Διερεύνηση του μηχανισμού του ροφήματος Xian Fang Huo Ming με βάση το Cistanche στη ρύθμιση της οδού σηματοδότησης PI3K/Akt/NF-κB στη θεραπεία της χρόνιας προστατίτιδας/του συνδρόμου χρόνιου πυελικού πόνου με βάση τη φαρμακολογία δικτύου και τα πειράματα σε ζώα

 

Περίληψη

Σκοπός:Για να εξερευνήσετε τον μηχανισμό δράσης ενός ποτού Xian Fang Huo Ming (XFHY) με βάση το Cistanche στη θεραπεία της χρόνιας προστατίτιδας/συνδρόμου χρόνιου πυελικού πόνου (CP/CPPS) μέσω φαρμακολογίας δικτύου, μοριακής σύνδεσης και πειραματικής επικύρωσης σε ζωικά μοντέλα.

Μέθοδοι:Τα ενεργά συστατικά και οι αντίστοιχοι στόχοι του XFHY ελήφθησαν από τις βάσεις δεδομένων TCMSP και SwissTargetPrediction. Οι στόχοι που σχετίζονται με το CP/CPPS συλλέχθηκαν από τα OMIM, GeneCards και DisGeNET. Οι βασικοί θεραπευτικοί στόχοι προσδιορίστηκαν μέσω κατασκευής δικτύου PPI και τοπολογικής ανάλυσης. Η βάση δεδομένων DAVID χρησιμοποιήθηκε για ανάλυση εμπλουτισμού GO και KEGG. Η μοριακή σύνδεση πραγματοποιήθηκε χρησιμοποιώντας το AutoDock και οι οπτικοποιήσεις δημιουργήθηκαν μέσω του GraphPad Prism 8. Ιη νίνο, ο τραυματισμός του προστάτη και η φλεγμονώδης διήθηση σε αρουραίους CP/CPPS που προκλήθηκαν από 3% λ-καρραγενάνη αξιολογήθηκαν χρησιμοποιώντας χρώση αιματοξυλίνης-ηωσίνης (HE). Χρησιμοποιήθηκε ELISA για την ανίχνευση της έκφρασης TNF- , IL-1 και COX-2. Η PCR πραγματικού χρόνου και η κηλίδα Western χρησιμοποιήθηκαν για την αξιολόγηση της έκφρασης mRNA και πρωτεΐνης p65 PI3K, Akt και NF-κB στον προστατικό ιστό.

Αποτελέσματα:Η χρώση HE δεν έδειξε σημαντική φλεγμονή στην εικονική ομάδα, ενώ η ομάδα μοντέλου εμφάνισε διήθηση φλεγμονωδών κυττάρων. Τα αποτελέσματα ELISA έδειξαν σημαντικά αυξημένο TNF- , IL-1 και COX-2 στην ομάδα μοντέλων (P<0.01), confirming successful modeling. XFHY significantly reduced these markers in a dose-dependent manner. PCR showed that low, medium, and high doses of XFHY downregulated PI3K, Akt, and NF-κB p65 mRNA expression. Western blot confirmed that XFHY inhibited phosphorylation of PI3K, Akt (Ser473 and Thr308), and NF-κB p65.

Σύναψη:Το XFHY μπορεί να ανακουφίσει την CP/CPPS αναστέλλοντας την οδό PI3K/Akt/NF-κB και μειώνοντας τη φλεγμονή. Η ενεργοποίηση του NF-κB μπορεί να σχετίζεται με φωσφορυλίωση Akt στα Ser473 και Thr308.

Λέξεις-κλειδιά:Φαρμακολογία Δικτύου; Molecular Docking;Cistanche; Xian Fang Huo Ming Drink?Χρόνια Προστατίτιδα/Σύνδρομο χρόνιου πυελικού πόνου; PI3K/Akt/NF-κB

 

 

 

 

 

Συμπλήρωμα εκχυλίσματος TCM Cistanche για θεραπείαΧρόνια Προστατίτιδα

Επικοινωνήστε μαζί μας αγοράστε τώρα

 

 

1. Εισαγωγή

Η προστατίτιδα είναι μια από τις πιο συχνές παθήσεις στην ουρολογία. Σύμφωνα με την ταξινόμηση του NIH, χωρίζεται σε τέσσερις τύπους: τύπου Ι (οξεία βακτηριακή προστατίτιδα), τύπου II (χρόνια βακτηριακή προστατίτιδα), τύπου III (χρόνια προστατίτιδα/σύνδρομο χρόνιου πυελικού πόνου, CP/CPPS) και τύπος IV (ασυμπτωματική προστατίτιδα). Μεταξύ αυτών, ο τύπος ΙΙΙ είναι ο πιο διαδεδομένος, που χαρακτηρίζεται από πυελικό και περινεϊκό πόνο, συμπτώματα του κατώτερου ουροποιητικού συστήματος, ψυχολογικές διαταραχές και σεξουαλική δυσλειτουργία, επηρεάζοντας σοβαρά την υγεία και την ποιότητα ζωής των ανδρών.

Οφέλη συμπληρώματος εκχυλίσματος Tcm Cistanche

 

Η αιτιολογία και η παθογένεση της CP/CPPS παραμένουν ασαφείς και μπορεί να περιλαμβάνει φλεγμονή, δυσλειτουργία του ανοσοποιητικού και νευροενδοκρινικές διαταραχές. Μεταξύ αυτών, η φλεγμονή θεωρείται ο βασικός παράγοντας στην εξέλιξη της νόσου. Οι τρέχουσες θεραπείες επικεντρώνονται στη συμπτωματική ανακούφιση με τη χρήση αναστολέων, ΜΣΑΦ, αντικαταθλιπτικών και αγχολυτικών. Ωστόσο, λόγω της πολυπλοκότητας και της χρονιότητας των συμπτωμάτων, η δυτική ιατρική από μόνη της συχνά αποτυγχάνει να προσφέρει ικανοποιητικά αποτελέσματα.

Η πρόσφατη συναίνεση των ειδικών υποδηλώνει ότι η Παραδοσιακή Κινεζική Ιατρική (TCM) έχει μοναδικά πλεονεκτήματα στη θεραπεία της CP/CPPS, ειδικά όπου η δυτική ιατρική υστερεί. Αν και τα αρχαία κείμενα TCM δεν αναφέρουν ρητά το CP/CPPS, συνήθως ταξινομείται με όρους όπως "jing zhuo", "lao lin" και "yin pain", με παθογόνους μηχανισμούς που περιλαμβάνουν υγρασία-θερμότητα, στασιμότητα τοξινών και στάση αίματος. Κατά συνέπεια, η θεραπεία εστιάζει στην εκκαθάριση της θερμότητας, στην αποστράγγιση της υγρασίας, στην προώθηση της κυκλοφορίας του αίματος και στη χαλάρωση των μεσημβρινών.

Ποτό Xian Fang Huo Ming (XFHY)προέρχεται από"Διορθωμένη πραγματεία για τις συνταγές για γυναίκες", που χαιρετίστηκε ως κλασική θεραπεία για αποστήματα και φλεγμονές. Καθαρίζει τη θερμότητα και τις τοξίνες, τονώνει το αίμα και διαλύει τα οζίδια. Στον τροποποιημένο τύπο που χρησιμοποιείται εδώ,Cistancheαντικαθιστά άλλα παραδοσιακά βότανα monarch, ενεργώντας για να τονώσει το νεφρικό yang, να βελτιώσει την κυκλοφορία και να μειώσει τη φλεγμονή. Η φόρμουλα περιλαμβάνει επίσης ουρά Αγγελικής, Ρίζα Κόκκινης Παιώνιας, Λιβάνι, Μύρο, Φλούδα Μανταρινιού και άλλα βότανα με συνεργιστικά αποτελέσματα για καθαρισμό θερμότητας, μείωση του οιδήματος και αποστράγγιση πύου.

Ο καθηγητής Chen Shenghui, βασισμένος σε χρόνια κλινικής πρακτικής, έχει εφαρμόσει το XFHY για τη θεραπεία της CP/CPPS που χαρακτηρίζεται από υγρασία-θερμότητα και στάση αίματος. Τα κλινικά αποτελέσματα δείχνουν ότι το XFHY μπορεί να ανακουφίσει τον πόνο και τα συμπτώματα του ουροποιητικού ενώ αυξάνει την αντιφλεγμονώδη κυτοκίνη IL-10 στο προστατικό υγρό, μειώνοντας έτσι τη φλεγμονή.

Αυτή η μελέτη στοχεύει στην περαιτέρω διερεύνηση των μηχανισμών του XFHY έναντι της χρήσης CP/CPPSφαρμακολογία δικτύουκαιπειράματα σε ζώα, παρέχοντας μια θεωρητική βάση για την κλινική εφαρμογή του.

Συμπλήρωμα εκχυλίσματος Tcm Cistanche

2. Υλικά

2.1 Ζώα

Συνολικά 70 αρσενικοί αρουραίοι Sprague-Dawley (SD) χωρίς παθογόνο (SPF) (ηλικίας 6 εβδομάδων, 200–220 g) αγοράστηκαν από την Jiangxi Qianchong Scientific Instruments Co., Ltd. (Αρ. άδειας SCXK(Zhe) 2024-0001). Οι αρουραίοι στεγάστηκαν στο Εργαστηριακό Κέντρο Ζωικής Τεχνολογίας του Πανεπιστημίου Jiangxi της Παραδοσιακής Κινεζικής Ιατρικής υπό ελεγχόμενες συνθήκες (12 ώρες κύκλος φωτός/σκότους, υγρασία 60%±5%, θερμοκρασία 23±1 βαθμός) με ελεύθερη πρόσβαση σε τροφή και νερό. Μετά από μια εβδομάδα εγκλιματισμού, ξεκίνησαν πειράματα. Η δεοντολογική έγκριση χορηγήθηκε από την Επιτροπή Δεοντολογίας του Πανεπιστημίου Jiangxi της Παραδοσιακής Κινεζικής Ιατρικής (Αρ. έγκρισης JZLLSC20241201).

2.2 Φάρμακα

Σύνθεση XFHY με βάση το Cistanche (ανά δόση):

Cistanche 9 g

Fritillaria 6 g

Saposhnikovia 6 γρ

Φλούδα μανταρινιού 9 γρ

Επεξεργασμένη Ζυγαριά Παγκολίνου 6 γρ

Λιβάνι 6 γρ

Μύρο 6 γρ

Κόκκινη Ρίζα Παιώνιας 6 γρ

Τριχοσάνθης Ρίζα 6 γρ

Ρίζα γλυκόριζας 6 γρ

Αγγελική ουρά 6 γρ

Αγκάθι Γλεδίτσια 6 γρ

Angelica Dahurica 3 γρ

Όλα τα βότανα αφέψημα και συμπυκνώθηκαν σε ένα μητρικό διάλυμα ισοδύναμο με 0,729 g/mL ακατέργαστων βοτάνων, στη συνέχεια αραιώθηκαν σε 0,3645 g/mL και 1,458 g/mL για χαμηλές και υψηλές δόσεις, αποθηκεύτηκαν στους 4 βαθμούς.

Όλα τα βότανα προέρχονται από πιστοποιημένους προμηθευτές TCM στην επαρχία Jiangxi και επικυρώθηκαν από τον διευθυντή Xiong Haoran από το Pharmacy of Affiliated Reproductive Hospital, Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine.

Φάρμακο ελέγχου:
Κάψουλες Παρατεταμένης Αποδέσμευσης Hydrochloride Tamsulosin (Jiangsu Hengrui Pharmaceuticals, 0,2 mg/κάψουλα, H20050392).

Τοπικό φάρμακο:
Αλοιφή Μουπιροκίνης (Σινο-Αμερικανική Tianjin Smith Kline, 15g, H10930064).

Συμπλήρωμα εκχυλίσματος Tcm Cistanche

 

2.3 Αντιδραστήρια και αντισώματα

λ-Carrageenan(MedChemExpress, παρτίδα HY-125474)

Κιτ ELISAγια TNF- , IL-1 , COX-2 (Wuhan Beinlai Biotechnology, παρτίδα RA20035, RA20020, RA2008)

Αντισώματα: PI3K, Akt, p-Akt (Ser473), NF-κB και p-NF-κB (Τεχνολογία σηματοδότησης κυψελών, ΗΠΑ)

αντίσωμα p-PI3K(Abmart, Σαγκάη, παρτίδα PC6417S)

p-Akt (Thr308)(Qinke Bio, Jiangsu)

Δευτερεύοντα αντισώματα συζευγμένα με HRP(Three Eagles Bio, Wuhan)

Κιτ qPCR και RNA(ComWin Biotech, Jiangsu)

Αντιδραστήρια ECL(Meilunbio®, Dalian)

Μεμβράνες PVDF(Μιλιπόρε, Γερμανία)

2.4 Όργανα

Φυγόκεντροι, κυκλοποιητές PCR, μηχανές qPCR, συστήματα ηλεκτροφόρησης, συσκευές Western blot, συσκευές ανάγνωσης ELISA και εξοπλισμός μικροσκοπίας προέρχονται από κορυφαίους κατασκευαστές επιστημονικού εξοπλισμού, συμπεριλαμβανομένων των Leica, Perkin Elmer, Bio-Rad και άλλων (δείτε την πλήρη λίστα στην ενότητα πρωτότυπων υλικών).