Επίδραση του αφεψήματος Bushen Huoxue Xiezhuo στην απόπτωση και την ίνωση του νεφρικού ιστού σε αρουραίους με νεφρεκτομή 5/6 με βάση το HIF-1 / PKM2

3.4 Επιδράσεις του αφεψήματος Bushen Huoxue Xiezhuo στις εκφράσεις πρωτεΐνης των -SMA, TGF-, FN και κολλαγόνου-1 σε νεφρικό ιστό αρουραίων CRF

Όπως φαίνεται στα Σχήματα 3~6, ​​σε σύγκριση με την ψευδοχειρουργημένη ομάδα, οι εκφράσεις πρωτεΐνης των -SMA, TGF-, FN και κολλαγόνου-1 στον νεφρικό ιστό της ομάδας μοντέλου ήταν σημαντικά αυξημένες (Ρ<0.05). Compared with the model group, the protein expressions of α-SMA, TGF-β, FN, and collagen-1 in renal tissue of all drug-administered groups were significantly decreased (P<0.05). The effect of Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction was dose-dependent.

Πίνακας 2 Επιδράσεις του αφεψήματος Bushen Huoxue Xiezhuo στα επίπεδα ουρίας, Scr και 2-MG στον ορό σε αρουραίους CRF (x̄±s, n=10)

Ομάδα	Ουρία/(mmol/L)	Scr/(μmol/L)	₂-MG/(mg/L)
Ομάδα εικονικής λειτουργίας	6.23±0.63	37.35±0.83	0.98±0.13
Ομάδα μοντέλων	23.02±0.73*	118.57±1.03*	3.95±1.07*
Ομάδα χαμηλής δόσης	21.23±0.69#	112.45±0.87#	2.57±0.35#
Ομάδα μεσαίας δόσης	18.02±0.54#	93.18±1.17#	1.98±0.09#
Ομάδα υψηλών δόσεων	15.23±0.33#	87.24±1.08#	1.13±0.17#
Ομάδα Μπεναζεπρίλη	19.09±0.59#	105.77±0.67#	2.48±0.15#

Σημείωση: *Σ<0.05 vs. sham-operated group; #P<0.05 vs. model group

3.5 Επιδράσεις του αφεψήματος Bushen Huoxue Xiezhuo στις εκφράσεις mRNA των HIF-1 , PKM2 και HK2 σε νεφρικό ιστό αρουραίων CRF

Όπως φαίνεται στο Σχήμα 7, σε σύγκριση με την ψευδοχειρουργημένη ομάδα, οι εκφράσεις mRNA των HIF-1, PKM2 και HK2 στον νεφρικό ιστό της ομάδας μοντέλου ήταν σημαντικά αυξημένες (Ρ<0.05). Compared with the model group, the mRNA expressions of HIF-1α, PKM2, and HK2 in renal tissue of all drug-administered groups were significantly decreased (P<0.05). The effect of Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction was dose-dependent.

 

Εικόνα 3. Επιδράσεις της φόρμουλας τονωτικής, ενεργοποίησης αίματος και εξάλειψης θολότητας νεφρών στην έκφραση πρωτεΐνης SMA σε νεφρικό ιστό αρουραίων CRF (ICH, ×400)

A. Sham-operated Group
Β. Ομάδα Μοντέλων
Γ. Ομάδα φόρμουλας χαμηλής δόσης τονωτικής, ενεργοποίησης αίματος και θολότητας
Δ. Ομάδα φόρμουλα μεσαίας δόσης που τονώνει, το αίμα που ενεργοποιεί και τη θολότητα
Ε. Ομάδα φόρμουλας υψηλής δόσης τονωτικής, ενεργοποίησης του αίματος και εξάλειψης θολότητας
F. Benazepril Group

 

Σχήμα 4. Επιδράσεις της φόρμουλας τονωτικής, ενεργοποίησης αίματος και εξάλειψης θολότητας νεφρών στην έκφραση πρωτεΐνης TGF στον νεφρικό ιστό αρουραίων CRF (ICH, ×400)

A. Sham-operated Group
Β. Ομάδα Μοντέλων
Γ. Ομάδα φόρμουλας χαμηλής δόσης τονωτικής, ενεργοποίησης αίματος και θολότητας
Δ. Ομάδα φόρμουλα μεσαίας δόσης που τονώνει, το αίμα που ενεργοποιεί και τη θολότητα
Ε. Ομάδα φόρμουλας υψηλής δόσης τονωτικής, ενεργοποίησης του αίματος και εξάλειψης θολότητας
F. Benazepril Group

 

 

Κάντε κλικ για περισσότερες λεπτομέρειες

 

Υποστήριξη της Wecistanche-Για περισσότερες λεπτομέρειες σχετικά με τη συνεργασία
Διεύθυνση ηλεκτρονικού ταχυδρομείου:wallence.suen@wecistanche.com

 

3.6 Επιδράσεις του αφεψήματος Bushen Huoxue Xiezhuo στις εκφράσεις πρωτεΐνης των HIF-1 , PKM2 και HK2 σε νεφρικό ιστό αρουραίων CRF

Όπως φαίνεται στο Σχήμα 8, σε σύγκριση με την ψευδοχειρουργημένη ομάδα, οι εκφράσεις πρωτεΐνης των HIF-1, PKM2 και HK2 στον νεφρικό ιστό της ομάδας μοντέλου ήταν σημαντικά αυξημένες (Ρ<0.05). Compared with the model group, the protein expressions of HIF-1α, PKM2, and HK2 in renal tissue of all drug-administered groups were significantly decreased (P<0.05). The effect of Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction was dose-dependent.

3.7 Επιδράσεις του αφεψήματος Bushen Huoxue Xiezhuo στις εκφράσεις πρωτεΐνης Bax, Bcl-2 και Caspase-3 σε νεφρικό ιστό αρουραίων CRF

Όπως φαίνεται στο Σχήμα 9, σε σύγκριση με την ψευδοχειρουργημένη ομάδα, οι εκφράσεις πρωτεΐνης Bax και Caspase-3 στον νεφρικό ιστό της ομάδας μοντέλου ήταν σημαντικά αυξημένες, ενώ η έκφραση πρωτεΐνης του Bcl-2 μειώθηκε σημαντικά (Ρ<0.05). Compared with the model group, the protein expressions of Bax and Caspase-3 in renal tissue of all drug-administered groups were significantly decreased, and the protein expression of Bcl-2 was significantly increased (P<0.05). The effect of Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction was dose-dependent.

 

Εικόνα 7. Επιδράσεις του τύπου τονωτικού, ενεργοποίησης αίματος και εξάλειψης θολότητας νεφρών στην έκφραση του mRNA του HIF-1, PKM2 και HK2 στον ιστό νεφρών αρουραίων CRF

A. Sham-operated Group
Β. Ομάδα Μοντέλων
Γ. Ομάδα φόρμουλας χαμηλής δόσης τονωτικής, ενεργοποίησης αίματος και θολότητας
Δ. Ομάδα φόρμουλα μεσαίας δόσης που τονώνει, το αίμα που ενεργοποιεί και τη θολότητα
Ε. Ομάδα φόρμουλας υψηλής δόσης τονωτικής, ενεργοποίησης του αίματος και εξάλειψης θολότητας
F. Benazepril Group
Σημείωση: Σε σύγκριση με την ομάδα που χειρουργείται από ψευδή,

∗ P<0.05; Compared with the model group,

#P<0.05

Εικόνα 8. Επιδράσεις της φόρμουλας τονωτικής, ενεργοποίησης αίματος και εξάλειψης θολότητας νεφρών στις πρωτεΐνες HIF-1, PKM2 και HK2 στον ιστό νεφρών αρουραίων CRF

A. Sham-operated Group
Β. Ομάδα Μοντέλων
Γ. Ομάδα φόρμουλας χαμηλής δόσης τονωτικής, ενεργοποίησης αίματος και θολότητας
Δ. Ομάδα φόρμουλα μεσαίας δόσης που τονώνει, το αίμα που ενεργοποιεί και τη θολότητα
Ε. Ομάδα φόρμουλας υψηλής δόσης τονωτικής, ενεργοποίησης του αίματος και εξάλειψης θολότητας
F. Benazepril Group

 

Εικόνα 9. Επιδράσεις της φόρμουλας τονωτικής, ενεργοποίησης αίματος και εξάλειψης θολότητας νεφρών στην έκφραση των πρωτεϊνών Bax, Bcl-2 και Caspase-3 στον ιστό νεφρών αρουραίων CRF

A. Sham-operated Group
Β. Ομάδα Μοντέλων
Γ. Ομάδα φόρμουλας χαμηλής δόσης τονωτικής, ενεργοποίησης αίματος και θολότητας
Δ. Ομάδα φόρμουλα μεσαίας δόσης που τονώνει, το αίμα που ενεργοποιεί και τη θολότητα
Ε. Ομάδα φόρμουλας υψηλής δόσης τονωτικής, ενεργοποίησης του αίματος και εξάλειψης θολότητας
F. Benazepril Group

Σημείωση: Σε σύγκριση με την ομάδα που χειρουργείται από ψευδή,

∗ P<0.05; Compared with the model group,

#P<0.05

 

4 Συζήτηση

Τα τελευταία χρόνια, ο αριθμός των ασθενών με ΧΝΝ αυξάνεται και ο επιπολασμός της έχει επίσης αυξηθεί σημαντικά. Βασισμένος στη βασική παθογένεση της ΧΝΝ ως «ανεπάρκεια που περιπλέκεται με περίσσεια», ο καθηγητής Tan Jinchuan πρότεινε τη θεραπευτική αρχή της τονωτικής του νεφρού και της σπλήνας, της ενεργοποίησης της κυκλοφορίας του αίματος και της αποστράγγισης της θολότητας. Προηγούμενες μελέτες έχουν δείξει ότι το αφέψημα Bushen Huoxue Xiezhuo μπορεί να ρυθμίσει μονοπάτια όπως η αυτοφαγία, η απόπτωση και η ίνωση για την προστασία της νεφρικής λειτουργίας. Σχετικές μελέτες έχουν δείξει ότι το ραβέντι, ο αστράγαλος, η αγγελική, η salvia miltiorrhiza και τα ενεργά συστατικά τους μπορούν όλα να αναστείλουν τη νεφρική ίνωση και να προστατεύσουν τη νεφρική λειτουργία [7]. Τα αποτελέσματα αυτής της μελέτης έδειξαν ότι σε σύγκριση με την ομάδα μοντέλου, όλες οι ομάδες δόσης του αφέψημα Bushen Huoxue Xiezhuo βελτίωσαν τα επίπεδα ουρίας, Scr και 2-MG στον ορό, καθώς και την εναπόθεση ινών κολλαγόνου στον νεφρικό ιστό σε διάφορους βαθμούς, υποδηλώνοντας ότι το αφέψημα Bushen Huoxue Xiezhuo διαδραματίζει σημαντικό ρόλο στην προστασία και την εκ νέου προστασία του αφέψημα του νεφρού.

Notably, similar renal protective effects have been reported for Cistanche tubulosa, a classic TCM herb known as "desert ginseng" and recognized as a top-grade kidney-nourishing medicinal material [15]. In TCM theory, Cistanche tubulosa is highly valued for its ability to "invigorate kidney yang and replenish essence", and modern research has confirmed that it is rich in active ingredients such as echinacoside, verbascoside, and flavonoids [15]. These components can inhibit renal cell apoptosis, promote renal cell proliferation, repair damaged renal tissue, and dilate renal blood vessels-effects that align with the kidney-protective mechanisms observed in Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction [15]. Τέτοια ευρήματα υπογραμμίζουν τη δυνατότητα των βοτάνων TCM με θρεπτικές ιδιότητες για τα νεφρά στη θεραπεία της ΧΝΝ.

Η απόπτωση είναι ένας από τους σημαντικούς μηχανισμούς που διέπουν την παθογένεση του CRF. Υπό φυσιολογικές συνθήκες, διατηρείται μια λεπτή δυναμική ισορροπία μεταξύ των προ-αποπτωτικών και αντι-αποπτωτικών μελών της οικογένειας. Μόλις η απόπτωση ενεργοποιηθεί υπερβολικά, θα οδηγήσει σε παθολογικές αλλαγές στα σπειράματα και στα νεφρικά σωληνάρια, βλάπτοντας έτσι τη νεφρική λειτουργία. Όταν ενεργοποιείται η προ-αποπτωτική πρωτεΐνη Bax, προκαλεί αύξηση της διαπερατότητας της μιτοχονδριακής εξωτερικής μεμβράνης, με αποτέλεσμα την κατάρρευση του δυναμικού της μιτοχονδριακής εσωτερικής μεμβράνης και την απελευθέρωση του κυτοχρώματος C (CytC) στο κυτταρόπλασμα, το οποίο ενεργοποιεί την Κασπάση-9 και περαιτέρω πυροδοτεί τις αποκριτικές καψάδες8. Σχετικές μελέτες έχουν δείξει ότι στα εγγύς σωληναριακά επιθηλιακά κύτταρα, η εξάλειψη του γονιδίου Bax ή η προς τα πάνω ρύθμιση της έκφρασης Bcl-2 μπορεί να αναστείλει αποτελεσματικά την αποπτωτική διαδικασία [9]. Αυτή η μελέτη διαπίστωσε ότι όλες οι δόσεις του αφέψημα Bushen Huoxue Xiezhuo μείωσαν σημαντικά τις εκφράσεις των προ-αποπτωτικών παραγόντων Bax και Caspase-3 και ρύθμισαν προς τα πάνω την έκφραση του αντι-αποπτωτικού παράγοντα Bcl-2, υποδηλώνοντας ότι το αφέψημα Bushen Huoxue Xiezhuo μπορεί να βελτιώσει τη νεφρική λειτουργία εμποδίζοντας την αποπτωτική οδό.

Η νεφρική ίνωση είναι μια χρόνια νεφρική νόσος που προκαλείται από πολλαπλές κυτοκίνες, που ρυθμίζεται από πολλαπλές οδούς σηματοδότησης και καθοδηγείται από πολλούς παράγοντες. Είναι μια κοινή οδός που οδηγεί σε νεφρική νόσο τελικού σταδίου, που χαρακτηρίζεται από βλάβη του νεφρικού ιστού, φλεγμονή, εναπόθεση ECM και σωληναριακή επιθηλιακή-μεσεγχυματική μετάβαση. Η νεφρική ίνωση περιλαμβάνει τη σπειραματική ίνωση και τη σωληναρισιακή διάμεση ίνωση [8]. Μελέτες έχουν επιβεβαιώσει ότι η κύρια παθολογική εκδήλωση της πρώιμης CRF είναι η νεφρική ίνωση και η καθυστέρηση της εξέλιξης της νεφρικής ίνωσης είναι μεγάλης σημασίας για τη μείωση της νεφρικής βλάβης και την ανακούφιση της εξέλιξης της νεφρικής ανεπάρκειας [10]. Το TGF- είναι ένας βασικός υποτύπος οδηγικής ίνωσης, ο οποίος ρυθμίζει τη σύνθεση ECM μέσω της οδού σηματοδότησης Smad. Το FN εμπλέκεται στην προσκόλληση κυττάρων, τη μετανάστευση και τη συναρμολόγηση ECM. Η κύρια κυτταρική πηγή υπερβολικής εναπόθεσης ECM είναι οι μυοϊνοβλάστες και η δομική διαδιαφοροποίησή τους είναι βασικός παράγοντας για την εμφάνιση και την ανάπτυξη νεφρικής ίνωσης. Το κολλαγόνο-1 προέρχεται κυρίως από μυοϊνοβλάστες και το -SMA, ως ένα από τα κύρια μορφολογικά χαρακτηριστικά και δείκτες ενεργοποίησης των μυοϊνοβλαστών, τα επίπεδα έκφρασης και των δύο συσχετίζονται θετικά με τον βαθμό νεφρικής ίνωσης [11]. Σχετικές μελέτες έχουν δείξει ότι σε διάφορες χρόνιες νεφρικές παθήσεις, οι εκφράσεις mRNA και πρωτεΐνης του -SMA και του κολλαγόνου-1 είναι σημαντικά αυξημένες, συνοδευόμενες από σοβαρή νεφρική ίνωση [12]. Σε αυτή τη μελέτη, το αφέψημα Bushen Huoxue Xiezhuo μείωσε σημαντικά τις εκφράσεις των δεικτών ίνωσης όπως -SMA, TGF-, FN και Collagen-1, υποδεικνύοντας ότι το αφέψημα Bushen Huoxue Xiezhuo έχει σημαντικά αποτελέσματα στη βελτίωση της νεφρικής λειτουργίας και στην επιβράδυνση της εξέλιξης της νεφρικής ίνωσης.

Η οδός σηματοδότησης HIF-1 /PKM2 σχετίζεται στενά με την απόπτωση. Το HIF-1 μπορεί να προάγει την απόπτωση ενεργοποιώντας μεταγραφικά το Bax και αναστέλλοντας το Bcl-2, και το PKM2 μπορεί να ασκήσει αποτελέσματα ρυθμίζοντας πρωτεΐνες που σχετίζονται με την απόπτωση όπως η ρ53 μετά την πυρηνική μετατόπιση [13]. Ως ένας από τους βασικούς ρυθμιστές της υποξικής απόκρισης των θηλαστικών, ο HIF-1 μπορεί να ρυθμίσει προς τα πάνω την έκφραση του TGF μέσω του HIF-1 σε υποξικά νεφρικά σωληναριακά επιθηλιακά κύτταρα σε ένα μοντέλο νεφρικής διάμεσης ίνωσης, ενεργοποιώντας έτσι μονοπάτια που σχετίζονται με το Smad και επάγοντας την έκφραση δεικτών ίνωσης όπως -SMA και Colla. Εκτός από τη συμμετοχή στη ρύθμιση της απόπτωσης, η PKM2 υποστηρίζει επίσης τις ενεργειακές ανάγκες των ινωτικών κυττάρων ρυθμίζοντας τον γλυκολυτικό μεταβολισμό [14]. Τα αποτελέσματα αυτής της μελέτης έδειξαν ότι τα επίπεδα των HIF-1 , PKM2 και HK2 στον νεφρικό ιστό της ομάδας μοντέλου CRF ήταν σημαντικά αυξημένα, ενώ εκείνα στις ομάδες TCM μειώθηκαν σημαντικά, υποδηλώνοντας ότι το αφέψημα Bushen Huoxue Xiezhuo μπορεί να αναστείλει την απόπτωση και να καθυστερήσει τη νεφρική ίνωση καταστέλλοντας την οδό επανενεργοποίησης του ιστού του PK/{2}.

Συνοπτικά, το αφέψημα Bushen Huoxue Xiezhuo μπορεί να αναστείλει την απόπτωση και την ίνωση των κυττάρων σε αρουραίους CRF, να βελτιώσει τη νεφρική βλάβη σε αρουραίους μοντέλου CRF και ο μηχανισμός του μπορεί να σχετίζεται με τη ρύθμιση της οδού σηματοδότησης HIF-1 /PKM2.

Αναφορές

[1] American Journal of Health-System Pharmacy. Κατευθυντήρια γραμμή κλινικής πρακτικής Kdigo 2024 για την αξιολόγηση και τη διαχείριση της χρόνιας νεφρικής νόσου[J]. Kidney International, 2024, 105(4S): 117-314.[2] Zhang L, Liu L, Bai M, et αϊ. Ο HE4 που προκαλείται από υποξία σε σωληναριακά επιθηλιακά κύτταρα προάγει τη συσσώρευση της εξωκυτταρικής μήτρας και τη νεφρική ίνωση μέσω του NF-κB[J]. FASEB Journal, 2020, 34(2): 2554-2567.[3] Hu D, Wang L, Zhang Y, et al. Το πόσιμο διάλυμα Sanqi βελτιώνει τη νεφρική ίνωση καταστέλλοντας την ενεργοποίηση των ινοβλαστών μέσω της οδού HIF-1 /PKM2/γλυκόλυσης στη χρόνια νεφρική νόσο[J]. Journal of Ethnopharmacology, 2024, 335: 118679.[4] Palsson-Mcdermott EM, Curtis AM, Goel G, et al. Η πυροσταφυλική κινάση M2 ρυθμίζει τη δραστηριότητα Hif-1 και την επαγωγή IL-1 και είναι ένας κρίσιμος καθοριστικός παράγοντας του φαινομένου Warburg σε μακροφάγους που ενεργοποιούνται με LPS [J]. Cell Metabolism, 2015, 21(1): 65-80.[5] Βλ. EJ, Cullen V. Σχολιασμός της ενημέρωσης 2021 της κατευθυντήριας γραμμής κλινικής πρακτικής KDIGO για τη διαχείριση της αρτηριακής πίεσης στη χρόνια νεφρική νόσο[J]. Nephrology (Carlton, Vic), 2025, 30(1): e14414.[6] Wu ZH, Cao WX, Tan Μ, et al. Διερεύνηση των επιδράσεων του αφέψημα με ραβέντι Xiezhuo στην αυτοφαγία και την απόπτωση σε αρουραίους με χρόνια νεφρική ανεπάρκεια με βάση την οδό mTORC1/p70S6K[J]. Lishizhen Medicine and Materia Medica Research, 2023, 34(2): 321-324.[7] Wang J, Li YT, Liu DW, et al. Πρόοδος της έρευνας σχετικά με τον μηχανισμό των κύριων ενεργών συστατικών των ανθρακινονών ραβέντι κατά της νεφρικής ίνωσης[J]. Traditional Chinese Medicine Research, 2023, 36(10): 92-96.[8] Askari H, Seifi B, Kadkhodaee M, et al. Προστατευτικές επιδράσεις του υδρόθειου στη χρόνια νεφρική νόσο με τη μείωση του οξειδωτικού στρες, της φλεγμονής και της απόπτωσης [J]. Περιοδικό EXCLI, 2018, 17: 14-23.[9] Solà-Riera C, García M, Ljunggren HG, et al. Ο ιός Hanta αναστέλλει την απόπτωση αποτρέποντας την απώλεια δυναμικού της μιτοχονδριακής μεμβράνης μέσω της ανοδικής ρύθμισης του παράγοντα υπέρ της επιβίωσης BCL-2[J]. PLoS Pathogens, 2020, 16(2): e1008297.[10] Yuan L, Wang L, Wang Η, et αϊ. Η ικαριίνη αναστέλλει την υπερμεθυλίωση του προαγωγέα Epo, ρυθμίζει τη μετάβαση περικυττάρων-μυοϊνοβλαστών και βελτιώνει τη νεφρική αναιμία σε αρουραίους που έχουν υποστεί νεφρεκτομή 5/6 [J/OL]. Pharmacology and Clinics of Chinese Materia Medica: 1-17 [2025-12-17]. https://doi.org/10.13412/j.cnki.zyyl.20250408.004.[11] Sravani S, Saifi MA, Godugu C. Riociguat βελτιώνει τον τραυματισμό των νεφρών και την ίνωση σε ένα ζωικό μοντέλο[J]. Biochemical and Biophysical Research Communications, 2020, 530(4): 706-712.[12] Li L, Zhou G, Fu R, et αϊ. Οι πολυσακχαρίτες που εξάγονται από το Balanophora polyandra Griff (BPP) βελτιώνουν τη νεφρική ίνωση και την EMT μέσω της αναστολής της οδού Hedgehog[J]. Journal of Cellular and Molecular Medicine, 2021, 25(6): 2828-2840.[13] Rana NK, Singh P, Koch B. Η υποξία που προσομοιώνεται με CoCl2 επάγει τον κυτταρικό πολλαπλασιασμό και μεταβάλλει το πρότυπο έκφρασης των γονιδίων που σχετίζονται με την υποξία που εμπλέκονται στην αγγειογένεση και την απόπτωση [J]. Biological Research, 2019, 52(1): 12.[14] Wang Z, Yu J, Hao D, et al. Μεταγραφικές υπογραφές που ανταποκρίνονται στον ενεργοποιητή PKM2 TEPP-46 σε υπεργλυκαιμικά ανθρώπινα εγγύς επιθηλιακά σωληναριακά κύτταρα νεφρού[J]. Frontiers in Endocrinology, 2022, 13: 965379.[15] Chengdu WeCistanche Bio-Tech., Co Ltd. Cistanche για θρεπτικό νεφρό[EB/OL]. https://www.xjcistanche.com/cistanche-extract-product/cistanche-for-nourishing-kidney.html, 01-08-2022.