Η κάψουλα Kelong ανακουφίζει την καλοήθη υπερπλασία του προστάτη μέσω της ενεργοποίησης της σηματοδότησης Nrf2 και της αναστολής της φλεγμονής σε αρουραίους

Περίληψη

Σκοπός:
Για τη διερεύνηση των μοριακών μηχανισμών με τους οποίους η κάψουλα Kelong βελτιώνει την καλοήθη υπερπλασία του προστάτη (BPH), με έμφαση στην οδό σηματοδότησης του παράγοντα 2 (Nrf2) που σχετίζεται με τον πυρηνικό παράγοντα ερυθροειδές 2.

Μέθοδοι:
Εξήντα αρσενικοί αρουραίοι Sprague-Dawley (SD) χωρίστηκαν τυχαία σε επτά ομάδες: τυφλό μάρτυρα, μοντέλο, εικονικό, φιναστερίδη και υψηλές, μεσαίες και χαμηλές δόσεις κάψουλας Kelong. Το μοντέλο BPH καθιερώθηκε μέσω αμφοτερόπλευρης ορχεκτομής που ακολουθείται από υποδόρια ένεση κυπιονικής τεστοστερόνης. Ξεκινώντας την 8η ημέρα μετά την ορχεκτομή, οι ομάδες θεραπείας με φάρμακα έλαβαν ενέσεις προπιονικής τεστοστερόνης και ταυτόχρονη από του στόματος χορήγηση των αντίστοιχων θεραπειών. Παρατηρήθηκαν ιστοπαθολογικές αλλαγές στον ιστό του προστάτη χρησιμοποιώντας χρώση με αιματοξυλίνη και ηωσίνη (ΗΕ). Τα επίπεδα τεστοστερόνης (Τ), διυδροτεστοστερόνης (DHT) και οιστραδιόλης (Ε2) στον ορό μετρήθηκαν με ELISA. Χρησιμοποιήθηκε ποσοτική PCR σε πραγματικό χρόνο (RT-qPCR) για την αξιολόγηση των επιπέδων έκφρασης mRNA των TNF-, IL-1, IL-6, Nrf2 και NAD(P)H κινόνης οξειδορεδουκτάσης 1 (NQO1) σε ιστό προστάτη.

Οφέλη Cistanche για την καλοήθη υπερπλασία του προστάτη

 

Αποτελέσματα:
Σε σύγκριση με την εικονική ομάδα, οι αρουραίοι στην ομάδα μοντέλου BPH εμφάνισαν κυβοειδές ή ψηλό κιονοειδές αδενικό επιθήλιο, σημαντικά διεσταλμένους αυλούς αδένων και αυξημένες ενδοαυλικές εκκρίσεις. Τα επίπεδα T και DHT στον ορό ήταν σημαντικά αυξημένα (P<0.05), whereas E2 levels were significantly decreased (P<0.01). Prostatic mRNA expression of TNF-α, IL-1β, and IL-6 was markedly increased (P<0.01), while Nrf2 and NQO1 mRNA levels were significantly downregulated (P<0.01). In the high-dose Kelong capsule group, the tall columnar epithelium was markedly reduced, and glandular dilation was notably improved. Serum E2 levels were significantly increased (P<0.05), while T and DHT were significantly decreased (P<0.05). NQO1 mRNA expression was significantly upregulated in both the high- and medium-dose groups (P<0.01). Nrf2 mRNA expression was significantly increased (P<0.05), and TNF-α, IL-1β, and IL-6 mRNA levels were significantly decreased (P<0.05) across all Kelong capsule treatment groups.

ΣΥΜΠΛΗΡΩΜΑ TCM HERB ΓΙΑ ΤΗ ΘΕΡΑΠΕΙΑ ΤΗΣ ΝΟΣΟΥ ΤΟΥ ΠΡΟΣΤΑΤΗ

 

 

ΣΤΟΙΧΕΙΑ CISTANCHE

 

 

 

Σύναψη:
Η κάψουλα Kelong ανακουφίζει αποτελεσματικά την παθολογική υπερπλασία του προστάτη σε αρουραίους τύπου BPH, πιθανώς μέσω της ενεργοποίησης της οδού σηματοδότησης Nrf2 και της αναστολής των φλεγμονωδών αποκρίσεων.

Λέξεις-κλειδιά:Καλοήθης υπερπλασία του προστάτη; Κάψουλα Kelong; Οξειδωτικό στρες; Φλεγμονή; Μονοπάτι σηματοδότησης Nrf2

 

 

 

Εισαγωγή

Η καλοήθης υπερπλασία του προστάτη (ΚΥΠ) είναι μια διαδεδομένη ουρολογική πάθηση στους ηλικιωμένους άνδρες, που χαρακτηρίζεται από συμπτώματα του κατώτερου ουροποιητικού συστήματος (LUTS) όπως συχνουρία, επείγουσα ούρηση και προοδευτική δυσκολία ούρησης. Ιστολογικά, η ΒΡΗ εκδηλώνεται ως υπερπλασία στρωματικών και αδενικών συστατικών του προστάτη, ενώ ανατομικά εμφανίζεται ως διόγκωση του προστάτη και απόφραξη εξόδου της ουροδόχου κύστης. Μελέτες αποκαλύπτουν ότι ο επιπολασμός της BPH αυξάνεται με την ηλικία, επηρεάζοντας περίπου το 30-40% των ανδρών στα 40 τους και έως το 70-80% των ανδρών άνω των 80 ετών.

Στην Παραδοσιακή Κινέζικη Ιατρική (TCM), η ΒΡΗ εμπίπτει στις κατηγορίες "μακράς μπι" (απόφραξη ούρων) και "lin zheng" (ουροποιητικό σύνδρομο). Η παθογένεια πιστεύεται ότι προέρχεται από ανεπάρκεια qi των νεφρών, που οδηγεί σε στάση αίματος και διαταραχή της κυκλοφορίας, με αποτέλεσμα τελικά την υπερπλασία του προστατικού ιστού.

Ενώ η σηματοδότηση ανδρογόνων, ιδιαίτερα που περιλαμβάνει την τεστοστερόνη και τη διυδροτεστοστερόνη, είναι ένας καλά εδραιωμένος παράγοντας στην παθοφυσιολογία της ΒΡΗ, τα αναδυόμενα στοιχεία υπογραμμίζουν το ρόλο τουοξειδωτικό στρες, χρόνια φλεγμονή, ορμονικές ανισορροπίεςκαι τοπική υποξία. Πρόσφατη έρευνα προτείνει ότι ηΜονοπάτι σηματοδότησης Nrf2, βασικός ρυθμιστής των κυτταρικών αντιοξειδωτικών αποκρίσεων, παίζει κρίσιμο ρόλο στην άμβλυνση του οξειδωτικού στρες και της φλεγμονής που σχετίζεται με την BPH.

 

Ο ρόλος της βοτανοθεραπείας στην BPH: Cistanche και υγεία του προστάτη

Μεταξύ των διαφόρων βοτανικών προσεγγίσεων, συστατικά όπως π.χCistanche deserticola-που χρησιμοποιούνται ευρέως σε παραδοσιακές φόρμουλες-κερδίζουν την προσοχή για τουςπροστατευτικές επιδράσεις στην υγεία του προστάτη. Cistancheπεριέχειφαινυλαιθανοειδείς γλυκοσίδες (π.χ. εχινακοσίδη, ακτεοσίδη)γνωστοί για τουςαντιφλεγμονώδεις, αντιοξειδωτικές και ορμονορυθμιστικές ιδιότητες. Μελέτες έχουν δείξει ότιCistancheτα εκχυλίσματα μπορούν:

Μειώστε τη φλεγμονή του προστάτημε μείωση των προφλεγμονωδών κυτοκινών (π.χ., IL-6, TNF- )

Ρυθμίστε τα επίπεδα ανδρογόνωνγια την αποκατάσταση της ορμονικής ισορροπίας

Ενεργοποίηση σηματοδότησης Nrf2, ενισχύοντας έτσι την έκφραση αντιοξειδωτικών ενζύμων όπως το HO-1 και το NQO1

Βελτιώνει τα συμπτώματα του ουροποιητικού και μειώνει τον όγκο του προστάτησε πειραματικά μοντέλα

Αυτά τα οφέλη ευθυγραμμίζονται στενά με τα ευρήματα της τρέχουσας μελέτης, υποδηλώνοντας ότι οι τύποι που περιέχουνCistanche-όπως η κάψουλα Kelong-μπορεί να ασκήσουν τα θεραπευτικά τους αποτελέσματα μέσωρύθμιση πολλαπλών στόχων του οξειδωτικού στρες και της φλεγμονήςστον προστάτη.

Υλικά και Μέθοδοι

1. Ζώα

Αρσενικοί αρουραίοι SD (ηλικίας 6-8 εβδομάδων, 200 ± 10 g) ελήφθησαν από τα Εθνικά Ινστιτούτα Ελέγχου Τροφίμων και Φαρμάκων (Αρ. άδειας SCXK (Jing) 2022-0002). Στεγάστηκαν υπό τυπικές συνθήκες (θερμοκρασία 20–25 βαθμούς, υγρασία 40–60%) με ad libitum πρόσβαση σε τροφή και νερό.

2. Φάρμακα και Αντιδραστήρια

Η κάψουλα Kelong είναι μια τροποποιημένη φόρμουλα που βασίζεται σεJin Gui Shen Qi Wan, που περιέχει [Rehmannia glutinosa, Cornus officinalis, Poria cocos, Moutan cortex] και πρόσθετα βότανα όπως αστράγαλος, ισοφλαβόνες σόγιας και έλαιο σπόρων κολοκύθας. Το φυτικό εκχύλισμα παρασκευάστηκε με αφέψημα με νερό και ξήρανση υπό κενό. Άλλα αντιδραστήρια περιελάμβαναν:

Finasteride (5 mg, Merck Sharp & Dohme)

Προπιονική τεστοστερόνη (98%, Macklin Biotech)

Κιτ ELISA για T, DHT και E2 (Sabokang Biotech)

Εκχύλιση RNA και αντιδραστήρια qPCR (Yisheng Biotech, Invitrogen)

Κιτ χρώσης HE (Jiuzhou Berlin Biotech)

3. Όργανα

Συστήματα ενσωμάτωσης βιολογικών ιστών, μικροτόμοι, μηχανές PCR και συσκευές ανάγνωσης ELISA χρησιμοποιήθηκαν από τις Thermo Fisher, BioTek, Leica και άλλους τυπικούς προμηθευτές εργαστηρίου.

 

Πειραματικός Σχεδιασμός

1. Επαγωγή μοντέλου BPH

Μετά από έναν εγκλιματισμό 7 ημερών, 60 αρουραίοι κατατάχθηκαν τυχαία σε ομάδες ελέγχου, εικονικής και BPH μοντέλου. Διεξήχθη αμφοτερόπλευρη ορχεκτομή υπό αναισθησία (πεντοβαρβιτάλη νατρίου, 45 mg/kg) για να προκληθεί ανεπάρκεια ανδρογόνων, ακολουθούμενη από υποδόριες ενέσεις προπιονικής τεστοστερόνης (5 mg/kg) για 28 ημέρες για προσομοίωση καταστάσεων BPH. Οι επίμυες που χειρουργήθηκαν ψευδώς υποβλήθηκαν σε τομή του οσχέου χωρίς αφαίρεση όρχεως.

2. Ομαδοποίηση και Θεραπεία

Οι αρουραίοι μοντέλα χωρίστηκαν περαιτέρω σε ομάδα μοντέλου, ομάδα φιναστερίδης (0,45 mg/kg) και ομάδες καψουλών Kelong υψηλής (14,4 g/kg), μεσαίας (7,2 g/kg) και χαμηλής (3,6 g/kg) δόσης. Όλες οι θεραπείες χορηγήθηκαν μέσω του στοματικού καθετήρα για 28 ημέρες. Οι αρουραίοι ελέγχου και εικονικοί αρουραίοι έλαβαν απεσταγμένο νερό.

3. Ιστολογία (Χρώση HE)

Οι ιστοί του προστάτη σταθεροποιήθηκαν σε παραφορμαλδεΰδη 4%, ενσωματώθηκαν σε παραφίνη, τεμαχίστηκαν και χρωματίστηκαν με αιματοξυλίνη και ηωσίνη. Η μικροσκοπική αξιολόγηση χρησιμοποιήθηκε για την αξιολόγηση των ιστοπαθολογικών αλλαγών.

4. Ανάλυση ELISA

Τα επίπεδα τεστοστερόνης, DHT και οιστραδιόλης στον ορό μετρήθηκαν χρησιμοποιώντας εμπορικά κιτ ELISA σύμφωνα με τις οδηγίες του κατασκευαστή.

5. PCR σε πραγματικό χρόνο

Ολικό RNA εκχυλίστηκε από ιστούς προστάτη χρησιμοποιώντας Trizol, μεταγράφηκε ανάστροφα σε cDNA και χρησιμοποιήθηκε για qPCR. Η σχετική έκφραση των Nrf2, NQO1, TNF-, IL-1 και IL-6 υπολογίστηκε χρησιμοποιώντας τη μέθοδο 2^-ΔΔCt. Οι αλληλουχίες εκκινητών παρατίθενται στον Πίνακα 1.