Διαιτητικό Cistanche Μετριάζει την οξεία βλάβη του ειλεού των πάπιων Ⅱ

3.1.Μορφολογία του εντέρου

Σε αυτή τη μελέτη, η κορυφαία παθολογική εξέταση (H&E) και η οδηγία της μικροδομής που αξιολογήθηκε με υπερδομή του ειλεού είχαν αποδειχθεί στο Σχήμα 1. Σε σύγκριση με το T0 ομάδα, ο ειλεός στο Τ0συν η ομάδα AFB1 δείχνει μείωση του πάχους του επιθηλίου, βλάβη στη δομή των λαχνών καιφλεγμονώδηςσυσσωμάτωση κυττάρων, και η καταστροφή μικροδομών, όπως μεγάλος αριθμός μικρολαχνών που έχουν σπάσει σοβαρά και μιτοχόνδρια καλά και συρρίκνωση. Η βλάβη στον ειλεό των πάπιων που περιέχει δομική η καταστροφή των λαχνών και των μικρολαχνών μετά τη χορήγηση AFB1 προκάλεσε την εμφάνιση φλεγμονώδηςστρες οξείδωσης. Οπως αναμενόταν,διαιτητικό κιστανάκιείχε την ικανότητα ναπροστατεύουν τον ειλεό από οξεία βλάβη που προκαλείται από το AFB1χορήγηση, συμπεριλαμβανομένων μερικών σπασμένων λαχνών ειλεού,φλεγμονώδες κύτταροσυγκεντρώθηκε και μια μικρή βλάβη του ειλεού δομικά αξιολογήθηκε από H&E, και μείωση του αριθμού των σπασμένων μικρολάχνων, μείωση των μιτοχονδριακών πρήξιμο και εξάλειψη των μιτοχονδρίων συρρικνώνουν την ηλικία που εκτιμάται από τη δακτυλιοειδή δομική που φαίνεται διαφορά δομής μεταξύ του Τ500συν AFB1group και το T0συν AFB1group.

ομάδα; Τ500 συν AFB1: cistanche συν ομάδα AFB1

Κάντε κλικ εδώ για να λάβετε αντιοξειδωτικά συμπληρώματα Cistanche

Ζήτα περισσότερα:

Email:wallence.suen@wecistanche.com Whatsapp plus 86 15292862950

3.2. Επίπεδα προσαγωγών AFB1-DNA στο πλάσμα

Τα προϊόντα προσθήκης AFB1-DNA στο πλάσμα των πάπιων μετρήθηκαν με έμμεση ανταγωνιστική ELISA και φαίνονται στο σχήμα2. Σε σύγκριση με το Τ0 ομάδα, η χορήγηση AFB1 αύξησε σημαντικά το περιεχόμενο AFB1-προσαγωγών DNA (p < 0.001) in the plasma. As expected, διαιτητικό κιστανάκιμειωμένο περιεχόμενο προσαγωγών AFB1-DNA (p = 0.001) στο πλάσμα των πάπιων στην ομάδα T500 συν AFB1 σε σχέση με αυτό στην ομάδα T0 συν ομάδα AFB1.

συν AFB1: cistanche συνΟμάδα AFB1. Οι τιμές εκφράζονται ως Μέσος όρος± SEM (n= 15), ** σημαίνει < 0.01.

3.3. Αντιοξειδωτική ικανότητα στο πλάσμα και στον ειλεό

Η αντιοξειδωτική ικανότητα του πλάσματος φαίνεται στο σχήμα3. Η έκθεση του AFB1 οδήγησε σε οξειδωτικό στρες, φανερώνοντας ότι το T-SOD (p = 0.073), GSH-PX (p = 0.034) και GSH-ST (p = 0.003) οι δραστηριότητες στο πλάσμα μειώθηκαν στο T0 συν την ομάδα AFB1 από εκείνα του T0 ομάδα. Ωστόσο, το T-SOD (p = 0.039), GSH-PX (p = 0.009) και GSH-ST (p = 0.003) οι δραστηριότητες βελτιώθηκαν σημαντικά στο T500 συν την ομάδα AFB1 από εκείνα του T0 συν ομάδα AFB1. Η συγκέντρωση του MDA (p = 0.028) στο πλάσμα αυξήθηκε στο Τ0 συν την ομάδα AFB1 από αυτή στο T0 ομάδα και η συγκέντρωση του MDA (p < 0.001) in the plasma was decreased in the T500 συν την ομάδα AFB1 από εκείνα του T0 συν AFB1. 

3.4. Έκφραση γονιδίων που σχετίζονται με το Nrf2-ΕΙΝΑΙ οδός σηματοδότησης στον ειλεόΗ χορήγηση AFB1 προκάλεσε το στρες οξείδωσης των κυττάρων και περαιτέρω οδήγησε σε αλλαγές έκφρασης γονιδίων συμπεριλαμβανομένων Keap1, Nrf2, CAT, SOD1, GPX, GST, NQO-1, HO-1, GCLC και GCLM στον ειλεό πάπιες. Όπως φαίνεται στο Σχήμα4, η χορήγηση AFB1 αύξησε σημαντικά το mRNA (p = 0.001) επίπεδο του γονιδίου Keap1 και ανέστειλε τα επίπεδα mRNA των γονιδίων συμπεριλαμβανομένου του Nrf2 (p = 0.171), ΚΑΤ (p = 0.166), SOD1 (p = 0.121), GPX (p = 0.065), GST (p = 0.008), NQO-1 (p = 0.061), HO-1 (p = 0.068), GCLC (p = 0.800) και GCLM (p = 0.090) και περιεκτικότητα πρωτεΐνης Nrf2 (p = 0.001) στον ειλεό των πάπιων στο Τ0 συν την ομάδα AFB1 σε σχέση με εκείνες στο Τ0 ομάδα. Όπως ήταν αναμενόμενο, η προσθήκη κιστάνσε σε πάπιες που τρέφονταν με δίαιτα για 70 ημέρες μείωσε σημαντικά το mRNA (p = 0.012) έκφραση του γονιδίου Keap1 στον ειλεό, σημαντικά αυξημένο επίπεδο mRNA των γονιδίων συμπεριλαμβανομένου του Nrf2 (p = 0.042), SOD1 (p = 0.038), HO-1 (p = 0.041), NQO-1 (p = 0.047) και GCLC (p = 0.043), και βελτιωμένο επίπεδο mRNA γονιδίων συμπεριλαμβανομένου του CAT (p = 0.229), GPX (p = 0.568), GST (p = 0.454) και GCLM (p = 0.860), και πρωτεΐνη Nrf2 (p = 0.005) στον ειλεό των πάπιων στο Τ500 συν την ομάδα AFB1 σε σχέση με εκείνες στο Τ0 συν ομάδα AFB1.

* που σημαίνειp < 0.05, ** meansp < 0.01

3.5. Έκφραση γονιδίων που σχετίζονται με NF-κΒ Δρόμος σηματοδότησης στον Ειλεό

Η έκφραση των φλεγμονωδών γονιδίων φαίνεται στο Σχήμα5. Σε σύγκριση με το Τ0 ομάδα, η χορήγηση AFB1 αύξησε το επίπεδο mRNA ορισμένων γονιδίων όπως το TLR4 (p = 0.037), NF-κB (p <0.001), TNF- (p = 0.025), IL-6 (p = 0.072), TXNIP (p = 0.007), NLRP3 (p <0.001) και IL-18 (p = 0.478) στον ειλεό των πάπιων στο Τ0 συν ομάδα AFB1. Οπως αναμενόταν,διαιτητικό κιστανάκικατέστειλε σημαντικά την υπερέκφραση γονιδίων συμπεριλαμβανομένου του TLR4 (p <0.001), NF-κB (p = 0.001), TNF- (p = 0.012), IL-6 (p = 0.007), TXNIP (p = 0.001), NLRP3 (p = 0.001) και IL-18 (p <0.001) στον ειλεό των πάπιων στο Τ500 συν την ομάδα AFB1 σε σχέση με εκείνες στο Τ0 συν ομάδα AFB1. Επιπλέον, το περιεχόμενο του PP 65 (p = 0.004) στον ειλεό αυξήθηκε στο Τ0 συν την ομάδα AFB1 σε σχέση με αυτή στο Τ0 ομάδα. Οπως αναμενόταν,διαιτητικό κιστανάκικαταστέλλεται σημαντικά το PP 65 (p = 0.015) περιεκτικότητα σε πρωτεΐνη.

ένταση της πρωτεΐνης στόχου στην εσωτερική αναφορά (GAPDH). Οι τιμές εκφράστηκαν ως Μέσος όρος± SEM (n = 15), και* που σημαίνειp < 0.05, ** means p < 0.01

4. Συζήτηση

Η μορφολογία του εντέρου είναι ένας από τους δείκτες συμπεριφοράς για την αξιολόγηση της φλεγμονής και του οξειδωτικού στρες του εντέρου που προκαλείται από τη χορήγηση AFB1. Η βιβλιογραφία σχετικά με τις επιδράσεις της χορήγησης AFB1 στη μορφολογία του ειλεού των πάπιων είναι ελάχιστη. Οι Yan et al. (2020) ανέφερε ότι η χορήγηση AFB1 οδήγησε σε καρδιακή παθολογική βλάβη των αρουραίων Sprague-Dawley, φλεγμονώδη κυτταρική διήθηση και μεγαλύτερο εκφυλισμό των καρδιομυοκυττάρων [29]. Καταρροϊκή εντερίτιδα με φλεγμονώδεις κυτταρικές διηθήσεις στο έντερο κοτόπουλων κρεατοπαραγωγής που προκλήθηκαν από AFB1 κατέστρεψαν τη δομή του εντέρου [12]. Οι Luzi et al. (2002) ανέφεραν οξείες συσπάσεις ειλεού που προκαλούνται από τη χορήγηση AFB1 [30]. Τα αποτελέσματα αυτής της μελέτης έδειξαν ότι η διαιτητική κίστανη είναι ένας ισχυρός προστατευτικός παράγοντας του ειλεού έναντι της αναστολής της φλεγμονής, κάτι που μπορεί να σημαίνει ότι το κιστάνσε είχε την ικανότητα να αναστέλλει αντιφλεγμονώδη σε πολλαπλές φλεγμονώδεις διαταραχές σε ποντίκια.31–33]. Η βλάβη του DNA που προκαλείται από το οξειδωτικό στρες θα καταστρέψει τη σταθερότητα του DNA, το οποίο μπορεί να προάγει το σχηματισμό διαφόρων προσαγωγών DNA [34]. Το AFB1-Το προϊόν προσθήκης DNA είναι ένας βιοδείκτης για την αξιολόγηση του βαθμού τραυματισμού του σώματος που προκλήθηκε από το AFB1. Η σύνθεση και ο εμπλουτισμός των προσαγωγών AFB1-DNA κατέστρεψε τη δομή των ιστών και στη συνέχεια προκάλεσε καρκινογόνο ανάπτυξη [35]. Το AFB1 θα μεταβολιζόταν από τα ισοένζυμα του κυτοχρώματος P450s σε AFB1-8,9-εποξείδιο (AFBO) και θα παράγει σχετικά προϊόντα προσθήκης [36] και αυξάνουν τη βλάβη των ιστών, το οξειδωτικό στρες και τη βλάβη του DNA από ROS [37]. AFB1-Τα προϊόντα προσθήκης DNA μπορούν να συνδεθούν με τις νουκλεοπρωτεΐνες και τα νουκλεϊκά οξέα, προκαλώντας έτσι βλάβη στο DNA και στα κύτταρα και μειώνοντας το επίπεδο των αντιοξειδωτικών ενζύμων και τη σύνθεση πρωτεϊνών [38]. Οι Zhang et al. (2016) ανέφερε ότι το συμπλήρωμα του κιστάνου ανέστειλε τη βλάβη του ήπατος που προκαλείται από την AFB1 αυξάνοντας την αντιοξειδωτική δράση των αντιοξειδωτικών ενζύμων (GPx, SOD, CAT και GST) και αναστέλλοντας την παραγωγή AFB1-DNA [39]. Σε αυτή τη μελέτη, η χορήγηση AFB1 αύξησε την περιεκτικότητα σε προϊόντα προσθήκης AFB1-DNA στο πλάσμα. Το διαιτητικό σιτανίσιο μείωσε σημαντικά αυτό το φαινόμενο, τα αποτελέσματα έδειξαν ότι το διαιτητικό κιστάνι ήταν η δυνατότητα να προστατεύσει τον ειλεό σε αυτό το μοντέλο οξείας χορήγησης AFB1, το οποίο μπορεί να εξηγηθεί από την αντιοξειδωτική δράση του κιστάνιου που βελτίωσε την αντιοξειδωτική ικανότητα του σώματος.40,41]. Το οξειδωτικό στρες εμφανίστηκε όταν η ανισορροπία της οξείδωσης και της αντιοξείδωσης στα σώματα προκαλείται από τις μειώσεις των αντιοξειδωτικών ενζύμων και τις αυξήσεις στα επίπεδα υπεροξείδωσης των λιπιδίων. Το αντιοξειδωτικό ενζυμικό σύστημα συμπεριλαμβανομένων των CAT, GSH-Px και SOD είναι η πρώτη γραμμή άμυνας των κυττάρων έναντι των ελεύθερων ριζών και των αντιδρώντων ειδών οξυγόνου (ROS) και είναι απαραίτητο σε ολόκληρη τη στρατηγική άμυνας των αντιοξειδωτικών στο σώμα.42]. 

Το GST είναι ένα κρίσιμο ένζυμο για τη μείωση των ενεργών ειδών οξυγόνου (ROS) και του οξειδωτικού στρες, προκειμένου να επιτευχθεί αποτοξίνωση για τους οργανισμούς.43]. Όπως φαίνεται στο Σχήμα3, το οξειδωτικό στρες στο πλάσμα και τον ειλεό των πάπιων εμφανίστηκε κατά τη διάρκεια οξείας βλάβης στον ειλεό που προκλήθηκε από τη χορήγηση AFB1. Όπως ήταν αναμενόμενο, η διαιτητική κίστανχη βελτίωσε το οξειδωτικό στρες των σωμάτων αυξάνοντας τις δραστηριότητες των T-SOD, GSH-PX και GSH-ST στο πλάσμα και στον ειλεό μετά τη χορήγηση AFB1. Τα αποτελέσματα αυτής της μελέτης έδειξαν ότι το κιστάνι είναι ένας ισχυρός αντιοξειδωτικός παράγοντας για πάπιες που τρέφονται με χορήγηση AFB1 που μπορεί να εξηγηθεί από την αντιοξειδωτική ικανότητα μέσω της καταστολής της οξείδωσης των λιπιδίων και της αύξησης της αντιοξειδωτικής δραστηριότητας του ενζύμου από το συμπλήρωμα του κιστάνι.8,44,45]. Αυτά τα αποτελέσματα συμβαδίζουν με μια προηγούμενη αναφορά που έδειξε ότι η κιστάνα βελτίωσε την AFB1-προκάλεσε μεταβολή στις δραστηριότητες της γλουταθειόνης, του SOD, του CAT και του MDA [8]. Αυτό μπορεί να οφείλεται στην ικανότητα του cistanche να καθαρίζει τις ελεύθερες ρίζες αποκαθιστώντας τις αντιοξειδωτικές ενζυμικές δραστηριότητες και ανακουφίζοντας το οξειδωτικό στρες.15,46]. Η ισορροπία μεταξύ οξείδωσης και αντιοξείδωσης in vivo ρυθμίστηκε από το T-SOD και το GSH-Px [47]. Το Nrf2 μετατοπίστηκε στον πυρήνα του κυττάρου και συνδυάστηκε με t στοιχείο αντιοξειδωτικής απόκρισης (ARE) και ρύθμισε προς τα πάνω τη μεταγραφή των γονιδίων του αντιοξειδωτικού ενζύμου συμπεριλαμβανομένων των SOD, CAT, GSH-Px, HO-1, NQO-1, GCLC και GCLM [47,48]. Επιπλέον, η GST ρυθμίζεται προς τα πάνω ενεργοποιώντας τον τρόπο σηματοδότησης Nrf2 και ως ένα είδος αποτοξινωτικού ενζύμου φάσης ΙΙ που εμπλέκεται σε διάφορες αποτοξίνωση in vivo για την ανακούφιση από το οξειδωτικό στρες.49,50]. Το οξειδωτικό στρες και η υπεροξείδωση των λιπιδίων ήταν βιοδείκτες για αρουραίους που προκλήθηκαν από τη χορήγηση AFB1 [51,52]. Το οξειδωτικό στρες μειώθηκε από την έκφραση γονιδίων ενεργοποίησης στα μονοπάτια σηματοδότησης Nrf2-ARE, όπως NQO-1, HO-1 και GCLC [40]. Πολυάριθμες έρευνες ανέφερε ότι η έκφραση των γονιδίων που συμπληρώθηκε με το cistanche, συμπεριλαμβανομένων των HO-1, NQO-1, -GCLC, -GCLM, CAT και GPX μέσω ενεργοποίησης Nrf2 σε κοτόπουλα κρεατοπαραγωγής και αρουραίους [40,41] και εξάλειψε ηπατική βλάβη που προκλήθηκε από τη χορήγηση AFB1 [39,53]. 

Τα αποτελέσματα σε αυτή τη μελέτη έδειξαν ότι η χορήγηση AFB1 μπορεί να προκαλέσει βλάβη οξειδωτικού στρες στον ειλεό μέσω της αναστολής της οδού σηματοδότησης Nrf2. Ο διαιτητικός κίστανχος προώθησε εκφράσεις γονιδίων Nrf2, όπως αντιοξειδωτικά γονίδια (CAT, SOD1, GPX1, GST) και γονίδια ενζύμων αποτοξίνωσης φάσης ΙΙ (NQO1, HO-1, GCLC, GCLM), τα οποία απέδειξαν ότι η προσθήκη του κιστάνου στη δίαιτα για Οι πάπιες ανέστειλαν την οξεία βλάβη οξείδωσης του ειλεού που προκαλείται από τη χορήγηση AFB1 μέσω της ενεργοποίησης της οδού σηματοδότησης Nrf2-ARE. NF που ενεργοποιείται από το οξειδωτικό στρεςκΤο μονοπάτι σηματοδότησης Β στη συνέχεια αξιολόγησε περαιτέρω την παραγωγή φλεγμονωδών κυτοκινών.54]. Σε αυτή τη μελέτη, ο τραυματισμός του ειλεού που προκαλείται από τη χορήγηση AFB1 μπορεί να οφείλεται σε φλεγμονή. Η χορήγηση AFB1 μπορεί να προκαλέσει βλάβη στον ειλεό απευθείας μέσω της αυξανόμενης έκφρασης φλεγμονωδών παραγόντων και ενεργοποιώντας άμεσα τη φλεγμονώδη οδό σηματοδότησης. Υπάρχει θετική σχέση μεταξύ του οξειδωτικού στρες και της φλεγμονής στους ιστούς [55]. Οι Ko et al. (2020) ανέφερε ότι το οξειδωτικό στρες ενεργοποιεί το NF-κΤο μονοπάτι σηματοδότησης Β, ρυθμίζει προς τα πάνω τις προφλεγμονώδεις κυτοκίνες και προκάλεσε φλεγμονή στον πνεύμονα αρουραίου [56]. Το NF-κΗ σηματοδότηση B θα μπορούσε να ενεργοποιηθεί από το AFB1 στην κυτταρική σειρά 3D4/21 [57], με αποτέλεσμα μια σειρά από φλεγμονώδεις αντιδράσεις [58]. Kumara et al. (2020) διαπίστωσε ότι η χορήγηση AFB1 προκάλεσε τη φλεγμονώδη αύξηση των επιπέδων των προφλεγμονωδών παραγόντων κυτοκινών, TNF- , IL-12 και IL-6 στον ορό αλμπίνο ποντικών [59]. Η διατροφική έκθεση AFB1 οδήγησε σε γονιδιακή υπερέκφραση του TNF- , IL-1 και IL-6 στο ήπαρ των χοίρων και τα επίπεδα mRNA των φλεγμονωδών παραγόντων (TNF- , IL-12, IL-6) στο συκώτι των χοίρων που τρέφονταν με τη δίαιτα που περιείχε 8 τοις εκατό άλευρο σπόρων σταφυλιού και AFB1 επέστρεψε στα επίπεδα ελέγχου [60]. Τα επίπεδα του TNF- , IL-6 και IL-1 στο ήπαρ αρουραίων με ενδομήτρια επιβράδυνση της ανάπτυξης ήταν αυξημένα, τα οποία στο ήπαρ αρουραίων IUGR που τρέφονταν με κίστανσο 400 mg kg−1 η δίαιτα επέστρεψε στο επίπεδο ελέγχου των αρουραίων με φυσιολογικό βάρος γέννησης [38]. Η ενεργοποίηση του NF-κΗ οδός σηματοδότησης Β ρυθμίζει προς τα πάνω την έκφραση γονιδίων (NLRP3 και Κασπάση-1), η οποία προάγει την IL-1 και ωρίμανση και έκκριση IL-18 και πυροδότησε μια φλεγμονώδη απόκριση [61]. Τα αποτελέσματα σε αυτή τη μελέτη έδειξαν ότι η χορήγηση AFB1 αξιολόγησε σημαντικά τη γονιδιακή έκφραση των παραγόντων φλεγμονής στον ειλεό των πάπιων και η διατροφική κίστανα ανέστειλε αυτή τη γονιδιακή έκφραση, σε συμφωνία με μια μελέτη ότι η ενεργοποίηση της οδού σηματοδότησης NLRP3 από το AFB1 σε αρουραίους [40]. Προηγούμενα αποτελέσματα έδειξαν ότι το cistanche είχε την ικανότητα να αναστέλλει την έκφραση της πρωτεΐνης NLRP3 μέσω της καταστολής της κασπάσης-1 και της IL-1 [29]. Έτσι, τα αποτελέσματα αυτής της μελέτης αποκάλυψαν ότι το κιστάνι μπορεί να είναι ένα από τα πολλά υποσχόμενα πρόσθετα ζωοτροφών για την ανακούφιση από φλεγμονή στον ειλεό και βλάβη στον ειλεό που προκαλείται από τη χορήγηση AFB1 αναστέλλοντας το NF-κΒ διαδρομή σηματοδότησης

5. Συμπεράσματα

Συμπερασματικά, η χορήγηση AFB1 προκάλεσε τραυματισμό ειλεού, οξειδωτικό στρες και φλεγμονή μέσω της αναστολής της έκφρασης των κατάντη γονιδίων του μονοπατιού σηματοδότησης Nrf2-ARE και της ενεργοποίησης γονιδιακής έκφρασης των κατάντη γονιδίων του NF-κΒ διαδρομή σηματοδότησης. Ωστόσο, η διαιτητική σιτάνη βελτίωσε σημαντικά τη βλάβη του ειλεού, το οξειδωτικό στρες και τη φλεγμονή των πάπιων που προκαλείται από τη χορήγηση AFB1, πιθανώς λόγω της ενεργοποίησης του Nrf2-ARE και της αναστολής του NF-κΔιαδρομή σηματοδότησης Β (Εικόνα6). Τα αποτελέσματα αυτής της μελέτης παρείχαν ισχυρές ενδείξεις ότι η διαιτητική κιστάνα είναι μια αποτελεσματική πρόσθετη τροφή για την προστασία του ειλεού από οξεία βλάβη που προκαλείται από τη χορήγηση AFB1 μέσω της ενεργοποίησης του Nrf2-ARE και της αναστολής του NF-κΒ διαδρομή σηματοδότησης.