Η αιμοκάθαρση αυξάνει το οξειδωτικό στρες μέσω ριζών με επίκεντρο τον άνθρακα παρά τη βελτιωμένη βιοσυμβατότητα

Ενεργοποίηση λευκοκυττάρων και τα προκύπτονταοξειδωτικό στρεςπροκαλούμενο απόβιοασυμβατά υλικάστη διάρκειαεπίδραση της αιμοκάθαρσηςτην πρόγνωση των ασθενών. Παρά τις πολλαπλές προόδους στοσυσκευές αιμοκάθαρσης, οπρόγνωση της αιμοκάθαρσηςασθενείς με επιπλοκές που σχετίζονται βαθιά μεοξειδωτικό στρες, όπωςΔιαβήτης ο σακχαρώδης παραμένει φτωχός. Έτσι, επαναξιολογήσαμε τις επιπτώσεις τουαιμοκάθαρσηπολλαπλών ενεργών ειδών οξυγόνου χρησιμοποιώντας μεθόδους που βασίζονται σε συντονισμό σπιν ηλεκτρονίων για περαιτέρω βελτίωση τηςβιοσυμβατότητασεαιμοκάθαρση. Εγγράψαμε 31 ασθενείς σε σταθερή κατάσταση που υποβλήθηκαν σε αιμοκάθαρση με χρήση διαλυτών πολυσουλφόνης υψηλής ροής. Τα αποτελέσματα της αιμοκάθαρσης σε αντιδραστικά είδη οξυγόνου αξιολογήθηκαν με δύο μεθόδους: MULTiS, η οποία αξιολογεί τις δραστηριότητες σάρωσης ορού έναντι πολλαπλών υδρόφιλων ενεργών ειδών οξυγόνου και i-STrap, που ανιχνεύει λιπόφιλες ρίζες στο κέντρο του άνθρακα. Παρόμοια με προηγούμενες μελέτες, διαπιστώσαμε ότι η δραστηριότητα δέσμευσης ριζών υδροξυλίου ορού βελτιώθηκε σημαντικά μετά την αιμοκάθαρση. Σε αντίθεση με προηγούμενες μελέτες, ανακαλύψαμε ότι η δράση καθαρισμού έναντι των ριζών αλκοξυλίου μειώθηκε σημαντικά μετάαιμοκάθαρση. Επιπλέον, οι ασθενείς με σακχαρώδη διαβήτη εμφάνισαν μείωση της δραστηριότητας σάρωσης ορού έναντι των ριζών αλκυλ υπεροξυλίου και αύξηση των λιπόφιλων ριζών στο κέντρο του άνθρακα μετά την αιμοκάθαρση. Αυτά τα αποτελέσματα υποδηλώνουν ότι παρά τις εκτεταμένες βελτιώσεις στις μεμβράνες της συσκευής διάλυσης, οι μορφές τουαντιδραστικά είδη οξυγόνουπου μπορούν να εξαλειφθούν κατά τη διάρκεια της αιμοκάθαρσης είναι περιορισμένα και πολλαπλά δραστικά είδη οξυγόνου παραμένουν σε αυξημένα επίπεδα κατά τη διάρκεια της αιμοκάθαρσης.

Λέξεις κλειδιά:αιμοκάθαρση, βιοσυμβατότητα, συντονισμός spin ηλεκτρονίων ρίζας αλκυλ υπεροξυλίου, MULTiS, i-STrap

ΚΑΝΤΕ ΚΛΙΚ ΕΔΩ ΓΙΑ ΝΑ ΠΑΡΕΤΕ ΦΥΣΙΚΟ ΟΡΓΑΝΙΚΟ ΕΚΧΥΛΙΣΜΑ ΚΙΣΤΑΝΧΗΣ ΜΕ 25% ΕΧΙΝΑΚΟΣΙΔΗ ΚΑΙ 9% ΑΚΤΕΟΣΙΔΗ ΓΙΑ ΤΗ ΛΕΙΤΟΥΡΓΙΑ ΤΩΝ ΝΕΦΡΩΝ

Υποστήριξη της Wecistanche-Ο μεγαλύτερος εξαγωγέας κιστάνι στην Κίνα:

Διεύθυνση ηλεκτρονικού ταχυδρομείου:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Tel:+86 15292862950

Αγορά για περισσότερες λεπτομέρειες Λεπτομέρειες:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-κατάστημα

Χρόνια νεφρική νόσος(ΧΝΝ) είναι γνωστό ότι σχετίζεται μευψηλό οξειδωτικό στρες. (-4)Συσσώρευση ουραιμικής τοξίνηςs με προοξειδωτικές ιδιότητες που οδηγούν σεμικροφλεγμονήπου προκαλείται από τοαύξηση της προφλεγμονώδους κυτοκίνηςsείναι το βασικό χαρακτηριστικό τουΠαθοφυσιολογία ΧΝΝ. (s-, Αιμοκάθαρση (HD), μια ευρέως διεξαχθείσα θεραπεία νεφρικής υποκατάστασης, δρα ως δίκοπο μαχαίρι για τη μείωση του οξειδωτικού στρες σε ασθενείς με ΧΝΝ. Ενεργοποίηση πολυμορφοπύρηνων λευκοκυττάρων, λόγω επαφής με τη μεμβράνη ή άλλες τεχνητές επιφάνειες σε κυκλώματα HD , είναι η κύρια αιτία του οξειδωτικού στρες που προκαλείται από το HD.s-) Αντίθετα, η απομάκρυνση των προοξειδωτικών ουραιμικών τοξινών, ιδιαίτερα των υδρόφιλων ενώσεων χαμηλού μοριακού βάρους όπως οι ενώσεις τριμεθυλαμίνης-Νοξειδίου ή γουανιδίνης, μπορεί να βελτιώσει την αντιοξειδωτική φύση της HD, που οδηγεί σε μακροπρόθεσμη βελτίωση του ποσοστού επιβίωσης και της ποιότητας ζωής σεασθενείς με ΧΝΝ. (2,13) ​​Επιπλέον, η διόρθωση της οξέωσης οδηγεί στην επανενεργοποίηση των αντιοξειδωτικών ενζύμων και στη μείωση της υπερφόρτωσης όγκου που οδηγεί στην πρόληψη της καρδιοπάθειας. Οι αγγειακές επιπλοκές είναι αντιοξειδωτικοί μηχανισμοί. (4 Επομένως, είναι απαραίτητο για τα υλικά HD για την ελαχιστοποίηση της ενεργοποίησης των λευκοκυττάρων και τη μεγιστοποίηση των αντιοξειδωτικών επιδράσεων. Για να ξεπεραστεί αυτό το προβληματικό αντιοξειδωτικό και βιοσυμβατό υλικό HD που παραδειγματίζεται από το επικαλυμμένο με βιταμίνη Ε συσκευή διαπίδυσης, έχουν αναπτυχθεί. η πρόγνωση των ασθενών με HD παραμένει μη ικανοποιητική, ειδικά εκείνων με σακχαρώδη διαβήτη (ΣΔ), μια ασθένεια που προάγει μια οξειδωτική κατάσταση.αντιδράσεις που σχετίζονται με το οξειδωτικό στρεςδεν έχουν αναλυθεί επαρκώς. Έτσι, αυτή η μελέτη στόχευε να διευκρινίσει την επίδραση της HD στη δυναμική των αντιδραστικών ειδών οξυγόνου (ROS), ως τα ανοδικά γεγονότα των αντιδράσεων οξειδωτικού στρες, με βάση την ιδέα ότι κάθε περιοχή στόχος οξειδωτικών και αντιοξειδωτικών αντιδράσεων στο σώμα πρέπει να περιγραφεί βιοχημικά. σε συγκεκριμένο χρόνο και χώρο. Μια εξήγηση για αυτό είναι αέλλειψη λεπτομερούς ανάλυσηςαπό την ανάντη πλευρά των αντιδράσεων που σχετίζονται με το οξειδωτικό στρες που διεγείρουν αυτές τις κυτταρικές αντιδράσεις. Η αναγνώριση των ROS που δρουν ως διεγέρτες των αντιδράσεων οξειδωτικού στρες ή των αλληλεπιδράσεων μεταξύ των ROS για τη δημιουργία οξειδωτικών διεγερτών είναι δύσκολη λόγω των υψηλών ρυθμών αντίδρασης και των πολύπλοκων αλυσίδων αντίδρασης. Δεδομένου ότι τα ROS δεν είναι ομοιόμορφα και τα μεμονωμένα ROS έχουν συγκεκριμένα χαρακτηριστικά κατά τη διάρκεια αντιδράσεων in vivo, απαιτείται ανάλυση πολλαπλών ROS. (9-2n Επομένως, για να βελτιωθεί η βιοσυμβατότητα με βάση τη χρήση αντιοξειδωτικών και βιοσυμβατών υλικών, πρέπει να κατανοήσουμε τις αλλαγές στη δυναμική των ROS που προκαλούνται από το HD.

Για να διερευνήσουμε τη δυναμική του ROS κατά τη διάρκεια της HD, χρησιμοποιήσαμε δύο νέες μεθόδους που βασίζονται σε συντονισμό σπιν ηλεκτρονίων (ESR). ο προσδιορισμός πολλαπλών υδρόφιλων ελεύθερων ριζών (MULTIS) και ο προσδιορισμός ανίχνευσης λιπόφιλων ριζών σε ολικό αίμα (i-STrap) Αν και η έρευνα σχετικά με τη δραστηριότητα σάρωσης ROS από το ESR δεν είναι εκτεταμένη, παραμένει η μόνη διαθέσιμη μέθοδος για τον προσδιορισμό του τύπου και την εξέταση της δυναμικής του ROS. Η μέθοδος συνδυάζει ένα σύστημα ροής τύπου υγρής χρωματογραφίας υψηλής απόδοσης με ένα σύστημα ESR και χρησιμοποιεί 5-(2,2-διμεθύλιο-1.3-προποξυκυκλοφωσφορύλιο)-5- μεθυλ-1-πυρρολινοξείδιο (CYPMPO) ως παγίδα περιστροφής. Το MULTIS παρέχει υψηλότερη ευαισθησία και σταθερότητα για τη μέτρηση σάρωσης ROS από τις συμβατικές δοκιμές ESR.22-24) Ένας από τους συν-συγγραφείς μας έχει αναφέρει στο παρελθόν δραστηριότητες σάρωσης ROS που μετρήθηκαν με MULTIS σε ασθενείς με ΧΝΝ σταδίου 5. Ωστόσο, δεν αξιολόγησαν την επίδραση του HD.e2) Επιπλέον, η μέθοδος i-STrap είναι μια μέθοδος βασισμένη σε ESR που ανιχνεύει ROS στο πλήρες αίμα χρησιμοποιώντας 2-διφαινυλφωσφινοϋλ-2-μεθυλ-3,{ {20}}διυδρο-2H-πυρρόλιο N-oxideDPhPMPO) ως παγίδα περιστροφής και μετρά το ESR μετά από μια οργανική εκχύλιση, αντανακλώντας έτσι λιπόφιλα ROS.2s.26 Σε αυτή τη μελέτη, βρήκαμε ότι τα επίπεδα πολλών ROS ήταν αυξήθηκε και δεν εξαλείφθηκε από την HD, υποδεικνύοντας ότι οι ριζικές αλυσιδωτές αντιδράσεις εξακολουθούν να μην ελέγχονται επαρκώς μετά από HD. Αυτό μπορεί να επηρεάσει τηνπρόγνωση ασθενών με ΧΝΝ.

Υλικά και μέθοδοι

Υποκείμενα και ενημερωμένη συγκατάθεση. Όλες οι διαδικασίες που διενεργήθηκαν σε ανθρώπινα υποκείμενα πραγματοποιήθηκαν μετά από εξατομικευμένη γραπτή συγκατάθεση. Το πρωτόκολλο που χρησιμοποιήθηκε εγκρίθηκε από την Επιτροπή Τεχνολογίας του Πανεπιστημίου Tsukuba (Αρ. Εξουσιοδότησης 201809). Αυτή είναι μια μελέτη παρατήρησης. Ως εκ τούτου, έγιναν παρεμβάσεις στους ασθενείς. Συνολικά 31 ασθενείς με σταθερή HD συμπεριλήφθηκαν στη μελέτη. Λάβαμε και καταγράψαμε κλινικές και δημογραφικές πληροφορίες για κάθε ασθενή. Όλοι οι ασθενείς υποβλήθηκαν σε θεραπεία με συσκευές διαπίδυσης με μεμβράνη πολυσουλφόνης υψηλής ροής (Toray Medical Co., Ltd., Τόκιο, Ιαπωνία) με διάφορες επιφάνειες μεμβράνης, προσαρμοσμένες στη σύσταση του σώματος κάθε ατόμου. Οι ασθενείς χωρίστηκαν σε δύο ομάδες ανάλογα με την αιτία της νεφρικής νόσου τελικού σταδίου: τη μη διαβητική ομάδα (ομάδα μη ΣΔ, n=17) και τη διαβητική ομάδα, n=14).

Συλλογή δειγμάτων. Λήφθηκαν δείγματα αίματος κατά την έναρξη και το τέλος της θεραπείας αιμοκάθαρσης από τη δειγματοληψία που βρίσκεται στην αρτηριακή πλευρά του κυκλώματος HD. Για μετρήσεις MULTIS, οι οροί διαχωρίστηκαν και αποθηκεύτηκαν σε καταψύκτη στον βαθμό {{0}} (μέχρι να πραγματοποιηθεί η μέτρηση, για μετρήσεις i-STrap. συλλέχθηκαν δείγματα ολικού αίματος σε σωλήνες επικαλυμμένους με ηπαρίνη που επιτρεπόταν να παραμείνει για μία ώρα πριν από τις μετρήσεις Μετρήσεις δραστικότητας πολλαπλών ελεύθερων ριζών στον ορό Οι δράσεις σάρωσης υδρόφιλων ROS μετρήθηκαν με τη μέθοδο MULTIS χρησιμοποιώντας πρωτόκολλα που περιγράφηκαν προηγουμένως με μικρές τροποποιήσεις. μετρήθηκαν το υπεροξείδιο (0,"), η ρίζα αλκοξυλίου (RO"), η ρίζα αλκυλ υπεροξυλίου (ROO") και το απλό οξυγόνο ('0,). Ένα φασματόμετρο ESR ζώνης Χ ( RR-Xl ESR: Radical Research Inc., Τόκιο, Ιαπωνία) που χρησιμοποιεί διαμόρφωση πεδίου 100 kHz και λογισμικό λειτουργίας WN-RAD (Radical Research Inc.). Τα αντιδραστήρια παγίδευσης περιστροφής ESR που χρησιμοποιήθηκαν ήταν CYPMPO για " OH, O, RO' και ROO' και 4-υδροξυ-2,2,6,6-τετραμεθυλπιπεριδίνη (TEMP) για το 'O. Οι τυπικές ρυθμίσεις του φασματόμετρου ήταν οι εξής: πλάτος διαμόρφωσης πεδίου.0.1 mT; ισχύς μικροκυμάτων, 10 mW; Πλάτος και ταχύτητα σάρωσης πεδίου+7.5 mT/2 λεπτά; και χρονική σταθερά, 0,1 s. Κάθε ROS δημιουργήθηκε μέσω in situ φωτισμού με UV/ορατό φως από illuminatorRUVF-203SR UV illuminator, Radical Research Inc.) εξοπλισμένο με λάμπα τόξου υδραργύρου/ξένον μέσης πίεσης 200 W και Οδηγός φωτός χαλαζία, συνδεδεμένος με την κοιλότητα του συντονιστή. Οι πηγές φωτός, οι χρόνοι φωτισμού, οι πρόδρομοι ουσίες και οι φωτοευαισθητοποιητές που χρησιμοποιούνται για την παραγωγή ROS συνοψίζονται στον Πίνακα 1. Οι δραστηριότητες σάρωσης ROS υπολογίστηκαν σύμφωνα με μια προηγουμένως περιγραφείσα μέθοδο22) και μετατράπηκαν στη μονάδα ισοδύναμη με γνωστούς καθαρούς καθαριστές: γλουταθειόνη (GSH) για OH και «Ο, υπεροξειδική δισμουτάση (SOD) για Ο, 6-υδροξυ-2, 5,7,8-τετραμεθυλοχρωμαν-2-καρβοξυλικό οξύ (Trolox) για RO», και ένα -λιποϊκό οξύ για το ROO'MULTIS Οι μετρήσεις για κάθε ROS πραγματοποιήθηκαν εις τριπλούν.

Μέτρηση λιπόφιλου

Δραστηριότητα σάρωσης Ros σε πλήρες αίμα χρησιμοποιώντας i-Strap. Η λιπόφιλη δραστηριότητα δέσμευσης ROs μετρήθηκε χρησιμοποιώντας τη μέτρηση i-STrap ESR ki (Dojin-Glocal/Dojindo, Kumamoto, Ιαπωνία) με βάση το πρωτόκολλο του κατασκευαστή και μια προηγούμενη αναφορά.2s Αυτή η μέθοδος βασίζεται στην ανταγωνιστική αντίδραση μεταξύ αντιοξειδωτικών στο πλήρες αίμα και DPhPMPO με το υδροϋπεροξείδιο τριτ-βουτυλίου (BuOOHradical. Δείγματα ολικού αίματος επωάστηκαν με DPhPMPO(1{{1{{{0}} mM) και δοκιμή-BuOOH (10 mM) για 30 λεπτά σε θερμοκρασία δωματίου. Μετά την επώαση, η περιστροφή Τα προϊόντα προσθήκης στην οργανική φάση εκχυλίστηκαν χρησιμοποιώντας διαλύματα χλωροφορμίου και μεθανόλης. Οι μετρήσεις ESR πραγματοποιήθηκαν χρησιμοποιώντας αυτά τα οργανικά δείγματα. Οι συνθήκες μέτρησης ήταν οι ίδιες όπως για τη μέτρηση MULTIS, εκτός από το πλάτος και το ρυθμό σάρωσης πεδίου, που ορίστηκαν σε +5 0,0 mT/2 min, Δεν υπήρχαν ειδικά αντιοξειδωτικά για τη μέτρηση i-STrap· επομένως, η δραστηριότητα σάρωσης εκφράστηκε ως τιμή an10/-1, όπου το "0" υποδηλώνει την ένταση του σήματος χωρίς δείγμα και το "" υποδηλώνει το σήμα έντασης με δείγμα (28)Αντιδραστήρια. Το CYPMPO ελήφθη από την RR INC. (Ιαπωνία). ριβοφλαβίνη, 2,2'-azobis (2-αμιδινοπροπάνιο) διυδροχλωρίδιο (AAPH), text-BuOOH, διμεθυλοσουλφοξείδιο (DMSO) και τριαντάφυλλο Βεγγάλης αγοράστηκαν από τη Sigma-Aldrich Japan (Τόκιο, Ιαπωνία) και αγοράστηκε η TEMP από την Tokyo Chemical Industry (Τόκιο, Ιαπωνία). Το υπεροξείδιο του υδρογόνου και τα ρυθμιστικά διαλύματα ελήφθησαν από την WakoChemical Co. (Οσάκα, Ιαπωνία). Στατιστική ανάλυση." Η στατιστική ανάλυση πραγματοποιήθηκε χρησιμοποιώντας λογισμικό υπολογιστή Prism 6 για Mac OS X (GraphPad SoftwareInc., La Jolla, CA). Τα δεδομένα δοκιμάστηκαν χρησιμοποιώντας το Student's ζεύγη t-test. Τα δεδομένα εκφράστηκαν ως μέσες τιμές με διάστημα εμπιστοσύνης 95% (95% CI.