Μέρος 1|Το εκχύλισμα Herba Cistanche ενισχύει τη δημιουργία μιτοχονδριακού ATP σε καρδιές αρουραίου και κύτταρα H9c2

Επικοινωνία: emily.li@wecistanche.com

Hoi Yan Leung και Kam Ming Ko

Τμήμα Βιοχημείας, Πανεπιστήμιο Επιστήμης & Τεχνολογίας του Χονγκ Κονγκ, Κόλπος Clear Water, Χονγκ Κονγκ SAR, Κίνα

Λέξεις-κλειδιά: ATP,Cistanche deserticola, κύτταρα H9c2, καρδιά, μιτοχόνδρια

Αφηρημένη

Για τη διερεύνηση της φαρμακολογικής βάσης του "Yang- αναζωογονητικό«Δράση του Herbal Cistanche [το αποξηραμένο ολόκληρο φυτό τουCistanche deserticolaYC Ma (Orobanchaceae)], στην κινεζική ιατρική, οι επιδράσεις του μεθανολικού εκχυλίσματος Herba Cistanche στην ικανότητα παραγωγής μιτοχονδριακού ΑΤΡ εξετάστηκαν χρησιμοποιώντας ένα ex vivo μοντέλο καρδιάς αρουραίου και έναν in situ κυτταρικό προσδιορισμό H9c2. Η θεραπεία με εκχύλισμα Herba Cistanche αύξησε την ικανότητα παραγωγής μυοκαρδιακής μιτοχονδριακής ΑΤΡ με τρόπο εξαρτώμενο από τη δόση σε αρουραίους, όπως αξιολογήθηκε με μέτρηση in vitro. Η διέγερση της ικανότητας παραγωγής ATP συσχετίστηκε με μια παράλληλη ενίσχυση στη μεταφορά ηλεκτρονίων μιτοχονδρίων που υποστηρίζεται από πυροσταφυλικό αλλά όχι ηλεκτρικό. Η θεραπεία με Herba Cistanche αύξησε επίσης τις δραστηριότητες του μυοκαρδιακού μιτοχονδριακού συμπλέγματος Ι και του συμπλέγματος III, με την έκταση της διέγερσης στη δραστηριότητα του συμπλόκου Ι να είναι μεγαλύτερη. Η θεραπεία με Herba Cistanche προκάλεσε μια δοσοεξαρτώμενη και χρονικά εξαρτώμενη αύξηση στην ικανότητα παραγωγής μιτοχονδριακού ATP στα κύτταρα H9c2. Τα αποτελέσματα δείχνουν ότι η θεραπεία με Herba Cistanche μπορείαύξηση της παραγωγής μιτοχονδριακού ΑΤΡσε καρδιές αρουραίου ex vivo και κύτταρα H9c2 in situ, πιθανώς μέσωενίσχυση της οξειδωτικής φωσφορυλίωσης.

Το Cistanche μπορεί να βελτιώσει τη λειτουργία της καρδιάς, να μειώσει την αρτηριακή πίεση και να μειώσει τα λιπίδια του αίματος

Εισαγωγή

Η "ενδυνάμωση Yang", η οποία ενσωματώνει τη γενικευμένη ενίσχυση της λειτουργίας του σώματος στην κινεζική ιατρική, περιλαμβάνει τη χρήση ενέργειας για την οδήγηση διαφόρων βιοχημικών διεργασιών.

Από αυτή την άποψη, το ATP, το οποίο είναι το παγκόσμιο νόμισμα ενέργειας για την τροφοδοσία της κυτταρικής λειτουργίας, παράγεται κυρίως μέσω οξειδωτικής φωσφορυλίωσης στα μιτοχόνδρια. Έχουμε υποθέσει ότι τα "Γιανγκ αναζωογονητικά" βόταναέχουν την ικανότητα να αυξάνουν την ικανότητα παραγωγής μιτοχονδριακού ATP(Ko et al., 2004). Αυτό υποστηρίζεται από την πρόσφατη ανακάλυψή μας ότι τα κινέζικα τονωτικά βότανα "Γιανγκ-αναζωογονητικά" αλλά όχι "θρεπτικά γιν" θα μπορούσαν να ενισχύσουν την ικανότητα παραγωγής μυοκαρδίου ATP σε καρδιές ποντικών ex vivo (Ko et al., 2006). Το Herba Cistanche, το αποξηραμένο ολόκληρο παρασιτικό φυτό (με εξαίρεση το άνθος) του Cistanche deserticola YC Ma (Orobanchaceae), ταξινομείται ως'Τονωτικό βότανο Yang-αναζωογονητικό στην παραδοσιακή κινεζική ιατρική (Chen, 1998), και εμφανίζεται ως το πιο δημοφιλές συστατικό σε μια σειρά κινεζικών διπλωμάτων ευρεσιτεχνίας που χρησιμοποιούνται για την αναζωογόνηση του Yang». Στην Κίνα και την Ιαπωνία, το Herba Cistanche χρησιμοποιείται ευρέως για τη θεραπεία πολλών συμπτωμάτων ανεπάρκειας Yang. Φαρμακολογικές μελέτες έδειξαν ότι το Herba Cistanche θα μπορούσεεξουδετερώνει τις ελεύθερες ρίζες(Xiong et al., 1996),παράγουν ηρεμιστικό(Lu, 1998),αντι γήρανση(Lee et al., 1990),αντινοληπτικά και αντιφλεγμονώδη αποτελέσματα(Lin et al., 2002), καιενισχύουν τη λειτουργία του ανοσοποιητικού(Wu et al., 2005). Το κύριο δραστικό συστατικό του Herba Cistanche είναιφαινυλαιθανοειδείς γλυκοσίδες(Ouyang et al., 2003), τα οποία έχουν βρεθεί ότι έχουναντιβακτηριακό, αντιστρες και αντιοξειδωτικόιδιότητες (Xiong et al., 1998), καθώς και αντι-αποπτωτικές επιδράσεις σε καλλιεργημένους νευρώνες (Tian & Pu, 2005). Στην παρούσα μελέτη, προκειμένου να διερευνηθεί η φαρμακολογική βάση της αναζωογονητικής δράσης του Yang του Herba Cistanche, εξετάστηκαν τα αποτελέσματα της θεραπείας με Herba Cistanche στην ικανότητα παραγωγής ATP σε μιτοχόνδρια που απομονώθηκαν από καρδιές αρουραίου ex vivo και καλλιεργημένα καρδιομυοκύτταρα H9c2 in situ. Για να διερευνηθεί ο βιοχημικός μηχανισμός που βρίσκεται κάτω από τη δράση ενίσχυσης της παραγωγής ATP, τα αποτελέσματα της θεραπείας με Herba Cistanche στη μεταφορά μιτοχονδριακών ηλεκτρονίων και στις σύνθετες δραστηριότητες I-IV εξετάστηκαν επίσης σε καρδιές αρουραίων.

Τα αποτελεσματικά συστατικά του Cistanche μπορούν να καθαρίσουν διάφορες ελεύθερες ρίζες ενεργού οξυγόνου

Υλικά και μέθοδοι

Χημικά, κυτταροκαλλιέργεια και φυτικά υλικά

Τα ATP, ADP και 3-[4,5-διμεθυλθειοζολ-2-υλ]-2,5-διφαινυλ-τετραζόλιο βρωμίδιο (MTT) αγοράστηκαν από τη Sigma Chemical Co (St. Louis, MO, ΗΠΑ). Το διάλυμα λουσιφεράσης (ATPlite) ελήφθη από την PerkinElmer (Βοστόνη, ΜΑ, ΗΠΑ). Το τροποποιημένο μέσο Eagle της Dulbecco (DMEM) και ο εμβρυϊκός βόειος ορός (FBS) αγοράστηκαν από την GIBCO BRL Life Technologies (Grand Island, ΝΥ, ΗΠΑ). Η κυτταρική σειρά H9c2 αγοράστηκε από την ATTC (Rockville, MD, ΗΠΑ). Το Herba Cistanche προμηθεύτηκε από έναν τοπικό έμπορο βοτάνων (Lee Hoong Kee). Το βότανο επικυρώθηκε από τον προμηθευτή και ένα δείγμα κουπονιού (HKUSTY00301) κατατέθηκε στο Τμήμα Βιοχημείας του Πανεπιστημίου Επιστήμης και Τεχνολογίας του Χονγκ Κονγκ (HKUST).

Εκχύλιση βοτάνων

Το Herba Cistanche (100g) κόπηκε σε μικρά κομμάτια και στη συνέχεια εκχυλίστηκε με θέρμανση υπό αναρροή σε 300 mL μεθανόλης στους 65◦C για 2 ώρες. Η διαδικασία επαναλήφθηκε δύο φορές. Το συγκεντρωμένο εκχύλισμα ξηράνθηκε με εξάτμιση του διαλύτη υπό μειωμένη πίεση και το μεθανολικό εκχύλισμα του Herba Cistanche ελήφθη σε απόδοση 39 τοις εκατό (β/β). Η χημική ανάλυση έδειξε ότι το μεθανολικό εκχύλισμα του Herba Cistanche περιείχε ολικές σαπωνίνες, ολικά φλαβονοειδή, ολικές λιγνάνες και πολυσακχαρίτες σε συγκεντρώσεις 1,62 τοις εκατό (w/w), 0,08 τοις εκατό, 0,15 τοις εκατό και 75,6 τοις εκατό, αντίστοιχα.

Φροντίδα ζώων

Ενήλικοι αρσενικοί αρουραίοι Sprague-Dawley (8-10 εβδομάδες, 250-300 g) διατηρήθηκαν σε κύκλο σκοταδιού/φωτός 12- ωρών σε δωμάτιο ελεγχόμενο από αέρα/υγρασία στους περίπου 22°C και επέτρεψαν τροφή και νερό κατά βούληση στις εγκαταστάσεις φροντίδας ζώων στο HKUST. Τα πειραματικά πρωτόκολλα εγκρίθηκαν από την Επιτροπή Ερευνητικής Πρακτικής στο HKUST.

Φαρμακευτική θεραπεία

Τα ζώα χωρίστηκαν τυχαία σε ομάδες, με πέντε έως έξι ζώα σε κάθε μία. Στις ομάδες θεραπείας, οι αρουραίοι χορηγήθηκαν ενδογαστρικά με το μεθανολικό εκχύλισμα Herba Cistanche (διαλυμένο/εναιωρημένο σε νερό) σε αυξανόμενες ημερήσιες δόσεις ({0}},031–0,5 g/kg) για 3 ημέρες. Τα ζώα ελέγχου έλαβαν μόνο νερό. Είκοσι τέσσερις ώρες μετά την τελευταία δόση, η καρδιά ελήφθη από αναισθητοποιημένα με φαινοβαρβιτάλη ζώα και υποβλήθηκε σε βιοχημική ανάλυση.

Παρασκευή μιτοχονδριακών κλασμάτων και μέτρηση της ικανότητας παραγωγής ATP (ATP-GC) ex vivo

Δείγματα καρδιακού ιστού αριστερής κοιλίας αποκόπηκαν και ξεπλύθηκαν με παγωμένο ισοτονικό ρυθμιστικό διάλυμα (0.32 Μ σακχαρόζη, 1 mM EDTA, 50 mM Tris/HCl, ρΗ 7,4). Τα καρδιακά μιτοχονδριακά κλάσματα παρασκευάστηκαν με διαφορική φυγοκέντρηση σε ισοτονικό ρυθμιστικό στους 4°C. Ένα καρδιακό ομογενοποίημα 10 τοις εκατό (w/v) παρασκευάστηκε με ομογενοποίηση του κομμένου κοιλιακού ιστού με ομογενοποιητή γυαλιού τεφλόν στις 4000 rpm για 20-30 πλήρεις κινήσεις. Το ομογενοποίημα φυγοκεντρήθηκε στα 600 χ g για 10 λεπτά για να απομακρυνθούν οι πυρήνες και τα κυτταρικά υπολείμματα. Το υπερκείμενο στη συνέχεια φυγοκεντρήθηκε στα 8000 χ g για 30 λεπτά για να καθιζάνει τα μιτοχόνδρια (Evan, 1992). Τα σφαιρίδια επαναιωρήθηκαν σε 1 mL του ισοτονικού ρυθμιστικού διαλύματος και ανασυστάθηκαν τα μιτοχονδριακά κλάσματα. Η μιτοχονδριακή ATP-GC των ζώων που δεν υποβλήθηκαν σε θεραπεία μετρήθηκε με τη μέθοδο των Leung et al. (2005)

Οι πολυσακχαρίτες Cistanche μπορούν να καθυστερήσουν τον φυσιολογικό εκφυλισμό των οργάνων και τον εκφυλισμό της μορφολογίας των κυττάρων

Μέτρηση μιτοχονδριακής μεταφοράς ηλεκτρονίων

Η μέτρηση της μεταφοράς ηλεκτρονίων σε απομονωμένα μιτοχόνδρια, η οποία βασίζεται στη μείωση του ΜΤΤ, όπως στην[1] σχηματίζεται όπως περιγράφεται από τους Cohen et al. (1997). Τα μιτοχόνδρια παρασκευάστηκαν σε συγκέντρωση πρωτεΐνης 1 mg/mL με ρυθμιστικό διάλυμα επώασης (250 mM σακχαρόζη, 50 mM HEPES, 10 mM KH2PO4, 2 mM MgCl2, 1 mM EGTA, pH 7,4) . Ένα κλάσμα (40 μL) των μιτοχονδρίων αναμίχθηκε με 100 μL έκαστο από 15 mM πυροσταφυλικό ή 0,5 mM ηλεκτρικό και 0,42 mg/mL ΜΤΤ. Το μίγμα της αντίδρασης επωάστηκε στους 37°C για 10 λεπτά με ήπια ανακίνηση. Μετά την επώαση, το μίγμα της αντίδρασης τερματίστηκε με την προσθήκη 100 μL ρυθμιστικού διαλύματος λύσης (10 τοις εκατό, β/ο, δωδεκυλοθειικό νάτριο και 45 τοις εκατό διμεθυλοφορμαμίδιο, ρυθμισμένο σε ρΗ 4,7 με παγόμορφο οξικό οξύ). Μετά από παραμονή για 5 λεπτά, μετρήσεις απορρόφησης του μίγματος αντίδρασης λήφθηκαν με συσκευή ανάγνωσης πλακών μικροτιτλοδότησης (Bio-Rad, Hercules, CA, USA) και αναφέρθηκαν ως η διαφορά μεταξύ 570 nm και 630 nm. Τα δεδομένα εκφράστηκαν ως ποσοστό της μέσης τιμής της ομάδας ελέγχου (δηλ. Herba Cistanche-χωρίς θεραπεία).

Κυτταρικής καλλιέργειας

Τα κύτταρα H9c2, μια μόνιμη κυτταρική σειρά που προέρχεται από καρδιακούς μυοβλάστες (Hescheler et al., 1991), καλλιεργήθηκαν ως μονοστιβάδες σε DMEM συμπληρωμένο με 10 τοις εκατό (ο/ο) FBS. Το μέσο περιείχε γλυκόζη (4,5 g/L) και γλουταμίνη (4,5 mM), συμπληρωμένο με NaHC03 (17 mM), πενικιλλίνη (100 IU/mL) και στρεπτομυκίνη (100 μg/mL). Όλα τα κύτταρα αναπτύχθηκαν υπό ατμόσφαιρα 5 τοις εκατό (ο/ο) CO2 σε αέρα στους 37°C. Το μέσο αντικαταστάθηκε από φρέσκο ​​μέσο κάθε 2 ή 3 ημέρες. Ένα απόθεμα κυττάρων αναπτύχθηκε σε φιάλη καλλιέργειας 75 cm2 και χωρίστηκε πριν από τη συρροή σε αναλογία υποκαλλιέργειας 1:10. Για τον προσδιορισμό ATP-GC, τα κύτταρα H9c2 σπάρθηκαν σε πυκνότητα 2,5 × 104 κύτταρα/φρεάτιο σε μια πλάκα 24-πηγαδιού. Μετά την προσκόλληση των κυττάρων, το εκχύλισμα Herba Cistanche (διαλυμένο σε αλατούχο διάλυμα ρυθμισμένο με φωσφορικά, PBS) εφαρμόστηκε στο μέσο και τα κύτταρα επωάστηκαν για αυξανόμενες περιόδους (2-16 ώρες) του χρόνου. Τα κύτταρα ελέγχου (χωρίς αγωγή) έλαβαν μόνο το PBS.

Μέτρηση ATP-GC in situ

Μετά τις υποδεικνυόμενες περιόδους επώασης με εκχύλισμα HerbaCistanche σε αυξανόμενες συγκεντρώσεις (5{{10}}-300μg/mL), πραγματοποιήθηκε η ανάλυση ATP-GC. Το μέσο αναρροφήθηκε και τα κύτταρα υποβλήθηκαν σε επεξεργασία με διγιτονίνη (50 μg/mL) σε ένα ρυθμιστικό διάλυμα επώασης (120 mM KCl, 5 mMKH2PO4, 2 mM EGTA, 10 mM HEPES, 0,1 mM MgCl2, 0,5 τοις εκατό BSA, pH 7,4 min για 7,4 λεπτά). ◦Γ. Μετά την αναρρόφηση της διγιτονίνης, γλουταμινικό (5 mM), μηλικό (5 mM) και ADP (60 μΜ) προστέθηκαν στα κύτταρα για παραγωγή μιτοχονδριακού ΑΤΡ, το οποίο παρακολουθήθηκε σε αυξανόμενα χρονικά διαστήματα που κυμαίνονταν από 0 έως 15 λεπτά. Η αντίδραση τερματίστηκε με την προσθήκη 60 μL υπερχλωρικού οξέος (30 τοις εκατό, w/v), και τα μίγματα της αντίδρασης στη συνέχεια φυγοκεντρήθηκαν στα 600 x g για 10 λεπτά στους 4°C. Ένα κλάσμα (120 μL) του υπερκειμένου αναμίχθηκαν με 90 μL 1,4 Μ KHCO3 για εξουδετέρωση. Τα μίγματα φυγοκεντρήθηκαν ξανά στα 600 × g στους 4°C και τα υπερκείμενα μετρήθηκαν για την περιεκτικότητα σε ΑΤΡ όπως περιγράφηκε προηγουμένως. Το ATP-GC των κυττάρων που δεν υποβλήθηκαν σε αγωγή υπολογίστηκε με υπολογισμό της περιοχής κάτω από την καμπύλη του γραφήματος (AUC1) που απεικονίζει το ATP που δημιουργήθηκε (nmol/mg πρωτεΐνη) σε συνάρτηση με το χρόνο (0-15 λεπτά) και εκφράζεται σε αυθαίρετες μονάδες. Για τα κύτταρα που υποβλήθηκαν σε αγωγή με HerbaCistanche, οι τιμές AUC1 των αυξανόμενων χρόνων επώασης (3, 5, 7, 10 και 15 λεπτά) κανονικοποιήθηκαν σε μια αντίστοιχη μέση τιμή ελέγχου από μη επεξεργασμένα δείγματα και εκφράστηκαν ως ποσοστό ελέγχου. Στη συνέχεια, η περιοχή κάτω από την καμπύλη (AUC2) της γραφικής παράστασης ποσοστιαίων τιμών ελέγχου έναντι του χρόνου επώασης (3–15 λεπτά) υπολογίστηκε και εκφράστηκε σε αυθαίρετες μονάδες. Τα δεδομένα των ομάδων που υποβλήθηκαν σε θεραπεία με Herba Cistanche εκφράστηκαν ως ποσοστό του μάρτυρα από την εξίσωση:

[AUC2(HerbaCistanche − κατεργασμένο)/AUC2(χωρίς θεραπεία)]×100 τοις εκατό

Μετρήσεις δραστικότητας συνθετάσης συμπλόκου I–IV και κιτρικών

Οι δραστηριότητες του συμπλόκου Ι-ΙΙΙ της μιτοχονδριακής αλυσίδας μεταφοράς ηλεκτρονίων (ETC) μετρήθηκαν με φασματοφωτομετρικές μεθόδους χρησιμοποιώντας ειδικά για το σύμπλοκο υποστρώματα (NADH για το σύμπλοκο Ι, ηλεκτρικό για το σύμπλοκο II και δεκυλουβικινόλη για το σύμπλοκο ΙΙΙ) όπως περιγράφεται (Grad & Lemire, 2004; Hsu et al. , 2005, Mark et al., 2001). Η δραστικότητα του συμπλόκου IV μετρήθηκε χρησιμοποιώντας κιτ ανάλυσης οξειδάσης κυτοχρώματος c από τη Sigma. Η δράση της μιτοχονδριακής κιτρικής συνθάσης μετρήθηκε με τη μέθοδο του Srere (1969).

Δοκιμασία πρωτεΐνης

Οι συγκεντρώσεις πρωτεΐνης των μιτοχονδριακών κλασμάτων και των κυτταρικών προϊόντων προσδιορίστηκαν χρησιμοποιώντας ένα κιτ προσδιορισμού πρωτεΐνης BioRad χρησιμοποιώντας αλβουμίνη ορού βοοειδών ως στάνταρ ({0}},038–0,600 mg/mL).

Στατιστική ανάλυση

Όλα τα δεδομένα εκφράστηκαν ως μέσος όρος ± τυπικό σφάλμα του μέσου όρου (SEM). Αναλύθηκαν με μονόδρομη ανάλυση διακύμανσης (ANOVA). Έγιναν post hoc πολλαπλές συγκρίσεις με LSD. Τιμές P<0.05 were="" regarded="" as="" statistically="">

Αποτελέσματα

Επιδράσεις της θεραπείας με Herba Cistanche στο μυοκαρδιομιτοχονδριακό ATP-GC σε αρουραίους

Όπως φαίνεται στο Σχήμα 1, η θεραπεία με εκχύλισμα Herba Cistanche σε δόσεις έως 0,5 g/kg αύξησε το μυοκαρδιακό μιτοχονδριακό ATP-GC με δοσοεξαρτώμενο τρόπο σε αρουραίους, με το βαθμό διέγερσης να είναι 89 τοις εκατό σε μια δόση από 0,5 g/kg.

Επιδράσεις της θεραπείας με Herba Cistanche στη μιτοχονδριακή μεταφορά ηλεκτρονίων σε καρδιές αρουραίου

Η έκταση της μεταφοράς ηλεκτρονίων σε απομονωμένα μιτοχόνδρια μετρήθηκε με παρακολούθηση της μείωσης του ΜΤΤ. Το υπόστρωμα που χρησιμοποιήθηκε για τον προσδιορισμό ήταν είτε πυροσταφυλικό είτε ηλεκτρικό.

Εικόνα 1. Η επίδραση της θεραπείας με Herba Cistanche στην ικανότητα παραγωγής μιτοχονδριακού ATP σε καρδιές αρουραίου ex vivo

Κάθε γραμμή αντιπροσωπεύει το θέμα ± SEM, με n {{0}}. Τα ζώα έλαβαν από του στόματος θεραπεία με HerbaCistanche στις ενδεικνυόμενες ημερήσιες δόσεις για 3 ημέρες. Η ικανότητα παραγωγής ATP μετρήθηκε όπως περιγράφεται στο "Υλικά και Μέθοδοι". Τα δεδομένα εκφράστηκαν σε ποσοστό ελέγχου σε σχέση με τις τιμές (AUC2) της αντίστοιχης ομάδας ελέγχου που δεν υποβλήθηκε σε αγωγή. ∗Σημαντικά διαφορετικό από την αντίστοιχη ομάδα ελέγχου που δεν υποβλήθηκε σε θεραπεία. σημαντικά διαφορετική από την ομάδα που έλαβε θεραπεία με Herba Cistanche στα 0,5 g/kg.

Εικόνα 2. Επιδράσεις της θεραπείας με Herba Cistanche στη μεταφορά ηλεκτρονίων μιτοχονδρίων σε καρδιές αρουραίου

Κάθε γραμμή αντιπροσωπεύει τη μέση τιμή ± SEM, με n {{0}}. (α) Υποστηριζόμενη από πυροσταφυλικό (β) μιτοχονδριακή μεταφορά ηλεκτρονίων με υποστήριξη ηλεκτρικού άλατος μετρήθηκε με αναγωγή ΜΤΤ, όπως περιγράφεται στο "Υλικά και Μέθοδοι". Τα δεδομένα εκφράστηκαν στο ποσοστό των μη επεξεργασμένων τιμών ελέγχου [υποστηριζόμενα από πυροσταφυλικό: OD570nm− OD630nm =0.0206 ± 0,0001 (SEM), n {{{ 10}}; υποστηρίζεται από ηλεκτρικό: αρσενικό, 0,255 ±0,015, n=5]. ∗Σημαντικά διαφορετική από την αντίστοιχη ομάδα ελέγχου χωρίς θεραπεία. μια ομάδα σημαντικά διαφορετική από 0,5 g/kg.

Όπως φαίνεται στο Σχήμα 2α, η θεραπεία με Herba Cistanche εξαρτώμενη από τη δόση αύξησε την έκταση της μιτοχονδριακής ηλεκτρομεταφοράς που υποστηρίζεται από πυροσταφυλικό σε καρδιές αρουραίων, με τη βέλτιστη διέγερση να παρατηρείται σε δόσεις 0,5 g/kg. Ωστόσο, δεν ανιχνεύθηκαν σημαντικές αλλαγές στην έκταση της μεταφοράς μιτοχονδριαλεηλεκτρονίων που υποστηρίζεται από ηλεκτρικό άλας σε καρδιές αρουραίων που υποβλήθηκαν σε θεραπεία με Herba Cistanche (Εικ. 2β).

Για το Μέρος 2,παρακαλώ κάντε κλικ εδώ.