Μέρος 2 Προληπτικές επιδράσεις των γλυκοζιτών φαινυλαιθανόλης από cistanche tubulosa στην ηπατική ίνωση που προκαλείται από αλβουμίνη ορού βοοειδών σε αρουραίους
Mar 06, 2022
Επικοινωνία: Όντρεϊ Χου Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Ηλεκτρονικό ταχυδρομείο:audrey.hu@wecistanche.com
NF-κB p65 και έκφραση κολλαγόνου Ι μετά από φαρμακευτική παρέμβαση σε κύτταρα HSC-T6 Προκειμένου να χαρακτηριστούν τα σήματα της ηπατικής ίνωσης, δύο βασικά ρυθμιστικά γονίδια στο ήπαρ προσδιορίστηκαν μέσω της δοκιμασίας RT-PCR. Τα δεδομένα έδειξαν ότι τα κύτταρα tHSC-T6 από την ομάδα ελέγχου είχαν χαμηλότερα επίπεδα NF- κB και κολλαγόνου τύπου I mRNA. Αντιστρόφως, ο TGF-β1 επάγει τα κύτταρα HSC-T6 για να ρυθμίσει σημαντικά το NF-κB (P< 0.01)="" and="" col-i="" (p="">< 0.01)="" mrna,="" with="" levels="" higher="" than="" those="" in="" the="" control="" group.="" in="" the="" presence="" of="" different="" concentrations="" of="">φαινυλαιθανοειδές γλυκοσίδιο από cistanche) , τα αποτελέσματα του NF-κB p65 [P NF-κB = 0,001 για 100 ug/ml, P NF-κB = 0,002 για 75 ug/ml, P NF-κB = 0,007 για 50 ug/ml, και P NF-κB = 0,012 για 25 ug/ml, αντίστοιχα] και Col-I [P Col-I = 0,006, P Col-I = 0,009, P Col-I = 0,014, P Col-I = 0,019, αντίστοιχα] έδειξαν μειωμένες εκφράσεις αυτών των mRNAs (Εικ. 7).
Ανάλυση δυτικής κηλίδας του επιπέδου κολλαγόνου Ι μετά από παρέμβαση φαρμάκου στα κύτταρα HSC-T6 Σχήμα 8 δείχνει τα επίπεδα έκφρασης της πρωτεΐνης κολλαγόνου Ι στα κύτταρα HSC-T6 των διαφόρων πειραματικών ομάδων. Το επίπεδο έκφρασης της πρωτεΐνης κολλαγόνου Ι μειώθηκε σημαντικά στις διάφορες ομάδες δόσης των CPhGs(φαινυλαιθανοειδές γλυκοσίδιο από cistanche)(100 ug/ml, 75 ug/ml, 50 ug/ml και 25 ug/ml) σε σύγκριση με την ομάδα του TGF-β1
Συζήτηση
CPhGs(φαινυλαιθανοειδές γλυκοσίδιο από cistanche)είναι ένας φαινυλαιθανοειδής γλυκοσίδης που απομονώνεται και καθαρίζεται από το ρίζωμα του Cistanche, το οποίο χρησιμοποιείται ως παραδοσιακό κινεζικό φυτικό φάρμακο. Τα τελευταία χρόνια, τα CPH είχε αποδειχθεί ότι διαθέτουν μια ισχυρή ικανότητα να προλαμβάνουν τους τραυματισμούς του ήπατος [20]. Ως εκ τούτου, στοχεύαμε να διερευνήσουμε εάν τα CPH έχουν ανασταλτικές επιδράσεις στην ίνωση της ηπατίτιδας από την ηπατική ίνωση που προκαλείται από την BSA σε αρουραίους. Το BJRG χρησιμοποιείται συνήθως ως θεραπευτικό φάρμακο για την ηπατική ίνωση στην Κίνα. Είναι κατασκευασμένο από κέλυφος χελώνας. Τα Radix Paeonia rubra, Cordyceps Sinensis, Radix isatidis κ.ά. έχουν ως αποτέλεσμα την αναπλήρωση του Qi και του αίματος, την ανακούφιση της κόπωσης, την αποσκλήρυνση των κόμβων. Επιπλέον, προηγούμενες μελέτες δείχνουν ότι έχει την προφανή λειτουργία να εμποδίζει την πρώιμη ίνωση του ήπατος, να αναστέλλει τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων που αποθηκεύουν λίπος και να μειώνει τη σύνθεση κολλαγόνου [21]. Ως εκ τούτου, το BJRG χρησιμοποιήθηκε ως θετικό φάρμακο σε αυτή τη μελέτη.
Οι παθολογικές μεταβολές της ηπατικής ίνωσης σε αρουραίους που προκαλούνται από ενέσεις BSA είναι παρόμοιες με εκείνες της κίρρωσης της ανθρώπινης πύλης [22]. CPhGs(φαινυλαιθανοειδές γλυκοσίδιο από cistanche)δοσοεξαρτώμενα μετριάστηκε ο βαθμός της ηπατικής ίνωσης και ανέστειλε τον μετασχηματισμό του HSC σε κύτταρα που μοιάζουν με μυοϊνοβλάστες, μείωσε τα αυξημένα επίπεδα alt, AST, HA, LN, CIV, TGF-β1 και τον ηπατικό δείκτη και κατέστειλε σημαντικά την έκφραση του κολλαγόνου Ι, του κολλαγόνου III και του TGF-β1 στον ιστό του ήπατος. Τα στάδια της ηπατικής ίνωσης συσχετίζονται με τα επίπεδα των HA, LN και IV-C στον ορό, τα οποία ως δείκτες μπορεί να παίζουν ρόλο στην ανίχνευση του βαθμού της ηπατικής ίνωσης [23]. Έχει αναφερθεί ότι το HA είναι ο κύριος πόρος της εξωκυτταρικής μήτρας. Το IV-C ως βασικό στοιχείο της βασικής μεμβράνης θα συντεθεί άφθονα και θα κατατεθεί σε μεγάλο βαθμό στις προηγούμενες φάσεις της κίρρωσης του ήπατος. Τα επίπεδα Ορού των LN και IV-C είναι οι δείκτες του ρυθμού κύκλου εργασιών της βασικής μεμβράνης και δείχνουν τον βαθμό ίνωσης στην περιοχή της πύλης και τα ημιτονοειδή τριχοειδή αγγεία [24]. Το PC III είναι ένας δείκτης στη διάγνωση της ηπατικής ίνωσης και της πρώιμης κίρρωσης, αλλά η ευαισθησία και η ειδικότητά του δεν είναι υψηλές και δεν υπάρχει σημαντική διαφορά μεταξύ των διαφόρων σταδίων της ίνωσης σε πολλές αναφορές [24, 25].
Αυτή η μελέτη έλαβε παρόμοιο αποτέλεσμα. Επιπλέον, οι παρατηρήσεις του H&E και του Masson με τριχρωμική τομή παρουσιάζουν φυσιολογικούς ιστούς του ήπατος με διακριτούς ηπατικούς λοβούς και ηπατικά ημιτονοειδή. Η δομή του ηπατικού ιστού στην ομάδα μοντέλου διαταράχθηκε και ο ηπατικός ιστός και το ηπατικό ημιτονοειδές αντικαταστάθηκαν από μια μεγάλη ποσότητα συνδετικού ιστού. Ωστόσο, παρατηρήθηκε σημαντική βελτίωση στις ομάδες θεραπείας σε σύγκριση με την ομάδα μοντέλου. Είναι σημαντικό ότι η έκφραση κολλαγόνου τύπου Ι και κολλαγόνου τύπου ΙΙΙ παίζουν ουσιαστικό ρόλο στην ανάπτυξη ηπατικής ίνωσης, ο αποκλεισμός της οποίας μπορεί να αποτρέψει και να θεραπεύσει την ηπατική ίνωση. Ως εκ τούτου, η δημιουργία και η εναπόθεση στον ηπατικό ιστό του κολλαγόνου τύπου Ι και του κολλαγόνου τύπου ΙΙΙ θα μπορούσε να χρησιμεύσει ως σημαντικός καθοριστικός παράγοντας της αποτελεσματικότητας της αντι-ηπατικής ίνωσης. Το TGF-β1 είναι επίσης μια σημαντική προϊνιδογόνος κυτοκίνη σε ηπατική βλάβη και είναι βιολογικά δραστική με πολλαπλές φαρμακολογικές δράσεις [26]. Απαιτείται ισορροπία μεταξύ αυτών των ενεργειών για τη διατήρηση της ομοιόστασης των ιστών. Η παρεκκλίνουσα έκφραση του TGF- β1 εμπλέκεται στην παθογένεση των ηπατικών παθήσεων [27, 28]. Είναι γνωστό ότι το TGF-β1 είναι μια κρίσιμη κυτοκίνη που εμπλέκεται στα αρχικά στάδια της ηπατικής ίνωσης.
Το οξειδωτικό στρες ενεργοποιεί το TGF-β1, με αποτέλεσμα το τελευταίο να διεγείρει την παραγωγή και την εναπόθεση ECM [29]. Ως εκ τούτου, μία από τις αποτελεσματικές στρατηγικές για την παραγωγή αντι-ηπατικού φαρμάκου ίνωσης είναι ο εντοπισμός αντι-TGF-β1 παραγόντων. Η ανοσοϊστοχημική ανάλυση έδειξε ότι οι εκφράσεις του κολλαγόνου τύπου Ι, του κολλαγόνου τύπου III και του TGF-β1 θα μπορούσαν να ανιχνεύσουν την παθολογική διαδικασία της ηπατικής ίνωσης. Οι εκφράσεις του κολλαγόνου τύπου Ι, του κολλαγόνου τύπου III και του TGF-β1 στις ομάδες θεραπείας μειώνονται, οι οποίες ήταν σημαντικά χαμηλότερες στις CPhG υψηλής δόσης(φαινυλαιθανοειδές γλυκοσίδιο από cistanche)ομάδα θεραπείας ειδικότερα, και πρότεινε ότι τα CPhGs είναι ένας αποτελεσματικός αναστολέας κολλαγόνου τύπου Ι, κολλαγόνου τύπου III και TGF-β1. Πιθανώς, CPhGs μπορεί να βελτιώσει τη δραστηριότητα της κολλαγενάσης, διατηρώντας τη δυναμική ισορροπία της σύνθεσης ecm και της υποβάθμισης, καθυστερώντας έτσι και αποτρέποντας το σχηματισμό της ηπατικής ίνωσης. CPhGs(φαινυλαιθανοειδές γλυκοσίδιο από cistanche)όχι μόνο θα μπορούσε να βελτιώσει την ηπατική ίνωση που προκαλείται από BSA σε αρουραίους, αλλά μπορεί επίσης να σχετίζεται με την αναστολή της ενεργοποίησης του HSC in vitro. HSC ενεργοποίηση θεωρείται ότι αντιπροσωπεύει το κρίσιμο βήμα της ινογένεσης. Σε αυτή τη μελέτη, τα αποτελέσματα έδειξαν ότι η χορήγηση CPHG από 25 έως 100 ug/ml εξασθένησε αξιοσημείωτα τη μειωμένη NF-κB p65, την έκφραση κολλαγόνου I mRNA και την έκφραση πρωτεϊνών κολλαγόνου Ι στο HSC. Το NF-κB παίζει σημαντικό ρόλο στη διαμόρφωση της ανοσολογικής απόκρισης σε λοιμώξεις ή ερεθίσματα [30]. Η συσσώρευση NF-κB στα ηπατικά κύτταρα μπορεί να οδηγήσει στη στρατολόγηση φλεγμονωδών κυτοκινών/μεσολαβητών, προκαλώντας έτσι την ανάπτυξη ίνωσης [31, 32]. Επιπλέον, το κολλαγόνο είναι επίσης ένας ευαίσθητος δείκτης που αντικατοπτρίζει το επίπεδο ίνωσης και αντιπροσωπεύει περίπου το 50 % της συνολικής πρωτεΐνης στο ινώδες ήπαρ [33].
Ως αποτέλεσμα, υποθέσαμε ότι ο μοριακός μηχανισμός κατά της ηπατο-ίνωσης συνδέεται με CPhGs(φαινυλαιθανοειδές γλυκοσίδιο από cistanche)-ενδιάμεση αδρανοποίηση της έκφρασης NF-κB, στην οποία το όφελος συμβάλλει σε συνεργιστικούς ρόλους της εξασθένησης της ανοσοτοξικότητας και του στρες της φλεγμονής στον ηπατικό ιστό που έχει υποστεί βλάβη από την BSA, διορθώνοντας περαιτέρω τον δυσμεταβολισμό για τη βελτίωση των ηπατικών λειτουργιών.
Συμπεράσματα
Συμπερασματικά, οι μελέτες μας δείχνουν ότι τα CPHGs(φαινυλαιθανοειδές γλυκοσίδιο από cistanche)μετριάζουν σημαντικά την έκταση της ηπατικής ίνωσης που προκαλείται από την BSA σε αρουραίους. Ο μηχανισμός του μπορεί να οφείλεται τουλάχιστον εν μέρει στην ανασταλτική επίδραση των CPhGs στη σύνθεση της ECM και στη διέγερση της αποικοδόμησης της ECM, και / ή στην άμεση αναστολή της σύνθεσης του κολλαγόνου τύπου Ι, του κολλαγόνου τύπου III και της έκφρασης του TGF-β1. Ως εκ τούτου, περιμέναμε ότι τα CPH μπορούν να χρησιμοποιηθούν σε προϊόντα υγειονομικής περίθαλψης ή σε κλινικά φάρμακα για την πρόληψη της ανθρώπινης ηπατικής ίνωσης. Απαιτούνται μελλοντικές μελέτες για να τεκμηριωθεί η αποτελεσματικότητα των CPhGs ως ισχυρό αντι-ηπατικό φάρμακο ίνωσης.
Συντομογραφίες
CPhGs:Γλυκοζίτες φαινυλαιθανόλης από cistanche; BSA: Λευκωματίνη ορού βοοειδών. HSC-T6: Ηπατικά αστεροειδή κύτταρα. Hyp: Υδροξυπρολίνη; BJRG: Σύνθετα δισκία Biejiarangan. TGF-β1: Μετασχηματιστικός αυξητικός παράγοντας β1; ALT: Αμινοτρανσφεράση της αλανίνης; AST: Ασπαρτική αμινοτρανσφεράση; HA: Υαλουρονικό οξύ. LN: Λαμινίνη; PC III: προκολλαγόνο τύπου III· IV-C: Κολλαγόνο τύπου IV. NF-κB: Πυρηνικός παράγοντας kappa-φως-αλυσίδα-ενισχυτής των ενεργοποιημένων Β κυττάρων. RT-PCR: Αλυσιδωτή αντίδραση αντίστροφης μεταγραφάσης-πολυμεράσης. SDS-ΣΕΛΙΔΑ: Ηλεκτροφόρηση πηκτής δωδεκυλοθειικού νατρίου-πολυακρυλαμιδίου.
Αντικρουόμενα συμφέροντα Οι συγγραφείς δηλώνουν ότι δεν έχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα. Οι συνεισφορές των συγγραφέων TL, JZ, SPY, LM, MT και SLZ συνέλαβαν και σχεδίασαν τα πειράματα. Οι SPY, TL και JZ ανέλυσαν τα δεδομένα. Οι SPY και JZ έγραψαν το χειρόγραφο. Οι TL, LM και JZ εξέτασαν το χειρόγραφο. Όλοι οι συγγραφείς διάβασαν και ενέκριναν το τελικό χειρόγραφο. Αναγνώριση Αυτή η έρευνα υποστηρίχθηκε από το Εθνικό Ίδρυμα Φυσικών Επιστημών της Κίνας (81260624). Οι συγγραφείς θα ήθελαν να εκφράσουν τις ειλικρινείς ευχαριστίες τους στον καθηγητή Tao Liu για τις προτεινόμενες βελτιώσεις του για τη συγγραφή αυτής της εργασίας. Λεπτομέρειες συγγραφέα 1 Τμήμα Τοξικολογίας, Σχολή Δημόσιας Υγείας, Ιατρικό Πανεπιστήμιο Xinjiang, No. 393 Xinyi Road, Urumqi 830011Xinjiang Uyghur Αυτόνομη
Περιοχή, Κίνα. 2 Βασικό Εργαστήριο για την Ιατρική των Ουιγούρων, Ινστιτούτο Materia Medica του Σιντζιάνγκ, 830004 Urumqi, Κίνα. 3 No. 140 Νότια οδός Xinhua, περιοχή Tianshan, Urumqi 830000Xinjiang Αυτόνομη περιοχή των Ουιγούρων, Κίνα. Ελήφθη: 6 Αυγούστου 2015 Έγινε δεκτό: 24 Νοεμβρίου 2015
Αναφορές
Cohen-Naftaly M, Friedman SL. Τρέχουσα κατάσταση των νέων αντιινωτικών θεραπειών σε ασθενείς με χρόνια ηπατική νόσο. Ther Adv Γαστρεντερόλη. 2011;4(6):391–417.
Puche JE, Saiman Y, Friedman SL. Ηπατικά αστεροειδή κύτταρα και ηπατική ίνωση. Compr Physiol. 2013;3(4):1473–92.
Hernandez-Gea V, Friedman SL. Παθογένεια της ηπατικής ίνωσης. Αννού Ρεβ Πάθολ. 2011;6:425–56.
Sohrabpour AA, Mohamadnejad M, Malekzadeh R. Άρθρο αναθεώρησης: η αναστρεψιμότητα της κίρρωσης. Διατροφή Φαρμακολ Θερ. 2012;36(9):824–32.
Raven PH, Zhang LB, Ventenat O. Κινεζική ακαδημία επιστημών. 23η έκδοση Κίνα: Συντακτική Επιτροπή της Χλωρίδας της Κίνας. 2013. σ. 1-16.
Κινεζική Επιτροπή Φαρμακοποιίας του Υπουργείου Υγιεινής της Λαϊκής Δημοκρατίας της Κίνας. Κινεζική φαρμακοποιία, Μέρος 1. Κίνα: Εκδοτικός οίκος χημικής βιομηχανίας. 2010. σ. 126.
Yan GH, Tian JH, Long BW, Li N. Ερευνητική πρόοδος των φαινυλαιθανοειδών γλυκοσίδων από cistanche tubulosa. Κεντρικός Νότος Pharm. 2012;10:692–5.
Λι Τζ, Χουάνγκ Ντ, Χε Λ. Επίδραση του Ρου Κονγκ Ρονγκ Ρονγκ(Χέρμπα Σιστάντσες Ερημικόλα) σχετικά με την αναπαραγωγική τοξικότητα σε ποντικούς που προκαλούνται από γλυκοσίδη του Leigongteng (Radix et Rhizoma Tripterygii). J Tradit Chin Med. 2014;34(3):324–32.
Xing Y, Liao J, Tang Y, Zhang P, Tan C, Ni H, et al. ACE, και αναστολείς συσσωμάτωσης αιμοπεταλίων από tamarix Hojnacki Bunge (φυτό ξενιστής του Herba Cistanches) που αναπτύσσονται στο Σιντζιάνγκ. Pharmacogn Mag. 2014;10(38):111–7.
Jia Y, Guan Q, Jiang Y, Salh B, Guo Y, Tu P, κ.ά. Βελτίωση της κολίτιδας που προκαλείται από θειικό νάτριο δεξτράνης σε ποντίκια με εκχύλισμα εμπλουτισμένο με εχινοκοσίδη cistanche tubulosa. Phytother Res. 2014;28(1):110–9.