Αποτελεσματικότητα της συνδυαστικής θεραπείας των εκχυλισμάτων Laminaria Japonica και Cistanche Tubulosa στην ανάπτυξη των μαλλιών

Κιούνγκα Σιν1#, Τάε-Σου Κιμ2#, Γιάνγκμπεν Κιουνγκ1, Ντατζέονγκ Κιμ1, Ντονγκσούν Παρκ1, Εχν-Κιουνγκ Τσόι1, Σουνγκ-Πιο Λι2, Γουόνγκ-Σουκ Γιανγκ2, Μιουνγκ-Χουά Κανγκ3, Γιουν-Μπέι Κιμ1*

1College της Κτηνιατρικής, Εθνικό Πανεπιστήμιο Chungbuk, Cheongju, Κορέα

2Misuba RTech Co,, Ε.Π.Ε., Asan, Κορέα

3Τμήμα Επιστήμης τροφίμων και διατροφής, Πανεπιστήμιο Hoseo, Asan, Κορέα

Δεδομένου ότι η τριχόπτωση του τριχωτού της κεφαλής έχει αυξηθεί πρόσφατα ακόμη και σε νέους ανθρώπους, επηρεάζοντας σοβαρά την ποιότητα ζωής των ατόμων, οι διεγερτικές για την ανάπτυξη των μαλλιών επιδράσεις του εκχυλίσματος Laminaria japonica (LJE) καιCistanche tubulosaτο εκχύλισμα (CTE) διερευνήθηκε. Μετά την επιβεβαίωση της αναγενούς φάσης των ωοθυλακίων υπό ξύρισμα, αρσενικά ποντίκια C57BL/6 εφαρμόστηκανδερμικά με 3% Minoxidil ή χορηγήθηκαν από το στόμα με τους συνδυασμούς LJE και CTE για 21 ημέρες. Η μινοξιδίλη προώθησε την αναγέννηση των μαλλιών και αύξησε τις δραστηριότητες γ-γλουταμυλο-τρανσπεπτιδάσης (γ-GTP) και αλκαλικής φωσφατάσης (ALP). Επιπλέον, Minoxidil up-ρυθμισμένος επιδερμικός αυξητικός παράγοντας (EGF) και αγγειακός ενδοθηλιακός αυξητικός παράγοντας (VEGF) επίπεδα. Η συγχορήγηση LJE και CTE στα 54 mg/kg LJE συν 162 mg/kg CTE άσκησε συνεργιστικές προωθητικές επιδράσεις στην αναγέννηση της τρίχας, συγκρίσιμες με 3% Μινοξιδίλη. Το LJE ενίσχυσε κατά προτίμηση τη δραστηριότητα ALP, ενώ η CTE αύξησε τόσο τις δραστηριότητες γ-GTP όσο και τις δραστηριότητες ALP, καθώς και τις εκφράσεις EGF και VEGF. Το μοντέλο φλεγμονής της θήκης αέρα in vivo, η αγγειακή εξίδρωση που προκαλείται από καραγενάνη και οι αυξημένες συγκεντρώσεις μονοξειδίου του αζώτου και προσταγλανδίνης Ε2 στα εξιδρώματα κατεστάλησαν συνεργιστικά με τη συγχορήγηση LJE και CTE. Επιπλέον, η διήθηση των φλεγμονωδών κυττάρων ανεστάλη ουσιαστικά από τη συνδυαστική θεραπεία. Τα αποτελέσματα δείχνουν ότι η συνδυαστική από του στόματος θεραπεία με LJE και CTE σε κατάλληλες δόσεις και αναλογίες αποτρέπουν την τριχόπτωση και βελτιώνουν την αλωπεκία, η οποία μπορεί να μεσολαβείται εν μέρει από τις αντιφλεγμονώδεις δράσεις τους.

Λέξεις κλειδιά:Τριχοφυΐα, φλεγμονή, Laminaria japonica,Cistanche tubulosa,συνδυαστική θεραπεία

Για περισσότερες πληροφορίες επικοινωνήστε με:Joanna.jia@wecistanche.com

Σιστάντσεdeserticola έχει πολλές επιπτώσεις, κάντε κλικ εδώ για να μάθετε περισσότερα

Πρόσφατα, η τριχόπτωση του τριχωτού της κεφαλής αυξάνεται ακόμη και στους νέους, επηρεάζοντας σοβαρά την ποιότητα ζωής ενός ατόμου. Αν και φαλάκρα δεν είναι ένα από τα προβλήματα υγείας, μπορεί να προκαλέσει βαθιά ψυχολογικά-άβολα κοινωνικό άγχος. Ως εκ τούτου, έχει μεγάλο ενδιαφέρον να αναπτυχθούν νέα προληπτικά ή/και θεραπευτικά υλικά για την τριχόπτωση και την αναγέννηση. Παρά την αγορά δισεκατομμυρίων δολαρίων, υπάρχουν μερικά επί του παρόντος αποτελεσματικά προϊόντα διαθέσιμα [1]. Οι θύλακες των τριχών αναδιαμορφώνονται κατά τη διάρκεια ποδηλατικών περιόδων ανάπτυξης (αναγενής), παλινδρόμησης (καταγένης), ανάπαυσης (τελογενούς) και αποβολής (εξωγενές) [2]. Κατά τη διάρκεια του καταγένιου,

πολλά από τα θυλακιώδη κύτταρα υποβάλλονται σε προγραμματισμένο κυτταρικό θάνατο (απόπτωση) [3], μειώνοντας το μέγεθος των ωοθυλακίων καθώς τα ωοθυλάκια εισέρχονται τελογενή. Η ενεργοποίηση των επιθηλιακών βλαστικών κυττάρων που βρίσκονται στην περιοχή διόγκωσης των ωοθυλακίων καθιστά την αναγέννηση των ωοθυλακίων κατά την έναρξη της επόμενης αναγενούς φάσης [4]. Οι απόγονοι βλαστικών κυττάρων σχηματίζουν μια νέα θυλακοειδή μήτρα κατά την πρώιμη αναγωγή και ο άξονας της τρίχας και το εσωτερικό περίβλημα της ρίζας προέρχονται από αυτά τα σχετικά αδιαφοροποίητα κύτταρα μήτρας [5]. Είναι γνωστό ότι το μέγεθος του θύλακα της τρίχας και η διάρκεια της αναγενούς φάσης διέπουν το μέγεθος (διάμετρος) και το μήκος του άξονα της τρίχας, αντίστοιχα. Αυτή η κυκλική ανάπτυξη των μαλλιών ρυθμίζεται από διάφορους αυξητικούς παράγοντες.

Μινοξιδίλη, φιναστερίδη, και propecia είναι εμπορικά διαθέσιμα για να επιβραδύνει την τριχόπτωση και να διευκολύνει την αναγέννηση των μαλλιών. Η μινοξιδίλη ως αγγειοδιασταλτικό άσκησε μια παρενέργεια για να διευκολύνει την ανάπτυξη των τριχών [6], η οποία μπορεί να οφείλεται στις δραστηριότητες παροχής θρεπτικών συστατικών και ανοίγματος διαύλων καλίου [7,8]. Η μινοξιδίλη είναι αποτελεσματική για την ανδρογενή αλωπεκία, μεταξύ άλλων θεραπειών φαλάκρας, αν και η αποτελεσματικότητά της εξαφανίζεται μέσα σε λίγους μήνες μετά τη διακοπή της θεραπείας. Συγκριτικά, η φιναστερίδη και η propecia, θεραπευτικές αγωγές της καλοήθους υπερπλασίας του προστάτη και του καρκίνου του προστάτη, έχουν καταχωρηθεί σε πολλές χώρες για την ανδρογενετική αλωπεκία (αρσενική φαλάκρα). Η φιναστερίδη και η προπέκια είναι συνθετικά αντι-ανδρογόνα, αναστέλλοντας τον τύπο ΙΙ 5-α αναγωγάση, ένα ένζυμο που μετατρέπει την τεστοστερόνη σε διυδροτεστοστερόνη (DHT) στα κύτταρα θηλών στο κάτω μέρος των τριχοθυλακίων [9]. Η Laminaria japonica, η Undaria pinnatifida και η Cladosiphon okamuranus, που διανέμονται ευρέως σε πολλές χώρες, έχουν χρησιμοποιηθεί ως θεραπευτικά στην ανατολική ιατρική για μεγάλο χρονικό διάστημα. Σε προηγούμενες μελέτες, η φουκοϊδάνη, ένα θειικό σύμπλεγμα πολυσακχαριτών, είχε εξαχθεί και ταυτοποιηθεί από τα φύκια και είχε επιβεβαιωθεί ότι διαθέτει αντιοξειδωτικές, αντιπηκτικές, αντικαρκινικές και αντιφλεγμονώδεις δράσεις [10,11]. Στη συνέχεια, έχουν αποδειχθεί ευεργετικές επιδράσεις της φουκοϊδάνης σε φλεγμονώδεις ασθένειες, ισχαιμία, ανοσολογική δυσλειτουργία και όγκους [12,13]. Από την άλληΕκχύλισμα cistanche tubulosa(CTE) έχει επίσης χρησιμοποιηθεί ευρέως για παραδοσιακά φάρμακα στην Κίνα. Η CTE βελτιώνει τη ροή του αίματος μειώνοντας τα επίπεδα χοληστερόλης στο αίμα [14]. Πρόσφατα, αναφέρθηκε ότι η CTE μείωσε την παραγωγή του παράγοντα νέκρωσης όγκων-α (TNF-α) και της ιντερλευκίνης-4 (IL-4) που είναι σημαντικοί παράγοντες για την παραγωγή μονοξειδίου του αζώτου (NO) στη φλεγμονώδη οδό [15]. Αποδείξαμε επίσης ότι η φουκοϊδάνη από εκχύλισμα Laminaria japonica (LJE) και CTE εξασθενούσε συνεργιστικά τη φλεγμονή in vitro και in vivo [16]. Συγκεκριμένα, έχει αποδειχθεί ότι υπήρχε στενή συσχέτιση της φλεγμονής του δέρματος (ειδικά του δακρυϊκού αδένα) με την αλωπεκία [17]. Έτσι, αναδύονται αντιφλεγμονώδεις πτυχές της θεραπείας της αλωπεκίας [18]. Με βάση τις δραστηριότητες βελτίωσης της ροής του αίματος και της φλεγμονής, διερευνούμε τη συνδυαστική αποτελεσματικότητα των LJE και CTE στην ανάπτυξη των μαλλιών και στους υποκείμενους μηχανισμούς, σε σύγκριση με το 3% Minoxidil (Hyundai Pharmaceutical, Seoul, Korea), έναν γνωστό ενισχυτή ανάπτυξης μαλλιών.

ΣιστάντσεΕκχύλισμα κατά της τριχόπτωσης

Υλικά και Μεθόδους

Υλικά

Η LJE και η CTE ελήφθησαν από την Misuba RTech Co., Ltd. (Asan, Κορέα). Η αποξηραμένη σκόνη της Laminaria japonica εξήχθη σε καθαρισμένο νερό στους 60oC για 24 ώρες, διηθείται μέσω μεμβράνης 0,45 μm, απολυμαίνεται και ξηραίνεται με ψεκασμό. Το Cistanche tubulosa εξήχθη σε 80% αιθανόλη, απολυμάνθηκε, συμπυκνώθηκε και αποξηράνθηκε. Η LJE και η CTE διατηρήθηκαν στους 4oC, αναμείχθηκαν (1:3) και διαλύθηκαν σε καθαρισμένο νερό πριν από τη χρήση και χορηγήθηκαν από το στόμα σε όγκο 5 ml/kg.

Ζωα

Αρσενικά ποντίκια C57BL/6 για μελέτη ανάπτυξης μαλλιών και αρσενικά ποντίκια ICR για μελέτη φλεγμονής αγοράστηκαν από το Daehan Biolink (Eumseong, Κορέα) και στεγάστηκαν σε ένα δωμάτιο με σταθερές περιβαλλοντικές συνθήκες (23±2ºC, 45-65% σχετική υγρασία, 12ωρος κύκλος φωτός-σκότους, φωτεινότητα 150-300 lux). Η τροφή με σφαιρίδια και το καθαρό νερό ήταν διαθέσιμα ad libitum. Όλα τα πειράματα σε ζώα εγκρίθηκαν από την Επιτροπή Θεσμικής Φροντίδας και Χρήσης Ζώων (IACUC) του Εθνικού Πανεπιστημίου Chungbuk (CBNU) της Κορέας και διεξήχθησαν σύμφωνα με τις Τυποποιημένες Διαδικασίες Λειτουργίας (SOP) του Ερευνητικού Κέντρου Πειραματόζωων, CBNU.

Θεραπεία για την ανάπτυξη των μαλλιών

Μετά την επιβεβαίωση της αναγενούς φάσης παρατηρώντας το ομογονιδιακά ροζ χρώμα του δέρματος στο πίσω δέρμα των ποντικών C57BL/6 (ηλικίας 6 εβδομάδων, n=8/ομάδα) μετά το κούρεμα στην τελογενή φάση, τα μαλλιά ξυρίστηκαν [1,19,20]. Από την επόμενη ημέρα, επιλέχθηκαν ποντίκια χωρίς ορατές γρατζουνιές και υποβλήθηκαν από το στόμα σε θεραπεία με LJE (18 ή 54 mg/kg), CTE (54 ή 162 mg/kg) ή το μείγμα τους (18+54 ή 54+162 mg/kg) μία φορά την ημέρα για 21 ημέρες. Οι χαμηλές δόσεις LJE (18 mg/kg) και CTE (54 mg/kg) προέρχονταν από εκτιμώμενες ανθρώπινες δόσεις 100 mg/σώμα (70 kg) και 300 mg/σώμα μετά από μετάφραση της επιφάνειας του σωματικού βάρους (Km=37 για τον άνθρωπο/Km=3 για τον ποντικό), αντίστοιχα. Υψηλές δόσεις LJE και CTE ορίστηκαν σε 3 φορές, μόνες τους ή σε συνδυασμό, για να αξιολογηθούν οι μέγιστες συνεργιστικές επιδράσεις [16]. Η μινοξιδίλη (3%, 0,2 ml) εφαρμόστηκε τοπικά μία φορά την ημέρα στο ξυρισμένο δέρμα στο ίδιο πρόγραμμα με τη θεραπεία με LJE/CTE.

Ακαθάριστη παρατήρηση της τριχοφυΐας

Τις ημέρες σε διαστήματα 3 ημερών μετά το ξύρισμα και κατά τη διάρκεια της θεραπείας, τα ποντίκια αναισθητοποιήθηκαν ελαφρά με διαιθυλαιθέρα και οι φωτογραφίες τραβήχτηκαν στις πίσω πλευρές τους. Η αναλογία της αναγέννησης των μαλλιών (αναγεννημένη περιοχή / ξυρισμένη περιοχή) στις φωτογραφίες αναλύθηκε χρησιμοποιώντας ένα ηλεκτρονικό σύστημα ανάλυσης εικόνας (Imageinside, Daejeon, Κορέα).

Μικροσκοπική εξέταση τριχοθυλακίων

Τις ημέρες 14 και 21, τα ποντίκια θυσιάστηκαν με βαθιά αναισθησία με διαιθυλαιθέρα και τα ραχιαία δέρματά τους αφαιρέθηκαν [1]. Το ραχιαίο δέρμα κόπηκε σε δύο μέρη. Τα τμήματα ιστού σταθεροποιημένα σε φορμαλίνη, ενσωματωμένα στην παραφίνη (διαμέτρου 5 μm) ενός μέρους χρωματίστηκαν με αιματοξυλίνη-ηωσίνη για να εξετάσουν τον αριθμό των τριχοθυλακίων και τα ιστολογικά ευρήματα. Το άλλο μέρος του ιστού καταψύχθηκε σε υγρό άζωτο για ενζυμική δοκιμασία και ανοσοδοκιμασία.

Δοκιμασία ενζυμικής δραστικότητας

Ο δερματικός ιστός ομογενοποιήθηκε σε 4 όγκους φωσφορικού ρυθμιστικού διαλύματος (pH 7,4). Το ομογενοποιημένο φυγοκεντρήθηκε στις 3.000 σ.α.λ. για 20 λεπτά και το υπερκείμενο υγρό χρησιμοποιήθηκε για τη δοκιμασία δραστηριοτήτων γ-γλουταμυλου-τρανσπεπτιδάσης (γ-GTP) και αλκαλικής φωσφατάσης (ALP) χρησιμοποιώντας ως υπόστρωμα τη φωσφορική p-νιτροφαινόλη (PNPP)-DEAV [1,21].

Ποσοτικός προσδιορισμός των αυξητικών παραγόντων

Ο επιδερμικός αυξητικός παράγοντας (EGF) και ο αγγειακός ενδοθηλιακός αυξητικός παράγοντας (VEGF) ποσοτικοποιήθηκαν χρησιμοποιώντας κιτ ενζυμικής ανοσοπροσροφητικής δοκιμασίας (ELISA) (R&D Systems, Μινεάπολη, ΗΠΑ) σύμφωνα με τις οδηγίες του κατασκευαστή [1,22].

Θεραπεία για φλεγμονή

Τα ποντίκια ICR (ηλικίας 7 εβδομάδων, n=8/ομάδα) έλαβαν από του στόματος θεραπεία με LJE (18 ή 54 mg/kg), CTE (54 ή 162 mg/kg) ή το μείγμα τους (18+54 ή 54+162 mg/kg) μία φορά την ημέρα για 7 ημέρες [16]. Την 1η ημέρα της θεραπείας με LJE και CTE, τα ποντίκια εγχύθηκαν υποδορίως με 10 ml αποστειρωμένου αέρα στην πίσω πλευρά για να σχηματίσουν μια θήκη [16,23,24]. Μετά από 2 και 5 ημέρες, η θήκη επανενέθηκε με 5 mL αέρα. Μία ώρα μετά την τελική θεραπεία με LJE και CTE, 1 ml καραγενάνης (1% σε φυσιολογικό ορό; Sigma-Aldrich, St. Louis, ΗΠΑ) ή το όχημά του (φυσιολογικός ορό) εγχύθηκε στο σακουλάκι.

Ανάλυση των εξιδρωμάτων

Η θήκη αέρα πλύθηκε με 1 mL κρύου φυσιολογικού ορού 6 ώρες μετά την ένεση καραγενάνης και τον καθαρό όγκο

υγρού πλύσης καταγράφηκε [16]. Ο συνολικός αριθμός των φλεγμονωδών κυττάρων, συμπεριλαμβανομένων των ουδετερόφιλων, των μονοκυττάρων και των λεμφοκυττάρων προσδιορίστηκαν χρησιμοποιώντας έναν μετρητή colter. Οι συγκεντρώσεις του ΝΟ και της προσταγλανδίνης Ε2 (PGE2) προσδιορίστηκαν με το αντιδραστήριο Griess (Sigma-Aldrich) και

ανοσοδοκιμασία ενζύμων (EIA) με χρήση κιτ Correlate-EIA (Assay Designs, Ann Arbor, ΗΠΑ), αντίστοιχα [16].

Σιστάντσεεκχύλισμα αντιγήρανσης και κατά της τριχόπτωσης

Στατιστική ανάλυση

Τα δεδομένα παρουσιάζονται ως μέσο± πρότυπο σφάλμα. Η στατιστική σημαντικότητα προσδιορίστηκε με μονόδρομη ανάλυση της διακύμανσης, ακολουθούμενη από τη δοκιμή πολλαπλής σύγκρισης του Posthoc Tukey. P-τιμές<0.05 were="" considered="" to="" be="" statistically="">

Αποτελέσματα

Η εφαρμογή της μινοξιδίλης (3%), ενός υλικού αναφοράς, διευκόλυνε σημαντικά την τριχοφυΐα των C57BL/6 ποντικών, παρουσιάζοντας σχεδόν πλήρη κάλυψη (92,4%) της ξυρισμένης περιοχής (Σχήματα 1, 2Β) σε σύγκριση με το 29,2% στη φυσιολογική ανάπτυξη (Σχήματα 1, 2Α) την ημέρα 21. Αν και λιγότερο αποτελεσματική από την εφαρμογή minoxidil, η από του στόματος θεραπεία της LJE διευκόλυνε επίσης την ανάπτυξη των μαλλιών, οδηγώντας σε κάλυψη 33,5 και 69,1% στα 18 και 54 mg/kg, αντίστοιχα (Σχήματα 1, 2C, 2D). Η CTE ήταν επίσης αποτελεσματική στην ενίσχυση της τριχοφυΐας, φθάνοντας το 73,6 και το 80,4%

κάλυψη στα 54 και 162 mg/kg, αντίστοιχα (σχήματα 1, 2Ε, 2F). Συγκεκριμένα, η συνδυαστική θεραπεία με υψηλές δόσεις LJE (54 mg/kg) και CTE (162 mg/kg) ενίσχυσε αξιοσημείωτα την ανάπτυξη των τριχών από την ημέρα 12, συγκρίσιμη με την επίδραση της μινοξιδίλης (Εικόνες 1, 2H), αν και οι χαμηλές δόσεις LJE (18 mg/kg) και CTE (54 mg/kg) ασκούν συνεργιστική δράση μόνο σε πρώιμο στάδιο (Εικόνες 1, 2Ζ).

Σε σύγκριση με τους φυσιολογικούς θύλακες των τριχών (Εικόνα 3Α), η εφαρμογή της μινοξιδίλης βελτίωσε την ακεραιότητα των τριχοθυλακίων, δείχνοντας μεγαλύτερους θύλακες και παχύτερους άξονες τριχών (Εικόνα 3Β). Τέτοιες επιδράσεις βρέθηκαν επίσης στα δέρματα ποντικών που έλαβαν θεραπεία με LJE και/ή CTE (Εικόνες 3C-3H). Ειδικότερα, η αποτελεσματικότητα της συνδυασμένης θεραπείας της LJE και της CTE για την ενίσχυση των θυλάκων της τρίχας ήταν συγκρίσιμη με εκείνη της Μινοξιδίλης.

Η εφαρμογή μινοξιδίλης αύξησε τη δραστηριότητα της γ-GTP που επάγει τους θύλακες των τριχών σε αναγενή φάση κατά 90-120%

τις ημέρες 14 και 21, σε σύγκριση με το επίπεδο του φυσιολογικού δέρματος (Εικόνα 4). Η LJE (54 mg/kg) ενίσχυσε επίσης την ενζυμική δραστηριότητα, αν και υπήρχαν υψηλές διακυμάνσεις. Η CTE άσκησε παρόμοια αποτελέσματα, ενισχύοντας σημαντικά τη δραστηριότητα γ- GTP την ημέρα 14. Είναι ενδιαφέρον ότι η συνδυαστική θεραπεία της LJE και της CTE αύξησε περαιτέρω την ενζυμική δραστηριότητα υψηλότερα από ό, τι όταν τα εκχυλίσματα χρησιμοποιήθηκαν μόνα τους.

Η δραστηριότητα της ALP, ένας δείκτης της ανάπτυξης των οστών και της αγγειογένεσης, αυξήθηκε σημαντικά στο δέρμα τις ημέρες 14 και 21 μετά από τοπική εφαρμογή της μινοξιδίλης (Εικόνα 5). Η LJE και η CTE αύξησαν επίσης τη δραστηριότητα της ALP μετά την από του στόματος χορήγηση με δοσοεξαρτώμενο τρόπο. Συγκεκριμένα, η ενζυμική δραστηριότητα ενισχύθηκε συνεργιστικά από τη συνδυασμένη εθνική θεραπεία με LJE και CTE.

Στην ανάλυση του EGF, ενός πολύ γνωστού αυξητικού παράγοντα τρίχας, η εφαρμογή minoxidil ενίσχυσε το επίπεδο του EGF

3,5 φορές φυσιολογικού ελέγχου και τις δύο ημέρες 14 και 21 (Σχήμα 6). Η LJE (18 mg/kg) αύξησε τον EGF μόνο την ημέρα 21, ενώ η CTE (162 mg/kg) αύξησε σημαντικά την παραγωγή της τις ημέρες 14 και 21. Έχει ενδιαφέρον να σημειωθεί ότι η συνδυαστική θεραπεία των LJE και CTE ακόμη και σε χαμηλές δόσεις παρουσίαζε έντονα συνεργιστικά αποτελέσματα.

Η θεραπεία με μινοξιδίλη αύξησε επίσης το επίπεδο του VEGF κατά 50-80% πάνω από την τιμή ελέγχου (Σχήμα 7). Αν και η LJE ήταν αναποτελεσματική, η CTE άσκησε αξιοσημείωτα ενισχυτικά αποτελέσματα. Επιπλέον, η συνδυαστική θεραπεία με LJE και CTE εμφάνισε συνεργιστική δράση στην πρώιμη φάση την ημέρα 14.

Η έγχυση καραγενάνης στη θήκη αέρα του ποντικιού ICR αύξησε τον όγκο του εξιδρώματος μέσα στη θήκη 6 φορές το επίπεδο ελέγχου (Πίνακας 1). Αυτή η αυξημένη εξίδρωση μετριάστηκε σημαντικά από τη θεραπεία με LJE (18 και 54 mg/kg) ή CTE (54 και 162 mg/kg). Συγκεκριμένα, η συνδυασμένη εθνική θεραπεία με LJE και CTE μειώθηκε περαιτέρω

τον όγκο του εξιδρώματος, σε σύγκριση με τις επιμέρους επιδράσεις. Ο αριθμός των φλεγμονωδών κυττάρων αυξήθηκε δραστικά με την ένεση καραγενάνης: 34,6, 4,2 και 24,9 φορές επίπεδα ελέγχου για ουδετερόφιλα, μονοκύτταρα και λεμφοκύτταρα, αντίστοιχα (Πίνακας 1). Ωστόσο, η LJE και η CTE μείωσαν σημαντικά τα φλεγμονώδη κύτταρα με δοσοεξαρτώμενους τρόπους, στους οποίους η LJE ήταν κάπως ανώτερη από τη CTE. Αναμενόμενα, οι συνεργιστικές επιδράσεις στη διήθηση των φλεγμονωδών κυττάρων επιτεύχθηκαν με τη συγχορήγηση LJE και CTE.

Παράλληλα με τη διήθηση των φλεγμονωδών κυττάρων στη θήκη, η περιεκτικότητα σε NO και PGE2 στη θήκη αυξήθηκε επίσης δραστικά μετά την ένεση καραγενάνης (Πίνακας 1). Σε σύγκριση με την ήπια επίδραση του LJE,

Η CTE μείωσε σημαντικά τη συγκέντρωση του ΝΟ. Η συνδυασμένη εθνική θεραπεία της LJE και της CTE μείωσε περαιτέρω το επίπεδο ΤΟΥ ΝΟ με δοσοεξαρτώμενο τρόπο. Με παρόμοιο τρόπο, το αυξημένο επίπεδο PGE2 ήταν συνεργιστικά

καταστέλλονται από τη συνδυασμένη θεραπεία με LJE και CTE (Πίνακας 1).

Σιστάντσεεκχύλισμα ενισχύειΑνοσίακαι αποτρέπει την τριχόπτωση

Συζήτηση

Το ανθρώπινο κεφάλι έχει κατά μέσο όρο 100.000 τριχοθυλάκια.

Κατά τη διάρκεια μιας ζωής, κάθε θύλακας μεγαλώνει και ρίχνει περίπου 20 φορές, δείχνοντας ημερήσια απώλεια μαλλιών 100 κλώνων [25]. Η τριχόπτωση, συμπεριλαμβανομένης της αλωπεκίας και της φαλάκρας, είναι μια οδυνηρή κατάσταση για τους άνδρες και τις γυναίκες, ειδικά στη σύγχρονη κοινωνία. Ως εκ τούτου, έχει μεγάλη σημασία για την ανάπτυξη νέων θεραπειών που αποτρέπουν την τριχόπτωση και ενισχύουν τη θεραπεία των μαλλιών. Δηλαδή, η αγγειακή εξίδρωση και η διήθηση των φλεγμονωδών κυττάρων κατεστάλησαν συνεργιστικά. Στην ποσοτική ανάλυση, οι κύριοι φλεγμονώδεις μεσολαβητές NO και PGE2 ελέγχθηκαν ουσιαστικά μετά από από του στόματος συγχορήγηση LJE και CTE. Είναι ενδιαφέρον ότι, δεδομένου ότι η LJE εμφάνισε αντιφλεγμονώδη δράση υψηλότερη από αυτή της ημι-καθαρισμένης φουκοϊδάνης [16], θεωρείται ότι μπορεί να υπάρχει ένα επιπλέον δραστικό συστατικό(α), εκτός από το fucoidan, στο LJE.

Συνολικά, τα αποτελέσματα δείχνουν ότι η συνδυαστική από του στόματος θεραπεία με LJE και CTE βελτιώνει την τριχόπτωση ρυθμίζοντας τους αυξητικούς παράγοντες και τις σχετικές ενζυμικές δραστηριότητες και εν μέρει μέσω του αντιφλεγμονώδους δυναμικού. Ως εκ τούτου, προτείνεται ότι ένας συνδυασμός που περιλαμβάνει LJE και CTE σε κατάλληλες κλινικές δόσεις και αναλογίες θα μπορούσε να είναι μια υποψήφια συνταγή για ασθενείς με τριχόπτωση.

Αναγνωρίσεις

Αυτή η έρευνα υποστηρίχθηκε οικονομικά από την κορυφαία βιομηχανική ανάπτυξη για την οικονομική περιοχή του Κορυφαίου Βιομηχανικού Γραφείου Chungcheong, του Ινστιτούτου της Κορέας για την Πρόοδο της Τεχνολογίας (KIAT) και του Υπουργείου Οικονομίας της Γνώσης (MKE), και εν μέρει από το Πρόγραμμα Ανάπτυξης Τεχνολογίας Τροφίμων υψηλής προστιθέμενης αξίας, Υπουργείο Γεωργίας, Τροφίμων και Αγροτικών Υποθέσεων (MAFRA, αριθμός επιχορήγησης 113034-3).

Σύγκρουση συμφερόντων Οι συγγραφείς δηλώνουν ότι δεν υπάρχει οικονομική σύγκρουση συμφερόντων για τη δημοσίευση αυτών των αποτελεσμάτων.

Αναφορές

1. Kim JS, Kang BS, Park HJ, Kim DY, Hwang SY, Nam SY, Yun YW, Lee BJ. Προώθηση της επίδρασης των φυτικών εκχυλισμάτων μείγματα στην αναγέννηση των μαλλιών σε ποντίκια C3H / HeJ. J Βιοϊατρική Res 2009; 10(3): 99-108.

2. Πάους Ρ, Κοτσαρέλης Γ. Η βιολογία των τριχοθυλακίων. N Engl J Med 1999; 341(7); 491-497.

3. Κοτσαρέλης Γ. Το θύλακας της τρίχας: πεθαίνει για προσοχή. Am J Pathol 1997· 151(6): 1505-1509.

4. Cotsarelis G, Sun TT, Lavker RM. Τα κύτταρα που συγκρατούν την ετικέτα βρίσκονται στην περιοχή διόγκωσης της μονάδας pilosebaceous: επιπτώσεις για τα θυλακιώδη βλαστοκύτταρα, τον κύκλο των μαλλιών και την καρκινογένεση του δέρματος. Κελί 1990; 61(7): 1329-1337.

5. Oshima H, Rochat A, Kedzia C, Kobayashi K, Barrandon Y. Μορφογένεση και ανανέωση τριχοθυλακίων από ενήλικα πολυδύναμα βλαστοκύτταρα. Κελί 2001; 104(2): 233-245.

6. Burton JL, Μάρσαλ Α. Υπερτρίχωση λόγω μινοξιδίλης. Br J Δερματόλη 1979; 101(5): 593-595.

7. Μεϊσέρι ΚΝ, Τσίπκους Λος Άντζελες, Τέιλορ Σι Τζέι. Μηχανισμός δράσης της αγγειοδιαστολής που προκαλείται από θειική μινοξιδίλη: ένας ρόλος για αυξημένη διαπερατότητα Κ+. J Pharmacol Exp Ther 1988; 245(3): 751-760.

8. Buhl AE, Waldon DJ, Baker CA, Johnson GA. Η θειική μινοξιδίλη είναι ο ενεργός μεταβολίτης που διεγείρει τους θύλακες των τριχών. J Επενδύστε δερματόλη 1990; 95(5): 553-557.

9. Κάουφμαν KD, Dawber RP. Φιναστερίδη, ένας αναστολέας τύπου 5αλφα-αναγωγάσης, στη θεραπεία ανδρών με ανδρογενετική αλωπεκία. Εμπειρογνώμονας Opin Investig Φάρμακα 1999; 8(4): 403-415.

10. Φέλντμαν ΣΚ, Ρεϊνάλντι Σ, Στορτς ΚΑ, Σερέζο ΑΣ, Ντάμοντ ΕΒ. Αντιιικές ιδιότητες των κλασμάτων φουκοϊδάνης από το Leathesia difformis. Φυτοϊατρική 1999; 6(5): 335-340.

11. Wang J, Zhang Q, Zhang Z, Song H, Li P. Πιθανή αντιοξειδωτική και αντιπηκτική ικανότητα των κλασμάτων φουκοϊδάνης χαμηλού μοριακού βάρους που εξάγονται από την Laminaria japonica. Int J Biol Macromol 2010; 46(1): 6-12.

12. Bojakowski K, Abramczyk P, Bojakowska M, Zwoliñska A, Przybylski J, Gaciong Z. Το Fucoidan βελτιώνει τη νεφρική ροή του αίματος στο πρώιμο στάδιο της νεφρικής ισχαιμίας/βλάβης επαναιμάτωσης στον αρουραίο. J Φυσιόλη Pharmacol 2001; 52(1): 137-143.

13. Li N, Zhang Q, Song J. Τοξικολογική αξιολόγηση της φουκοϊδάνης που εξάγεται από την Laminaria japonica σε αρουραίους Wistar. Τρόφιμα Chem Τοξικόλη 2005; 43(3): 421-426.

14. Σιμόντα Χ, Τανάκα Τζ, Τακαχάρα Υ, Τακεμότο Κ, Σαν Σj, Σου ΜΧ. Οι υποχοληστερολαιμικές επιδράσεις του εκχυλίσματος Cistanche tubulosa, ενός κινεζικού παραδοσιακού ακατέργαστου φαρμάκου, σε ποντίκια. Am J Chin Med 2009; 37(6): 1125-1138.

15. Yamada P, Iijima R, Han J, Shigemori H, Yokota S, Isoda H. Ανασταλτική επίδραση της acteoside που απομονώνεται από το Cistanche tubulosa στην απελευθέρωση χημικών μεσολαβητών και στην παραγωγή φλεγμονωδών κυτοκινών από κύτταρα RBL-2H3 και KU812. Πλάντα Μεντ 2010; 76(14): 1512- 1518.

16. Kyung J, Kim D, Park D, Yang YH, Choi EK, Lee SP, Kim TS, Lee YB, Kim YB. Συνεργιστικές αντιφλεγμονώδεις επιδράσεις της Laminaria japonica fucoidan και του εκχυλίσματος Cistanche tubulosa. Εργαστήριο Anim Res 2012; 28(2): 91-97.

17. Chee E, Fong KS, Al Jajeh I, Nassiri N, Rootman J. Η συσχέτιση της φλεγμονής του δακρυϊκού αδένα με την γυροειδή αλωπεκία. Τροχιά 2015. 34(1): 45-50.

18. Μπρεζίνσκα-Ουσίσλο Λ, Μπέργκλερ-Τσοπ Β, Ουίσλο-Ντζιαντέκα Δ, Λις- Σβιέτι Α. Νέες πτυχές της θεραπείας της γυροειδούς αλωπεκίας. Μεταπέπιο Δερματόλη Alergol 2014; 31(4): 262-265.

19. Hattori M, Ogawa H. Βιοχημική ανάλυση της τριχοφυΐας από τις πτυχές της γήρανσης και των ενζυμικών δραστηριοτήτων. J Δερματόλη 1983; 10(1): 45-54.

20. Lee SH, Lee HJ, Baek IJ, Yon JM, Nam SY, Lee BJ, Yun YW, Kim YB, Hwang SY, Hong JT. Επίδραση της λοσιόν του τριχωτού της κεφαλής DREAMMO® στην προώθηση της ανάπτυξης των μαλλιών σε ένα μοντέλο αλωπεκίας C57BL / 6 ποντικών. Εργαστήριο Anim Res 2006; 22(1): 91-96.

21. Χαντζίσκι ΒΚ, Άιχμουλερ Σ, Χόφμαν Ου, Τσαρνέτσκι ΒΜ, Πάους

R. Δραστηριότητα αλκαλικής φωσφατάσης και εντοπισμός κατά τη διάρκεια του κύκλου των τριχών του ποντικού. Br J Δερματόλη 1994; 131(3): 303-310.

22. Σταυρός MJ, Dixelius J, Ματσουμότο Τ, Claesson-Ουαλική L. VEGF- μεταγωγή σήματος υποδοχέα. Τάσεις Βιοχημεία Sci 2003; 28(9): 488-494.

23. Σιν Σ, Τζέον ΙΗ, Παρκ Ντ, Τζανγκ Τζι, Τζου SS, Χουάνγκ ΜΠΙ, Τσόε Σι, Κιμ ΥΒ. Αντιφλεγμονώδεις επιδράσεις ενός εκχυλίσματος αιθανόλης angelica gigas σε ένα μοντέλο φλεγμονής θήκης αέρα Καραγενάνης. Exp Anim 2009; 58(4): 431-436.

24. Κιμ Ντ, Παρκ Ντ, Κιουνγκ Τζ, Γιανγκ ΥΗ, Τσόι ΕΚ, Λι ΥΒ, Κιμ ΧΚ, Χουάνγκ ΜΠΙ, Κιμ ΥΒ. Αντιφλεγμονώδεις επιδράσεις του Houttuynia cordata υπερκρίσιμο εκχύλισμα σε μοντέλο φλεγμονής θήκης αέρα καραγενάνης. Εργαστήριο Anim Res 2012; 28(2): 137-140.

25. Rebora A. Παθογένεια της ανδρογενετικής αλωπεκίας. J Am Acad Δερματόλη 2004; 50(5): 777-779.

26. Shirai A, Ikeda J, Kawashima S, Tamaoki T, Kamiya T. KF19418, μια νέα ένωση για την προώθηση της ανάπτυξης των μαλλιών in vitro και in vivo μοντέλα ποντικών. J Δερματόλη Sci 2001; 25(3): 213-218.

27. Kawabe TT, Kubicek MF, Τζόνσον GA, Buhl AE. Χρήση της δραστηριότητας γ-γλουταμυλ-τρανσπεπτιδάσης ως δείκτης του κύκλου των μαλλιών και της επαγωγής αναγενών σε θύλακες τριχών ποντικού. J Επενδύστε δερματόλη 1994; 103(1): 122-126.

28. Hamada K, Suzuki K. Αξιολόγηση βιοχημικών δεικτών ως δείκτη κύκλου μαλλιών σε ποντίκια C3H. Exp Anim 1996; 45(3): 251-256.

29. Παρκ SJ, Λι KW, Λιμ DS, Λι Σ. Ο θειωμένος πολυσακχαρίτης φουκοϊδάνη διεγείρει την οστεογενή διαφοροποίηση των ανθρώπινων λιπωδών βλαστοκυττάρων. Βλαστοκύτταρα Dev 2012; 21(12): 2204-2211.

30. Ντανιλένκο DM, Δαχτυλίδι BD, Πιρς GF. Αυξητικοί παράγοντες και κυτοκίνες στην ανάπτυξη και την ποδηλασία των τριχοθυλακίων: πρόσφατες πληροφορίες από ζωικά μοντέλα και τις δυνατότητες κλινικής θεραπείας. Mol Med Σήμερα 1996; 2(11): 460-467.

31. Οζέκι Μ, Ταμπάτα Υ. Το In vivo προώθησε την ανάπτυξη των τριχοθυλακίων ποντικών με την ελεγχόμενη απελευθέρωση αυξητικών παραγόντων. Βιοϋλικά 2003· 24(13): 2387-2394.

32. Φούτζι Τ, Κατόχ Σ, Ουρά Χ, Ουράνο Υ, Αράσε Σ. Η χημειοτακτική επίδραση ενός παράγοντα που προέρχεται από κύτταρα δερματικής θηλής στα κύτταρα του εξωτερικού περιβλήματος ρίζας. J Δερματόλη Sci 2001; 25(3): 206-212.

33. Stenn KS, Paus R. Έλεγχοι της ποδηλασίας των τριχοθυλακίων. Φυσιόλη Rev 2001; 81(1): 449-494.

34. Chapman RE, Hardy MH Επιδράσεις του ενδοδερμικά ενέσιμου και τοπικά εφαρμοζόμενου επιδερμικού αυξητικού παράγοντα ποντικού στην ανάπτυξη μαλλιού, δέρματος και μαλλιού των προβατοειδών μερινό. Aust J Biol Sci 1988; 41(2): 261-268.

35. Ντβόρζακ HF, Μπράουν LF, Ντέτμαρ Μ, Ντβόρζακ ΑΜ. Αγγειακός παράγοντας διαπερατότητας/αγγειακός ενδοθηλιακός αυξητικός παράγοντας, μικροαγγειακή υπερδιαπερατότητα και αγγειογένεση. Am J Pathol 1995· 146(5):

1029-1039.

36. Ellis RA, Moretti G. Αγγειακά μοτίβα που σχετίζονται με τους θύλακες των τριχών κατηγόνου στο ανθρώπινο τριχωτό της κεφαλής. Ann N Y Acad Sci 1959; 83: 448- 457.

37. Στέν ΚΣ, Φερνάντες Λος Άντζελες, Τίρρελ ΣJ. Οι αγγειογενείς ιδιότητες του θύλακα της τρίχας rat vibrissa σχετίζονται με τον βολβό. J Επενδύστε δερματόλη 1988; 90(3): 409-411.

38. Yano K, Brown LF, Detmar M. Έλεγχος της ανάπτυξης των τριχών και του μεγέθους των θυλάκων με τη μεσολάβηση του VEGF αγγειογένεσης. J Clin Invest 2001; 107(4): 409-417.

39. Lachgar S, Charveron M, Ceruti I. Κατανομή των αδιάφορων σταδίων των θυλάκων της τρίχας VEGF mRNA με επιτόπιο υβριδισμό φθορισμού σε συνδυασμό με συνεστιακή μικροσκοπία με λέιζερ. Στο: Έρευνα μαλλιών για την επόμενη χιλιετία (Van Neste DJJ, ed), Elsevier, Άμστερνταμ, 1996; σελ 407-412.

40. Freyschmidt-Paul P, Sundberg JP, Happle R, McElwee KJ, Metz S, Boggess D, Hoffmann R. Επιτυχής θεραπεία της τριχόπτωσης που μοιάζει με γυροειδή αλωπεκία με τον ευαισθητοποιητή επαφής πλακικό οξύ dibutylester (SADBE) σε ποντίκια C3H / HeJ. J Επενδύστε δερματόλη 1999; 113(1): 61-68.