Νευροπροστατευτικές επιδράσεις της θεραπείας με βότανα Cistanches σε ασθενείς με μέτρια νόσο του Αλτσχάιμερ

Επικοινωνία: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com

Nan Li, Jianping Wang, Jun Ma, Zhiqiang Gu, Chao Jiang, Lie Yu και Xiaojie Fu

Αφηρημένη

Cistanches Herba(CH) πιστεύεται ότι είναι ένα «αναζωογονητικό» υλικό στην παραδοσιακή κινεζική ιατρική. Αξιολογήσαμε τις νευροπροστατευτικές επιδράσεις τουCistanches HerbaεπίΗ ασθένεια Αλτσχάϊμερ(AD) ασθενείς. Μέτρια μ.Χ(Η ασθένεια Αλτσχάϊμερ)οι συμμετέχοντες χωρίστηκαν σε 3 ομάδες:Cistanche Herbaκάψουλα (CH, 𝑛=10), δισκίο Donepezil (DON, 𝑛=8) και μια ομάδα ελέγχου χωρίς θεραπεία (𝑛=6). Αξιολογήσαμε την αποτελεσματικότητα με MMSE και ADAS-cog και διερευνήσαμε τις αλλαγές όγκου του ιππόκαμπου με μαγνητικές τομογραφίες 1,5 T. Επίπεδα πρωτεΐνης, mRNA και εκκρίσεις ολικού tau (T-tau), παράγοντα νέκρωσης όγκου-𝛼 (TNF-𝛼) και ιντερλευκίνης (IL) 1𝛽 (IL-1𝛽) στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό (ΕΝΥ) ανιχνεύθηκαν με στύπωμα Western, RT-PCR και ELISA. Οι βαθμολογίες έδειξαν στατιστική διαφορά μετά από 48 εβδομάδες θεραπείας σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου. Εν τω μεταξύ, οι αλλαγές όγκου του ιππόκαμπου ήταν μικρές στις ομάδες θεραπείας με φάρμακα, αλλά διακριτές στην ομάδα ελέγχου. τα επίπεδα T-tau, TNF-𝛼 και IL-1𝛽 μειώθηκαν σε σύγκριση με εκείνα της ομάδας ελέγχου.Cistanches Herbaθα μπορούσε να βελτιώσει τη γνωστική και ανεξάρτητη ικανότητα διαβίωσης της μέτριας AD(Η ασθένεια Αλτσχάϊμερ)ασθενείς, επιβραδύνουν τις αλλαγές όγκου του ιππόκαμπου και μειώνουν τα επίπεδα T-tau, TNF-𝛼 και IL-1𝛽. Το πρότεινεCistanches Herbaείχε πιθανές νευροπροστατευτικές επιδράσεις για μέτρια AD (Η ασθένεια Αλτσχάϊμερ).

Cistanches Herba

1. Εισαγωγή

Η ασθένεια Αλτσχάϊμερ(AD) είναι μια σειρά από κλινικά σύνδρομα που προκαλούνται από νευροεκφυλισμό που χαρακτηρίζεται από προοδευτική επιδείνωση της γνωστικής ικανότητας και ικανότητας για ανεξάρτητη ζωή. Υπολογίζεται ότι υπάρχουν περίπου 28,4 εκατομμύρια άνθρωποι της μ.Χ(Η ασθένεια Αλτσχάϊμερ)παγκοσμίως το 2010 [1]. Τώρα δεν υπάρχουν θεραπείες τροποποίησης της νόσου για την πρόληψη ή τη θεραπεία της AD(Η ασθένεια Αλτσχάϊμερ)είναι διαθέσιμα. Υπερφωσφορυλιωμένη πρωτεΐνη tau που συσσωρεύεται ενδοκυτταρικά στην AD(Η ασθένεια Αλτσχάϊμερ)εγκέφαλος και δημιουργία νευροϊνιδιακών μπερδέματα και αμυλοειδούς-βήτα (A𝛽) πρωτεΐνη που συσσωρεύεται εξωκυτταρικά στην AD(Η ασθένεια Αλτσχάϊμερ)Οι πλάκες του εγκεφάλου και του φλοιώδους γεροντικού είναι τα κύρια νευροπαθολογικά σημάδια της AD. Η αυξημένη περιεκτικότητα σε ολική ταυ (T-tau) στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό (ΕΝΥ) έχει αποδειχθεί σταθερά στην AD(Η ασθένεια Αλτσχάϊμερ)[2]. Η προοδευτική ατροφία διαφόρων περιοχών του εγκεφάλου στη ΝΑ παρατηρείται επίσης ευρέως, ιδιαίτερα στον ιππόκαμπο που είναι μια περιοχή που εμπλέκεται στη γνωστική λειτουργία, τη μνήμη και τη μάθηση. Οι μεταθανάτιες αναφορές έδειξαν πρώιμες νευροπαθολογικές βλάβες και νευρωνική απώλεια στον ιππόκαμπο [3]. Καθώς η μαγνητική τομογραφία (MRI) μπορεί να παρακολουθεί δομικά την ατροφία του ιππόκαμπου στις μεσαίες και όψιμες καταστάσεις της AD(Η ασθένεια Αλτσχάϊμερ), μπορεί να είναι ένας άλλος δείκτης της AD(Η ασθένεια Αλτσχάϊμερ)[4]. Πρόσφατα, η νευροφλεγμονή από μη φυσιολογικά ενεργοποιημένη νευρογλοία εμφανίστηκε ως ένας σημαντικός μηχανισμός της διαδικασίας της AD [5]. Τα αυξημένα επίπεδα Α𝛽 και η εναπόθεση προκαλούν χρόνια ενεργοποίηση του ανοσοποιητικού συστήματος και διαταραχή των λειτουργιών μικρογλοιακής κάθαρσης. Τα επιδημιολογικά δεδομένα έδειξαν βασικό ρόλο στην ενεργοποίηση του εγγενούς ανοσοποιητικού συστήματος ως παράγοντα προαγωγής της νόσου [6]. Οι κυτοκίνες πιστεύεται ότι συμμετέχουν στη συσσώρευση αμυλοειδών πλακών και επιταχύνουν τις βλαβερές επιδράσεις του A𝛽 μέσω της εμπλοκής στη φλεγμονώδη διαδικασία [7]. Τα αυξανόμενα στοιχεία αποκαλύπτουν ότι ο εγκέφαλος μπορεί να ξεκινήσει μια καλά ρυθμισμένη ανοσοαπόκριση σε τραυματισμό [8, 9] και να παρακινήσει τα περιφερειακά ανοσοκύτταρα [10, 11]. Οι κυκλοφορούσες κυτοκίνες μπορούν να διασχίσουν τον αιματοεγκεφαλικό φραγμό (BBB) ​​μέσω ενός κορεσμένου μηχανισμού μεταφοράς [12, 13]. Οι TNF-𝛼, IL-1𝛽 και προφλεγμονώδεις κυτοκίνες έχουν ήδη αποδειχθεί ότι προκαλούνται σε εγκεφάλους ποντικών από ιονίζουσα ακτινοβολία [14, 15]. Επιπλέον, η IL-1𝛽 μπορεί να έχει διαφορετικές επιδράσεις στα κύτταρα του ΚΝΣ: η χαμηλή συγκέντρωση IL-1 έχει νευροτοξικές επιδράσεις [16]. Πολυάριθμες έρευνες υποδηλώνουν έναν κεντρικό ρόλο των προφλεγμονωδών κυτοκινών στη φλεγμονή του ΚΝΣ [17-21] και τα υψηλά επίπεδα αυτών των κυτοκινών μπορεί να προκαλέσουν νευρωνική βλάβη στην AD(Η ασθένεια Αλτσχάϊμερ)εγκέφαλος [22]. Επί του παρόντος, ορισμένες αντιφλεγμονώδεις θεραπευτικές ιδέες της θεραπείας στην AD(Η ασθένεια Αλτσχάϊμερ)έχει προταθεί.

Cistanches Herba(CH), ολοπαρασιτικό φυτό του Cistanche deserticola YC Ma που χαρακτηρίζεται ως το κύριο υλικό για τον τονισμό του νεφρού και ως υλικό «αναζωογονητικό γιανγκ» στην παραδοσιακή κινεζική θεωρία [23]. Χρησιμοποιείται ευρέως για τη θεραπεία της λήθης και της απώλειας ακοής, για την αύξηση της δύναμης της αναπαραγωγής και την ανάπτυξη της λειτουργίας γονιμότητας. Οι προηγούμενες μελέτες έδειξαν ότι η CH έχει διαφορετικές φαρμακολογικές δράσεις: αντιλοχιστικές και αντιφλεγμονώδεις επιδράσεις [24-26]. Οι κύριες δραστικές ενώσεις στο CH είναι φαινυλαιθανοειδείς γλυκοσίδες: όπως η βερμπασκοσίδη και η Εχινακοσίδη [27], οι οποίες πιστεύεται ότι έχουν κάποιες επιδράσεις στο κεντρικό νευρικό σύστημα (ΚΝΣ). Μελέτες έχουν αναφέρει ότι η βερμπασκοσίδη εμφανίζει νευροπροστατευτικά αποτελέσματα έναντι του 1-μεθυλ-4- φαινυλοπυριδίου (MPP plus ) 5 που έχει αποδειχθεί ότι προκαλεί σημαντικά ελλείμματα μνήμης in vivo [28]. Η εχινακοσίδη μπορεί να διασώσει νευρωνικά κύτταρα SH-SY5Y μετά από απόπτωση που προκαλείται από TNF-𝛼 και να βελτιώσει τα ελαττώματα συμπεριφοράς σε ένα μοντέλο ποντικού της νόσου του Πάρκινσον [29, 30].

Από τη Χ.Θ(Cistanches Herba)έχει χρησιμοποιηθεί για τη θεραπεία της λήθης για πολλά χρόνια και οι ενώσεις του έχουν κάποιες επιδράσεις στο ΚΝΣ, μπορεί επίσης να έχει νευροπροστατευτικές επιδράσεις στην AD(Η ασθένεια Αλτσχάϊμερ). Στη μελέτη μας, αναλύσαμε τις γνωστικές και συμπεριφορικές ικανότητες των ασθενών και αξιολογήσαμε τις επιδράσεις στο T-tau, το TNF-𝛼 και το IL-1𝛽. Πιθανές επιπτώσεις της CH(Cistanches Herba) κατά του νευροεκφυλισμού παρατηρήθηκαν.

Cistanches Herba

2. Υλικά και μέθοδοι

2.1. Ασθενείς

Όλοι οι ασθενείς παρείχαν γραπτή ενημερωμένη συγκατάθεση. Αυτή η μελέτη πραγματοποιήθηκε σύμφωνα με τον Κώδικα Δεοντολογίας της Παγκόσμιας Ιατρικής Ένωσης (Διακήρυξη του Ελσίνκι) και εγκρίθηκε από την επιτροπή δεοντολογίας του Πανεπιστημίου Zhengzhou (ημερομηνία: 10 Νοεμβρίου 2012).

Επιλέχθηκαν 26 συμμετέχοντες από το δεύτερο συνεργαζόμενο νοσοκομείο του Πανεπιστημίου Zhengzhou και το πέμπτο συνεργαζόμενο νοσοκομείο του Πανεπιστημίου Zhengzhou από το 2013 έως το 2014. Είχαν παρόμοιο εκπαιδευτικό υπόβαθρο και η μέση διάρκεια των συμπτωμάτων πριν από τη διάγνωση ήταν 1,5 έτος. Κάθε συμμετέχων που συμπεριλήφθηκε στη μελέτη μας είχε υποβληθεί σε μια σειρά κλινικών συνεντεύξεων και εξετάσεων από τον νευρολόγο. Τα κριτήρια συμπερίληψης ήταν MMSE και ADAS-cog, από 10 έως 20 και 29 έως 40. Κριτήρια αποκλεισμού ήταν οξεία ή χρόνια λοίμωξη, αρχική φλεγμονώδης νόσος, ογκογένεση, θεραπεία Donepezil, υδροχλωρική μεμαντίνη ή φύλλο Ginkgo biloba, θεραπεία αντιφλεγμονώδους φαρμάκου ή επίπεδα κορτικοστεροειδών και C-αντιδρώσας πρωτεΐνης (CRP) ⩾ 10 mg/L.

Συνολικά 20 μ.Χ(Η ασθένεια Αλτσχάϊμερ)ασθενείς συστάθηκαν σε φαρμακευτική θεραπεία: Ομάδα θεραπείας CH: χορήγηση από το στόμαCistanches Herbaκάψουλα 48 εβδομάδες (0,9 g/ημέρα, κάθε άτομο, N=11) και ομάδα θεραπείας DON: από του στόματος χορήγηση δισκίου Donepezil 48 εβδομάδες (5 mg/ημέρα, κάθε άτομο, N{{6 }}). Έξι ασθενείς εγγράφηκαν ως η ομάδα ελέγχου (καμία θεραπεία, 𝑛=6). Όλοι οι συμμετέχοντες συμφώνησαν και ενημερώθηκαν να λάβουνCistanches Herba(CH) κάψουλα (0.3 g/κάψουλα, 3 κάψουλες την ημέρα, LYYLYD pharmaceuticals Company, Changchun, Κίνα), δισκίο Donepezil (5 mg/δισκίο, 1 δισκίο την ημέρα, Eisai China Inc., Suzhou, Κίνα), ή τίποτα, αντίστοιχα. Όλοι οι ασθενείς δεν είχαν φαρμακευτικές θεραπείες πριν από αυτή τη μελέτη.

2.2. Τεστ Γνωστικών Ικανοτήτων

Όλες οι αξιολογήσεις δόθηκαν πριν και μετά τις θεραπείες από τυφλούς αξιολογητές.

2.3. MRI

Για κάθε συμμετέχοντα, πραγματοποιήθηκαν μαγνητικές τομογραφίες σε σαρωτή μαγνητικής τομογραφίας GE 1.5 T Signa HDxt (General Electric Company, Fairfield, CT, ΗΠΑ). Η αλληλουχία μαγνητικής τομογραφίας ήταν υπό τις συνθήκες: TR=11.6 ms, TE=5 ms, χωρική ανάλυση=0.94 mm και πάχος τομής=1.2 mm. Όλες οι εικόνες αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας τα πακέτα λογισμικού Analyze (Mayo Foundation, 1999) και Statistical Parametric Mapping (SPM99, Institute of Neurology, Λονδίνο, UK, που χρησιμοποιούνται αποκλειστικά για τη μέτρηση του όγκου της συνολικής φαιάς ουσίας) [33]. Η μορφομετρία του ιππόκαμπου έγινε από νευροακτινολόγους (ιχνηλασία χεριών) που ήταν τυφλοί στη διάγνωση. Τα περιγράμματα του ιππόκαμπου σχεδιάστηκαν στην προβολή με κεφαλή βέλους χρησιμοποιώντας το εργαλείο "περιοχή ενδιαφέροντος" που εφαρμόστηκε στο λογισμικό Analyze. Αφού ολοκληρώθηκε το σχέδιο για όλες τις φέτες με κεφαλή βέλους όπου ήταν ορατός ο ιππόκαμπος, χορηγήθηκε η ορθότητα της οριζόντιας στην στεφανιαία και οβελιαία όψη. Στη συνέχεια, οι αμφίπλευροι όγκοι του ιππόκαμπου και οι συνολικοί όγκοι του εγκεφάλου προσδιορίστηκαν χρησιμοποιώντας έναν αυτόματο αλγόριθμο προγραμματισμένο σε MATLAB και SPM99.

2.4. Οσφυονωτιαια παρακεντηση

Συλλέξαμε το εγκεφαλονωτιαίο υγρό των ασθενών σε τρία σημεία: πριν από τη φαρμακευτική θεραπεία, 24 εβδομάδες μετά τη θεραπεία και 48 εβδομάδες μετά τη θεραπεία. Κανένας από τους συμμετέχοντες δεν είχε αντενδείξεις οσφυονωτιαίας παρακέντησης. Πριν από την εκτέλεση της παρακέντησης, θα πρέπει να ενημερωθεί ο καθένας για τη διαδικασία μαζί με τους πιθανούς κινδύνους και τα οφέλη και να επιδείξει τη συγκατάθεσή του από τον κηδεμόνα του. Ο ασθενής ήταν σε ξαπλωμένη θέση με την πλάτη λυγισμένη. Στη συνέχεια, βρέθηκε το σημείο παρακέντησης που βρισκόταν στη διασταύρωση μεταξύ των άνω πλευρών της λαγόνιας ακρολοφίας και της σπονδυλικής στήλης (L4 ακανθώδης επίπεδο). Το ορόσημο του διαστήματος μεταξύ των επιπέδων χώρου L3 και L4 επισημάνθηκε. Αυτή η θέση ήταν κάτω από τον τερματισμό του νωτιαίου μυελού και πολύ πιο ασφαλής για αυτήν την επέμβαση. Τοπικό αναισθητικό διηθήθηκε υποδορίως και εγχύθηκε μια σπονδυλική βελόνα στο ανατομικό ορόσημο κατά μήκος της επιδιωκόμενης διαδρομής. Οκτώ χιλιοστόλιτρα υγρού συλλέχθηκαν και αποθηκεύτηκαν στους -80∘ C για περαιτέρω δοκιμή. Όταν λήφθηκε ένα επαρκές δείγμα, η βελόνα αφαιρέθηκε και ο ασθενής έμεινε σε επίπεδη θέση για άλλες 6 ώρες.

2.5 Αλυσιδωτή αντίδραση ανάστροφης μεταγραφής-πολυμεράσης (RT-PCR)

Χρησιμοποιήσαμε το αντιδραστήριο Trizol (CWBIO, Πεκίνο, Κίνα) για την εξαγωγή ολικού RNA από το ΕΝΥ των συμμετεχόντων σύμφωνα με τις οδηγίες του κατασκευαστή και δημιουργήσαμε cDNA πρώτης έλικος από το σύστημα ThermoScript RT-PCR (Invitrogen, Grand Island, Νέα Υόρκη, ΗΠΑ) με 1 μL τυχαίου εξαμερούς εκκινητή, 2 𝜇L 10 mM dNTP-Mix, 0,1 M DTT και 1 𝜇L ThermoScript RT σε νερό επεξεργασμένο με DEPC σε τελικό όγκο αντίδρασης 20 l. Στη συνέχεια το μίγμα της αντίδρασης μετουσιώθηκε στους 63°C^∘C για 5 λεπτά και ακολούθησε στα 45^∘C στα 50 λεπτά και αποθηκεύεται στους -20^∘ C.

Σύμφωνα με τα δεδομένα της τράπεζας γονιδίων, σχεδιάσαμε τους εκκινητές και τους συνθέσαμε από τη Sangon Biotech (Σαγκάη, Κίνα): T-tau, εμπρός: 5 -CAAAGCTCGCATGGTCAGT A-3 και αντίστροφα: 5 -AGGGTTGGATCAGGGGTCT{ 6}}; TNF-𝛼, προς τα εμπρός: 5 -AGGC AATAGGTTTTGAGGGCCAT{{10}} και αντίστροφα: 5 -GGGACACACAAGCATCAAGGA TAC- 3 ; IL-1𝛽, προς τα εμπρός: 5 -TGGCAGGTTCCTGATTT-3 και αντίστροφα: 5 -AACTTGTT CGACAA CCCTC-3 ; έλεγχος GADPH, προς τα εμπρός: 5 -GGUCAUCCAUGACAAC UUUTT- 3 και αντίστροφη: 5 -AAAGUUGUCAUGGAUGACCTT-3. Αυτά τα επίπεδα έκφρασης του mRNA μετρήθηκαν με RT PCR. Το μίγμα της αντίδρασης αποτελούνταν από 1 ug δείγματος cDNA, 1 μL εκκινητή, 2 𝜇L 10 mM dNTPs, 25 𝜇L Taq DNA πολυμεράσης (Sangon Biotech) και επεξεργασμένο με DEPC νερό σε τελικό όγκο 50 𝜇L. Οι συνθήκες PCR ήταν 98∘ C για 30 δευτερόλεπτα (μετουσίωσης), 55-58∘ C για 30 δευτερόλεπτα (ανόπτηση) και 72∘ C για 60 δευτερόλεπτα (επέκταση) για 30 κύκλους και στη συνέχεια στους 72 C για 10 λεπτά, αποθήκευση στους 4∘ C. Τα ληφθέντα θραύσματα επιβεβαιώθηκαν με ηλεκτροφόρηση πηκτής αγαρόζης 1,0 τοις εκατό. Τα μεγέθη των προϊόντων PCR των T-tau, TNF-𝛼 και IL-1𝛽 ήταν 188 bp, 560 bp και 298 bp.

Cistanches Herba και εκχύλισμα cistanche

3. Αποτελέσματα

3.1. Το Cistanches Herba θα μπορούσε να βελτιώσει τις γνωστικές ικανότητες

10 από τους 11 συμμετέχοντες στο Χ.Θ(Cistanches Herba)ομάδα (το ποσοστό κατακράτησης ήταν 90,1 τοις εκατό και το ποσοστό φθοράς ήταν 9,9 τοις εκατό και ένας ασθενής εγκατέλειψε τη μελέτη λόγω σοβαρού εμέτου), 8 από τους 9 συμμετέχοντες στην ομάδα Don (το ποσοστό κατακράτησης ήταν 88,9 τοις εκατό και το ποσοστό τριβής ήταν 11,1 τοις εκατό και ένας ασθενής παραιτήθηκε λόγω πεπτικού έλκους) και 6 από τους 6 συμμετέχοντες στην ομάδα ελέγχου (το ποσοστό κατακράτησης ήταν 100 τοις εκατό) ολοκλήρωσαν την ανοιχτή πιλοτική μελέτη 48 εβδομάδων. Τα κλινικά χαρακτηριστικά της AD(Η ασθένεια Αλτσχάϊμερ)ασθενείς παρουσιάστηκαν στον Πίνακα 1. AD(Η ασθένεια Αλτσχάϊμερ)Οι συμμετέχοντες με φαρμακευτικές θεραπείες ή χωρίς θεραπείες αξιολογήθηκαν οι γνωστικές τους ικανότητες από το MMSE και το ADAS-cog, κατά την περίοδο παρακολούθησης (Εικόνες 1(α) και 1(β)). Η μέτρηση στις ομάδες θεραπείας με φάρμακα έδειξε υψηλότερες βαθμολογίες χρησιμοποιώντας MMSE και χαμηλότερες βαθμολογίες χρησιμοποιώντας ADAS-cog στις 48 εβδομάδες (𝑃 < 0.05),="" σε="" σύγκριση="" με="" την="" ομάδα="" ελέγχου.="" ωστόσο,="" δεν="" υπήρχαν="" εμφανείς="" διαφορές="" μεταξύ="" των="" ομάδων="" στις="" 24="" εβδομάδες="" και="" τα="" δεδομένα="" έδειξαν="" μικρή="" διαφορά="" μεταξύ="" της="">(Cistanches Herba)και ομάδες DON (𝑃 > 0.05).

3.2. Το Cistanches Herba θα μπορούσε να επιβραδύνει την ατροφία του ιππόκαμπου

Ο όγκος του αμφοτερόπλευρου ιππόκαμπου (HIP) στην ομάδα ελέγχου που μετρήθηκε στις 48 εβδομάδες ήταν 4,2 τοις εκατό κάτω από τον μέσο όρο των δεδομένων που μετρήθηκαν στις 0 εβδομάδες. Και δεν υπήρχαν ορατές αλλαγές όγκου του ιππόκαμπου σε ομάδες θεραπείας με φάρμακα (Εικόνες 2(α)–2(στ)).

3.3. Το Cistanches Herba θα μπορούσε να μειώσει την έκφραση των mRNA T-tau, TNF-𝛼 και IL-1𝛽 και τα επίπεδα πρωτεϊνών των T-tau, TNF-𝛼 και IL-1𝛽.

Τα mRNA T-tau, TNF-𝛼 και IL-1𝛽 μειώθηκαν σημαντικά στο CH(Cistanches Herba)ομάδα θεραπείας και ομάδα θεραπείας DON, αντίστοιχα (Εικόνες 3(α)–3(γ)) κατά τη διάρκεια 48 εβδομάδων. Τα επίπεδα των mRNA T-tau, TNF-𝛼 και IL-1𝛽 έδειξαν φθίνουσα τάση (Εικόνες 3(d)–3(f)). Οι πρωτεΐνες T-tau, TNF-𝛼 και IL{10}}𝛽 μειώθηκαν επίσης στο CH(Cistanches Herba)ομάδα θεραπείας και ομάδα θεραπείας DON σε σύγκριση με τον έλεγχο (Εικόνες 4(α)–4(g)). Δεν βρέθηκαν διαφορές είτε στην έκφραση των mRNAs είτε στα επίπεδα πρωτεΐνης μεταξύ του CH(Cistanches Herba)ομάδα θεραπείας και ομάδα θεραπείας DON, υποδεικνύονταςCistanches Herbaθα μπορούσε να μειώσει τα επίπεδα T-tau, TNF-𝛼 και IL-1𝛽 mRNA και πρωτεϊνών με τα ίδια αποτελέσματα με το Donepezil.

3.4. Το Cistanches Herba θα μπορούσε να αναστείλει τις εκκρίσεις των T-tau, TNF-𝛼 και IL-1𝛽.

Cistanches Herbaαναφέρθηκε ότι εμπλέκεται σε πολλούς τύπους φλεγμονωδών ασθενειών [35]. Μετρήσαμε τα περιεχόμενα των TNF-𝛼 και IL-1𝛽 στο ΕΝΥ με ELISA. Εν τω μεταξύ, αξιολογήσαμε τις συγκεντρώσεις του T-tau στο ΕΝΥ με ELISA. Σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου, τα επίπεδα T-tau, TNF-𝛼 και IL-1𝛽 στο ΕΝΥ ήταν χαμηλότερα (𝑃 < 0.01)="" στις="" ομάδες="" θεραπείας,="" όπως="" φαίνεται="" στο="" σχήμα="" 5(α)="" –5(c),="" υποδεικνύοντας="">Cistanches Herbaθα μπορούσε να μειώσει τα επίπεδα T-tau και να αναστείλει φλεγμονώδεις παράγοντες όπως οι εκκρίσεις TNF-𝛼 και IL-1𝛽 στην AD(Η ασθένεια Αλτσχάϊμερ)παθολογική διαδικασία. Ανάμεσα σε δύο ομάδες θεραπείας, τα περιεχόμενα T-tau, TNF-𝛼 ή IL-1𝛽 δεν είχαν στατιστική διαφορά (𝑃 > 0.05), γεγονός που υποδηλώνει ότι και τα δύο φάρμακα θα μπορούσαν να μειώσουν το T-tau, το TNF- 𝛼, και IL-1𝛽 επίπεδα και η επίδραση τουCistanches Herbaήταν το ίδιο με το Donepezil. Σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου, τα περιεχόμενα T-tau, TNF-𝛼 και IL-1𝛽 στις ομάδες θεραπείας είχαν φθίνουσα τάση.

4. Συζήτηση

Οι μελέτες μας το έδειξανCistanches Herbaθα μπορούσε να βελτιώσει τις γνωστικές ικανότητες, να επιβραδύνει την ατροφία του ιππόκαμπου και να μειώσει το περιεχόμενο των T-tau, TNF-𝛼 και IL-1𝛽 στο ΕΝΥ μέτριας AD(Η ασθένεια Αλτσχάϊμερ)ασθενείς. Αναλύσαμε τους σχετικούς όγκους του ιππόκαμπου που εκτελούνται από το πηλίκο του ιππόκαμπου και του συνολικού όγκου του εγκεφάλου και κάναμε την ορθότητα της οριζόντιας ελέγχοντας στην στεφανιαία και οβελιαία όψη. Μπόρεσε να μειώσει στο μέγιστο τα λάθη. Κανένας προηγούμενος ερευνητής δεν είχε αναφέρει τις νευροπροστατευτικές επιδράσεις τουCistanches Herbaστις μ.Χ(Η ασθένεια Αλτσχάϊμερ)ασθενείς. Από όσο γνωρίζουμε, αυτή η μελέτη είναι η πρώτη που διερευνά τα θεραπευτικά αποτελέσματα τουCistanches Herbaσε διαφήμιση(Η ασθένεια Αλτσχάϊμερ)ασθενείς.

Η «Θεωρία Γιν/Γιανγκ» είναι μια κλασική δομή της Παραδοσιακής Κινεζικής Ιατρικής (TCM), η οποία πιστεύει ότι η δομή του ανθρώπινου σώματος είναι μια οργανική οντότητα και το σύμπαν είναι μια ενότητα αντίθετης δύναμης, δηλαδή, Γιν και Γιανγκ. Σύμφωνα με τη Θεωρία Γιν/Γιανγκ, το Τσι ταξινομείται ως Γιανγκ, ενώ η ουσία, το αίμα και τα σωματικά υγρά ανήκουν στο Γιν. Όλα χτίζουν τη βάση του ανθρώπινου σώματος. Με την έννοια Yin/Yang, το TCM εξηγεί τα κλινικά συμπτώματα και καθοδηγεί τη θεραπεία ασθενειών. Το Yang/Qi οδηγεί τις βιολογικές δραστηριότητες στο ανθρώπινο σώμα και ενισχύει την ενέργεια στα ανθρώπινα όργανα. Οι ελλείψεις στο Yang/Qi εμφανίζουν σημαντικό ρόλο στη νόσο του Alzheimer [36].Cistanches Herbaθεωρείται ως υλικό αναζωογόνησης Yang στο ανθρώπινο σώμα. Μπορεί να είναι μια επιλογή θεραπείας για την AD(Η ασθένεια Αλτσχάϊμερ). Στη μελέτη μας, προσπαθήσαμε να παρατηρήσουμε τις επιπτώσεις τουCistanches Herbaστις μ.Χ(Η ασθένεια Αλτσχάϊμερ)από τη θεωρία της δυτικής ιατρικής. Εν τω μεταξύ, επιλέγουμε Donepezil για σύγκρισηCistanches Herbaνα αξιολογήσει τις ιατρικές του επιπτώσεις. Η Donepezil, ένας πολύ γνωστός αναστολέας της ακετυλοχολινεστεράσης (AchE) εγκεκριμένος από τον FDA, αποδείχθηκε ότι προστατεύει από την τοξικότητα A𝛽 και tau σε ζωικά μοντέλα και κύτταρα [37]. Η 1-ετής, ελεγχόμενη με εικονικό φάρμακο δοκιμή είχε αποκαλύψει ότι οι ασθενείς που έλαβαν δονεπεζίλη εξασθένησαν κατά περίπου το μισό από τους ασθενείς που έλαβαν εικονικό φάρμακο σε μια παγκόσμια βαθμολογία συμπτωμάτων άνοιας [38]. Και η προηγούμενη έρευνα έδειξε ότι μια χορήγηση δονεπεζίλης σε AD(Η ασθένεια Αλτσχάϊμερ)ασθενείς για 1 μήνα οδήγησαν σε μειωμένα επίπεδα IL-6 και IL-1 σε μονοπύρηνα κύτταρα του περιφερικού αίματος, υποδεικνύοντας την αντιφλεγμονώδη επίδραση αυτού του παράγοντα. Το Donepezil είχε επίσης αποδείξει τις αντιφλεγμονώδεις επιδράσεις σε ποντίκια με απολιποπρωτεΐνη E-knockout που έδειξαν περιορισμένη έκφραση του TNF- 𝛼 στην αορτή [39].

Μελετήσαμε την επιρροή τουCistanches Herbaνα διερευνηθεί εάν θα μπορούσε να παίξει βασικό ρόλο στην παθοφυσιολογία της AD(Η ασθένεια Αλτσχάϊμερ)στο ΚΠΣ. Παρατηρήθηκε σημαντική στατιστική διαφορά στις γνωστικές ικανότητες μεταξύ των ομάδων θεραπείας με φάρμακα και των ομάδων ελέγχου. Οι Mohs et al. [40] ανέφερε επίσης ότι το Donepezil ωφελεί στην ενίσχυση των γνωστικών ικανοτήτων της AD(Η ασθένεια Αλτσχάϊμερ). Η ανάλυση των εκφράσεων T-tau, TNF-𝛼 και IL-1𝛽 στο ΕΝΥ που πραγματοποιήσαμε έδειξε ότι όλες άλλαξαν σημαντικά κατά τη διάρκεια 48 εβδομάδων από τις θεραπείες. Τα ευρήματά μας έδειξαν τις εκφράσεις mRNA των T-tau, TNF-𝛼 και IL-1𝛽 και τα επίπεδα αυτών των πρωτεϊνών μειώθηκαν μετά τη θεραπεία κατάCistanches Herba, και υπήρξαν φθίνουσες τάσεις με την παράταση του χρόνου θεραπείας. ΠρότεινεCistanches Herbaθα μπορούσε να διασχίσει τον αιματοεγκεφαλικό φραγμό (BBB) ​​και να εμπλέξει την παθολογική διαδικασία της AD(Η ασθένεια Αλτσχάϊμερ). Cistanches Herbaμπορεί να είναι σε θέση να αποκαταστήσει ένα φυσιολογικό ρυθμιστικό δίκτυο του εγκεφάλου.

Πρόσφατες μελέτες ανέφεραν ότι οι υδατάνθρακες σεCistanches Herbaείχε επιδράσεις στο κεντρικό νευρικό σύστημα (ΚΝΣ) και θα μπορούσε να αναστείλει τις φλεγμονώδεις δραστηριότητες των κυτοκινών [24, 41]. Μπορεί να οφείλεται σε κάποια είδη ενεργών συστατικών. Φαινυλαιθανοειδείς γλυκοσίδες (PhGs), που διαχωρίστηκαν και καθαρίστηκαν απόCistanches Herba, θεωρούνται ως τα κύρια βιοενεργά στοιχεία, τα οποία πολλές μελέτες έχουν δείξει ότι έχουν ευρείες βιολογικές επιδράσεις που περιλαμβάνουν αντιβακτηριακές, κυτταροτοξικές, αντιφλεγμονώδεις και νευροπροστατευτικές δραστηριότητες. Στη μελέτη του Mannami, τα PhGs μπόρεσαν να αναστείλουν τη συσσώρευση του A𝛽42 και να περιορίσουν τις προκαλούμενες από A𝛽42-κυτταροτοξικές επιδράσεις στα κύτταρα SH-SY5Y του ανθρώπινου νευροβλαστώματος διεγείροντας την έκφραση του mRNA των γλυκολυτικών ενζύμων και του ενδοκυτταρικού ATP [42]. Τα PhGs θα μπορούσαν να αυξήσουν τη μνήμη χωρικής εκμάθησης των ποντικών με επιτάχυνση της απολεξίας, ενισχύοντας την έκφραση mRNA της φωσφογλυκερικής κινάσης [43]. Οι δοκιμές του Park έδειξαν ένα Ν-τελικό θραύσμα tau 17 kD που δημιουργήθηκε από τη διάσπαση της καλπαΐνης, που περιείχε υπολείμματα αμινοξέος 45-230, το οποίο ήταν διευθετημένο για να μεσολαβήσει στην επαγόμενη από το A𝛽 τοξικότητα [44]. Οι έρευνες για την ανοσοθεραπεία tau υποδεικνύουν ότι η ανοσοποίηση tau παράγει την ενεργοποίηση του συστήματος συμπληρώματος που επάγει μια παρενέργεια που οδηγεί σε πρωτεόλυση του A𝛽 [45]. Αυτά σημαίνουν κάποια σχέση μεταξύ A𝛽 και tau. Ωστόσο, λίγες σχετικές έρευνες έδωσαν ψέματα σε μια συζήτηση σχετικά με τις διαδραστικές επιδράσεις του A𝛽 και του tau ή των PhGs και της πρωτεΐνης tau. Στις μελέτες μας, υποθέσαμε ότι τα PhGs μπορεί να επηρεάσουν την παθολογία tau στην AD(Η ασθένεια Αλτσχάϊμερ)επηρεάζοντας τη συσσώρευση του A𝛽, αλλά ο σαφής μηχανισμός ήταν άγνωστος. Οι έρευνες για τις αντιφλεγμονώδεις ικανότητες in vitro ανέφεραν ότι τα PhGs θα μπορούσαν να αναστείλουν την παραγωγή IL-10 και TNF- 𝛼 σε περιτοναϊκά μακροφάγα. Αποδείχθηκε επίσης ότι έχουν δοσοεξαρτώμενες επιδράσεις στις αναστολές των εκφράσεων τόσο των γονιδίων όσο και των πρωτεϊνών των χημειοκινών που ενεργοποιούνται από ιντερφερόνη- (IFN-) g και TNF-𝛼 [46]. Ωστόσο, στη μελέτη μας, δεν απομονώσαμε PhGs απόCistanches Herbaκαι επικεντρωθείτε σε αυτά. Θα χρειαζόταν περαιτέρω έρευνα με διαφορετικές προσεγγίσεις όπως η κυτταρική βιολογία, η μοριακή βιολογία και η χημεία των φυτών για την απεικόνιση των δράσεων τουCistanches Herbaκαι τα συστατικά του.

Η φλεγμονή είναι ένας γνωστός παράγοντας στην αιτιοπαθογένεση νευροεκφυλιστικών νοσημάτων, όπως π.χ.Η ασθένεια Αλτσχάϊμερ(μ.Χ.) [47]. Πρώιμες μελέτες έχουν αποδείξει ότι το εγγενές ανοσοποιητικό σύστημα και το σύστημα συμπληρώματος στους εγκεφάλους ασθενών με AD ενεργοποιούνται. Και οι πλάκες αμυλοειδούς περιβάλλονται πάντα από ενεργοποιημένα μικρογλοία, τα οποία μπορούν να ενεργοποιήσουν υποδοχείς τύπου νεύματος (NLRs) στο κυτταρόπλασμα. Αυτά τα NLR οδηγούν στην ενεργοποίηση και συγκέντρωση συμπλεγμάτων κυτταροπλασματικής πρωτεΐνης ως φλεγμονών. Αυτά τα σύμπλοκα μπορούν να ενεργοποιήσουν τις προφλεγμονώδεις κασπάσες, συγκεκριμένα την κασπάση-1, η οποία στη συνέχεια ενεργοποιεί τις προφλεγμονώδεις κυτοκίνες όπως το TNF-𝛼 και το IL-1𝛽 [48]. Η προηγούμενη μελέτη ανέφερε ότιCistanches Herbaβελτίωσε το ανοσοποιητικό σύστημα [49, 50]. Οι μελέτες μας έδειξαν ότι τα επίπεδα TNF-𝛼 και IL-1𝛽 στο CFS των ομάδων θεραπείας με φάρμακα ήταν σημαντικά χαμηλότερα από αυτά στην ομάδα ελέγχου στις 24 εβδομάδες και 48 εβδομάδες. Υποθέσαμε ότιCistanches Herbaμπορεί να συνδέεται με το μονοπάτι της νευροφλεγμονής στην AD(Η ασθένεια Αλτσχάϊμερ)εγκεφάλους.

5. Συμπεράσματα

Η μελέτη μας απέδειξεCistanches Herbaθα μπορούσε να βελτιώσει τις γνωστικές ικανότητες στην AD(Η ασθένεια Αλτσχάϊμερ)και επιβραδύνουν την ατροφία του ιππόκαμπου του ασθενούς, καταστέλλουν τις εκφράσεις των T-tau, TNF-𝛼 και IL-1𝛽 στο ΕΝΥ της AD(Η ασθένεια Αλτσχάϊμερ)ασθενείς με παρόμοια αποτελεσματικότητα με το Donepezil, αλλάCistanches Herbaήταν πολύ φθηνότερο και ευκολότερο στην αγορά, επομένως θα μπορούσε να είναι ένα είδος προσβάσιμο υποκατάστατο για το Donepezil, ειδικά στην Κίνα ή σε άλλες αναπτυσσόμενες χώρες.

Επιδράσεις του Cistanches Herba: ΑΝΤΙ-Νόσος Αλτσχάιμερ

Συντομογραφίες

CH: Cistanches Herba

ΝΤΟΝ: Ντονεπεζίλ

PhGs: Φαινυλαιθανοειδείς γλυκοσίδες

TCM: Παραδοσιακή κινέζικη ιατρική

βιβλιογραφικές αναφορές

[1] M. Prince, R. Bryce, E. Albanese, A. Wimo, W. Ribeiro και CP Ferri, «The global prevalence of dementia: a systematic review and metaanalysis», Alzheimer's & Dementia, τομ. 9, αρ. 1, σελ. 63– 75, 2013.

[2] N. Mattsson, H. Zetterberg, O. Hansson, et al., «Βιοδείκτες CSF και αρχόμενη νόσος Alzheimer σε ασθενείς με ήπια γνωστική δυσλειτουργία», The Journal of the American Medical Association, τομ. 302, αρ. 4, σελ. 385–393, 2009.

[3] G. Bartzokis, JL Cummings, D. Sultzer, VW Henderson, KH Nuechterlein, and J. Mintz, "White matter structural integrity in υγιείς ηλικιωμένους ενήλικες και ασθενείς με νόσο Alzheimer: a magnetic resonance imaging study," Archives of Neurology , τόμ. 60, αρ. 3, σελ. 393–398, 2003.

[4] CR Jack Jr., M. Slomkowski, S. Gracon, et al., "MRI ως βιοδείκτης της εξέλιξης της νόσου σε μια θεραπευτική δοκιμή της μιλαμελίνης για την AD(Η ασθένεια Αλτσχάϊμερ)," Neurology, vol. 60, no. 2, σελ. 253–260, 2003.

[5] F. Sardi, L. Fassina, L. Venturini, et al., "Νόσος Alzheimer, αυτοάνοση και φλεγμονή. Το καλό, το κακό και το άσχημο," Autoimmunity Reviews, τομ. 11, αρ. 2, σελ. 149–153, 2011.

[6] A. Aguzzi, BA Barres και ML Bennett, "Microglia: αποδιοπομπαίος τράγος, σαμποτέρ ή κάτι άλλο;" Science, τόμ. 339, αρ. 6116, σελ. 156–161, 2013.

[7] MR Emmerling, MD Watson, CA Raby, και K. Spiegel, «Ο ρόλος του συμπληρώματος στην παθολογία της νόσου του Alzheimer», Biochimica et Biophysica Acta—Molecular Basis of Disease, τομ. 1502, αρ. 1, σελ. 158–171, 2000.

[8] A. Trivedi, AD Olivas και LJ Noble-Haeusslein, "Φλεγμονή και τραυματισμός του νωτιαίου μυελού: διηθητικά λευκοκύτταρα ως καθοριστικοί παράγοντες τραυματισμού και διεργασιών αποκατάστασης", Clinical Neuroscience Research, τομ. 6, αρ. 5, σελ. 283–292, 2006.

[9] GM Lewitus, H. Cohen, and M. Schwartz, «Reducing post-traumatic anxiety by immunization», Brain, Behavior, and Immunity, τομ. 22, αρ. 7, σελ. 1108–1114, 2008.

[10] R. Shechter, A. London, C. Varol, et al., "Infiltrating blood-derited macrophages are vital cells που παίζουν έναν αντιφλεγμονώδη ρόλο στην ανάρρωση από τραυματισμό του νωτιαίου μυελού σε ποντίκια", PLoS Medicine, τομ. 6, αρ. 7, ID άρθρου e1000113, 2009.

[11] K. Baruch and M. Schwartz, «CNS-specific T κύτταρα διαμορφώνουν τη λειτουργία του εγκεφάλου μέσω του χοριοειδούς πλέγματος», Brain, Behavior, and Immunity, τομ. 34, σελ. 11–16, 2013.

[12] W. Pan, C. Yu, H. Hsuchou, Y. Zhang και AJ Kastin, «Η νευροφλεγμονή διευκολύνει την είσοδο του LIF στον εγκέφαλο: ρόλος του TNF», The American Journal of Physiology—Cell Physiology, τομ. 294, αρ. 6, σελ. C1436–C1442, 2008.