Απόκριση ανοσοσφαιρινών ασθενών με COVID-19, ληπτών εμβολίων COVID-19 και τυχαίων ατόμων

Αφηρημένη

Ιστορικό

Έχει προταθεί η ανάπτυξη ειδικών ανοσοσφαιρινών για τον COVID-19 μετά από φυσική μόλυνση ή εμβολιασμό. Η αποτελεσματικότητα και η δυναμική αυτής της απόκρισης δεν είναι ακόμη σαφείς.

Σκοπός

Αυτή η μελέτη στοχεύει να αναλύσει την ανταπόκριση στην ανοσοσφαιρίνη μεταξύ ασθενών με COVID-19, ληπτών εμβολίων COVID-19 και τυχαίων ατόμων.

Μέθοδοι

Συνολικά 665 συμμετέχοντες, συμπεριλαμβανομένων 233 ασθενών με COVID-19, 288 λήπτες εμβολίων για τον COVID-19 και 144 τυχαίων ατόμων, ερευνήθηκαν για ανοσοσφαιρίνες κατά του COVID-19 (IgA, IgG, IgM).

Αποτελέσματα

Μεταξύ των ασθενών με COVID{{{{{0}}, το 22,7 τοις εκατό είχε ανιχνεύσιμα αντισώματα IgA με μέσο όρο 27,3±57,1 ng/ml, το 29,6 τοις εκατό είχε αντισώματα IgM με μέσο όρο 188,4±666.0 BAU/ ml, ενώ το 59,2 τοις εκατό είχε αντισώματα IgG με μέσο όρο 101,7±139,7 BAU/ml. Οι λήπτες του εμβολίου Pfizer-BioNTech είχαν θετική IgG στο 99,3 τοις εκατό με μέσο όρο 515,5±1143,5 BAU/ml ενώ το 85,7 τοις εκατό των ληπτών εμβολίου Sinopharm είχαν θετικό IgG με μέσο όρο 170,0±230,0 BAU/ml. Όσον αφορά τα τυχαία άτομα, το 54,9 τοις εκατό είχε θετική IgG με μέσο όρο 164,3±214 BAU/ml.

Η μέγιστη ανταπόκριση IgM σε ασθενείς με COVID{{0}} εντοπίστηκε νωρίς στις 15–22 ημέρες, ακολουθούμενη από την κορυφή της IgG στις 16–30 ημέρες και τη μέγιστη IgA στις 0–60 ημέρες. Τα αντισώματα IgM εξαφανίστηκαν στις 61–90 ημέρες, ενώ τα αντισώματα IgG και IgA μειώθηκαν αργά μετά την κορύφωση και παρέμειναν ανιχνεύσιμα έως και 300 ημέρες. Η συχνότητα της θετικής IgG μεταξύ των ασθενών επηρεάστηκε σημαντικά από την αυξημένη ηλικία, το τμήμα εισαγωγής (εσωτερικά ή εξωτερικά ιατρεία), τα συμπτώματα, την ανάγκη για οξυγονοθεραπεία και την αυξημένη διάρκεια μεταξύ θετικής εξέτασης COVID{10} RT PCR και δειγματοληψίας ορού (p˂0,05 ). Σημειώθηκαν θετικές συσχετίσεις μεταξύ διαφορετικών τύπων ανοσοσφαιρινών (IgG, IgM και IgA) μεταξύ των ασθενών.

Υπάρχει κάποια συσχέτιση μεταξύ της μέγιστης απόκρισης IgM και της ανοσίας, αλλά όχι πανομοιότυπη.

Οι αυξημένες συγκεντρώσεις της IgM, της κύριας ανοσοσφαιρίνης στην πρώτη γραμμή άμυνας του σώματος, συνήθως υποδεικνύουν ότι το σώμα αναπτύσσει μια ανοσολογική απόκριση έναντι ενός παθογόνου και συνήθως εμφανίζονται νωρίς σε μια λοίμωξη. Επομένως, η μέγιστη απόκριση του IgM μπορεί να αντανακλά την αρχική ικανότητα αντιμετώπισης του σώματος και τον βαθμό ενεργοποίησης του ανοσοποιητικού συστήματος.

Ωστόσο, η μέγιστη απόκριση του IgM δεν αντικατοπτρίζει απαραίτητα πλήρως το επίπεδο ανοσίας του σώματος. Μελέτες έχουν δείξει ότι για το ίδιο παθογόνο, μπορεί να υπάρχουν διαφορές στη μέγιστη απόκριση IgM που παράγεται από διαφορετικά άτομα. Επιπλέον, η ανοσία του σώματος περιλαμβάνει επίσης τη συνέργεια άλλων ανοσοκυττάρων και μορίων, συμπεριλαμβανομένων των Τ κυττάρων, Β κυττάρων, φαγοκυττάρων, υποτύπων αντισωμάτων κ.λπ. Επομένως, δεν είναι δυνατό να βασιστούμε αποκλειστικά στη μέγιστη απόκριση IgM για την αξιολόγηση της ανοσίας του σώματος σε πρακτικές εφαρμογές. Επομένως, πρέπει να βελτιώσουμε το ανοσοποιητικό μας. Το Cistanche έχει σημαντική επίδραση στη βελτίωση της ανοσίας. Το Cistanche είναι πλούσιο σε μια ποικιλία αντιοξειδωτικών ουσιών, όπως βιταμίνη C, βιταμίνη C, καροτενοειδή κ.λπ. Αυτά τα συστατικά μπορούν να καθαρίσουν τις ελεύθερες ρίζες, να μειώσουν το οξειδωτικό στρες και να βελτιώσουν την αντίσταση του ανοσοποιητικού συστήματος.

Κάντε κλικ στα οφέλη του σωληνίσκου cistanche

συμπεράσματα

Τα εμβόλια φυσικής μόλυνσης και COVID-19 παρέχουν ανοσία με τη μεσολάβηση IgG. Η κατηγορία, η θετικότητα, ο μέσος όρος, η αποτελεσματικότητα και η διάρκεια της απόκρισης των ανοσοσφαιρινών επηρεάζονται από τον μηχανισμό της ανοσίας και τις μεταβλητές που σχετίζονται με τον ξενιστή. Τυχαία άτομα της κοινότητας είχαν ανιχνεύσιμη IgG COVID-19 σε ~55 τοις εκατό, πολύ μακριά από το να φτάσουν τα επίπεδα ανοσίας της αγέλης.

Εισαγωγή

Ένα ξέσπασμα του νέου (νέου) κοροναϊού αναφέρθηκε για πρώτη φορά τον Δεκέμβριο του 2019 στο Wuhan, στην επαρχία Hubei, στην Κίνα. Τον Μάρτιο του 2020, η νόσος του κοροναϊού 2019 (COVID-19), που προκαλείται από το σοβαρό οξύ αναπνευστικό σύνδρομο κοροναϊός 2 (SARS-CoV-2), κηρύχθηκε πανδημία από τον Παγκόσμιο Οργανισμό Υγείας (ΠΟΥ). Με την εμφάνιση πολλών παραλλαγών, η εξάπλωση του SARS-CoV-2 συνέχισε να οδηγεί στις μεγαλύτερες δυσκολίες για τη δημόσια υγεία, την κοινωνική ανάπτυξη και την οικονομία στην εποχή μας. Μέχρι τις 10 Φεβρουαρίου 2022, υπήρχαν περισσότερα από 400 εκατομμύρια κρούσματα παγκοσμίως με πάνω από 5,5 εκατομμύρια θανάτους [1, 2].

Ο SARS-CoV-2 είναι το νεότερο μέλος της οικογένειας του Betacoronavirus, που περιλαμβάνει επίσης τους αιτιολογικούς παράγοντες του SARS-CoV και του ιού του αναπνευστικού συνδρόμου της Μέσης Ανατολής (MERS) [3]. Τέσσερις βασικές πρωτεΐνες κωδικοποιούνται από το γονιδίωμα RNA 30 Kb plus ve του ιού: S: spike, N: νουκλεοκαψίδιο, M: μεμβράνη και E: φάκελος, επιπλέον των 15 μη δομικών πρωτεϊνών (Nsp1- 10 και Nsp12-16), και 8 βοηθητικές πρωτεΐνες [4, 5].

Η πρωτεΐνη S είναι ιδιαίτερης σημασίας καθώς μεσολαβεί στην προσκόλληση και στην επακόλουθη είσοδο του ιού στο κύτταρο στόχο. Η περιοχή δέσμευσης υποδοχέα (RBD) της υπομονάδας S1 μεσολαβεί στη σύνδεση στη μεμβράνη ενός κυττάρου ξενιστή μέσω της δέσμευσης στο ένζυμο μετατροπής της αγγειοτενσίνης 2 (ACE2). Η υπομονάδα S2 μεσολαβεί στη σύντηξη της μεμβράνης επιτρέποντας την είσοδο του ιού [6, 7]. Ως εκ τούτου, το S ήταν ο κύριος στόχος για την ανάπτυξη εμβολίων και ανοσοθεραπευτικών [8].

Τα αντισώματα (Abs) ειδικά για τον SARS-CoV-2 έχουν μελετηθεί εκτενώς κατά τη διάρκεια της φυσικής μόλυνσης καθώς και κατά τον εμβολιασμό. Η ανοσοσφαιρίνη Α (IgA), η ανοσοσφαιρίνη M (IgM) και η ανοσοσφαιρίνη G (IgG) έναντι των πρωτεϊνών S και N του SARS-CoV-2 εξελίσσονται γρήγορα μέσα σε 1 έως 2 εβδομάδες μετά την έναρξη των συμπτωμάτων στους ορούς του COVID{{6 }} ασθενείς [9-12]. Τα συγκεκριμένα αντισώματα IgG για τον COVID-19 συνεχίζουν να αυξάνονται μήνες μετά τη μόλυνση και θα παραμείνουν πιθανώς ενεργά για περισσότερο από ένα χρόνο [13]. Η βαρύτητα της νόσου αποδείχθηκε ότι αντικατοπτρίζεται στους τίτλους και την κινητική της απόκρισης του Ab COVID{11}}. Έχει αναφερθεί επανειλημμένα ότι οι ασυμπτωματικές και οι ήπια συμπτωματικές περιπτώσεις έχουν σημαντικά χαμηλότερους τίτλους Ab ορού που μειώνονται ταχύτερα σε σύγκριση με τους συμπτωματικούς ασθενείς [14, 15]. Από την άλλη πλευρά, η πιθανή ανάπτυξη του συνδρόμου οξείας αναπνευστικής δυσχέρειας (ARDS), αποδείχθηκε ότι συσχετίζεται πολύ ισχυρά με υψηλότερους τίτλους Ab, ειδικά έναντι της πρωτεΐνης Ν [16]. Είναι ενδιαφέρον ότι αναφέρθηκε ότι οι νεκροί ασθενείς εμφανίζουν πιο αργή εμφάνιση Abs στους ορούς τους, αν και οι τίτλοι φτάνουν σε υψηλότερα επίπεδα αργότερα στην εξέλιξη της νόσου [17, 18].

Η ειδική για το αντιγόνο απόκριση IgA φαίνεται να είναι ισχυρότερη και πιο επίμονη από την απόκριση IgM [19]. Το IgA βρέθηκε να κυριαρχεί στην πρώιμη φάση της λοίμωξης από SARS-CoV-2 στους ορούς και παρέμεινε για μεγαλύτερο χρονικό διάστημα στις βλεννογόνες επιφάνειες των ασθενών [20]. Το IgA από πλύσεις ορού, σάλιου και βρογχοκυψελιδικών ασθενών αποδείχθηκε πιο ισχυρό στην εξουδετέρωση του ιού σε σύγκριση με το IgG. Είναι ενδιαφέρον ότι τα διμερή IgA στις επιφάνειες του βλεννογόνου έδειξαν ότι είναι 15 φορές πιο ισχυρά στην εξουδετέρωση του ιού από τα μονομερή IgA ορού [21]. Αυτό υποδηλώνει ότι τα IgA Abs μπορεί να έχουν σημαντικό ρόλο στην πρόληψη της μόλυνσης, της μετάδοσης και της επιδείνωσης των συμπτωμάτων.

Έχει τεκμηριωθεί η ειδική ανοσία μετά τον εμβολιασμό κατά του COVID-19. Οι περισσότερες αναφορές αποκάλυψαν ότι τα επίπεδα IgG ήταν σημαντικά υψηλότερα στις ομάδες που εμβολιάστηκαν με mRNA σε σύγκριση με τους φυσικά μολυσμένους ασθενείς. Από την άλλη πλευρά, τα επίπεδα IgG στους εμβολιασμένους που έλαβαν εμβόλια αδρανοποιημένου ιού ήταν πιο παρόμοια με εκείνα της φυσικής μόλυνσης [22-26].

Τα εμβόλια mRNA για τον COVID-19 προκαλούν επίσης επίπεδα IgA ειδικά για αντιγόνο και κινητικές παρόμοιες με τους φυσικά μολυσμένους ασθενείς [27]. Ωστόσο, μόνο μία μελέτη ανέφερε την απόκριση IgA σε αδρανοποιημένους ιούς που εμβολιάστηκαν. Αυτή η μελέτη ανέφερε ότι σε αντίθεση με το Comirnaty που βασίζεται σε mRNA, ο αδρανοποιημένος ιός CoronaVac δεν προκάλεσε ανιχνεύσιμη IgA στον ρινικό βλεννογόνο, αλλά και οι δύο έδειξαν ανιχνεύσιμη IgA ορού [28].

Η αποτελεσματικότητα, η κινητική και η προστασία μετά από φυσική και επαγόμενη από εμβόλιο ανοσία για τον COVID-19 δεν είναι πλήρως κατανοητές. Τα συγκεκριμένα αντισώματα διαδραματίζουν ουσιαστικό ρόλο στην προστασία από τον COVID-19 μέσω των επιδράσεων εξουδετέρωσης και κάθαρσης. Σε αυτήν τη μελέτη, στοχεύσαμε να διερευνήσουμε τη συχνότητα, τον τίτλο, την αποτελεσματικότητα και την κινητική της απόκρισης ανοσοσφαιρινών (IgG, IgM και IgA) ασθενών με COVID-19, ληπτών εμβολίων COVID-19 και τυχαίων ατόμων.

Υλικά και μέθοδοι

Σχεδιασμός μελέτης

Ο πληθυσμός του δείγματος περιελάμβανε τυχαιοποιημένα άτομα από την Ιορδανία που είχαν μολυνθεί με COVID-19 που επιβεβαιώθηκε με RT-PCR από τον Μάιο του 2020 έως τον Αύγουστο του 2021. Οι συμμετέχοντες προσλήφθηκαν σε τμήματα εσωτερικών ή εξωτερικών ασθενών του Prince Hamza Hospital (PHH). Τα δημογραφικά και κλινικά δεδομένα συλλέχθηκαν μετά από εθελοντική συγκατάθεση. Στη συνέχεια, κάθε συμμετέχων παρείχε ένα δείγμα ορού για ανοσολογικές μελέτες αντισωμάτων COVID-19 συμπεριλαμβανομένων των IgA, IgM και IgG. Η διάρκεια μεταξύ της θετικής δοκιμής RT-PCR και της συλλογής δειγμάτων ορού υπολογίστηκε ως ημέρες.

Οι λεπτομέρειες των εμβολιασμένων ατόμων με COVID{0}}αναφέρθηκαν προηγουμένως [22, 29]. Εν συντομία, οι λήπτες εμβολίου Pfizer-BioNTech (n=141) και οι λήπτες εμβολίου Sinopharm (n=147) είχαν συλλεχθεί ορός 2 εβδομάδες μετά τη χορήγηση της δεύτερης δόσης. Δείγματα ορού αναλύθηκαν για αντισώματα COVID-19 IgG και IgM [22]. Τέλος, 144 τυχαία άτομα στρατολογήθηκαν για τον προσδιορισμό του κοινοτικού επιπολασμού των ανοσοσφαιρινών COVID{10}}. Δείγματα ορού που παραπέμπονται σε εργαστήρια PHH για μελέτες που δεν σχετίζονται με τον COVID συλλέχθηκαν την περίοδο μεταξύ 1ης Σεπτεμβρίου 2021 και 1ης Οκτωβρίου 2021. Αυτά τα δείγματα πιθανώς περιλαμβάνουν συμπτώματα και ασυμπτωματικά μολυσμένα με COVID{{17} άτομα, εμβολιασμένα άτομα και άτομα που δεν έχουν υποστεί . Μόνο δημογραφικά δεδομένα συλλέχθηκαν για αυτήν την ομάδα χωρίς πληροφορίες κλινικών ή παραγόντων κινδύνου. Στη συνέχεια διερευνήθηκαν τα IgG και IgA COVID{18}} ορού. Η μελέτη εγκρίθηκε από την επιτροπή θεσμικού συμβουλίου αναθεώρησης (IRB) στο Πανεπιστήμιο Hashemite στις 7 Μαρτίου 2020 (Αρ.: 1∕5∕2019∕2020) και την επιτροπή PHH IRB στις 15 Μαρτίου 2020 (αρ.: 1/631). Όλοι οι εγγεγραμμένοι συμμετέχοντες έδωσαν γραπτή ενημερωμένη συγκατάθεση πριν από τη συμμετοχή τους σε αυτή τη μελέτη.

Μέτρηση ανοσοσφαιρίνης κατά του COVID-19

Τα Vitek Immuno Diagnostic Assay Systems (VIDAS1, Biomerieux Inc., Hazelwood, MO, USA) για SARS-COV-2 είναι αυτοματοποιημένες ποιοτικές αναλύσεις που χρησιμοποιήθηκαν για την ανίχνευση κοιλιακών IgG ή IgM ειδικά για SARS-CoV{{4 }} στον ανθρώπινο ορό ή στο πλάσμα (ηπαρίνη λιθίου) με τη χρήση της τεχνικής Enzyme Linked Fluorescent Assay (ELFA). Αυτά τα δοκίμια συνδυάζουν μια μέθοδο ανοσοδοκιμασίας ενζύμου σάντουιτς δύο σταδίων με ανίχνευση τελικού φθορισμού (ELFA). Τα IgG Abs ανιχνεύονται ειδικά από την αντι-ανθρώπινη IgG, η οποία είναι επισημασμένη με αλκαλική φωσφατάση, ενώ τα IgM Abs ανιχνεύονται ειδικά με παρόμοιο τρόπο από την αντι-ανθρώπινη IgM, η οποία επίσης επισημαίνεται με αλκαλική φωσφατάση. Η ένταση του φθορισμού είναι ευθέως ανάλογη με το επίπεδο του αντισώματος στο υπό μελέτη δείγμα. Ένας δείκτης υπολογίζεται ως αναλογία μεταξύ της σχετικής τιμής φθορισμού (RFV) που μετράται στο δείγμα και του RFV που λαμβάνεται για τον βαθμονομητή, ο οποίος είναι εξανθρωπισμένος ανασυνδυασμένος anti-SARS CoV-2 IgG ή IgM. Τα αποτελέσματα ερμηνεύτηκαν αρχικά ως θετικά (δείκτης £1) ή αρνητικά (δείκτης<1), before being converted into binding antibody units per milliliter (BAU/ ml) that correlate with the WHO standard.

Για τον ποσοτικό προσδιορισμό της ανθρώπινης πρωτεΐνης S1 κατά του SARS-CoV-2 (αντισώματα κατηγορίας IgA) σε δείγματα ορού ή πλάσματος, χρησιμοποιήθηκε δοκιμή ELISA σύμφωνα με τις οδηγίες του κατασκευαστή (MyBioSource Inc, San Diego, CA, USA). Εν συντομία, 96-πλάκες φρεατίων επικαλύφθηκαν με SARS-CoV-2 πρωτεΐνη S1. Μετά το πλύσιμο, η δεσμευμένη IgA ανιχνεύθηκε από μονοκλωνικά αντισώματα αντι-ανθρώπινων IgA συζευγμένων με υπεροξειδάση ραπανάκι (HRP). Μετά από ένα άλλο στάδιο πλύσης, προστέθηκε το χρωμογόνο υπόστρωμα 3,3',5,5'-τετραμεθυλοβενζιδίνη (TMB) και η χρωματική αντίδραση σταμάτησε με 2Μ H2SO4. Τέλος, η απορρόφηση κάθε φρεατίου μετρήθηκε στα 450 nm και οι μετρήσεις μετατράπηκαν σε συγκέντρωση (ng/ml) με στύπωμα έναντι μιας τυπικής καμπύλης. Όλες οι δοκιμές ανίχνευσης αντισωμάτων COVID-19 που χρησιμοποιούνται σε αυτήν τη μελέτη είναι εγκεκριμένες με Conformite Europeenne (CE) και είχαν ποσοστά ευαισθησίας και ειδικότητας άνω του 90 τοις εκατό .

Στατιστική ανάλυση

Για στατιστική ανάλυση, χρησιμοποιήσαμε το Statistical Package for the Social Sciences (SPSS) έκδοση 24.0 (Chicago, IL, USA). Μετά την εφαρμογή της περιγραφικής στατιστικής, τα δεδομένα παρουσιάστηκαν ως αριθμοί (ποσοστό) για τις κατηγορικές μεταβλητές και μέση ± τυπική απόκλιση (SD) για τις αριθμητικές μεταβλητές. Το τεστ Χ-τετράγωνο και το ακριβές τεστ Fisher χρησιμοποιήθηκαν για τη σύγκριση κατηγορικών μεταβλητών. Οι συσχετίσεις μεταξύ των τίτλων IgG, IgM και IgA δοκιμάστηκαν χρησιμοποιώντας τη δοκιμασία συσχέτισης Bivariate Pearson. P-τιμή<0.05 was considered statistically significant.

Αποτελέσματα

Δημογραφικά και κλινικά χαρακτηριστικά των πληθυσμών της μελέτης

Συνολικά 665 συμμετέχοντες προσλήφθηκαν εθελοντικά στη μελέτη, συμπεριλαμβανομένων των επιβεβαιωμένων ασθενών με COVID-19 (n=233) με τεκμηριωμένα θετικά τεστ RT-PCR για COVID-19, λήπτες εμβολίων COVID-19 (n=288) και τυχαία δείγματα από PHH (n=144). Όσον αφορά τους ασθενείς με COVID-19, η μέση ηλικία ± SD ήταν 39,3 ± 14,9 έτη, από 2 έως 80 έτη, με τους περισσότερους ασθενείς στην ηλικιακή περιοχή 20-41 ετών (48,1 τοις εκατό ). Οι άνδρες αντιπροσώπευαν το 52,8 τοις εκατό ενώ οι γυναίκες το 47,2 τοις εκατό των συμμετεχόντων. Το 65,7 τοις εκατό των ασθενών ήταν εξωτερικοί ασθενείς χωρίς ή ήπια συμπτώματα ενώ το 34,3 τοις εκατό εισήχθη στο νοσοκομείο λόγω μέτριας έως σοβαρής ασθένειας. Μόνο το 1,7 τοις εκατό των συμμετεχόντων μολύνθηκε δύο φορές με COVID-19 και το 1,7 τοις εκατό ήταν έγκυος τη στιγμή της μόλυνσης. Οι περισσότεροι ασθενείς έχουν τεκμηριώσει συμπτώματα που σχετίζονται με τον COVID{32} (64,4 τοις εκατό ) ενώ το 28,3 τοις εκατό ήταν ασυμπτωματικοί. Επιπλέον, μόνο το 10,7 τοις εκατό των ασθενών χρειάστηκαν οξυγονοθεραπεία. Η διάρκεια μεταξύ της μόλυνσης (θετική RT-PCR) και της δειγματοληψίας ορού (Μέση ± SD) ήταν 82,3 ± 72,9 ημέρες (Πίνακας 1) (Πίνακας S1). Συνολικά 144 τυχαίοι ασθενείς επιλέχθηκαν σε διάστημα 30 ημερών με μέση ηλικία 48,1 ± 20,5 έτη συμπεριλαμβανομένων 67 συμμετεχόντων (46,5 τοις εκατό) ηλικίας 61 έως 80 ετών. Οι άνδρες ήταν 86 (59,7 τοις εκατό ), 35 (24,3 τοις εκατό ) ήταν εξωτερικοί ασθενείς και 109 (75,7 τοις εκατό ) ήταν εσωτερικούς ασθενείς (Πίνακας 1). Τα δημογραφικά, οι παρενέργειες και τα κλινικά δεδομένα που σχετίζονται με τους λήπτες του εμβολίου αναφέρθηκαν λεπτομερώς (Πίνακας 1) [22, 29].

Απόκριση ανοσοσφαιρινών ασθενών με COVID-19, ληπτών εμβολίων COVID-19 και τυχαίων ατόμων

Συνολικά, μόνο το 22,7 τοις εκατό των ασθενών που μολύνθηκαν από τον COVID-19 είχαν ανιχνεύσιμα αντισώματα COVID-19 IgA με μέσο όρο 27,3 ± 57,1 ng/ml, το 29,6 τοις εκατό είχε COVID{{10}} IgM αντισώματα με μέσο όρο 188,4 ± 666.0 BAU/ml, ενώ το 59,2 τοις εκατό είχε θετικά αντισώματα COVID-19 IgG με μέσο όρο 101,7 ± 139,7 BAU/ml (Πίνακας 2 ) (Πίνακας S1). Όσον αφορά τα τυχαία δείγματα, το ποσοστό των ατόμων με θετική COVID-19 IgG ήταν 54,9 τοις εκατό (79/144), με μέσο όρο 164,3 ± 214 BAU/ml (Πίνακας 2). Τέλος, οι λήπτες του εμβολίου Pfizer-BioNTech είχαν θετικό IgG COVID-19 σε ποσοστό 99,3 τοις εκατό με μέσο όρο 515,5 ± 1143,5 BAU/ml ενώ το 85,7 τοις εκατό των ληπτών εμβολίων Sinopharm είχαν θετικό IgG με μέσο όρο 170,0 ml/AU ± 170,0 ml (AU ± 23,00 ± 170,0 ± 115,5 ± 1143,5 BAU/ml). Πίνακας 2).

Η δυναμική της απόκρισης ανοσοσφαιρινών ασθενών με COVID{{{{{0}} μελετήθηκε για να προσδιοριστεί η μέγιστη απόκριση κάθε ανοσοσφαιρίνης σε ασθενείς με COVID-19 (Εικόνα 1). Η μέγιστη ανταπόκριση IgG σε ασθενείς με COVID-19 ήταν στις 16–30 ημέρες (183,1 ± 147,9 BAU/ml) (Εικ. 1Α). Η μέγιστη ανταπόκριση IgM σε ασθενείς με COVID-19 ήταν νωρίς στις 15–22 ημέρες (872,3 ± 1634,2 BAU/ml) (Εικόνα 1Β). Η μέγιστη ανταπόκριση IgA σε ασθενείς με COVID-19 ήταν 0–60 ημέρες (62,9 ± 104,3 ng/ml) (Εικ. 1C). Τα αντισώματα IgM σχεδόν εξαφανίστηκαν στις 61–90 ημέρες σε όλους τους ασθενείς, ενώ τα αντισώματα IgG και IgA άρχισαν να μειώνονται αργά μετά την κορύφωση και εξακολουθούσαν να είναι ανιχνεύσιμα για έως και 300 ημέρες (Εικ. 1) (Πίνακας S2).

Παράγοντες που επηρεάζουν τη θετική απόκριση στις ανοσοσφαιρίνες σε ασθενείς με COVID-19

Η συχνότητα της θετικής IgG επηρεάστηκε σημαντικά από την αυξημένη ηλικία (p {{0}}.02), τους εξωτερικούς ασθενείς (p < 0,001), τους συμπτωματικούς ασθενείς (p < 0,001), τους ασθενείς που χρειάζονταν οξυγόνο θεραπεία (ρ=0.01) και αυξημένη διάρκεια μεταξύ θετικής εξέτασης COVID-19 RT-PCR και δειγματοληψίας ορού (Πίνακας 3). Επιπλέον, η συχνότητα της θετικής IgM ήταν σημαντικά αυξημένη σε εσωτερικούς ασθενείς (p=0.02), ασθενείς που χρειάζονταν οξυγόνο (p=0.004) και μικρότερη διάρκεια μεταξύ θετικής COVID-19 RT -Δοκιμή PCR και δειγματοληψία ορού (ρ=0.02) (Πίνακας 3). Δεν υπήρχαν παράγοντες που να είχαν σημαντική επίδραση στη συχνότητα της θετικότητας IgA μεταξύ των ασθενών με COVID-19 (Πίνακας 3) (Πίνακας S1).

Συσχετίσεις μεταξύ ανοσοσφαιρινών μεταξύ ασθενών με COVID-19

Ο τίτλος IgG συσχετίστηκε θετικά με τον τίτλο IgM και τη συγκέντρωση IgA (p < {{0}}.001) μεταξύ των ασθενών με COVID-19. Επιπλέον, τα θετικά IgG αποτελέσματα συσχετίστηκαν σημαντικά με θετικά αποτελέσματα IgM και θετικά IgA (p < 0,001). Επιπλέον, ο τίτλος IgM συσχετίστηκε θετικά με τη συγκέντρωση IgA και συσχετίστηκε με θετικά αποτελέσματα (ρ < 0,001) (Πίνακας 4) (Πίνακας S1).

Συζήτηση

Το μέγεθος και η κινητική της χυμικής ανοσίας ως απόκριση στη λοίμωξη SARS-CoV-2 δίνουν πληροφορίες για μέτρα ανοσολογικής προστασίας έναντι φυσικής λοίμωξης, καθώς και μέτρα για την αποτελεσματικότητα των εμβολίων. Έχει αναφερθεί επανειλημμένα ότι οι περισσότεροι επιτόπιοι Β-κυττάρων που εντοπίστηκαν έχουν βρεθεί στον C-τελικό τομέα S1 και στο S2 [30-32]. Επιπλέον, περίπου τα περισσότερα εξουδετερωτικά Abs επάγονται από το RBD (αμινοξέα 306-527) και το S2 [33, 34]. Δεδομένου ότι η πρωτεΐνη S2 διατηρείται περισσότερο σε άλλους κοροναϊούς, το S1 (συγκεκριμένα ο RBD) παραμένει το πιο πολύτιμο εργαλείο για την αναγνώριση ειδικού Ab [34-44]. Ως εκ τούτου, σε αυτήν τη μελέτη, μετρήσαμε την παρουσία S1-ειδικών IgM, IgG και IgA σε ορούς από φυσικά μολυσμένους ασθενείς με COVID-19, από πρώην εμβολιασμένους με COVID{20}} προσωπικό της Pfizer και της Sinopharm, και μια ομάδα τυχαίων ατόμων.

Η θετικότητα και τα επίπεδα του anti-S IgG βρέθηκαν να συσχετίζονται αρνητικά με την ηλικία και θετικά με τη σοβαρότητα των συμπτωμάτων, κάτι που είναι σύμφωνο με προηγούμενες μελέτες [45, 46]. Η αυξημένη σοβαρότητα των συμπτωμάτων, η όψιμη ανταπόκριση του Ab και τα αυξημένα ιικά φορτία θα μπορούσαν να σταθούν πίσω από την υψηλότερη συγκέντρωση Ab στους ορούς ηλικιωμένων ασθενών σε σύγκριση με νεότερους, ειδικά σε μεγαλύτερους χρόνους (6 μήνες) μετά τη μόλυνση. Προηγούμενες μελέτες ανέφεραν ότι οι τίτλοι anti-S Ab αυξάνονταν με τη σοβαρότητα των συμπτωμάτων [45, 46]. Βρέθηκε σημαντική θετική συσχέτιση μεταξύ του anti-S IgG και του τμήματος του ασθενούς. Φυσικά, οι μολυσμένοι μη εμβολιασμένοι εξωτερικοί ασθενείς εμφάνισαν υψηλότερες αποκρίσεις Ab σε σύγκριση με τους εσωτερικούς ασθενείς. Αυτό μπορεί να οφείλεται σε διακυμάνσεις στον χρόνο συλλογής αίματος. Δείγματα εσωτερικών ασθενών συλλέχθηκαν κατά τη διάρκεια της νοσηλείας εντός των πρώτων 2 εβδομάδων μετά την έναρξη των συμπτωμάτων του COVID{10}}, ενώ οι εξωτερικοί ασθενείς δώρησαν τα δείγματά τους έως και 10 μήνες μετά.

Στο πλαίσιο του εμβολιασμού, διαπιστώσαμε ότι τα επίπεδα anti-S IgG που ανιχνεύθηκαν 2 εβδομάδες μετά τον εμβολιασμό ήταν τα υψηλότερα μεταξύ των ατόμων που δεν είχαν εμβολιαστεί με COVID-19 που δεν είχαν εμβολιαστεί με Pfizer-BioNTech, σύμφωνα με προηγούμενες έρευνες, καθώς το Pfizer-BioNTech αναφέρθηκε επανειλημμένα ότι ήταν περισσότερα αποτελεσματική στην ανοσολογική προστασία έναντι του COVID-19 σε σύγκριση με το Sinopharm και τη φυσική μόλυνση [22– 26, 39–41, 47].

Το IgM πιστεύεται ότι παίζει σημαντικό ρόλο στην προστατευτική ανοσία έναντι του COVID-19, καθώς παρατηρήθηκε ισχυρή συσχέτιση μεταξύ των μειωμένων επιπέδων anti-S IgM και της μείωσης των αποκρίσεων εξουδετέρωσης του Ab [48-50]. Εδώ, διαπιστώσαμε ότι η απόκριση IgM σε φυσικά μολυσμένους ασθενείς με COVID-19 ήταν υψηλότερη σε σύγκριση με τα εμβολιασμένα άτομα όσον αφορά τη θετικότητα και τους τίτλους, κάτι που είναι σύμφωνο με άλλες μελέτες [42, 50]. Είναι ενδιαφέρον ότι οι Ruggiero et al. [50] ανέφερε ότι τα άτομα που δεν είχαν προσβληθεί από τον COVID-19 που εμβολιάστηκαν με το εμβόλιο mRNA της Pfizer εμφάνισαν μη συμβατικά μοτίβα αποκρίσεων anti-S IgM που απεικονίζονταν είτε από την απουσία IgM, την ανάπτυξη IgM μετά από IgG ή την ταυτόχρονη παρουσία IgM και IgG. Είναι δύσκολο να υποθέσουμε τον λόγο πίσω από τις αντισυμβατικές αποκρίσεις IgM που προκαλούνται από τα εμβόλια σε δυνητικά εμβολιασμένο προσωπικό που δεν έχει προηγηθεί COVID{11}}. Ένας λόγος για την πλήρη απουσία IgM δύο εβδομάδες μετά τον πλήρη εμβολιασμό θα μπορούσε να είναι η έλλειψη ανταπόκρισης μνήμης IgM από μια προϋπάρχουσα ανοσία σε διασταυρούμενους ανθρώπινους κοροναϊούς, μια προηγούμενη πρωτογενή ανοσοαπόκριση έναντι μιας ασυμπτωματικής μόλυνσης με τον ιό ή πρώτος ενισχυτής εμβολιασμού με ταχεία αποσύνθεση IgM. Ένας άλλος πιθανός λόγος θα μπορούσε να είναι η επικουρική επίδραση των λιπιδικών συστατικών του εμβολίου στην πρόωρη και εκτεταμένη αλλαγή κατηγορίας IgG λόγω των αναφερόμενων Th{16}}πολωμένων αποκρίσεων [51]. Η επιμονή των ειδικών για τον ιό αποκρίσεων IgM στους εμβολιασμένους θα μπορούσε να αναφέρεται στην επιμονή των IgM που δεν αλλάζουν κατηγορία και των Β κυττάρων μνήμης [52].

Το SARS-CoV-2 S IgA που προκαλείται από φυσική λοίμωξη μεσολαβεί στην εξουδετέρωση του ιού και είναι πιθανότατα σημαντικό συστατικό της φυσικής ανοσίας [27, 28]. Οι αποκρίσεις IgA στα εμβόλια COVID-19 έχουν διερευνηθεί, ειδικά κατά των εμβολίων που βασίζονται σε mRNA. Chan et. al. ανέφερε ότι ο εμβολιασμός με το mRNA του COVID-19 προκαλεί το S-ειδικό IgA με παρόμοια κινητική σε σύγκριση με το S-ειδικό IgG, αλλά μειώνεται πιο γρήγορα στους ορούς των εμβολιασμένων μετά την 1η και τη 2η δόση [28].

Έχει αναφερθεί ότι τόσο το Comirnaty που βασίζεται σε mRNA όσο και ο απενεργοποιημένος ιός CoronaVac επάγουν το πλάσμα SARS-CoV-2 S1-ειδικό IgA. Ωστόσο, το Comirnaty, αλλά όχι το CoronaVac, ήταν επίσης σε θέση να επάγει S1-ειδικό IgA στον ρινικό βλεννογόνο [28]. Τα εμβόλια που βασίζονται σε mRNA προκάλεσαν επίσης την έκκριση αντι-S IgA στο γάλα των γυναικών [53] καθώς και το σάλιο των εμβολιασμένων [54]. Αν και η ενδομυϊκή οδός του εμβολιασμού δεν προκαλεί ανοσία του βλεννογόνου [55], υπάρχουν ενδείξεις ότι τα νανοσωματίδια λιπιδίων, όπως αυτά που φιλοξενούν τα εμβόλια που βασίζονται σε mRNA, μπορούν να ανιχνευθούν σε απομακρυσμένους ιστούς, συμπεριλαμβανομένου του πνεύμονα [56]. Τα ευρήματά μας δείχνουν ότι τα επίπεδα IgA είναι υψηλότερα σε φυσικά μολυσμένους ασθενείς με COVID-19 σε σύγκριση με τους εμβολιασμένους με Pfizer και Sinopharm και τυχαία άτομα, υποδεικνύοντας ότι η απόκριση IgA είναι πιο εμφανής λόγω φυσικών λοιμώξεων σύμφωνα με προηγούμενες έρευνες [27, 28].

Δυσκολευόμαστε να συμπεράνουμε την τυχαία μεμονωμένη ομάδα μας, καθώς θα μπορούσε να αντιπροσωπεύει μια ποικιλία ρυθμίσεων μόλυνσης/εμβολιασμού, συμπεριλαμβανομένων φυσικά μολυσμένου-μη εμβολιασμένου προσωπικού, μη εμβολιασμένων για τον COVID-19 με διαφορετικούς τύπους εμβολίων (Pfizer, Sinopharm ή AstraZeneca) , και μερικός ή πλήρης εμβολιασμός και εμβολιασθέντες με προηγούμενη ή ταυτόχρονη μόλυνση. Ωστόσο, η απόκριση Ab αυτής της ομάδας με ~ 55 τοις εκατό anti-S IgG απέχει ακόμα πολύ από το να φτάσει τα επίπεδα ανοσίας της αγέλης (65-95 τοις εκατό) στον πληθυσμό της Ιορδανίας [57].

Οι αρχικές μελέτες κατά το πρώτο κύμα εξάπλωσης του COVID-19, πριν από την εισαγωγή των εμβολίων και πριν από πιθανές επαναμολύνσεις, αντανακλούσαν ένα ρεαλιστικό μοτίβο απόκρισης ανοσοσφαιρίνης στη μόλυνση από SARS-CoV{-2. Γενικά, η μέγιστη ανταπόκριση IgM ήταν στις 2-4 εβδομάδες και έγινε μη ανιχνεύσιμη 3 μήνες μετά την έναρξη των συμπτωμάτων, τα αντισώματα IgG και IgA συνήθως ακολουθούν και κορυφώνονται σε περίπου 30-60 ημέρες και στη συνέχεια μειώνονται αργά με επίπεδα ακόμα ανιχνεύσιμα 9 μήνες ή αργότερα [58-60 ]. Παρά την ετερογένεια του πληθυσμού του δείγματος, οι σοβαρές περιπτώσεις COVID-19 συσχετίστηκαν πάντα με υψηλότερους τίτλους παραγωγής και εξουδετέρωσης Ab [60]. Μια μεγάλη μελέτη κοόρτης σε λήπτες εμβολίων με βάση το mRNA ανέφερε ότι η απόκριση IgG που προκλήθηκε κατά του εμβολιασμού για τον COVID-19 κορυφώθηκε 15 ημέρες μετά τη δεύτερη δόση και μειώθηκε με την πάροδο του χρόνου έως και έξι μήνες μετά τον εμβολιασμό [61]. Παρά τη μείωση των τίτλων αντισωμάτων με την πάροδο του χρόνου μετά τον εμβολιασμό, δεν εντοπίστηκαν περιπτώσεις σοβαρού COVID-19 μεταξύ των συμμετεχόντων σε άλλη μελέτη [62]. Η κινητική των ανοσοσφαιρινών COVID{-19 που αναφέρθηκαν σε αυτήν τη μελέτη είναι σύμφωνη με προηγούμενες μελέτες [36-44, 58-62].

Παρά τη σημασία της εξουδετέρωσης των κοιλιακών κοιλιακών για την προστασία από τη μόλυνση από SARS-CoV-2, το άλλο σκέλος της προσαρμοστικής ανοσίας, δηλαδή τα Τ κύτταρα, έχει αποδειχθεί σημαντικό για την ανοσολογική προστασία έναντι του COVID-19. Η ειδική για τον ιό κυτταροτοξική απόκριση CD8 συν Τ-λεμφοκύτταρα ανιχνεύθηκε νωρίς εντός 7 ημερών από την έναρξη των συμπτωμάτων και κορυφώθηκε μετά από 14 ημέρες. Αυτό αποδείχθηκε ότι συσχετίζεται με αποτελεσματική κάθαρση του ιού και ηπιότερα συμπτώματα. Από την άλλη πλευρά, οι αποκρίσεις των Τ-κυττάρων βρέθηκαν να είναι σοβαρά μειωμένες σε σοβαρές και κρίσιμες περιπτώσεις COVID-19. Αυτή η διαταραχή βρέθηκε να σχετίζεται με έντονη ενεργοποίηση Τ-κυττάρων και λεμφοπενία [60-62].

συμπεράσματα

Συγκεκριμένα αντισώματα SARS-CoV-2 κατά του S ήταν ανιχνεύσιμα σε φυσικά μολυσμένους, λήπτες εμβολίων και τυχαία άτομα. Η κατηγορία, τα επίπεδα, ο ρυθμός θετικότητας, η δυναμική και η διάρκεια της απόκρισης των ανοσοσφαιρινών διέφεραν ευρέως, γεγονός που αντικατοπτρίζει την ανοσογονικότητα και το ενισχυτικό αποτέλεσμα στο ένα άκρο και την ανοσολογική κατάσταση του ξενιστή στο άλλο άκρο. Αυτή η μελέτη υπογραμμίζει την πολυπλοκότητα και την ποικιλομορφία των παραγόντων που συμβάλλουν στην απόκριση των ανοσοσφαιρινών COVID-19 στην κοινότητα.

Βοηθητικές πληροφορίες

Πίνακας S1. Ακατέργαστα δεδομένα επιβεβαιωμένων ασθενών με COVID-19. Ακατέργαστα δεδομένα του πληθυσμού της μελέτης συμπεριλαμβανομένων δημογραφικών δεδομένων, κλινικών δεδομένων και ανταπόκρισης ανοσοσφαιρινών (IgG, IgM και IgA). Αυτά τα δεδομένα χρησιμοποιήθηκαν για τη δημιουργία των πινάκων 1-4. (XLS).

Πίνακας S2. Ακατέργαστα δεδομένα απόκρισης ανοσοσφαιρινών του COVID-19 επιβεβαιώθηκαν ασθενείς με την πάροδο του χρόνου. Οι μέσοι όροι των τίτλων ανοσοσφαιρίνης ± SD με την πάροδο του χρόνου σε ημέρες παρασχέθηκαν και χρησιμοποιήθηκαν για τη δημιουργία του Σχ. 1. (XLSX).

Ευχαριστίες

Θα θέλαμε να ευχαριστήσουμε το Hashemite University, το Υπουργείο Υγείας, το Υπουργείο Τριτοβάθμιας Εκπαίδευσης και Έρευνας και το Νοσοκομείο Prince Hamzah στην Ιορδανία για την υποστήριξή τους.

Συνεισφορές Συγγραφέων

Εννοιολόγηση:

Mohammad Al-Tamimi, Amjed A. Tarifi, Arwa Qaqish, Ashraf I. Khasawneh.

Επιμέλεια δεδομένων:

Mohammad Al-Tamimi, Amjed A. Tarifi, Manal M. Abbas, Hadeel Albalawi, Jumanah Abu-Raideh, Muna Salameh.

Επίσημη ανάλυση:

Mohammad Al-Tamimi, Arwa Qaqish, Ashraf I. Khasawneh.

Απόκτηση χρηματοδότησης:

Μοχάμεντ Αλ Ταμίμι.

Ερευνα:

Manal M. Abbas, Hadeel Albalawi, Jumanah Abu-Raideh, Muna Salameh.

Μεθοδολογία:

Manal M. Abbas, Hadeel Albalawi, Jumanah Abu-Raideh, Muna Salameh.

Διαχείριση έργου:

Μοχάμεντ Αλ Ταμίμι.

Πόροι:

Ashraf I. Khasawneh.

Εποπτεία:

Mohammad Al-Tamimi, Ashraf I. Khasawneh.

Συγγραφή – πρωτότυπο προσχέδιο:

Mohammad Al-Tamimi, Arwa Qaqish. Συγγραφή – κριτική & επιμέλεια: Amjed A. Tarifi, Manal M. Abbas, Hadeel Albalawi, Jumanah Abu-Raideh, Muna Salameh, Ashraf I. Khasawneh.

βιβλιογραφικές αναφορές

1. https://www.who.int/emergencies/diseases/novel-coronavirus-2019/situation-reports.

2. Zhu N, Zhang D, Wang W, Li X, Yang B, Song J, et al; Ομάδα διερεύνησης και έρευνας για τον νέο κορωνοϊό της Κίνας. Ένας νέος κορωνοϊός από ασθενείς με πνευμονία στην Κίνα, 2019. N Engl J Med. 20 Φεβρουαρίου 2020; 382(8):727–733. https://doi.org/10.1056/NEJMoa2001017 PMID: 31978945

3. Coutard B, Valle C, de Lamballerie X, Canard B, Seidah NG, Decroly E. Η γλυκοπρωτεΐνη ακίδας του νέου κοροναϊού 2019-nCoV περιέχει μια θέση διάσπασης που μοιάζει με φουρίνη που απουσιάζει στον CoV του ίδιου clade. Antiviral Res. 2020 Απρ. 176:104742. https://doi.org/10.1016/j.antiviral.2020.104742 PMID: 32057769

4. Wu A, Peng Y, Huang B, Ding X, Wang X, Niu P, et al. Σύνθεση γονιδιώματος και απόκλιση του νέου κοροναϊού (2019-nCoV) που προέρχεται από την Κίνα. Μικρόβιο ξενιστή κυττάρων. 11 Μαρτίου 2020; 27(3):325–328. https://doi.org/10.1016/j.chom.2020.02.001 PMID: 32035028

5. Bianchi M, Benvenuto D, Giovanetti M, Angeletti S, Ciccozzi M, Pascarella S. Sars-CoV-2 Πρωτεΐνες φακέλου και μεμβράνης: δομικές διαφορές που συνδέονται με τα χαρακτηριστικά του ιού; Biomed Res Int. 2020 30 Μαΐου; 2020:4389089. https://doi.org/10.1155/2020/4389089 PMID: 32596311

6. Walls AC, Park YJ, Tortorici MA, Wall A, McGuire AT, Veesler D. Δομή, λειτουργία και αντιγονικότητα του SARS-CoV-2 Spike Glycoprotein. Κύτταρο. 16 Απριλίου 2020; 181(2):281–292.ε6. https://doi.org/10.1016/ j.cell.2020.02.058 Erratum in: Cell. 2020 10 Δεκεμβρίου 183(6):1735. PMID: 32155444

7. Wang Q, Zhang Y, Wu L, Niu S, Song C, Zhang Z, et al. Δομική και Λειτουργική Βάση Εισόδου SARS-CoV2 με χρήση ανθρώπινου ACE2. Κύτταρο. 2020 14 Μαΐου; 181(4):894–904.ε9. https://doi.org/10.1016/j.cell. 2020.03.045 PMID: 32275855

8. Dai L, Gao GF. Ιικοί στόχοι για εμβόλια κατά του COVID-19. Nat Rev Immunol. 2021 Φεβ. 21(2):73–82. https://doi.org/10.1038/s41577-020-00480-0 PMID: 33340022

9. Wu J, Liang Β, Chen C, Wang Η, Fang Y, Shen S, et αϊ. Η λοίμωξη SARS-CoV-2 προκαλεί παρατεταμένες χυμικές ανοσολογικές αποκρίσεις σε ασθενείς που βρίσκονται σε ανάρρωση μετά από συμπτωματικό COVID-19. Nat Commun. 22 Μαρ 2021; 12(1):1813. https://doi.org/10.1038/s41467-021-22034-1 PMID: 33753738

10. Lei Q, Li Y, Hou HY, Wang F, Ouyang ZQ, et al. Δυναμική αντισωμάτων κατά του SARS-CoV-2 σε ασυμπτωματικές λοιμώξεις από COVID-19. Αλλεργία. 2021 Φεβ. 76(2):551–561.

For more information:1950477648nn@gmail.com