Τα εκχυλίσματα Cistanche Deserticola μπορούν να ανταγωνιστούν την ανοσολογικότητα και να παρατείνουν τη διάρκεια ζωής σε ποντίκια με επιρρεπή στη γήρανση 8 (SAM-P8)

Ke Zhang, Xu Ma, Wenjun He, Haixia Li, Shuyan Han, Yong Jiang, Hunan Wu, Li Han, Tomohiro Ohno, Nobuo Uotsu, Kohji Yamaguchi, Zhizhong Ma και Pengfei Tu

1 Τμήμα Φυσικών Φαρμάκων, Σχολή Φαρμακευτικών Επιστημών, Πανεπιστήμιο του Πεκίνου, No. 38 Xueyuan Road, Beijing 100191, China

2 Ιατρικό και Υγιές Αναλυτικό Κέντρο, Πανεπιστήμιο του Πεκίνου, No. 38 Xueyuan Road, Beijing 100191, Κίνα

3 Σχολή Θεμελιωδών Ερευνών, Ινστιτούτο Ερευνών Fancl, FANCL Corporation, 12-13 Kamishinano, Totsuka-Ku, Yokohama, Kanagawa 244-0806, Ιαπωνία

4 Τμήμα Ενσωμάτωσης Παραδοσιακής Κινέζικης και Δυτικής Ιατρικής, Σχολή Βασικών Ιατρικών Επιστημών, Πανεπιστήμιο του Πεκίνου, No. 38 Xueyuan Road, Beijing 100191, China

Επικοινωνία:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Τα επιρρεπή στη γήρανση 8 υποστρώματα ποντικού (SAM-P8), ευρέως αποδεκτά ως ζωικό μοντέλο για τη μελέτη φαρμάκων γήρανσης και αντιγήρανσης, χρησιμοποιήθηκαν για να εξεταστούν τα αποτελέσματα των συμπληρωμάτων διατροφής με εκχυλίσματαCistanchedeserticola(ECD) το οποίο έχει χρησιμοποιηθεί εκτενώς στην παραδοσιακή κινεζική ιατρική λόγω της αντιληπτής ικανότητάς του να προάγει τη λειτουργία του ανοσοποιητικού στους ηλικιωμένους. Αρσενικά ποντίκια SAM-P8 οκτώ μηνών υποβλήθηκαν σε θεραπεία με ECD με καθημερινές στοματικές χορηγήσεις για 4 εβδομάδες. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι τα συμπληρώματα διατροφής 150 mg/kg και 450 mg/kg ECD θα μπορούσαν να παρατείνουν τη διάρκεια ζωής που μετρήθηκε με την ανάλυση επιβίωσης Kaplan-Meier με δοσοεξαρτώμενο τρόπο. Το συμπλήρωμα διατροφής ποντικών SAM-P8 για 4 εβδομάδες με 100, 500 και 2500 mg/kg ECD αποδείχθηκε ότι είχε ως αποτέλεσμα σημαντικές αυξήσεις τόσο στα αφελή Τ όσο και στα φυσικά κύτταρα φονιάς στους πληθυσμούς των κυττάρων του αίματος και του σπλήνα. Αντίθετα, τα Τ κύτταρα περιφερικής μνήμης και η προφλεγμονώδης κυτοκίνη, IL-6 στον ορό, μειώθηκαν σημαντικά στα ποντίκια που έλαβαν 100 και 500 mg/kg ECD καθημερινά. Επιπρόσθετα, τα θετικά κύτταρα Sca{18}, οι αναγνωρισμένοι πρόγονοι των περιφερειακών αφελών Τ κυττάρων, αποκαταστάθηκαν παράλληλα. Τα αποτελέσματά μας παρέχουν σαφή πειραματική υποστήριξη για μακροχρόνιες μελέτες κλινικής παρατήρησης που το δείχνουν αυτόCistanchedeserticolaέχει σημαντικές επιδράσεις στην παράταση της διάρκειας ζωής και υποδηλώνει ότι αυτό επιτυγχάνεται με τον ανταγωνισμό του ανοσοποιητικού.

Cistancheμπορώαντι γήρανσηκαιλευκαίνει το δέρμα

Εισαγωγή

Cistanchedeserticola, ένα από τα πιο δημοφιλή παραδοσιακά κινέζικα φυτικά φάρμακα/προϊόντα υγείας, έχει περιγραφεί σε πολλές ιστορικές κινεζικές φυτικές φαρμακοποιίες ως έχουσες αντιγηραντικές ιδιότητες. Κατά συνέπεια, έχει χρησιμοποιηθεί ευρέως στην Κίνα για τη θεραπεία διαφόρων διαταραχών που σχετίζονται με την ηλικία, συμπεριλαμβανομένης της γεροντικής άνοιας, της ανικανότητας, της στειρότητας, της χρόνιας λοίμωξης και των αιμοποιητικών διαταραχών στους ηλικιωμένους [1]. Οι σύγχρονες χημικές προσεγγίσεις επέτρεψαν να απομονωθούν δύο κύριοι τύποι ενώσεων, οι φαινυλαιθανοειδείς γλυκοσίδες και οι ολιγοσακχαρίτες, ως τα κύρια δραστικά συστατικά τουCistanchedeserticola[1]. Την τελευταία δεκαετία,Cistanchedeserticolaκαι τα εκχυλίσματά του έχουν μελετηθεί εντατικά και έχουν αποδειχθεί ικανά να προστατεύουν τους νευρώνες από τραυματισμό που προκαλείται από νευροτοξίνες [2], να αναστέλλουν την ηπατοτοξικότητα που προκαλείται από τετραχλωράνθρακα [2] και να προάγουν την ανάκτηση των κυττάρων του μυελού των οστών από βλάβη από ακτινοβολία που προκαλείται από το Co60 [3] . Έχει επίσης αποδειχθεί ότι έχει αντιφλεγμονώδη, αντιοξειδωτικά και αντιγηραντικά αποτελέσματα [4]. Ωστόσο, εάν το Cistanche deserticola μπορεί να αυξήσει τη διάρκεια ζωής και ποιοι είναι οι υποκείμενοι μοριακοί μηχανισμοί [3] που σχετίζονται με τις αντιγηραντικές του ιδιότητες δεν έχουν δοκιμαστεί αυστηρά.

Η ανοσοενέργεια, δηλαδή η μεταβολή του ανοσοποιητικού συστήματος με την ηλικία αποτελεί το υπόβαθρο στο οποίο έχει σημειωθεί αυξημένη ευαισθησία σε λοιμώξεις, καρκίνο, νευροεκφυλιστικές ασθένειες και αυτοάνοσα νοσήματα στους ηλικιωμένους [5]. Θεραπευτικές παρεμβάσεις, όπως ο θερμιδικός περιορισμός [6] και η λήψη συμπληρωμάτων βιταμίνης Ε, έχουν αναφερθεί ότι είναι αποτελεσματικές στην καθυστέρηση της εξέλιξης της ανοσολογικότητας και ως εκ τούτου στη μείωση της νοσηρότητας ορισμένων ασθενειών που σχετίζονται με την ηλικία καθώς και στην παράταση της διάρκειας ζωής τόσο των ανθρώπων όσο και των τρωκτικών. [7, 8]. Ωστόσο, οι μελέτες σε αυτόν τον τομέα περιπλέκονται από το γεγονός ότι η γήρανση σχετίζεται με το παράδοξο της ταυτόχρονης ανοσολογικής ανεπάρκειας και της χρόνιας φλεγμονής [9]. Αυτό σημαίνει ότι η απλή διέγερση του πολλαπλασιασμού των λεμφοκυττάρων ή η αντιφλεγμονή δεν αντιπροσωπεύει ιδανικές θεραπευτικές παρεμβάσεις στην αντιμετώπιση της γήρανσης και των καταστάσεων που σχετίζονται με την ηλικία [10]. Συνεπώς, κατά την αναζήτηση ιατρικών παρεμβάσεων ικανών να αποτρέψουν ή να ανακουφίσουν καταστάσεις που σχετίζονται με την ηλικία, όπως λοιμώξεις, καρκίνος, αυτοάνοσα νοσήματα, αθηροσκλήρωση και νευροεκφυλιστικές ασθένειες που αποτελούν κύριες αιτίες θανάτου και αναπηρίας, καθώς και την αποκατάσταση ελαττωμάτων του ανοσοποιητικού συστήματος, πρέπει να συνοδεύεται από αναστολή φλεγμονώδεις αποκρίσεις.

Το ποντίκι με επιτάχυνση της γήρανσης [11] είναι ένα μοντέλο ποντικού που προέρχεται από το στέλεχος AKR/J, το οποίο χρησιμοποιείται ευρέως σε μελέτες γήρανσης. Το υποστέλεχος P8 (SAM-P8) αυτών των ποντικών έχει σημαντικά μειωμένη διάρκεια ζωής σε σύγκριση με το υποστρέλεχος R1 (SAM-R1), το οποίο δείχνει επίσης μια πιο αργή διαδικασία γήρανσης [12]. Παράλληλα με την πρόωρη γήρανση, τα ποντίκια SAM-P8 παρουσιάζουν επίσης αυξημένη νευρολογική γήρανση, ανοσογήρανση και σχετιζόμενα με την ηλικία αιμοποιητικά ελλείμματα που μιμούνται στενά τυπικά χαρακτηριστικά ανθρώπινης γήρανσης [13, 14]. Η ανάλυση των υποκείμενων μηχανισμών που ευθύνονται για την επιταχυνόμενη διαδικασία γήρανσης και τις διαταραχές που σχετίζονται με την ηλικία δείχνει ότι η μιτοχονδριακή δυσλειτουργία [15], το οξειδωτικό στρες και ο αυξημένος ρυθμός σωματικής μετάλλαξης του DNA φαίνεται να εμπλέκονται [16, 17]. Αυτό το σύστημα ποντικών, με το ομοιογενές γενετικό του υπόβαθρο, επομένως, παρέχει ένα εξαιρετικό πειραματικό μοντέλο για τη μελέτη της γήρανσης και της θεραπείας κατά της γήρανσης [12]. Αυτή η μελέτη επικεντρώθηκε στη διερεύνηση του κατά πόσο τα εκχυλίσματα του Cistanche deserticola είναι σε θέση να παρατείνουν τη διάρκεια ζωής των ποντικών SAM-P8 και να αντιστρέψουν την κατάσταση ανοσολογισμού τους.

κιστανάκιεχινακοσίδημπορώαντι γήρανση

Αποτελέσματα

3.1. Ανάλυση δυνητικών ενεργών συστατικών σε εκχυλίσματα Cistanche deserticola (ECD). Όπως φαίνεται στον Πίνακα 1, το ECD αποτελείται κυρίως από δύο τύπους ενώσεων, τους φαινυλαιθανοειδείς γλυκοσίτες και τους ολιγοσακχαρίτες. Στους φαινυλαιθανοειδείς γλυκοσίδες, ο εχινακοσίδης, η ακτεοσίδη και το 8-επιλογανικό οξύ έχουν ταυτοποιηθεί, ενώ στους ολιγοσακχαρίτες εντοπίστηκε μόνο η γαλακτιτόλη.

3.2. Η επίδραση των εκχυλισμάτων Cistanche deserticola στη μέση διάρκεια ζωής των ποντικών SAM-P8. Για αυτήν και για τις επόμενες μελέτες, αρσενικά ποντίκια SAM-P8 οκτώ μηνών χωρίστηκαν σε 4 ομάδες. Μεταξύ αυτών, μια ομάδα ποντικών τράφηκε με κανονική διατροφή χωρίς ECD, οι άλλες 3 ομάδες έχουν καταπιεί χωριστά τις δίαιτες που περιέχουν διαφορετικές αναλογίες ECD. Ποντίκια από το υποστέλεχος SAM-R1, τα οποία έχουν κανονική διαδικασία γήρανσης και διάρκεια ζωής, χρησιμοποιήθηκαν ως ομάδα ελέγχου σε όλα τα πειράματα.

Σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου SAM-R1, η μέση διάρκεια ζωής των ποντικών SAM-P8 μειώθηκε σημαντικά (Εικόνα 1(α); 𝑃 < 0.001).="" αν="" και="" η="" συμπλήρωση="" της="" δίαιτας="" με="" χαμηλή="" δόση="" (50="" mg/kg)="" ecd="" απέτυχε="" να="" προκαλέσει="" σημαντική="" αύξηση="" στη="" διάρκεια="" ζωής="" των="" ποντικών="" sam-p8,="" στη="" μέση="" (150="" mg/kg)="" και="" υψηλή="" (450="" mg/ml)="" συμπληρωματική="" δόσεις="" υπήρξε="" μια="" δοσοεξαρτώμενη="" αύξηση="" στη="" διάρκεια="" ζωής="" (εικόνες="" 1(α)="" και="" 1(β)·="" 𝑃="">< 0,05–0,01)="" που="" επιβεβαιώθηκε="" από="" την="" ανάλυση="" επιβίωσης="" kaplan-meier,="" η="" οποία="" περιελάμβανε="" τη="" χρήση="" και="" των="" δύο="" κατάταξης="" log="" (="" mantel-cox)="" και="" δοκιμές="">

3.3. Αναστροφή της ανοσολογικότητας σε ποντίκια SAM-P8 από εκχυλίσματα Cistanche deserticola (ECD). Η μείωση των περιφερειακών αφελών Τ λεμφοκυττάρων και η ταυτόχρονη αύξηση των Τ λεμφοκυττάρων της περιφερικής μνήμης είναι εξέχοντα χαρακτηριστικά της ανοσολογικότητας που θεωρούνται ευρέως ως οι κύριοι υποκείμενοι λόγοι για ανοσολογικές ανωμαλίες που σχετίζονται με την ηλικία. Αυτός ο ανοσολογισμός στα SAM-P8 σε σχέση με τα ζώα SAM-R1 ήταν ξεκάθαρα εμφανής όταν η ανάλυση FACS χρησιμοποιήθηκε για την απαρίθμηση των λεμφοκυττάρων (CD3 plus CD44low CD45RBhigh) ως δείκτη των αφελών Τ κυττάρων και των (CD3 συν CD44 υψηλού CD45BRlow) λεμφοκυττάρων ως δείκτη μνήμης κύτταρα. Έτσι, τόσο στο περιφερικό αίμα (Εικόνα 2) όσο και στα σπληνικά κύτταρα (Εικόνα 3) οι πληθυσμοί μείωσαν τα επίπεδα των αφελών Τ κυττάρων και αυξημένα επίπεδα Τ κυττάρων μνήμης παρατηρήθηκαν σε ποντικούς SAM-P8. Η συμπλήρωση της δίαιτας ποντικών SAM-P8 με ECD βρέθηκε ότι μπορεί να αντιστρέψει αυτούς τους δείκτες ανοσολογισμού με δοσοεξαρτώμενο τρόπο τόσο σε πληθυσμούς περιφερικού αίματος (Εικόνα 2) όσο και σε πληθυσμούς σπληνικών κυττάρων (Εικόνα 3). Ως πρόσθετος δείκτης της αντιστροφής της ανοσολογικότητας με τη συμπλήρωση ECD στη δίαιτα, αναλύθηκε το επίπεδο των φυσικών κυττάρων φονέων [18], ενός κύριου κυτταρικού δείκτη του έμφυτου ανοσοποιητικού συστήματος. Αυτό έδειξε ότι η συμπλήρωση της δίαιτας ECD είχε ως αποτέλεσμα μια δοσοεξαρτώμενη αύξηση των κυττάρων ΝΚ (CD3 συν CD49 συν) στους πληθυσμούς λεμφοκυττάρων τόσο του περιφερικού αίματος (Εικόνα 4) όσο και των σπληνικών κυττάρων (Εικόνα 5).

3.4. Εκχυλίσματα Cistanche deserticola Ενισχύουν τη σχετική ένταση φθορισμού των θετικών κυττάρων Sca-1 σε ποντίκια SAM-P8. Το αντιγόνο βλαστοκυττάρων-1 (Sca-1) είναι ένας από τους πιο σημαντικούς βιοδείκτες αιμοποιητικών βλαστοκυττάρων (HSC) σε πληθυσμούς κυττάρων μυελού των οστών. Τα θετικά κύτταρα Sca-1 αντιπροσωπεύουν επίσης προγόνους λεμφοκυττάρων που έχουν πρόσφατα εξαχθεί από τον μυελό των οστών στο περιφερικό αίμα όπου υφίστανται περαιτέρω διαφοροποίηση σε διάφορους τύπους ώριμων λεμφοκυττάρων. Συνεπώς, αυτά τα θετικά Sca-1 κύτταρα αντιπροσωπεύουν την κύρια πηγή των αφελών Τ λεμφοκυττάρων στο περιφερικό αίμα. Το Σχήμα 6 δείχνει ότι σε σύγκριση με τα ποντίκια ελέγχου SAM-R1, η σχετική ένταση φθορισμού των θετικών κυττάρων Sca-1 σε ποντικούς SAM-P8 ήταν σημαντικά χαμηλότερη. Η συμπλήρωση διατροφής ποντικών SAM-P8 με τρεις διαφορετικές δόσεις ECD αποδείχθηκε ότι ενισχύει σημαντικά τη σχετική ένταση φθορισμού των θετικών κυττάρων Sca-1 (Εικόνα 6).

3.5. Τα εκχυλίσματα Cistanche deserticola (ECD) προάγουν την απόπτωση και αναστέλλουν τη νέκρωση των λεμφοκυττάρων σε ποντίκια SAM-P8. Τα επίπεδα νέκρωσης και απόπτωσης σε πληθυσμούς λεμφοκυττάρων αίματος αναλύθηκαν με διπλή χρώση με Annexin V-FITC V/PI. Αυτό αποκάλυψε ότι η αναλογία νεκρωτικών λεμφοκυττάρων σε ποντικούς SAM-P8 ήταν σημαντικά υψηλότερη από ό,τι στα ζώα ελέγχου SAM-R1, ενώ η αναλογία αποπτωτικών λεμφοκυττάρων ήταν χαμηλότερη (Εικόνα 7). Η συμπλήρωση της διατροφής των ποντικών SAM-P8 με τρεις διαφορετικές δόσεις ECD ήταν ικανή να αναστείλει τα επίπεδα νέκρωσης που παρατηρήθηκαν σε πληθυσμούς περιφερικών λεμφοκυττάρων, ενώ μόνο τα δύο υψηλότερα επίπεδα συμπληρώματος ECD προκάλεσαν σημαντική αλλαγή στο επίπεδο των αποπτωτικών λεμφοκυττάρων (Εικόνα 7).

κιστανάκιμπορώαντιοξείδωση

3.6. Εκχυλίσματα Cistanche deserticola (ECD) Μειώνουν την Προφλεγμονώδη Κυτοκίνη IL-6 σε ποντίκια SAM-P8. Ως περαιτέρω δείκτης της ικανότητας του ECD να επηρεάζει τις αλλαγές που σχετίζονται με την ηλικία στο ανοσοποιητικό σύστημα, η επίδραση της συμπλήρωσης δίαιτας ECD στο επίπεδο ενός αριθμού κυτοκινών (IFN-𝛾, TNF- 𝛼, IL-2, IL{ Τα {9}}, IL{{10}}, GM-CSF και IL-3) αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας ανάλυση κυτταρομετρικής διάταξης σφαιριδίων (CBA) η οποία περιλαμβάνει χρώση με αντισώματα επισημασμένα με φθορισμό χρωστική σε συνδυασμό με κυτταρομετρικά σφαιρίδια σύλληψης. Τα αποτελέσματα (Εικόνα 8) έδειξαν ότι η φλεγμονώδης κυτοκίνη IL-6 δεν αυξήθηκε σε ποντίκια SAM-P8 μηνών σε σύγκριση με ποντίκια ελέγχου SAM-R1 της ίδιας ηλικίας, αλλά αυξήθηκε σημαντικά όταν σε σύγκριση με 6-ποντίκια SAM-R1 μηνών (τα αποτελέσματα δεν εμφανίζονται). Ωστόσο, τα συμπληρώματα διατροφής με υψηλές και μεσαίες δόσεις ECD μπόρεσαν να προκαλέσουν στατιστικά σημαντική μείωση στα επίπεδα IL{26}} στο πλάσμα (Εικόνες 8(α) και 8(β), 𝑃 < 0,05).="" τα="" επίπεδα="" πλάσματος="" των="" άλλων="" κυτοκινών="" που="" εξετάστηκαν="" (ifn-𝛾,="" tnf-𝛼,="" il-2,="" il-10,="" gm-csf="" και="" il-3)="" δεν="" έδειξαν="" σημαντικές="" διακυμάνσεις="" μεταξύ="" sam-="" ομάδες="" ποντικών="" που="" έλαβαν="" p8,="" sam-r1="" και="" ecd="" (δεδομένα="" δεν="">

4. Συζήτηση

Η ανοσολογική άμυνα ενάντια σε νεοδιηθητικούς μικροοργανισμούς ή ενδογενή κύτταρα όγκου εξαρτάται από την ποικιλομορφία του ρεπερτορίου των Τ κυττάρων, το οποίο με τη σειρά του βασίζεται στη δημιουργία και τη συντήρηση των αφελών Τ κυττάρων [19]. Κατά τη διάρκεια της διαδικασίας γήρανσης, η ποικιλομορφία του ρεπερτορίου των Τ-κυττάρων έχει αποδειχθεί ότι συρρικνώνεται δραματικά λόγω της προοδευτικής εξάντλησης των αφελών Τ κυττάρων στην περιφερειακή δεξαμενή αποθεμάτων. Είναι αυτή η έλλειψη αποκρινόμενων αφελών Τ κυττάρων που πιστεύεται ότι είναι υπεύθυνη για την ευαισθησία των ηλικιωμένων σε λοιμώξεις, καρκίνο και κακή έκβαση μετά τον εμβολιασμό [20]. Διάφορες παρεμβάσεις, συμπεριλαμβανομένου του θερμιδικού περιορισμού [7], της άσκησης [21] και της χορήγησης συμπληρωμάτων βιταμίνης Ε [8], έχουν χρησιμοποιηθεί για την επιτυχή αναπλήρωση των αφελών Τ κυττάρων και συνεπώς την παράταση της διάρκειας ζωής και τη μείωση της εμφάνισης λοίμωξης και καρκίνου στους ηλικιωμένους. Σε αυτή τη μελέτη, δείξαμε ότι η ECD είναι ικανή να αυξήσει το επίπεδο των αφελών Τ κυττάρων στην περιφερική δεξαμενή και υπήρξε παράταση της διάρκειας ζωής και μείωση της συχνότητας σχηματισμού όγκων σε ποντίκια με επιτάχυνση της γήρανσης (Θεραπευτική ομάδα ECD έναντι SAM-P8, 0 έναντι 1/6). Ως εκ τούτου, φαίνεται λογικό να συμπεράνουμε ότι η ικανότητα του ECD να αναστρέφει την εξαρτώμενη από την ηλικία εξάντληση των περιφερειακών αφελών Τ κυττάρων μπορεί να συμβάλει στα γνωστά αποτελέσματά του στη μείωση της σχετιζόμενης με την ηλικία νόσου που προέρχεται από μακροχρόνιες κλινικές παρατηρήσεις.

κιστανάκιακτεοσίδημπορώαντι γήρανση

βιβλιογραφικές αναφορές

[1] Y. Jiang και P.-F. Tu, "Analysis of chemical constituents in Cistanche species," Journal of Chromatography Α, τομ. 1216, αρ. 11, σελ. 1970–1979, 2009.

[2] Q. Xiong, K. Hase, Y. Tezuka, T. Tani, T. Namba, and S. Kadota, «Ηπατοπροστατευτική δραστηριότητα φαινυλαιθανοειδών από Cistanche deserticola», Planta Medica, τομ. 64, αρ. 2, σελ. 120–125, 1998.

[3] "Immunology and aging in Europe. Proceeding of the 2nd Conference on Basic Biology and Clinical Impact of Immunosenescence. March 22-26, 2001, Cordoba, Spain," Experimental Gerontology, vol. 37, αρ. 2-3, σελ. 183–473, 2002.

[4] Γ.-Δ. Xuan και C.-Q. Liu, "Έρευνα σχετικά με την επίδραση των φαινυλαιθανοειδών γλυκοσιδίων (PEG) του Cistanche deserticola στην αντιγήρανση σε ηλικιωμένους ποντικούς που προκαλούνται από D-γαλακτόζη," Journal of Chinese Medicinal Materials, τομ. 31, αρ. 9, σελ. 1385–1388, 2008.

[5] D. Aw, AB Silva, and DB Palmer, "Immunosenescence: emerging challenges for an aging πληθυσμό", Immunology, τομ. 120, αρ. 4, σελ. 435–446, 2007.

[6] M. Alizadeh, H. Pohla, A. Rehbein, and G. Pawelec, "Μακροχρόνια καλλιέργεια μονοκλωνικών ανθρώπινων Τ λεμφοκυττάρων: μοντέλα ανοσοενέργειας;" Μηχανισμοί Γήρανσης και Ανάπτυξης, τόμ. 83, αρ. 3, σελ. 171–183, 1995.

[7] EH Greeley, E. Spitznagel, DF Lawler, RD Kealy, and M. Segre, "Modulation of canine immunosenescence by life-long caloric περιορισμός", Veterinary Immunology and Immunopathology, τομ. 111, σελ. 287–299, 2006.

[8] SN Meydani, SN Han και D. Wu, "Vitamin E and immune response in the aged: molecular μηχανισμοί και κλινικές επιπτώσεις", Immunological Reviews, τομ. 205, σελ. 269–284, 2005.

[9] SG Deeks, "HIV λοίμωξη, φλεγμονή, immunosenescence, and aging," Annual Review of Medicine, τομ. 62, σελ. 141– 155, 2011.

[10] M. Capri, D. Monti, S. Salvioli et al., "Complexity of anti immunosenescence strategies in humans", Artificial Organs, τομ. 30, αρ. 10, σελ. 730–742, 2006.

[11] S. Antonaci, AR Garofalo, C. Chicco et al., "Γεροντική άνοια, τύπος Alzheimer: μια διακριτή οντότητα στον ανοσολογισμό;" Journal of Clinical Laboratory Analysis, τομ. 4, αρ. 1, σελ. 16–21, 1990.

[12] R. Takahashi, "Anti-aging studies on the senescence-accelerated mouse strains (SAM) strains," Yakugaku Zasshi, τομ. 130, αρ. 1, σελ. 11–18, 2010.

[13] S. Llor´ens, RMM-F. De Mera, Α. Pascual et al., "The senescence-accelerated mouse (SAM-P8) as a model for the study of vascular functional alterations during aging," Biogerontology, τομ. 8, αρ. 6, σελ. 663–672, 2007.

[14] T. Takeda, "Senescence-accelerated mouse (SAM) with special reference to neurodegeneration models, SAMP8 and SAMP10 ποντίκια," Neurochemical Research, τομ. 34, αρ. 4, σελ. 639–659, 2009.

[15] H. Nakahara, T. Kanno, Y. Inai et al., "Mitochondrial dysfunction in the senescence-accelerated mouse (SAM)," Free Radical Biology and Medicine, τομ. 24, αρ. 1, σελ. 85–92, 1998.

[16] J. Mizutani, T. Chiba, M. Tanaka, K. Higuchi, and M. Mori, «Unique mutations in mitochondrial DNA of senescence-accelerated mouse strains (SAM)», Journal of Heredity, τομ. 92, αρ. 4, σελ. 352–355, 2001.

[17] A. Mori, K. Utsumi, J. Liu, and M. Hosokawa, «Oxidative damage in the senescence-accelerated mouse», Annals of the New York Academy of Sciences, τομ. 854, σελ. 239–250, 1998.

[18] WB Ershler, WH Sun, N. Binkley et al., "Ιντερλευκίνη-6 και γήρανση: τα επίπεδα αίματος και η παραγωγή μονοπύρηνων κυττάρων αυξάνονται με την πρόοδο της ηλικίας και η in vitro παραγωγή μπορεί να τροποποιηθεί με διαιτητικούς περιορισμούς," Lymphokine and Cytokine Έρευνα, τόμ. 12, αρ. 4, σελ. 225–230, 1993.

[19] AN Vallejo, "Immune remodeling: Learns from reper toire alterations gjatë χρονολογικής γήρανσης και σε ασθένειες που προκαλούνται από το ανοσοποιητικό," Trends in Molecular Medicine, τομ. 13, αρ. 3, σελ. 94–102, 2007.