Η επίδραση του αναστολέα STAT6 AS1517499 στη θεραπεία της νεφρικής ίνωσης
Mar 24, 2022
Επικοινωνία:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791
ΜΕΡΟΣ Ⅰ: Φαρμακολογική αναστολή του STAT6 Βελτιώνει την ενεργοποίηση των μυελοειδών ινοβλαστών και την εναλλακτική πόλωση μακροφάγων στη νεφρική ίνωση
Baihai Jiao, Changlong An, Melanie Tran, Hao Du, Penghua Wang, Dong Zhou και Yanlin Wang
ΕΙΣΑΓΩΓΗ
Η χρόνια νεφρική νόσος (ΧΝΝ) έχει γίνει μια σημαντική πρόκληση για τη δημόσια υγεία(1). Η ίνωση είναι η απόλυτη κοινή οδός για την ανάπτυξη της ΧΝΝ και θεωρείται σημαντικός παράγοντας για την εξέλιξη όλων των μορφών ΧΝΝ(2).Νεφρική ίνωσηείναι ένα παθολογικό χαρακτηριστικό της ΧΝΝ, που οδηγεί στην αντικατάσταση της δομής του φυσιολογικού νεφρικού ιστού με εξωκυτταρική μήτρα (ECM) με προοδευτική και μη αναστρέψιμη βλάβη της νεφρικής λειτουργίας (3). Ωστόσο, παρά την αυξημένη κατανόηση των μοριακών μηχανισμών τουνεφρική ίνωση, δεν υπάρχει ειδική θεραπεία για τον έλεγχο της ίνωσης και την αποκατάσταση της νεφρικής λειτουργίας. Καθώς η προέλευση και η λειτουργική συμβολή των ινοβλαστών δεν είναι πλήρως κατανοητές, η αποτελεσματική στόχευση των ινοβλαστών στην ίνωση οργάνων παραμένει μια πρόκληση.
Τα συσσωρευμένα στοιχεία δείχνουν ότι οι μυελοειδείς μυοϊνοβλάστες που ονομάζονται ινοκύτταρα παίζουν κρίσιμο ρόλο στη διαδικασία της ίνωσης (4-7). Εμείς και άλλοι έχουμε δείξει προηγουμένως ότι η στρατολόγηση ινοβλαστών που προέρχονται από μυελό των οστών αυξάνει την εξέλιξη και την ανάπτυξηνεφρώνίνωση(8-12). Επομένως, η στόχευση αυτών των κυττάρων μπορεί να χρησιμεύσει ως αποτελεσματική θεραπευτική στρατηγική για τη θεραπεία της χρόνιας νεφρικής νόσου. Οι ινοβλάστες που προέρχονται από μυελό των οστών μοιράζονται τα χαρακτηριστικά των μεσεγχυματικών κυττάρων καθώς και των αιμοποιητικών κυττάρων(13,14). Ωστόσο, διάφορες κυτοκίνες που παράγονται στο τοπικό μικροπεριβάλλον καθορίζουν τη διαφοροποίηση των ινοβλαστών που προέρχονται από το μυελό των οστών. Έχουμε αποδείξει προηγουμένως ότι οι κυτοκίνες Th2 (I-4 και IL-13), οι οποίες θεωρούνται προϊβρωτικές κυτοκίνες, ενισχύουν την έκφραση του κολλαγόνου τύπου Ι, της φιμπρονεκτίνης και -SMA σε μονοκύτταρα που προέρχονται από μυελό των οστών (15 , 16).
STAT6η σηματοδότηση ενεργοποιείται κυρίως από τις κυτοκίνες Th2 όπως η IL-4 και η IL-13 και σχετίζεται με την παθογένεση του πνεύμονα (17,18), του ήπατος (19) καινεφρώνίνωση(15, 20). Πρόσφατα δείξαμε ότι το JAK3/STAT6παίζει καθοριστικό ρόλο στην ενεργοποίηση των ινοβλαστών που προέρχονται από το μυελό των οστών και στην ανάπτυξηνεφρώνίνωσηστην αποφρακτική νεφροπάθεια(15). Επιπλέον, δείξαμε ότι το νοκ-άουτ του IL-4Ro αναστέλλειSTAT6ενεργοποίηση, συσσώρευση και μετασχηματισμός μυελοειδών ινοβλαστών σε μυοϊνοβλάστες, πόλωση μακροφάγων Μ2 και ανάπτυξηνεφρώνίνωσημετά από αποφρακτικό τραυματισμό ή χορήγηση φυλλικού οξέος(16). Αυτά τα ευρήματα υποδηλώνουν ότι ηSTAT6η οδός σηματοδότησης μπορεί να χρησιμεύσει ως νέος θεραπευτικός στόχος γιανεφρώνίνωση.
Σε αυτή τη μελέτη, αξιολογήσαμε τον πιθανό θεραπευτικό ρόλο τουAS1517499, ένα ισχυρό και επιλεκτικόSTAT6αναστολέα(21), στην ενεργοποίηση των μυελοειδών ινοβλαστών και στην ανάπτυξη τουνεφρώνίνωσησε δύο πειραματικά μοντέλα ποντικού. Τα αποτελέσματά μας το αποδεικνύουνAS1517499καταργήθηκεSTAT6ενεργοποίηση στα διάμεση κύτταρα του νεφρού με αποφρακτική κάκωση ή νεφροπάθεια με φολικό οξύ. Επιπλέον, η διοίκηση τουAS1517499καταστέλλει την ενεργοποίηση των μυελοειδών ινοβλαστών, μειώνει την πόλωση των μακροφάγων Μ2 και εξασθενείνεφρώνίνωση. Αυτά τα ευρήματα υποδηλώνουν ότι η αναστολή τουSTAT6μεAS1517499έχει τη δυνατότητα για τη θεραπεία της ινωτικής νεφρικής νόσου.
Εκχύλισμα Cistanche:απόσπασμα απόβότανο κιστανάκιγια τη θεραπεία της νεφρικής νόσου
ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΑ
AS1517499 Αναστέλλει την ενεργοποίηση STAT6 στο νεφρό με αποφρακτική κάκωση
Έχουμε αναφέρει ότι JAK3/STAT6Η σηματοδότηση ενεργοποιείται στα διάμεση κύτταρα των ινωτικών νεφρών μετά από αποφρακτικό τραυματισμό ή χορήγηση φυλλικού οξέος(15,16). Για να αξιολογηθεί ανSTAT6μπορεί να χρησιμεύσει ως θεραπευτικός στόχος για τη θεραπεία τηςνεφρώνίνωση, ποντίκια άγριου τύπου υποβλήθηκαν σε αποφρακτικό τραυματισμό και στη συνέχεια υποβλήθηκαν σε θεραπεία με όχημα ήAS1517499, a STAT6-ειδικός αναστολέας, κάθε δύο ημέρες για 10 ημέρες. Πραγματοποιήθηκαν ανοσοϊστοχημική χρώση και ανάλυση στυπώματος Western για εξέτασηSTAT6ενεργοποίηση στο νεφρό. Η ανοσοϊστοχημική χρώση αποκάλυψε ότι η θετική φωσφορικήSTAT6η χρώση ανιχνεύθηκε κυρίως στα διάμεση κύτταρα του νεφρού με αποφρακτική νεφροπάθεια, η οποία μειώθηκε μεAS1517499θεραπεία (Εικόνες 1Α, Β). Σε συμφωνία με αυτά τα ευρήματα, η ανάλυση Western blot έδειξε επίπεδο φωσφο-STAT6ανεστάλη στο νεφρό με αποφρακτική νεφροπάθεια που ακολούθησεAS1517499θεραπεία (Εικόνες 1C, D). Αυτά τα δεδομένα δείχνουν ότι η αναστολή τουSTAT6μεAS1517499προλαμβάνειSTAT6ενεργοποίηση στο νεφρό με αποφρακτική νεφροπάθεια.AS1517499Εξουδετερώνει τη συσσώρευση μυελοειδών ινοβλαστών στην αποφρακτική νεφροπάθεια Η συσσώρευση στοιχείων υποδεικνύει ότι η στρατολόγηση μυελοειδών ινοβλαστών συμβάλλει σημαντικά στην παθογένεση τουνεφρώνίνωση. Για να διερευνηθεί ανAS1517499επηρεάζει τη συσσώρευση μυελοειδών ινοβλαστών, τομές νεφρών χρωματίστηκαν για τον αιμοποιητικό δείκτη CD45 και τον μεσεγχυματικό δείκτη PDGFR-.
ΕΙΚΟΝΑ 1|Το AS1517499 αναστέλλει την ενεργοποίηση του STAT6 στον νεφρό με αποφρακτική κάκωση.(Α) Αντιπροσωπευτικές μικροφωτογραφίες τμημάτων νεφρών την ημέρα 10 της UUO που χρωματίστηκαν για φωσφορυλιωμένοSTAT6(καφέ) και αντιχρωματίζεται με αιματοξυλίνη (μπλε). Μπάρα ζυγαριάς, 50 μ. (Β) Ποσοτική ανάλυση φωσφορυλιωμένωνSTAT6-θετικά κύτταρα στο νεφρό.***Σ<0.001 vs.=""><0.01 vs=""><0.01 vs="" as-uuo.n="6" per="" group.="" (c)="" representative="" western="" blots="" show="" protein="" levels="" of="">STAT6καιSTAT6στο νεφρό την ημέρα 10 της UUO.(D) Ποσοτική ανάλυση p-STAT6επίπεδα πρωτεΐνης στο νεφρό,***P<0.001 vs=""><0.05 vs="" vehicle-uuo;="">< 0.05="" vs="" as-uuo.="" n="6" per="">
Ο αριθμός των CD45 και PDGFR- διπλά θετικών κυττάρων αυξήθηκε σημαντικά στους αποφρακμένους νεφρούς, ενώAS1517499Η θεραπεία μείωσε σημαντικά τα CD45 και PDGFR-διπλά θετικά κύτταρα (Εικόνες 2Α, Β). Αυτά τα στοιχεία υποδηλώνουν ότιSTAT6ανασταλτικός παράγονταςAS1517499βελτιώνει τη συσσώρευση μυελοειδών ινοβλαστών στον νεφρό μετά από αποφρακτικό τραυματισμό.AS1517499Μειώνει την πόλωση των Μ2 Μακροφάγων στην Αποφρακτική Νεφροπάθεια Ο μετασχηματισμός των μονοκυττάρων σε ινοβλάστες που προέρχονται από τον μυελό των οστών μεσολαβείται από την πόλωση των μακροφάγων Μ2.STAT6παίζει βασικό ρόλο στην πόλωση των μακροφάγων Μ2. Επομένως, εξετάσαμε εάν η αναστολή τουSTAT6μεAS1517499μεσολαβεί στην πόλωση των μακροφάγων. Οι τομές νεφρών χρωματίστηκαν για CD206 (δείκτης μακροφάγων Μ2) και τα PDGFR- .CD206 και PDGFR- διπλά θετικά κύτταρα αυξήθηκαν σημαντικά στο νεφρό ποντικών με αποφρακτική βλάβη. Σε αντίθεση,AS1517499μείωσε σημαντικά τον αριθμό των κυττάρων CD206 plus και PDGFR-plus σε νεφρούς με αποφρακτική νεφροπάθεια (Εικόνες 2C, D). Αυτά τα στοιχεία δείχνουν ότιAS1517499εξασθενεί σημαντικά τη μετάβαση των μονοκυττάρων σε μυελοειδείς ινοβλάστες και μειώνει την πόλωση των μακροφάγων Μ2.
ΣΧΗΜΑ 2|AS1517499 εξασθενεί τη συσσώρευση μυελοειδών ινοβλαστών και την πόλωση των μακροφάγων στον νεφρό με αποφρακτική κάκωση.(Α) Αντιπροσωπευτικές μικροφωτογραφίες τμημάτων kidhey την ημέρα 10 της UUO που χρωματίστηκαν για CD45 (κόκκινο), PDGFR- (πράσινο) και DAPI (μπλε) Ράβδος κλίμακας, 50μm. B） Ποσοτική ανάλυση των ινοβλαστών CD45*και PDGFR-* στον νεφρό.**P<0.001 vs=""><0.01 vs=""><0.01 vs="" as-uuo.n="6" per="" group.="" (c)representative="" photomicroaraphs="" of="" the="" kidney="" at="" day="" 10ofuuo="" stained="" for="" cd206="" (red).pdgfr-b="" (green).and="" dapiblue).scale="" bar.,50um.(d)="" quantitative="" analysis="" of="" cd206t="" and="" pdgfr-b+="" fibroblasts="" in=""><0.01 ys=""><0.01 vs=""><0.01 vs="" as-uuo.n="6" per="" group.="" (e)quantitative="" analysis="" of="" mrnaexpression="" of="" m2="" macrophage="" markers="" (mrc.fzz1.arg1.ccl17="" in="" the="" kidney="" of="" vehide="" or="">AS1517499ποντίκια που έλαβαν θεραπεία.*Π<><><0.05 vs=""><><0.05 vs=""><><0.05vs as-uuo.n="6" per="">
Για περαιτέρω αξιολόγηση της επίδρασης τουSTAT6ανασταλτικός παράγονταςAS1517499στην πόλωση των μακροφάγων Μ2, πραγματοποιήθηκε RT-PCR σε πραγματικό χρόνο για την ανίχνευση εκφράσεων mRNA δεικτών μακροφάγων Μ2.AS1517499Η θεραπεία κατέστειλε την αφθονία έκφρασης mRNA των Argl, MRCl, Fizzl και CCL17 σε αποφρακμένους νεφρούς (Εικόνα 2Ε). Αυτά τα στοιχεία δείχνουνSTAT6σηματοδοτική χρώση ανοσοφθορισμού και ανάλυση Western blot. Η χρώση με ανοσοφθορισμό και η ανάλυση Western blot αποκάλυψαν ότι τα επίπεδα ινονεκτίνης και κολλαγόνου Ι ήταν σημαντικά αυξημένα στον αποφρακωμένο νεφρό, ενώAS1517499Η θεραπεία μείωσε σημαντικά τα επίπεδα πρωτεΐνης του κολλαγόνου Ι και της φιμπρονεκτίνης στον αποφραγμένο νεφρό (Εικόνες 4C-H).
ΣΧΗΜΑ 3|Το AS1517499 μειώνει τον σχηματισμό μυοϊνοβλαστών στον νεφρό με αποφρακτική κάκωση.(Α) Αντιπροσωπευτικές μικροφωτογραφίες τμημάτων νεφρού που υποβλήθηκαν σε επεξεργασία με UUO χρωματισμένα για a-SMA (πράσινο) και αντιχρωματισμένα με DAPI (μπλε). Γραμμή κλίμακας, 50mm. (Β) Ποσοτική ανάλυση θετικής α-SMA περιοχής στο νεφρό. ***P < 0.001="" έναντι="" vehicle-con,="" #="" p="">< 0.05="" έναντι="" vehicle-uuo,="" συν="" p.="">< 0,01="" vs="" as-uuo.="" n="6" ανά="" ομάδα.="" (γ)="" αντιπροσωπευτικά="" στυπώματα="" western="" δείχνουν="" επίπεδα="" πρωτεΐνης="" a-sma="" στο="" νεφρό.="" (δ)="" ποσοτική="" ανάλυση="" της="" έκφρασης="" πρωτεΐνης="" a-sma="" στο="" νεφρό.="" ***p="">< 0,001="" έναντι="" vehicle-con,="" ##p="">< 0,01="" vs="" vehicle-uuo,="" συν="" p="">< 0,01="" vs="" as-uuo.="" n="6" ανά="">
ΕΙΚΟΝΑ 4|Το AS1517499 εξασθενεί τη νεφρική ίνωση και την παραγωγή πρωτεΐνης ECM στο νεφρό με αποφρακτική βλάβη.(Α) Αντιπροσωπευτικές μικροφωτογραφίες τμημάτων νεφρών που χρωματίστηκαν με κόκκινο Sirius για αξιολόγηση της ολικής εναπόθεσης κολλαγόνου στο νεφρό. Μπάρα ζυγαριάς, 50mm. (Β) Ποσοτική ανάλυση της εναπόθεσης διάμεσου κολλαγόνου στο νεφρό. ***Π<0.001 vs="" vehicle-con.="" ##p="" <="" 0.01="" vs="" vehicle-uuo,="" ++p="" <="" 0.01="" vs="" as-uuo.="" n="6" per="" group.="" (c)="" representative="" photomicrographs="" of="" the="" kidney="" sections="" stained="" for="" fibronectin="" (green)="" and="" counterstained="" with="" dapi="" (blue).="" scale="" bar,="" 50mm.="" (d)="" quantitative="" analysis="" of="" the="" fibronectin-positive="" area="" in="" the="" kidney.="" ***p="" <="" 0.001="" vs="" vehicle-con.="" ##p="" <="" 0.01="" vs="" vehicle-uuo,="" +="" p="" <="" 0.05="" vs="" as-uuo.="" n="6" per="" group.="" (e)="" representative="" photomicrographs="" of="" the="" kidney="" sections="" stained="" for="" collagen="" i="" (green)="" and="" counterstained="" with="" dapi="" (blue).="" scale="" bar,="" 50mm.="" (f)="" quantitative="" analysis="" of="" collagen="" i="" positive="" area="" in="" the="" kidney.="" ***p="" <="" 0.001="" vs="" vehicle-con.="" #="" p="" <="" 0.05="" vs="" vehicle-uuo,="" ++p="" <="" 0.01="" vs="" as-uuo.="" n="6" per="" group.="" (g)="" representative="" western="" blots="" show="" protein="" expression="" of="" fibronectin="" and="" collagen="" i="" in="" the="" kidney.="" (h)="" quantitative="" analysis="" of="" protein="" levels="" of="" fibronectin="" and="" collagen="" i="" in="" the="" kidney.="" ***p="" <="" 0.001="" vs="" veh-con;="" ##p="" <="" 0.01,="" #="" p="" <="" 0.05="" vs="" veh-uuo;="" ++p="" <="" 0.01="" vs="" as-uuo.="" n="6" per="">
AS1517499 ΑναστέλλειSTAT6Ενεργοποίηση στη νεφροπάθεια με φολικό οξύ
Η νεφροπάθεια με φολικό οξύ είναι ένα άλλο ευρέως χρησιμοποιούμενο μοντέλο ποντικούνεφρώνίνωση. Επομένως, εξετάσαμε ανAS1517499μπορεί να αναστέλλειSTAT6ενεργοποίηση και παθογένεια τωννεφρώνίνωσησε νεφροπάθεια με φολικό οξύ. Οι τομές νεφρών χρωματίστηκαν για φωσφο-STAT6.STAT6Η φωσφορυλίωση προκλήθηκε σημαντικά σε διάμεση κύτταρα του νεφρού με FA νεφροπάθεια, ενώAS1517499Η θεραπεία ανέστειλε σημαντικά την έκφραση της φωσφο-STAT6 (Εικόνες 5Α, Β). Αυτά τα ευρήματα επιβεβαιώθηκαν περαιτέρω με ανάλυση στυπώματος Western (Εικόνες 5C, D). Αυτά τα στοιχεία δείχνουν ότιSTAT6ενεργοποιείται στα διάμεση κύτταρα του κατεστραμμένου νεφρού με νεφροπάθεια με φολικό οξύ, η οποία αναστέλλεται σημαντικά μετάAS1517499θεραπευτική αγωγή.
ΕΙΚΟΝΑ 5|Το AS1517499 αναστέλλει την ενεργοποίηση STAT6 στη νεφροπάθεια με φολικό οξύ.(Α) Αντιπροσωπευτικές εικόνες ανοσοϊστοχημικής χρώσης φωσφορυλιωμένωνSTAT6στο νεφρό 2 εβδομάδες μετά το όχημα ήAS1517499θεραπευτική αγωγή. Μπάρα ζυγαριάς, 50mm. (Β) Ποσοτική ανάλυση φωσφορυλιωμένωνSTAT6-θετικά κύτταρα στο νεφρό 2 εβδομάδες μετά το όχημα ήAS1517499θεραπευτική αγωγή. ***P < {{0}}.001="" έναντι="" con;="" ##p="">< 0,01="" vs="" fa="" συν="" veh.="" n="6" ανά="" ομάδα.="" (c)="" αντιπροσωπευτικό="" western="" blot="" του="">STAT6καιSTAT6στο νεφρό. (Δ) Ποσοτική ανάλυση p-STAT6επίπεδα πρωτεΐνης στα νεφρά. ***P < {{0}}.001="" έναντι="" con;="" ##p="">< 0,01="" vs="" fa="" συν="" veh.="" n="6" ανά="">
AS1517499Καταστέλλει τη συσσώρευση μυελοειδών ινοβλαστών στη νεφροπάθεια με φολικό οξύ Για να εξεταστεί ο ρόλος τουAS1517499στη συσσώρευση μυελοειδών ινοβλαστών στο νεφρό με νεφροπάθεια με φολικό οξύ, πραγματοποιήσαμε χρώση διπλού ανοσοφθορισμού για CD45 και PDGFR-. Ο αριθμός των CD45 και PDGFR- διπλά θετικών κυττάρων αυξήθηκε στο νεφρό με νεφροπάθεια με φολικό οξύ.AS1517499κατέστειλε σημαντικά τον αριθμό των CD45 και PDGFR- διπλά θετικών κυττάρων στον νεφρό με νεφροπάθεια με φολικό οξύ (Εικόνες 6Α, Β).
AS1517499Μειώνει την πόλωση Μ2 Μακροφάγων στη Νεφροπάθεια με Φολικό Οξύ Στη συνέχεια εξετάσαμε εάν η φαρμακολογική αναστολήSTAT6μεAS1517499ρυθμίζει την πόλωση των μακροφάγων Μ2 σε νεφροπάθεια FA. Όπως επιβεβαιώθηκε από την ανάλυση χρώσης ανοσοφθορισμού, η θεραπεία τουAS1517499ανέστειλε σημαντικά τον αριθμό των CD206 και PDGFR- διπλά θετικών κυττάρων σε σύγκριση με ποντίκια που υποβλήθηκαν σε αγωγή με φορέα με χορήγηση FA (Εικόνες 6C, D). Επιπλέον, δείκτες μακροφάγων M2, Argl, MRC1, Fizzl και CCL17 προκλήθηκαν σε νεφροπάθεια με φολικό οξύ. Αυτοί οι δείκτες μακροφάγων Μ2 μειώθηκαν μετάAS1517499θεραπεία (Εικόνα 6Ε). Αυτά τα δεδομένα υποδεικνύουν ότι η φαρμακολογική αναστολή τουSTAT6μεAS1517499εξασθενεί την πόλωση των μακροφάγων Μ2 στον νεφρό με FA νεφροπάθεια.
ΕΙΚΟΝΑ 6|Το AS1517499 εξασθενεί τη συσσώρευση των μυελοειδών ινοβλαστών και την πόλωση των μακροφάγων στη νεφροπάθεια με φολικό οξύ.(Α) Αντιπροσωπευτικές μικροφωτογραφίες τμημάτων νεφρού 2 εβδομάδες μετά το όχημα ήAS1517499θεραπεία χρωματίστηκε για CD45 (κόκκινο), PDGFR-b (πράσινο) και DAPI (μπλε). Γραμμή κλίμακας, 50mm. (Β) Ποσοτική ανάλυση των ινοβλαστών CD45 plus και PDGFR-b συν στο νεφρό. **P < 0.01="" vs="" con.="" #="" p="">< 0,05="" έναντι="" fa="" συν="" veh.="" n="6" ανά="" ομάδα.="" (γ)="" αντιπροσωπευτικές="" μικροφωτογραφίες="" τμημάτων="" νεφρού="" 2="" εβδομάδες="" μετά="" το="" όχημα="">AS1517499θεραπεία χρωματίστηκε για CD206 (κόκκινο), PDGFR-b (πράσινο) και DAPI (μπλε). Γραμμή κλίμακας, 50mm. (Δ) Ποσοτική ανάλυση των ινοβλαστών CD206 plus και PDGFR-b συν στο νεφρό. ***P < 0,001="" vs="" con.="" ##p="">< 0,01="" vs="" fa="" συν="" veh.="" n="6" ανά="" ομάδα.="" (ε)="" ποσοτική="" ανάλυση="" της="" έκφρασης="" mrna="" των="" δημιουργών="" μακροφάγων="" μ2="" (mrc,="" fizz1,="" arg1,="" ccl17)="" στο="" νεφρό="" 2="" εβδομάδες="" μετά="" το="" όχημα="">AS1517499θεραπευτική αγωγή. ***P < {{0}}.001="" vs="" con;="" ###p="">< 0,001="" vs="" fa="" συν="" veh;="" ##p="">< 0,01="" vs="" fa="" συν="" veh.="" n="6" ανά="">
AS1517499Μειώνει το σχηματισμό μυοϊνοβλαστών στη νεφροπάθεια με φολικό οξύ Για να προσδιοριστεί εάνAS1517499επηρεάζει τον μετασχηματισμό των μυοϊνοβλαστών, η έκφραση -SMA εξετάστηκε σε τομές νεφρού και με ανάλυση western blot. Σε συμφωνία με τα ευρήματά μας στο μοντέλο UUO, οι -SMA θετικοί μυοϊνοβλάστες και η έκφραση της πρωτεΐνης -SMA ενισχύθηκαν στους νεφρούς μετά από θεραπεία με FA σε σύγκριση με ποντίκια που έλαβαν θεραπεία με όχημα. Επιπλέον, συγχορήγηση ΦΑ μεAS1517499σημαντικά μειωμένα επίπεδα -SMA θετικών κυττάρων και -SMA πρωτεϊνών στο νεφρό σε σύγκριση με την ομάδα φορέα που συγχορηγήθηκε με FA (Εικόνες 7A-D). Αυτά τα αποτελέσματα δείχνουν ότιAS1517499αναστέλλει το σχηματισμό μυοϊνοβλαστών στο νεφρό με νεφροπάθεια με φολικό οξύ.
ΕΙΚΟΝΑ 7|Το AS1517499 μειώνει τον σχηματισμό μυοϊνοβλαστών στη νεφροπάθεια με φολικό οξύ.(Α) Αντιπροσωπευτικές μικροφωτογραφίες τμημάτων νεφρού 2 εβδομάδες μετά το όχημα ήAS1517499θεραπεία βάφτηκε για a-SMA (πράσινο) και αντιχρωματίστηκε με DAPI (μπλε). Γραμμή κλίμακας, 50mm. (Β) Ποσοτική ανάλυση θετικής α-SMA περιοχής στο νεφρό. ***P < 0.001="" vs="" con;="" ###p="">< 0,001="" vs="" fa="" συν="" veh.="" n="6" ανά="" ομάδα.="" (γ)="" αντιπροσωπευτικά="" στυπώματα="" western="" που="" δείχνουν="" επίπεδα="" πρωτεΐνης="" a-sma="" στο="" νεφρό="" 2="" εβδομάδες="" μετά="" το="" όχημα="">AS1517499θεραπευτική αγωγή. (Δ) Ποσοτική ανάλυση της έκφρασης πρωτεΐνης a-SMA στο νεφρό. ***P < 0.001="" vs="" con,="" ##p="">< 0,01="" vs="" fa="" συν="" veh.="" n="6" ανά="">
maca ginseng cistanche
AS1517499 ΒελτιώνειΝεφρώνΊνωσηκαι διατηρεί τη νεφρική λειτουργία στη νεφροπάθεια με φολικό οξύ
Για την αξιολόγηση της επίδρασης τουAS1517499onνεφρώνίνωσηΣε τομές νεφρών πραγματοποιήθηκε χρώση με κόκκινη κόκκινη ακτινοβολία. Τα ποντίκια που υποβλήθηκαν σε αγωγή με FA είχαν σημαντικά αυξημένα επίπεδα εναπόθεσης κολλαγόνου, ενώAS1517499η θεραπεία μείωσε σημαντικά τις ποσότητες εναπόθεσης κολλαγόνου στους νεφρούς (Εικόνες 8Α, Β). Επιπροσθέτως, η χρώση με ανοσοφθορισμό και η ανάλυση στυπώματος Western το απέδειξαν περαιτέρωAS1517499αναστέλλει σημαντικά την έκφραση των πρωτεϊνών ECM (ινωδονεκτίνη και κολλαγόνο Ι) στον νεφρό με νεφροπάθεια με φολικό οξύ (Εικόνες 8C-H). Αυτά τα στοιχεία υποδηλώνουν ότιAS1517499αναστέλλει την παραγωγή ECM στους νεφρούς και την ανάπτυξη τουνεφρώνίνωσησε νεφροπάθεια με φολικό οξύ.
Για την αξιολόγηση της επίδρασης τουSTAT6ανεπάρκεια στη νεφρική λειτουργία σε νεφροπάθεια με φολικό οξύ, μετρήθηκε η κρεατινίνη ορού. Τα ποντίκια που υποβλήθηκαν σε θεραπεία με φολικό οξύ εμφάνισαν σημαντική αύξηση της κρεατινίνης ορού (Εικόνα 8I). Αντίθετα, τα ποντίκια που έλαβαν θεραπεία μεAS1517499παρουσίασε πολύ χαμηλότερη κρεατινίνη ορού σε νεφροπάθεια με φολικό οξύ. Αυτά τα αποτελέσματα υποδεικνύουν ότι η αναστολή τουSTAT6μεAS1517499προστατεύει το νεφρό από νεφροπάθεια με φολικό οξύ.
ΕΙΚΟΝΑ 8|Το AS1517499 μειώνει την ίνωση των νεφρών και διατηρεί τη λειτουργία των νεφρών σε νεφροπάθεια με φολικό οξύ. (Α) Αντιπροσωπευτικές μικροφωτογραφίες τμημάτων νεφρού 2 εβδομάδες μετά το όχημα ήAS1517499θεραπεία χρωματισμένη με κόκκινο Sirius για αξιολόγηση της ολικής εναπόθεσης κολλαγόνου στους νεφρούς. Γραμμή κλίμακας, 50mm. (Β) Ποσοτική ανάλυση της εναπόθεσης διάμεσου κολλαγόνου στο νεφρό. ***P < 0.0{{1{0}}1="" εναντίον="" con,="" ##p="">< 0.01="" εναντίον="" fa="" συν="" veh.="" .="" n="6" ανά="" ομάδα.="" (γ)="" αντιπροσωπευτικές="" μικροφωτογραφίες="" τμημάτων="" νεφρού="" που="" χρωματίστηκαν="" για="" φιμπρονεκτίνη="" (πράσινο)="" και="" αντιχρωματίστηκαν="" με="" dapi="" (μπλε).="" γραμμή="" κλίμακας,="" 50mm.="" (δ)="" ποσοτική="" ανάλυση="" της="" θετικής="" ινονηκτίνης="" περιοχής="" σε="" νεφρούς="" που="" έχουν="" υποστεί="" αγωγή="" με="" fa.="" ***p="">< 0,001="" vs="" con,="" ##p="">< 0,01="" vs="" fa="" συν="" veh.="" n="6" ανά="" ομάδα.="" (ε)="" αντιπροσωπευτικές="" μικροφωτογραφίες="" τμημάτων="" νεφρού="" που="" χρωματίστηκαν="" για="" κολλαγόνο="" ι="" (πράσινο)="" και="" αντιχρωματίστηκαν="" με="" dapi="" (μπλε).="" μπάρα="" ζυγαριάς,="" 50mm.="" (στ)="" ποσοτική="" ανάλυση="" θετικής="" περιοχής="" κολλαγόνου="" ι="" στο="" νεφρό.="" ***p="">< 0,001="" vs="" con,="" #="" p="">< 0,05="" vs="" fa="" συν="" veh.="" n="6" ανά="" ομάδα.="" (ζ)="" αντιπροσωπευτικά="" στυπώματα="" western="" που="" δείχνουν="" έκφραση="" πρωτεΐνης="" φιμπρονεκτίνης="" και="" κολλαγόνου="" ι="" στο="" νεφρό.="" (η)="" ποσοτική="" ανάλυση="" των="" επιπέδων="" πρωτεΐνης="" ινονεκτίνης="" και="" κολλαγόνου="" ι="" στο="" νεφρό.="" ***p="">< 0,001="" vs="" con;="" ##p="">< 0,01="" vs="" fa="" συν="" veh.="" n="6" ανά="" ομάδα.="" (i)="" επίδραση="">AS1517499στην κρεατινίνη ορού. **P < {{0}}.001="" vs="" con;="" #="" p="">< 0,05="" έναντι="" fa="" συν="" veh.="" n="6" ανά="">
Το παραδοσιακό κινέζικο φαρμακευτικό βότανο:κιστανάκι
Σημείωση: Το παραδοσιακό κινέζικο φάρμακοβότανο κιστανάκι(γνωστό και ως «βότανο δράκου» και «τζίνσενγκ της ερήμου»), φύεται μόνο στις άνυδρες και ζεστές ερήμους. Ως ένα από τα εννέα αθάνατα βότανα,Cistanche(cistanche tubulosa/cistanche deserticola/έρημο ζώο κιστανάκι/cistanche salsa)περιέχει πλούσια αποτελεσματικά συστατικά όπως εχινακοσίδη, ακτεοσίδη, ολικές φαινυλαιθανοειδείς γλυκοσίδες, φλαβονοειδή, πολυσακχαρίτες κ.λπ. σύγχρονες φαρμακολογικές μελέτες έχουν επιβεβαιώσει τα ακόλουθαεπιδράσεις του cistanche(τα οφέλη του cistanche): βελτίωση της ανοσίας. βελτίωση της σεξουαλικής λειτουργίας και της νεφρικής λειτουργίας. κατά της κούρασης? αντι γήρανση; βελτίωση της μνήμης? κατά της νόσου του Πάρκινσον? κατά της νόσου του Alzheimer? αντιοξείδωση? ευκολία-δυσκοιλιότητα? αντιφλεγμονώδη? προώθηση της ανάπτυξης των οστών, λεύκανση του δέρματος. προστατεύει το συκώτι? και τα λοιπά.
cistanche wirkung
