πακέτο Studio 2.1 [33]. Για να συγκριθούν οι σχετικές συγγένειες δέσμευσης του εχινακοσίδη, τουμπουλοσίδης Α και ακτεοσίδης στο GHSR, η περιοχή του ενεργού κέντρου που κατασκευάστηκε με GHRP-6 στο GHSR χρησιμοποιήθηκε για τη σύνδεση και η ενέργεια δέσμευσης υπολογίστηκε από το GEMDOCK (The Institute of Bioinformatics , Εθνικό Πανεπιστήμιο Chiao Tung, Ταϊβάν).
Συνεισφορές συγγραφέα: Πειράματα σε ζώα, C.-JW, Y.-CL και W.-YC; Ταυτοποίηση και καθαρισμός: MY.C., N.-HL και C.-HC. Μοριακή μοντελοποίηση: C.-JW, Y.-CL και JTCT. Σχεδιασμός και συγγραφή έργου: C.-HC και JTCT
Χρηματοδότηση: Το έργο υποστηρίχθηκε εν μέρει από επιχορήγηση στον Jason TC Tzen του Εθνικού Πανεπιστημίου Chung-Hsing (NCHU-102D604).
Ευχαριστίες: Οι συγγραφείς ευχαριστούν τον Tian-Shun Weng που μοιράστηκε την επαγγελματική του εμπειρία στη χρήση των ειδών Cistanche.
Σύγκρουση συμφερόντων: Όλοι οι συγγραφείς δηλώνουν ότι δεν υπάρχει σύγκρουση συμφερόντων.
βιβλιογραφικές αναφορές
1. Wang, Τ.; Zhang, Χ.; Xie, W. Cistanche deserticola YC Ma, "Desert ginseng": Μια κριτική. Είμαι. J. Chin. Med. 2012,40, 1123–1141. [CrossRef] [PubMed]
2. Wang, Τ.; Chen, C.; Yang, Μ.; Deng, Β.; Kirby, MG; Zhang, X. Cistanche tubulosa αιθανολικό εκχύλισμα μεσολαβεί στα επίπεδα ορμονών φύλου αρουραίου με επαγωγή στεροειδογόνων ενζύμων των όρχεων. Pharm. Biol. 2016, 54, 481–487. [CrossRef] [PubMed]
3. Lin, WY; Chun, Υ.; Jack, C.; Kao, ST; Tsai, FJ; Liu, HP Molecular pathways που σχετίζονται με την προώθηση της μακροζωίας και τη γνωστική βελτίωση του Cistanche tubulosa στη Drosophila. Phytomedicine 2017, 26, 37–44. [CrossRef]
4. Wu, CR; Lin, HC; Su, MH Reversal by υδατικά εκχυλίσματα Cistanche tubulosa από ελλείμματα συμπεριφοράς στο μοντέλο αρουραίου που μοιάζει με τη νόσο του Alzheimer: Σχέση με την εναπόθεση αμυλοειδούς και τη λειτουργία του κεντρικού νευροδιαβιβαστή. Συμπλήρωμα BMC. Εναλλακτική. Med. 2014, 14, 202. [CrossRef]
5. Xuan, GD; Liu, CQ Έρευνα σχετικά με την επίδραση των φαινυλαιθανοειδών γλυκοσιδίων (PEG) του Cistanche deserticola στην αντιγήρανση σε ηλικιωμένα ποντίκια που προκαλούνται από D-γαλακτόζη. Zhong Yao Cai 2008, 31, 1385–1388. [PubMed]
6. Jiang, Υ.; Tu, PF Ανάλυση χημικών συστατικών σε είδη Cistanche. J. Chromatogr. 2009, 1216, 1970–1979. [CrossRef] [PubMed]
7. Gao, C.; Wang, C.; Wu, G. Cistanche ολικές γλυκοσίδες στην επιρροή της μάθησης και της μνήμης των αρουραίων με αγγειακή άνοια και η έρευνα μηχανισμού. Πηγούνι. Βότανο. Med. 2005, 36, 1852–1855.
8. Li, F.; Yang, Υ.; Zhu, Ρ.; Chen, W.; Qi, D.; Shi, Χ.; Zhang, C.; Yang, Ζ.; Li, P. Echinacoside προάγει την αναγέννηση των οστών αυξάνοντας την αναλογία OPG/RANKL στα κύτταρα MC3T3-Ε1. Fitoterapia 2012, 83, 1443–1450. [CrossRef]
9. Shimoda, Η.; Tanaka, J.; Takahara, Υ.; Takemoto, Κ.; Shan, SJ; Su, MH Οι υποχοληστερολαιμικές επιδράσεις του εκχυλίσματος Cistanche tubulosa, ενός κινεζικού παραδοσιακού ακατέργαστου φαρμάκου, σε ποντίκια. Είμαι. J. Chin. Med. 2009, 37, 1125–1138. [CrossRef]
10. Tang, F.; Hao, Υ.; Zhang, Χ.; Qin, J. Επίδραση της εχινακοσίδης στην ίνωση των νεφρών μέσω αναστολής της οδού σηματοδότησης TGF- 1/Smads στο μοντέλο ποντικών DB/DB της διαβητικής νεφροπάθειας. Drug Des. Ανάπτυξη. Εκεί. 2017, 11.2813–2826. [CrossRef]
11. Xiong, WT; Gu, L.; Wang, C.; Sun, HX; Liu, X. Αντι-υπεργλυκαιμικές και υπολιπιδαιμικές επιδράσεις του Cistanche tubulosa σε τύπου 2 διαβητικούς ποντικούς DB/DB. J. Ethnopharmacol. 2013, 150, 935–945. [CrossRef] [PubMed]
12. Bao, XX; Ma, HH; Ding, Η.; Li, WW; Zhu, M. Προκαταρκτική βελτιστοποίηση μιας φόρμουλας κινεζικής φυτικής ιατρικής που βασίζεται στα νευροπροστατευτικά αποτελέσματα σε ένα μοντέλο αρουραίου της νόσου του Πάρκινσον που προκαλείται από τη ροτενόνη. J. Integr. Med. 2018, 16, 290–296. [CrossRef] [PubMed]
13. Kojima, Μ.; Hosoda, Η.; Ημερομηνία, Υ.; Nakazato, Μ.; Matsuo, Η.; Το Kanagawa, K. Ghrelin είναι ένα ακυλιωμένο πεπτίδιο που απελευθερώνει αυξητική ορμόνη από το στομάχι. Nature 1999, 402, 656–660. [CrossRef] [PubMed]
14. Zigman, JM; Jones, JE; Lee, CE; Saper, CB; Elmquist, JK Έκφραση mRNA του υποδοχέα γκρελίνης στον εγκέφαλο του αρουραίου και του ποντικού. J. Comp. Neurol. 2006, 494, 528–548. [CrossRef] [PubMed]
15. Castaneda, TR; Tong, J.; Datta, R.; Culler, Μ.; Tschop, MH Ghrelin στη ρύθμιση του σωματικού βάρους και του μεταβολισμού. Εμπρός. Neuroendocrinol. 2010, 31, 44–60. [CrossRef] [PubMed]
16. Rudman, D.; Feller, AG; Nagraj, HS; Γερμανοί, GA; Lalitha, PY; Goldberg, AF; Schlenker, RA; Cohn, L.; Rudman, IW; Mattson, DE Επιδράσεις της ανθρώπινης αυξητικής ορμόνης σε άνδρες άνω των 60 ετών. N. Engl. J. Med. 1990, 323, 1–6. [CrossRef] [PubMed]
17. Liu, Η.; Bravata, DM; Olkin, Ι.; Nayak, S.; Roberts, Β.; Garber, AM; Hoffman, AR Συστηματική ανασκόπηση: Η ασφάλεια και η αποτελεσματικότητα της αυξητικής ορμόνης σε υγιείς ηλικιωμένους. Αννα. Κρατώ. Med. 2007, 146, 104–115. [CrossRef] [PubMed]
18. Giordano, R.; Bonelli, L.; Marinazzo, Ε.; Ghigo, Ε.; Arviat, E. Θεραπεία με αυξητική ορμόνη στην ανθρώπινη γήρανση: Οφέλη και κίνδυνοι. Hormones 2008, 7, 133-139. [CrossRef] [PubMed]
19. Sattler, FR Αυξητική ορμόνη στον ηλικιωμένο άνδρα. Βέλτιστη πρακτική. Res. Clin. Endocrinol. 2013, 27, 541–555. [CrossRef]
20. Lo, YH; Chen, YJ; Chang, CI; Lin, YW; Chen, CY; Lee, MR; Lee, VS; Οι Tzen, JTC Teaghrelins, μοναδικές ακυλιωμένες φλαβονοειδείς τετραγλυκοσίδες στο τσάι Chin-shin oolong, είναι πιθανοί από του στόματος αγωνιστές του υποδοχέα γκρελίνης.
J. Agric. Food Chem. 2014, 62, 5085–5091. [CrossRef]
21. Hsieh, SK; Λοιπόν, YH; Wu, CC; Chung, TY; Tzen, JTC Προσδιορισμός βιοσυνθετικών ενδιάμεσων τεαγρελινών και ενώσεων που μοιάζουν με teaghrelin σε τσάι oolong και η μοριακή τους πρόσδεση στον υποδοχέα γκρελίνης.
J. Food Drug Anal. 2015, 23, 660–670. [CrossRef]
22. Hsieh, SK; Chung, TY; Li, YC; Λοιπόν, YH; Lin, NH; Kuo, PC; Chen, WY; Tzen, JTC Ginkgoghrelins, μοναδικές ακυλιωμένες φλαβονοειδείς γλυκοσίδες στο Folium Ginkgo, διεγείρουν την έκκριση αυξητικής ορμόνης μέσω της ενεργοποίησης του υποδοχέα γκρελίνης. J. Ethnopharmacol. 2016, 193, 237–247. [CrossRef]
23. Han, L.; Mavis, BY; Liu, Ε.; Zhang, Υ.; Li, W.; Τραγούδι, Χ.; Fu, F.; Gao, X. Δομικός χαρακτηρισμός και ταυτοποίηση φαινυλαιθανοειδών γλυκοσιδών από Cistanches deserticola YC Ma από UHPLC/ESI-QTOF-MS/MS. Phytochem. Πρωκτικός. 2012, 23, 668–676. [CrossRef]
24. Lu, D.; Zhang, J.; Yang, Ζ.; Liu, Η.; Li, S.; Wu, Β.; Ma, Z. Ποσοτική ανάλυση του Cistanches Herba χρησιμοποιώντας υγρή χρωματογραφία υψηλής απόδοσης σε συνδυασμό με ανίχνευση διάταξης διόδων και φασματομετρία μάζας υψηλής ανάλυσης σε συνδυασμό με χημειομετρικές μεθόδους. J. Sep. Sci. 2013, 36, 1945–1952. [CrossRef]
25. Moon, Μ.; Kim, HG; Hwang, L.; Seo, JH; Kim, S.; Hwang, S.; Kim, S.; Lee, D.; Chung, Η.; Ω, MS; et al. Νευροπροστατευτική δράση της γκρελίνης στο 1-μεθυλ-4-φαινυλ-1, 2, 3, ένα μοντέλο 6-τετραϋδροπυριδίνης ποντικού της νόσου του Πάρκινσον αναστέλλοντας τη μικρογλοιακή ενεργοποίηση. Neurotox. Res. 2009, 15, 332-347. [CrossRef]
26. Lupien, SJ; Isabelle, OM; Hupbach, Α.; Tu, MT; Buss, C.; Walker, D.; Prussner, J.; Mcewen, BS Πέρα από την έννοια του στρες: Αλλοστατικό φορτίο-Μια αναπτυξιακή βιολογική και γνωστική προοπτική. In Developmental Psychopathology: Volume Two: Developmental Neuroscience; John Wiley & Sons, Inc.: Νέα Υόρκη, Νέα Υόρκη, ΗΠΑ, 2015; σελ. 578–628.
27. Rizzo, Μ.; Rizvi, ΑΑ; Sudar, Ε.; Soskic, S.; Ομπράντοβιτς, Μ.; Montalto, G.; Boutjdir, Μ.; Μιχαηλίδης, Δ.Π. Isenovic, ER Μια ανασκόπηση των καρδιαγγειακών και αντι-αθηρογόνων επιδράσεων της γκρελίνης. Curr. Pharm. Des. 2013, 19, 4953–4963. [CrossRef]
28. Holst, Β.; Lang, Μ.; Brandt, Ε.; Bach, Α.; Howard, Α.; Frimurer, TM; Beck-Sickinger, Α.; Schwartz, TW Αντίστροφοι αγωνιστές υποδοχέα γκρελίνης: Αναγνώριση ενεργού πεπτιδικού πυρήνα και επίτοπων αλληλεπίδρασής του στον υποδοχέα. ΜοΙ. Pharmacol. 2006, 70, 936–946. [CrossRef]
29. Yamazaki, Μ.; Nakamura, Κ.; Kobayashi, Η.; Matsubara, Μ.; Hayashi, Υ.; Kanagawa, Κ.; Sakai, Τ. Επίδραση ρύθμισης της γκρελίνης στην έκκριση αυξητικής ορμόνης από διαχυμένα κύτταρα πρόσθιας υπόφυσης αρουραίου. J. Neuroendocrinol. 2002, 14, 156–162. [CrossRef]
30. Lo, YH; Chen, YJ; Chung, TY; Lin, NH; Chen, WY; Chen, CY; Lee, MR; Chou, CC; Το Tzen, JTC Emogrelin, ένα μοναδικό παράγωγο εμοδίνης στο Heshouwu, διεγείρει την έκκριση αυξητικής ορμόνης μέσω της ενεργοποίησης του υποδοχέα γκρελίνης. J. Ethnopharmacol. 2015, 159, 1–8. [CrossRef]
31. Moukhametzianov, R.; Warne, Τ.; Edwards, PC; Serrano-Vega, MJ; Leslie, AG; Tate, CG; Schertler, GF Δύο διακριτές διαμορφώσεις της έλικας 6 που παρατηρήθηκαν σε δεσμευμένες με ανταγωνιστές δομές ενός βήτα1-αδρενεργικού υποδοχέα. Proc. Natl. Ακαδ. Sci. ΗΠΑ 2011, 108, 8228–8232. [CrossRef]
32. Rosenbaum, DM; Zhang, C.; Lyons, JA; Holl, R.; Aragao, D.; Arlow, DH; Rasmussen, SG; Choi, HJ; Devree, BT; Sunahara, RK; et al. Δομή και λειτουργία ενός συμπλέγματος μη αναστρέψιμου αγωνιστή-βήτα(2) αδρενοϋποδοχέα. Nature 2011, 469, 236–240. [CrossRef]
33. Brooks, BR; Bruccoleri, RE; Olafson, BD; Πολιτεία, DJ; Swaminathan, S.; Karplus, M. CHARMM—Ένα πρόγραμμα για υπολογισμούς μακρομοριακής ενέργειας, ελαχιστοποίησης και δυναμικής. J. Comput. Chem. 1983, 4, 187–217. [CrossRef]
