Επιδράσεις του Cistanche Deserticola σε οξεία πνευμονική βλάβη σε αρουραίους με σήψη

Επικοινωνία: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com

[Αφηρημένη]Στόχος: Να μελετηθεί η επίδραση τουCistanche deserticolaσε οξείατραυματισμός του πνεύμονα(ALI) σε αρουραίους με σήψη. Μέθοδοι: Το μοντέλο της σήψης έγινε με απολίνωση και παρακέντηση του τυφλού. Πραγματοποιήθηκαν οι ιστοπαθολογικές εξετάσεις και μετρήθηκαν οι βιολογικοί δείκτες της ALI. Αποτελέσματα: Κάτω από μικροσκόπιο φωτός στην ομάδα φυσιολογικού ορού, υπήρχε οίδημα τουπνευμονικό μεσοδιάστημα, μεγάλος αριθμός ερυθροκυττάρων και ουδετερόφιλων και πρωτεΐνη πλάσματος στις κυψελιδικές κοιλότητες. οπνεύμοναςυγρό/ξηρό βάρος, ο ρυθμός των ουδετερόφιλων και η περιεκτικότητα σε πρωτεΐνη στο υγρό πνευμονικής κυψελιδικής έκπλυσης, η πνευμονική αγγειακή διαπερατότητα και η πνευμονική κυψελιδική διαπερατότητα και τα MDA, SOD, καθώς και MPO, ήταν αντίστοιχα σημαντικά αυξημένα. Στην ομάδα μεCistanche deserticolaθεραπεία, αυτοί οι δείκτες ALI ήταν σημαντικά χαμηλότεροι από εκείνους στην ομάδα με φυσιολογικό ορό.

συμπέρασμα: Cistanche deserticolaέχει μεγάλες επιδράσεις στο ALI σε αρουραίους με σήψη. Ο θεραπευτικός μηχανισμός είναι πιθανώς μέσω της αναστολής των ουδετερόφιλων και των οξειδωτικών ελεύθερων ριζών.

【Λέξεις κλειδιά】Σήψη; Οξεία πνευμονική βλάβη; Cistanche deserticola

Η σήψη είναι μια κλινική επείγουσα και κρίσιμη ασθένεια και η αναζήτηση αποτελεσματικών θεραπευτικών φαρμάκων ήταν πάντα ένα σημαντικό πρόβλημα στην κλινική και βασική έρευνα. Η παραδοσιακή κινεζική ιατρική παθογένεια της σήψης είναι η έλλειψη δικαιοσύνης και η πληθωρικότητα του κακού. Η επιθετική θεραπεία για την κακή ευημερία του σώματος είναι ένα από τα αποτελεσματικά θεραπευτικά μέτρα.Cistancheείναι ένα παραδοσιακό τονωτικό κινέζικο φάρμακο. Φαρμακολογικές μελέτες έχουν επιβεβαιώσει ότι έχει προστατευτικές λειτουργίες όπως η ενίσχυση του ρυθμού σύνθεσης του κυτταρικού DNA και η αντίσταση στις ρίζες ελεύθερες από οξυγόνο. Ο συγγραφέας παρατηρεί πειραματικά την επίδραση τουCistanche για βλάβη στους πνεύμονεςστη σήψη, προκειμένου να παρέχεται αποτελεσματική διερεύνηση για τη θεραπεία της σήψης.

Το Cistanche Echinacoside θεραπεύει την πνευμονική νόσο

1 Υλικό και μέθοδοι

1. 1 ΖώοΥγεία 40 αρσενικοί 5D αρουραίοι, βάρους 200~250 g, που παρέχονται από το Κέντρο Πειραματικών Ζώων του Πανεπιστημίου Επιστήμης και Τεχνολογίας Huazhong, αριθμός ποιοτικού ελέγχου: TJLA—2008—1670 χωρίστηκαν τυχαία σε 3 ομάδες: 8 ομάδες φυσιολογικού ορού, Ig/Υπήρχαν 12 αρουραίοι στην ομάδα μελιτζάνας σε mL και 12 στην ομάδα 5 g/mLCistancheομάδα. Στα πειραματόζωα χορηγήθηκαν τα αντίστοιχα φάρμακα με καθετήρα ρουτίνας για 15 ημέρες, δύο φορές την ημέρα (τοCistancheΤο εκχύλισμα deserticola παρασχέθηκε από την αίθουσα προετοιμασίας της παραδοσιακής κινεζικής ιατρικής αυτού του νοσοκομείου) και η δόση των 200 mg/kg χρησιμοποιήθηκε στα πειραματόζωα σύμφωνα με τη μέθοδο της βιβλιογραφίας U] 12 λεπτά μετά την απολίνωση του τυφλού και τη διάτρηση. Συλλογή δειγμάτων.

1.2 Ιστολογική εξέταση πνευμόνων αρουραίου.Πάρτε μια μικρή ποσότητα από τον αριστερό λοβό του ζώουπνεύμοναςαπό κάθε ομάδα, στερεώστε το με 10 τοις εκατό φορμαλδεΰδη, ενσωματώστε το τμήμα με παραφίνη και λεκέδες HE, παρατηρήστε με ένα συνηθισμένο οπτικό μικροσκόπιο και σε αυτή τη βάση, πάρτε τοπνεύμοναςπρόβλημα να γίνει 1mm3 για 25 Καθορίστηκε σε επί τοις εκατό διάλυμα γλουταραλδεΰδης, στη συνέχεια στερεώθηκε σε διάλυμα τετροξειδίου 1 τοις εκατό, αφυδατώθηκε με αιθανόλη και ακετόνη, ενσωματώθηκε στο Epon 81, παρασκευάστηκαν εξαιρετικά λεπτές τομές, χρωματίστηκαν με μόλυβδο ουρανίου και παρατηρήθηκαν με ηλεκτρόνιο μετάδοσης μικροσκόπιο.

1.3 Προσδιορισμός της αναλογίας υγρού/ξηρού βάρους του προβλήματος του πνεύμονα αρουραίου, αναλογία αριθμού κυττάρων σε υγρό κυψελιδικής πλύσης και αναλογία βάρους σε περιεκτικότητα σε πρωτεΐνη.Μια άλλη ομάδα αρουραίων υποβλήθηκε σε κυψελιδική πλύση μετά από θωρακοτομή και το υγρό έκπλυσης υποβλήθηκε σε μέτρηση κυττάρων και ταξινόμηση κυττάρων κάτω από μικροσκόπιο. Η μέθοδος Coomassie brilliant blue χρησιμοποιείται για τον προσδιορισμό της περιεκτικότητας σε πρωτεΐνη και τον υπολογισμόπνεύμοναςδείκτης διαπερατότητας (πρωτεΐνη υγρού κυψελιδικής πλύσης/πρωτεΐνη πλάσματος, LPI).

1.4 Αλλαγές στην πνευμονική αγγειακή διαπερατότητα (PVP) σε αρουραίουςΣύμφωνα με τη μέθοδο που εισήγαγαν οι Zhou et al. (2), μετά τη χορήγηση, τα ζώα σε κάθε ομάδα υποβλήθηκαν σε απολίνωση και διάτρηση του τυφλού και ένεση στη μηριαία φλέβα 50 mg/kg λανθανίου χρησιμοποιήθηκε για να ανοίξει το στήθος και να αφαιρεθούν οι πνεύμονες. Αφαιρέστε τα γύρω προβλήματα, μουλιάστε τοπνεύμονεςστο διάλυμα φορμαμίδης (η ποσότητα φορμαμίδης είναι 20 mg/100 g σωματικού βάρους), επωάζεται σε επωαστήρα 45-50T για 72 ώρες, περιμένετε μέχρι να εκπλυθούν όλες οι χρωστικές στα προβλήματα, αφαιρέστε τα προβλήματα, φυγοκεντρήστε και λάβετε το υπερκείμενο, Χρησιμοποιήστε ένα υπεριώδες φασματοφωτόμετρο για να εκτελέσετε χρωματομέτρηση στα 620 nm και υπολογίστε την περιεκτικότητα σε αιθανόλη σύμφωνα με την τυπική καμπύλη για να προσδιορίσετε τη μεταβολή της PVP.

1.5 Προσδιορισμός μηλονοδιαλδεΰδης (MDA) σε πρόβλημα πνεύμονα αρουραίουΗ μέθοδος θειοβαρβιτουρικού οξέος (TBA) χρησιμοποιήθηκε για τον προσδιορισμό της δραστηριότητας MDA. Προσθέστε 4 mL 1,67 mol/L θειικού οξέος. 0.541 τοις εκατό φωσφονικό οξύ σε 50 ml δείγματος δοκιμής, ανακατέψτε καλά, φυγοκεντρήστε στα 3000 r/min για 10 λεπτά και επεξεργαστείτε την κατακρήμνιση για άλλη μια φορά όπως παραπάνω, στη συνέχεια προσθέστε 1 ml διπλής απεσταγμένου νερού, 1 ml διαλύματος TBA, 95 τοις εκατό άνυδρο λουτρό για 60 λεπτά, εκχύλιση με 5 mL n-βουτανόλης, τετρααιθοξυπροπάνιο ως πρότυπο, τελική συγκέντρωση lnmol/L, φασματοφωτόμετρο φθορισμού στα 532 nm για μέτρηση της απορρόφησης.

1.6 Προσδιορισμός της δισμουτάσης υπεροξειδίου (SOD) σε προβλήματα πνεύμονα αρουραίουΣύμφωνα με τη μέθοδο στη βιβλιογραφία [4], η δραστηριότητα SOD προσδιορίστηκε με τη μέθοδο της οξειδάσης Huangpuyin (το κιτ αγοράστηκε από το Ινστιτούτο Βιολογικής Μηχανικής Nanjing Jiancheng).

1.7 Προσδιορισμός της μυελοϋπεροξειδάσης (MPO) σε αρουραίοπνεύμοναςπρόβλημα.Πάρτε το πρόβλημα των πνευμόνων για να πλύνετε το υπόλοιπο αίμα όσο το δυνατόν περισσότερο σε ισοτονικό αλατούχο ορό και τοποθετήστε το σε ρυθμιστικό διάλυμα φωσφορικών που περιέχει {{0}}.5 τοις εκατό κετυλοτριμεθυλοβρωμίδιο (PH6. 0) Κάντε 5 τοις εκατό του ομογενοποιήματος, και λειτουργεί σύμφωνα με τις οδηγίες του κιτ.

1.8 Στατιστικές μέθοδοιΧρησιμοποιήστε στατιστικό λογισμικό SPSS και μετρήστε τα δεδομένα σε μορφή (x±s), χρησιμοποιώντας t-test και X2 test.

Cistanche

2 αποτελέσματα

2.1 Σύγκριση αναλογίας υγρού/ξηρού βάρους τουπνεύμοναςπροβλήματα, η αναλογία αριθμού κυττάρων και η περιεκτικότητα σε πρωτεΐνη σε υγρό κυψελιδικού πλύσης σε κάθε ομάδα φαίνονται στον Πίνακα 1.πνεύμοναςΗ αναλογία υγρού/ξηρού βάρους στην ομάδα φυσιολογικού ορού ήταν σημαντικά υψηλότερη από αυτή στην ομάδαCistancheομάδα (Π<0.05 or="" 0.01).="" the="" cell="" count="" ratio="" and="" protein="" content="" in="" the="" alveolar="" lavage="" fluid="" of="" the="">Cistancheη ομάδα ήταν σημαντικά χαμηλότερη από εκείνες της ομάδας με φυσιολογικό ορό (P<0.05 or="" 0.01).="" 0.="" 01),="" and="" with="" the="" increase="" of="" the="" dose="" concentration,="" it="" shows="" a="" significant="">

Πίνακας 1 Σύγκριση της αναλογίας υγρού/ξηρού βάρους του προβλήματος των πνευμόνων και της αναλογίας κυτταρικού αριθμού και της περιεκτικότητας σε πρωτεΐνη στο υγρό κυψελιδικής πλύσης των αρουραίων σε κάθε ομάδα (X ± S)

Σε σύγκριση με την ομάδα φυσιολογικού ορού, το P<0.><001. below="" is="" the="">

2.2 Σύγκριση των μορφολογικών αλλαγών των πνευμονικών προβλημάτων των αρουραίων σε κάθε ομάδα. Γενική παρατήρηση: ΗπνεύμονεςΣτην ομάδα του αλατούχου διαλύματος ήταν σημαντικά διευρυμένα και σκούρα κόκκινα, με ποικίλους βαθμούς συμφόρησης και οιδήματος στην επιφάνεια και μεγάλο αριθμό πνευμονικών εμφραγμάτων στην άκρη. οι πνεύμονες στοCistancheΗ ομάδα ήταν ανοιχτό κόκκινο με επιφάνεια Ήπια συμφόρηση και οίδημα, χωρίς εμφανές πνευμονικό έμφραγμα. Παρατήρηση με ελαφρύ μικροσκόπιο έδειξε ότι στην ομάδα φυσιολογικού ορού, υπήρχε κυψελιδική και πνευμονική διάμεση συμφόρηση και οίδημα, μεγάλος αριθμός διάχυτης διήθησης ουδετερόφιλων στην κυψελιδική κοιλότητα, σχηματισμός αποστήματος και ποικίλοι βαθμοί ατελεκτασίας, νέκρωσης και αντισταθμιστικού εμφυσήματος. , Θρόμβος και παρόμοιος σχηματισμός διαφανούς μεμβράνης. Οι προαναφερθείσες βλάβες στην ομάδα Cistanche μειώθηκαν σημαντικά. Στην ομάδα φυσιολογικού ορού, τα κυψελιδικά επιθηλιακά κύτταρα διογκώθηκαν, τα φυλλώδη σωμάτια εκκενώθηκαν προφανώς, σχηματίστηκαν μεγάλα κενοτόπια, τα τριχοειδή ενδοθηλιακά κύτταρα διογκώθηκαν, τα ενδοθηλιακά κύτταρα τραυματίστηκαν συνεχώς, ο μεσοκυττάριος χώρος διευρύνθηκε, τα τριχοειδή αγγεία και οι κυψελιδικές βασικές μεμβράνες ήταν χαλαρά και διευρύνθηκαν. Ακανόνιστη πάχυνση, ανομοιόμορφο πάχος. Στην ομάδα Cistanche, τα κυψελιδικά επιθηλιακά κύτταρα δεν ήταν διογκωμένα, η κένωση του φυλλώματος μειώθηκε, ο αριθμός των κενοτοπίων που σχηματίστηκαν ήταν μικρός, η σύνδεση μεταξύ των τριχοειδών ενδοθηλιακών κυττάρων ήταν κοντά στο φυσιολογικό και η βασική μεμβράνη ήταν ελαφρώς χαλαρή και ακανόνιστα παχύρρευστη. Σε σύγκριση με την ομάδα κίστανχου Ig/niL, η ομάδα κίστανχου των 5 g/mL είχε μικρότερο εύρος μορφολογικών αλλαγών με προβλήματα στους πνεύμονες και ο βαθμός τραυματισμού του πνεύμονα ήταν μικρότερος.

2.3 Η σύγκριση του LPI και του PVP των αρουραίων σε κάθε ομάδα φαίνεται στον Πίνακα 2. Το LPI και το PVP της ομάδας αλατούχου διαλύματος ήταν σημαντικά υψηλότερα από εκείνα της ομάδας Cistanche (PV0).05 ή 0,01. ). Το LPI και το PVP της ομάδας Cistanche ήταν χαμηλότερα, γεγονός που είχε σημαντική σχέση δόσης-αποτελέσματος.

2.4 Η σύγκριση της δραστηριότητας του MDA.SOD.MPO στοπνεύμοναςπροβλήματα των αρουραίων σε κάθε ομάδα φαίνονται στον Πίνακα 3. Η περιεκτικότητα MDA στοπνεύμοναςΤο πρόβλημα της ομάδας φυσιολογικού ορού ήταν σημαντικά υψηλότερο από αυτό της ομάδαςCistancheομάδα, ενώ η δραστηριότητα SOD και η δραστηριότητα MPO στο πρόβλημα των πνευμόνων της ομάδας Cistanche ήταν σημαντικά αυξημένες (F<0.05 or="">

3 Συζήτηση

Η ανεπάρκεια πολλαπλών οργάνων είναι η βασική αιτία της μη αναστρέψιμης κατάστασης και του υψηλού ποσοστού θνησιμότητας στο τελευταίο στάδιο της σήψης (5). Η προστασία της λειτουργίας των οργάνων είναι μεγάλης σημασίας για τη μείωση του υψηλού κλινικού ποσοστού θνησιμότητας από σήψη. Ο πνεύμονας είναι το πρώτο όργανο της πολλαπλής ανεπάρκειας οργάνων. Το 1/3 των ασθενών με σήψη πεθαίνει από οξεία πνευμονική βλάβη (ALI) και σύνδρομο οξείας αναπνευστικής δυσχέρειας (ARDS). Ο κύριος παθοφυσιολογικός μηχανισμός της ALI είναι η συσσώρευση μεγάλου αριθμού ουδετερόφιλων στο πρόβλημα των πνευμόνων και ενεργοποιεί και προσκολλάται στα αγγειακά ενδοθηλιακά κύτταρα. Ταυτόχρονα, η συγκέντρωση της ανηγμένης οξειδάσης του συνενζύμου II που μεταφέρει μεμονωμένα ηλεκτρόνια αυξάνεται, προκαλώντας αναπνευστικές εκρήξεις, δημιουργώντας μεγάλη ποσότητα ελεύθερων ριζών οξυγόνου και προκαλώντας βλάβη και λειτουργία των κυτταρικών μεμβρανών και των δομών της μεμβράνης μέσω ισχυρής οξείδωσης. Εμπόδια⑹. Το υπεροξείδιο των λιπιδίων αντανακλά την αλλαγή των ελεύθερων ριζών οξυγόνου στο πρόβλημα και σχετίζεται άμεσα με τον βαθμό τραυματισμού των πνευμόνων (7). Στο ενζυματικό και μη ενζυματικό σύστημα οξείδωσης κατά των ριζών του σώματος, η δραστηριότητα του SOD διατηρεί μια καλή συσχέτιση με τον βαθμό βλάβης του προβλήματος ⑺. Σε σύγκριση με την ομάδα φυσιολογικού ορού, οι δραστηριότητες MDA και SOD της ομάδας Cistanche έδειξαν στατιστικά σημαντικές διαφορές. Το Cistanche έχει τις λειτουργίες της ενίσχυσης της λειτουργίας του ανοσοποιητικού, της αντιγήρανσης και της ενίσχυσης του ρυθμού σύνθεσης του κυτταρικού DNA. Τα πειραματικά αποτελέσματα έδειξαν ότι ο συντελεστής πνεύμονα, η PLT, η αναλογία ουδετερόφιλων υγρού κυψελιδικής έκπλυσης και η πνευμονική αγγειακή διαπερατότητα της ομάδας Cistanche μειώθηκαν σημαντικά, η δραστηριότητα MDA του πνευμονικού προβλήματος μειώθηκε, η SOD αυξήθηκε σημαντικά και η δραστηριότητα MPO μειώθηκε. Ταυτόχρονα, η μορφολογική παρατήρηση έδειξε ότι ο βαθμός βλάβης του πνευμονικού προβλήματος μειώθηκε σημαντικά, η διήθηση των ουδετερόφιλων μειώθηκε και η ομάδα 5 g/mL Cistanche είχε μικρότερο τραυματισμό στους πνεύμονες από την ομάδα Ig/mL Cistanche και υπήρχε καλή σχέση δόσης-αποτελέσματος. Υποδηλώνει ότι το Cistanche έχει σημαντική προστατευτική επίδραση στο ALI. Ο μηχανισμός μπορεί να είναι: (1) Αναστολή της μετανάστευσης των φλεγμονωδών κυττάρων στοπνεύμονες, μειώνουν τις ελεύθερες ρίζες οξυγόνου που παράγονται από ουδετερόφιλα και άλλα ενεργοποιημένα κύτταρα, έτσι ώστε το βιοφίλμ να προστατεύεται. (2) Προώθηση της σύνθεσης νουκλεϊκού οξέος και πρωτεϊνών και προστασία από τραυματισμό του πνεύμονα. (3) Ενισχύουν την ανοσοποιητική λειτουργία των φαγοκυττάρων και μειώνουνπνεύμοναςπροβληματική βλάβη που προκαλείται από ενδοτοξίνη. Τα πειραματικά αποτελέσματα παρέχουν μια πειραματική βάση για τη θεραπεία της οξείας πνευμονικής βλάβης στην κλινική σήψη ενισχύοντας το σώμα και ενισχύοντας την ανεπάρκεια.

βιβλιογραφικές αναφορές

[1] Jin Huiming. Μοντέλο σήψης μετά από απολίνωση του τυφλού και διάτρηση [J]. Κινεζικό Περιοδικό Παθοφυσιολογίας "990, 6 (2): 126 ~ 127.

[2] Zhou WG, Mc Collum MO, Levine BA, et al. Ο ρόλος του παράγοντα ενεργοποίησης των αιμοπεταλίων στην οξεία πνευμονική βλάβη που σχετίζεται με παγκρεατίτιδα στον αρουραίο [J]. Am J Pathol, 1992, 140: 971 -979.

[3] Wang Qian, Zhu Xiaofeng, Zhao Xilong. Πειραματικές μέθοδοι σύγχρονης ιατρικής [Μ]. Beijing: People's Medical Publishing House, 2007:508.

[4] Zhang Xiuming, Li Jianzhai, Wei Mingjing. Σύγχρονη κλινική βιοχημική εργαστηριακή επιστήμη [M]. Beijing: People's Military Medical Press, 2008: 896.

[5] Λούο Ζενγκγιάο. Σοκ Μελέτες [Μ]. Tianjin: Tianjin Science and Technology Press, 2008:345.

[6]Ξάνθους CA, Hall JB. Samsel RW. Ενδοτοξίνη σε ανθρώπινες ασθένειες, μέρος 2 Βιολογικό αποτέλεσμα και κλινική αξιολόγηση ιών αντι-ενδοτοξινών [J]