Ενεργοποίηση μακροφάγων με χαμηλού μοριακού βάρους σακχαρίτες από το Cistanche Deserticola

Επικοινωνία: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com

［Απράκτ

Για τη διερεύνηση της επίδρασης και του μηχανισμού ανοσολογικής ενεργοποίησης των σακχαριτών χαμηλού μοριακού βάρους απόCistanche deserticola(LMSC) σε περιτοναϊκά μακροφάγα ποντικού, RAW264. 7 κύτταρα. Το RAW264. 7 κύτταρα χωρίστηκαν στην ομάδα φυσιολογικού ελέγχου, στην ομάδα θετικού ελέγχου LPS και στις ομάδες θεραπείας με LMSC. Το RAW264. 7 κύτταρα υποβλήθηκαν σε επεξεργασία με διάφορες συγκεντρώσεις LMSC από 3. 91 έως 62. 5 g·L - 1. Η ουδέτερη ερυθρή δοκιμασία χρησιμοποιήθηκε για την ανίχνευση της φαγοκυτταρικής δραστηριότητας των μακροφάγων. Η απελευθέρωση ΝΟ ανιχνεύθηκε χρησιμοποιώντας κιτ ΝΟ και επίπεδα πρωτεϊνικής έκφρασης που σχετίζονται με την ενεργοποίηση μακροφάγων (TNF-, IL-6, IKK, p-IKK, IκB, p-IκB, NF-κB και p-NF-κB) εντοπίστηκαν με Western blot. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι το LMSC είχε μια επίδραση ενεργοποίησης στα μακροφάγα. μπορεί να αυξήσει σημαντικά την απελευθέρωση NO στο RAW264. 7 κύτταρα και προάγουν την έκφραση των κυτοκινών TNF- και IL-6. Επιπλέον, το LMSC αύξησε σημαντικά τη φωσφορυλίωση των IKK, IκB, και NF-κB p65. Επιπλέον, η μαννιτόλη ένα από τα κύρια συστατικά του LMSC ενίσχυσε σημαντικά τη φαγοκυτταρική δραστηριότητα των μακροφάγων. Αυτά τα αποτελέσματα έδειξαν ότι το LMSC θα μπορούσε να ενεργοποιήσει τα μακροφάγα ρυθμίζοντας προς τα πάνω το μονοπάτι σηματοδότησης NF-κB και η μαννιτόλη μπορεί να είναι ένα από τα κύρια ενεργά συστατικά του LMSC.

［Λέξεις-κλειδιά］ Σακχαρίτες χαμηλού μοριακού βάρους. Cistanche deserticola; Ανοσολογική ενεργοποίηση? μακροφάγος; φλεγμονώδης παράγοντας? NF-κB

Cistanche deserticola YC Maείναι φυτό που ανήκει στο γένοςCistanche deserticolaYC Ma. Το σαρκώδες στέλεχος του μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως φάρμακο. Έχει τις λειτουργίες θρέψης γιανγκ των νεφρών, θρεπτικής ουσίας και αίματος και ενυδάτωσης των εντέρων. Είναι γνωστό ως «τζίνσενγκ της ερήμου». Τα χημικά συστατικά του Cistanche περιλαμβάνουν φαινυλαιθανοειδείς γλυκοσίδες, ιριδοειδή γλυκοσίδες, σάκχαρα, λιγνάνες και πολλούς άλλους τύπους. Σύγχρονες φαρμακολογικές μελέτες έχουν βρει ότι το Cistanche έχει πολλές βιολογικές δραστηριότητες όπως νευροπροστασία, αντικαρκινική, ανοσορρυθμιστική, αντιφλεγμονώδη και αντιοξειδωτική [1]. Μελέτες έχουν δείξει ότι το αφέψημα Cistanche και πολυσακχαρίτες μπορεί να βελτιώσει σημαντικά τη φαγοκυτταρική ικανότητα και τη λειτουργία έκκρισης των μακροφάγων [2-3]. Ωστόσο, δεν υπάρχει καμία αναφορά για την έρευνα δραστηριότητας των χαμηλού μοριακού βάρους υδατανθράκων του. Επομένως, αυτή η μελέτη χρησιμοποίησε το σύστημα καλλιέργειας in vitro του RAW264. 7 περιτοναϊκά μακροφάγα ποντικού για τη διερεύνηση της ανοσοτροποποιητικής δραστηριότητας και των σχετικών μηχανισμών των υδατανθράκων χαμηλού μοριακού βάρους Cistanche. Αυτή η έρευνα μπορεί να προσφέρει περισσότερα πειραματικά στοιχεία για μια ολοκληρωμένη κατανόηση τουΑνοσοτροποποιητικό αποτέλεσμα του Cistancheστο μέλλον, ώστε να καθοδηγηθεί περαιτέρω η κλινική εφαρμογή του.

Το Cistanche deserticola έχει πολλά αποτελέσματα, κάντε κλικ εδώ για να μάθετε περισσότερα

1. Υλικά

RAW264. 7 κύτταρα αγοράστηκαν από το Κέντρο Κυττάρων της Κινεζικής Ακαδημίας Ιατρικών Επιστημών. Ο εμβρυϊκός βόειος ορός (FBS) αγοράστηκε από την PAN Biotech, Γερμανία. Τα αντιβιοτικά και το μέσο DMEM αγοράστηκαν από την Zhongke Machen Technology Co., Ltd. Ο λιποπολυσακχαρίτης από την Escherichia coli O55:B5 (LPS) αγοράστηκε από τη Sigma Company, ΗΠΑ. Ένα κιτ μονοξειδίου του αζώτου (NO) αγοράστηκε από το Nanjing Jiancheng Institute of Bioengineering. Το κιτ χημειοφωταύγειας ECL αγοράστηκε από την Thermo Fisher, Η.Π.Α. Το αντίσωμα αγοράστηκε από την Cell Signaling Technology, USA. Οι ολικοί γλυκοζίτες του cistanche, τα σάκχαρα χαμηλού μοριακού βάρους του cistanche και οι πολυσακχαρίτες του cistanche κατασκευάστηκαν μόνοι μας από την ερευνητική μας ομάδα. Το κλάσμα μάζας των συνολικών γλυκοσιδών του cistanche ήταν 78,76 τοις εκατό. Το κλάσμα μάζας σακχάρων χαμηλού μοριακού βάρους τουCistanche deserticolaείναι 58. 00 τοις εκατό και το κλάσμα μάζας τουCistanche deserticolaπολυσακχαρίτες είναι 65. 24 τοις εκατό . Το Tanon-5200Το σύστημα διαίρεσης απεικόνισης πολλαπλών τζελ αγοράστηκε από τη Shanghai Tianneng Technology Co., Ltd. Η συσκευή ανάγνωσης μικροπλάκας Sunrise-Basic αγοράστηκε από την εταιρεία TECAN.

2. Μέθοδος

2. 1 Μέθοδος ουδέτερου κόκκινου για τη μέτρηση της φαγοκυτταρικής δραστηριότητας των μακροφάγων

Πάρτε τα περιτοναϊκά μακροφάγα ποντικού στη φάση λογαριθμικής ανάπτυξης, μετά την θρυψινοποίηση, μετρήστε τα κύτταρα, ρυθμίστε τον αριθμό των κυττάρων σε 5 × 104 κύτταρα/mL και εμβολιάστε τα σε 96-πλάκα κυτταροκαλλιέργειας φρεατίου, 100 μL/φρεάτιο , στους 37 βαθμούς Καλλιεργείται υπό συνθήκες 5 τοις εκατό CO2, αφού τα κύτταρα προσκολληθούν στο τοίχωμα, απορρίψτε το υπερκείμενο της καλλιέργειας, προσθέστε μέσο DMEM (10 τοις εκατό FBS συν 1 τοις εκατό P/S), LPS (1 mg·L － 1) και Cistanche cistanche αντίστοιχα Ολικές γλυκοσίδες,CistancheΚαλλιεργήθηκαν ολικοί πολυσακχαρίτες και σάκχαρα μικρού μοριακού βάρους Cistanche cistanche (3,91 ~ 62,5 g·L -1, αντίστοιχα, διηθήθηκαν με μεμβράνη φίλτρου πριν από τη χορήγηση). Μετά από καλλιέργεια για 48 ώρες, προσθέστε 100 μL 0,075 τοις εκατό ουδέτερου κόκκινου φυσιολογικού αλατούχου διαλύματος σε κάθε φρεάτιο, συνεχίστε την καλλιέργεια για 4 ώρες, αναρροφήστε το υπερκείμενο, πλύνετε 3 φορές με PBS, προσθέστε κυτταρόλυμα (παγόμορφο οξικό οξύ -αιθανόλη 1:1) 100 μL, τοποθετήστε το στους 4 βαθμούς για 2 ώρες και μετρήστε την απορρόφηση (A540 nm) μετά τη λύση των κυττάρων.

2. 2 Ανίχνευση ποσότητας απελευθέρωσης ΝΟ στο υπερκείμενο υγρό κυττάρων

Εμβολιάστε το RAW264. 7 κύτταρα σε μια πλάκα 48-πηγαδιού (1 × 105 κύτταρα/mL, 500 μL/φρεάτιο), αναρροφήστε το μέσο κυτταροκαλλιέργειας μετά από ολονύκτια επώαση, προσθέστε μέσο DMEM (10 τοις εκατό FBS συν 1 τοις εκατό P/S), 500 μL καθένα από LPS (1 mg·L -1) και ολικούς γλυκοσίδες Cistanche cistanche, ολικούς πολυσακχαρίτες και σάκχαρα χαμηλού μοριακού βάρους (3,91 ~ 62,5 g·L -1, αντίστοιχα). Μετά από 24 ώρες καλλιέργειας επαγωγής, το υπερκείμενο συλλέχθηκε. Προσδιορίστε τη συγκέντρωση του ΝΟ στο υπερκείμενο κυτταρικό κάθε ομάδας με το κιτ NO, ακολουθήστε τις οδηγίες και τελικά ανιχνεύστε την απορρόφηση (A570 nm) με συσκευή ανάγνωσης μικροπλακών

2. 3. Western blot

Εμβολιάστε το RAW264. 7 κύτταρα σε μια πλάκα 6-πηγαδιού, αναρροφήστε το μέσο κυτταροκαλλιέργειας μετά από ολονύκτια επώαση, προσθέστε μέσο DMEM (10 τοις εκατό FBS συν 1 τοις εκατό P/S), LPS (1 mg·L － 1) καιCistancheΟι ολικοί Πολυσακχαρίτες και τα σάκχαρα χαμηλού μοριακού βάρους (3,91 ~ 62,5 g·L -1) ήταν το καθένα 2 mL και το υπερκείμενο απορρίφθηκε μετά από 24 ώρες καλλιέργειας επαγωγής. Τα κύτταρα πλύθηκαν δύο φορές με PBS και απορρίφθηκαν. Μετά την θρυψίνη, τα κύτταρα διοχετεύονται με πιπέτα προς τα κάτω. Φυγοκεντρήστε, αφαιρέστε το υπερκείμενο, προσθέστε 100 μL ρυθμιστικό διάλυμα λύσης NP40 και λύστε σε πάγο για 40 λεπτά. Μετά τη φυγοκέντρηση, το υπερκείμενο λήφθηκε και η συγκέντρωση πρωτεΐνης προσδιορίστηκε με τη μέθοδο BCA και η συγκέντρωση πρωτεΐνης κάθε ιστόνης ρυθμίστηκε ομοιόμορφα. Πάρτε την ίδια ποσότητα δειγμάτων πρωτεΐνης και διαχωρίστε τα σε 12 τοις εκατό SDS-PAGE υπό σταθερή πίεση. Στη συνέχεια χρησιμοποιήστε τη δεξαμενή ηλεκτροφόρησης μεταφοράς Bio-Rad για να μεταφέρετε τη μεμβράνη με σταθερό ρεύμα 350 mA για 1 ώρα και μεταφέρετε την πρωτεΐνη στη μεμβράνη PVDF (προεπεξεργασία της μεμβράνης PVDF: εμποτίστε με μεθανόλη και εξισορροπήστε με το ρυθμιστικό διάλυμα μεταφοράς). Μετά από αποκλεισμό με 5 τοις εκατό αποβουτυρωμένο γάλα (διαμορφωμένο με TBST που περιέχει 0,1 τοις εκατό Tween-20) για 1 ώρα σε θερμοκρασία δωματίου, η μεμβράνη πλύθηκε 3 φορές με TBST και η μεμβράνη επωάστηκε στο πρωτεϊνικό αραιωτικό αντισώματος στους 4 βαθμός κατά τη διάρκεια της νύχτας. Η μεμβράνη πλύθηκε 3 φορές με TBST κάθε δεύτερη μέρα και το αντίστοιχο αραιωτικό προστέθηκε για επώαση για 1 ώρα. Η μεμβράνη πλύθηκε 3 φορές με TBST και οι λωρίδες αναπτύχθηκαν με έναν παράγοντα ανάπτυξης χημειοφωταύγειας ECL.

2. 4 ανάλυση δεδομένων

Τα δεδομένα εκφράζονται ως x ± s και η σημασία της διαφοράς ελέγχεται χρησιμοποιώντας το στατιστικό λογισμικό GraphPad Prism 6 για μονόδρομη ανάλυση διακύμανσης. Πάρτε τον Π<0.01 as="" a="" very="" significant="" difference,="" and=""><0.05 as="" a="" significant="">

3. Αποτελέσματα

3. 1. Επιδράσεις σακχάρων χαμηλού μοριακού βάρους Cistanche cistanche, ολικών γλυκοσιδών και ολικών πολυσακχαριτών στη φαγοκυτταρική δραστηριότητα του RAW264. 7 κύτταρα

Η έρευνα για τα χημικά συστατικά του Cistanche δείχνει ότιCistancheκυρίως περιέχειφαινυλαιθανοειδείς γλυκοσίδες, ιριδοειδής γλυκοσίδες και υδατάνθρακες. Σε αυτό το πείραμα, επιλέγονται οι συνολικές γλυκοσίδες του cistanche (συμπεριλαμβανομένων των γλυκοσιδών της φαιναιθυλικής αλκοόλης και των ιριδοειδών γλυκοσιδών), των χαμηλών μοριακών σακχάρων και των σακχάρων. Οι τρεις ενεργές θέσεις των ολικών πολυσακχαριτών διερευνήθηκαν για τις επιδράσεις τους στην ενεργοποίηση του RAW264. 7 κύτταρα. Τόσο ο πολυσακχαρίτης Cistanche cistanche όσο και το σάκχαρο χαμηλού μοριακού βάρους cistanche μπορούν να αυξήσουν σημαντικά τη φαγοκυτταρική δραστηριότητα του RAW264. 7 κύτταρα, αλλά η φαγοκυτταρική δραστηριότητα της ολικής ομάδας χορήγησης γλυκοσιδών δεν αλλάζει σημαντικά. Επιπλέον, το φάρμακο θετικού ελέγχου LPS βελτίωσε επίσης σημαντικά τη φαγοκυτταρική δραστηριότητα του RAW264. 7 κύτταρα, όπως φαίνεται στο Σχήμα 1. Τα παραπάνω αποτελέσματα υποδηλώνουν ότι τα χαμηλού μοριακού βάρους σάκχαρα και πολυσακχαρίτες του Cistanche μπορεί να έχουν ως αποτέλεσμα την ενεργοποίηση του RAW264. 7 κύτταρα.

3. 2. Η επίδραση των ολικών γλυκοσιδών Cistanche, των χαμηλών μοριακών σακχάρων και των ολικών πολυσακχαριτών στην περιεκτικότητα σε μονοξείδιο του αζώτου (NO) στο υπερκείμενο υγρό των κυττάρων

Προκειμένου να διερευνηθεί περαιτέρω το αποτέλεσμα ενεργοποίησης των τριών ενεργών θέσεων του Cistanche στο RAW264. 7 κύτταρα, προσδιορίστηκε η περιεκτικότητα ΝΟ στα κυτταρικά υπερκείμενα που διεγείρονται από διαφορετικά φάρμακα. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι η απελευθέρωση NO στην ομάδα LPS ήταν σημαντικά υψηλότερη από αυτή στην τυφλή ομάδα ελέγχου (P<0.01); the="" release="" of="" no="" in="" the="" 5="" doses="" of="" low="" molecular="" sugar="" and="" polysaccharides="" in="" the="" cistanche="" cistanche="" group="" was="" significantly="" higher="" than="" that="" in="" the="" control="" group="" (p=""><0.01) ),="" and="" was="" dose-dependent;="" the="" total="" glycosides="" of="">Cistancheδεν είχε σημαντική επίδραση. Τα παραπάνω αποτελέσματα δείχνουν ότι τόσο οι πολυσακχαρίτες όσο και τα χαμηλού μοριακού βάρους σάκχαρα του Cistanche μπορούν να προάγουν την απελευθέρωση ΝΟ από το RAW264. 7 κύτταρα. Μεταξύ αυτών, η επίδραση των χαμηλού μοριακού βάρους σακχάρων του Cistanche είναι ιδιαίτερα σημαντική, όπως φαίνεται στο Σχήμα 2.

3. 3. Η επίδραση του σακχάρου χαμηλού μοριακού βάρους Cistanche cistanche στην έκφραση της πρωτεΐνης TNF- και IL-6 στο RAW264. 7 κύτταρα

Ο TNF- είναι ένας σημαντικός φλεγμονώδης μεσολαβητής που εμφανίζεται στη διαδικασία ενεργοποίησης του RAW264. 7 κύτταρα, τα οποία μπορούν να προάγουν τη σύνθεση και την απελευθέρωση άλλων κυτοκινών (όπως η IL-6). Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι η έκφραση του TNF- και του IL-6 αυξήθηκε σημαντικά μετά τη διέγερση του χαμηλού μοριακού βάρους σακχάρου του Cistanche cistanche, υποδηλώνοντας ότι το χαμηλού μοριακού βάρους σάκχαρο του Cistanche μπορεί να προάγει την έκφραση του TNF - και IL{11}} σε RAW264. 7 κύτταρα, ενεργοποιώντας έτσι την κυτταρική ανοσία Φαγοκυττάρωση, βλέπε Εικόνα 3.

3. 4. Η ρυθμιστική επίδραση του χαμηλού μοριακού βάρους σακχάρου Cistanche cistanche στο μονοπάτι σηματοδότησης IKK /IκB /NF-κB

Προκειμένου να διερευνηθεί ο πιθανός μηχανισμός των σακχάρων χαμηλού μοριακού βάρους Cistanche cistanche στην ενεργοποίηση του RAW264. 7 κύτταρα, οι συγγραφείς διερεύνησαν τις ρυθμιστικές του επιδράσεις στην κλασική οδό σηματοδότησης IKK/IκB/NF-κB. Το σάκχαρο χαμηλού μοριακού βάρους Cistanche cistanche μπορεί να αυξήσει σημαντικά τη φωσφορυλίωση του NF-κB και τη φωσφορυλίωση των πρωτεϊνών σηματοδοσίας IKK και IκB προς τα πάνω και να μειώσει την έκφραση της συνολικής πρωτεΐνης IκB, υποδεικνύοντας ότι έχει ενεργοποιητική επίδραση στο IKK / Μονοπάτι σηματοδότησης IKB /NF-κB. Το φάρμακο θετικού ελέγχου LPS έχει επίσης παρόμοια ρυθμιστική δράση. Συνοπτικά, τα χαμηλού μοριακού βάρους σάκχαρα του Cistanche μπορεί να ενεργοποιήσουν το μονοπάτι σηματοδότησης IKK /IκB /NF-κB, προκαλώντας έτσι τη σύνθεση και απελευθέρωση κυτοκινών όπως το TNF- και το IL-6 και τελικά προκαλώντας το ανοσοποιητικό ενεργοποίηση του RAW264. 7 κελιά, βλέπε Εικόνα 4.

3. 5. Διαλογή ενεργών συστατικών με δράση ενεργοποίησης μακροφάγων σε σάκχαρα χαμηλού μοριακού βάρους Cistanche

Το εργαστήριό μας έχει αναλύσει τα χαμηλού μοριακού βάρους σάκχαρα που περιέχονται σεCistancheσε πρώιμο στάδιο και διαπίστωσε ότι περιέχει κυρίως μαννιτόλη (16,53 τοις εκατό ), σακχαρόζη (8,34 τοις εκατό ), φρουκτόζη (25,38 τοις εκατό ) και γλυκόζη (7, 75 τοις εκατό ) και άλλα συστατικά. Έτσι ο συγγραφέας χρησιμοποίησε την ουδέτερη κόκκινη μέθοδο για να εξετάσει το αποτέλεσμα ενεργοποίησης των παραπάνω συστατικών στα μακροφάγα. Η μαννιτόλη μπορεί να αυξήσει σημαντικά τη φαγοκυτταρική δραστηριότητα των μακροφάγων με δοσοεξαρτώμενο τρόπο, ενώ οι επιδράσεις άλλων συστατικών δεν είναι σημαντικές. Αυτό υποδηλώνει ότι η μαννιτόλη μπορεί να είναι ένα από τα βασικά ενεργά συστατικά στα χαμηλού μοριακού βάρους σάκχαρα του Cistanche cistanche για την ενεργοποίηση των μακροφάγων, όπως φαίνεται στο Σχήμα 5.

4. Συζήτηση

Το κιστάνσε, ένα παρασιτικό φυτό της οικογένειας των Lydanaceae, έχει αναφερθεί ότι έχει ανοσοτροποποιητικές επιδράσεις, επομένως θα πρέπει να περιέχει ανοσοτροποποιητικές ουσίες. Σε αυτό το πείραμα, ο συγγραφέας εξέτασε τη φαγοκυτταρική δραστηριότητα των περιτοναϊκών μακροφάγων ποντικού σε διαφορετικά καθαρισμένα μέρη τουCistancheκαι διαπίστωσε ότι τα χαμηλού μοριακού βάρους σάκχαρα και πολυσακχαρίτες του Cistanche έχουν την επίδραση της ενεργοποίησης των μακροφάγων, αλλά οι συνολικές γλυκοσίδες του Cistanche δεν είναι προφανείς. Ταυτόχρονα, ο συγγραφέας διαπίστωσε ότι τα σάκχαρα χαμηλού μοριακού βάρους μπορούν να ενεργοποιήσουν τα μακροφάγα σε χαμηλότερες συγκεντρώσεις, έτσι οι συγγραφείς επέλεξανCistancheσάκχαρα χαμηλού μοριακού βάρους ως επίκεντρο της μετέπειτα έρευνας.

Εξετάζοντας την επίδραση του χαμηλού μοριακού βάρους σακχάρου κιστάνζης στην έκφραση των κυτοκινών TNF- και IL-6, οι συγγραφείς διαπίστωσαν ότι το χαμηλού μοριακού βάρους σάκχαρο κιστάνζης αύξησε σημαντικά την έκφραση του TNF- και του IL-6, το οποίο απέδειξε περαιτέρω ότι η χαμηλού μοριακού βάρους σάκχαρα κιστάνζης έχει επίδραση στα ποντίκια. Τα περιτοναϊκά μακροφάγα έχουν ενεργοποιητική δράση. Έτσι ο συγγραφέας διερεύνησε περαιτέρω τον πιθανό μηχανισμό δράσης του. Κάντε έρευνα

Αποδεικνύεται ότι ο βακτηριακός λιποπολυσακχαρίτης (LPS) μπορεί να προκαλέσει ενεργοποίηση μακροφάγων ποντικού και γλοιακών κυττάρων ποντικού μέσω οδών σήματος όπως JAK2/STAT3, NF-κB, p38/ERK και MAPK [4-8]. Το μονοπάτι NF-κB αναγνωρίζεται ως κλασικό μονοπάτι, επομένως οι πρωτεΐνες σήματος σε αυτό το μονοπάτι δοκιμάστηκαν σε αυτό το πείραμα. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι τα χαμηλού μοριακού βάρους σάκχαρα του Cistanche μπορούν να αυξήσουν σημαντικά τη φωσφορυλίωση του NF-κΒ και τη φωσφορυλίωση των βασικών πρωτεϊνών σηματοδότησης IKK και IκB, υποδηλώνοντας ότι τα χαμηλού μοριακού βάρους σάκχαρα τουCistancheμπορεί να ενεργοποιήσει περιτοναϊκούς γίγαντες ποντικού μέσω της οδού σηματοδότησης IKK /IκB /NF-κB. Τα κύτταρα φάγων απελευθερώνουν φλεγμονώδεις κυτοκίνες και στη συνέχεια παίζουν ρόλο στην ενεργοποίηση της κυτταρικής ανοσίας.

Στο πρώιμο στάδιο του εργαστηρίου, η χημική σύσταση του χαμηλού μοριακού βάρους εκχυλίσματος ζάχαρης τουCistanche deserticolaαναλύθηκε συστηματικά. Διαπιστώθηκε ότι τα σάκχαρα χαμηλού μοριακού βάρους περιέχουν κυρίως μονομερή όπως η μαννιτόλη, η σακχαρόζη, η φρουκτόζη και η γλυκόζη. Περαιτέρω έρευνα διαπίστωσε ότι η μαννιτόλη μπορεί να βελτιώσει σημαντικά τη φαγοκυτταρική δραστηριότητα των μακροφάγων. Ως εκ τούτου, εικάζεται ότι η μαννιτόλη μπορεί να είναι βασικό συστατικό των σακχάρων χαμηλού μοριακού βάρους που ενεργοποιεί μια κυτταρική ανοσοποιητική λειτουργία.

Συνοπτικά, αυτή η μελέτη χρησιμοποίησε τα μακροφάγα στο σύστημα καλλιέργειας Vitro και διαπίστωσε ότι τα χαμηλού μοριακού βάρους σάκχαρα τουCistancheέχουν σημαντική ενεργοποιητική επίδραση στα μακροφάγα και μπορεί να ενεργοποιήσουν περιτοναϊκά μακροφάγα ποντικού μέσω της οδού σηματοδότησης NF-κB και στη συνέχεια να παίξουν κάποιο ρόλο. Η μαννιτόλη σε σάκχαρα χαμηλού μοριακού βάρους μπορεί να παίξει σημαντικό ρόλο στην ενεργοποίηση της φαγοκυτταρικής δραστηριότητας των μακροφάγων.

βιβλιογραφικές αναφορές

[1] Tu Pengfei, Guo Yuhai. Τεχνικές καλλιέργειας της ερήμου Cistanche και του ξενιστή της Tamarix [M]. Πεκίνο: Science Press, 2015:31.

[2] Gao Xiaoxia, Chen Jun, Peng Yanli. Μια ερευνητική επισκόπηση των φαρμακολογικών επιδράσεων τουCistanche deserticolaπολυσακχαρίτης [J]. Food and Drugs, 2015, 17(2):136.

[3] Wang Xiangyan, Qi Yun, Cai Ruslan, et al. Ενεργοποίηση μακροφάγου πολυσακχαρίτη Cistanche [J]. Chinese Pharmacological Bulletin, 2009, 25(6):787.

[4] Liu Zhongyuan, Li Yanping. Η βιολογική δραστηριότητα και ο μηχανισμός του βακτηριακού λιποπολυσακχαρίτη [J]. Medical Science Review, 2010, 16(2):166.

[5] Fu Zhihui, Xu Ling, Huang Jiao, et al. Το LPS μέσω της οδού p38 /MAPK και η ενεργοποίηση NF-κB επάγει την έκφραση του HIF-1 στο RAW264. 7 κύτταρα [J]. Chongqing Medical University Journal, 2016, 41(10): 1033.

[6] Hao Yutong, Chen Chunhai, Yang Xuesen, et al. Το μονοπάτι σηματοδότησης JAK2/STAT3 εμπλέκεται στην ενεργοποίηση της μικρογλοίας που προκαλείται από τη ζάχαρη (J［J］). Journal of the Third Military Medical University, 2009, 31(12):1119.

[7] Song Xiaomin, Liao Lixi, Dong Xin, et al. Οι γλυκοσίδες του βλεννογόνου αναστέλλουν τη φλεγμονή της BV-2 μικρογλοίας που προκαλείται από λιποπολυσακχαρίτες και του μηχανισμού της [J]. Κινεζική Εφημερίδα Παραδοσιακής Κινεζικής Ιατρικής, 2016, 41(13): 2506.