Προσδιορισμός των φαρμάκων που ενισχύουν το φύλο που προστίθενται παράνομα στα προϊόντα υγείας από την TLC-NIRS συνδυασμένη τεχνολογία

Περίληψη:Για την καθιέρωση του μοντέλου ανίχνευσης τουφάρμακα που ενισχύουν το φύλοΠαράνομα προστιθέμενη από τη συνδυασμένη τεχνολογία της χρονικής και της ποσοτικής ανάλυσης των φαρμάκων που προστέθηκαν παράνομα προστίθενται παράνομα σε φάρμακαπροϊόντα υγειονομικής περίθαλψης． ΜεE περιεχόμενο χημικών φαρμάκωνστα προϊόντα υγειονομικής περίθαλψης καθορίζεται από τη μέθοδο HPLC ως τιμή αναφοράς． Η TLC χρησιμοποιήθηκε στη μελέτη． Χρησιμοποιήθηκε υδροξείδιο τριχλωρομεθάνης-μεθυλικού αλκοόλ-αμμονίου (1 0 ∶ 1 ∶ 0． 1) Χρησιμοποιήθηκε ως αναπτυσσόμενος διαλύτης και η πλάκα ανιχνεύθηκε κάτω από ένα υπεριώδες λάμπα． Το φάσμα των σημείων χημικών συστατικών στο TLC συλλέχθηκε από τα NIRS． Το γρήγορο ποιοτικό και ποσοτικό μοντέλο χημικών φαρμάκων δημιουργήθηκε με τη χρήση της ανάλυσης μερικής ελάχιστης παλινδρόμησης (PLS) σε συνδυασμό με τη μέθοδο διασταυρούμενης επικύρωσης． Και επικυρώθηκε για το μοντέλο． Καθιέρωσε τη μέθοδο ανάλυσης HPLC με βαθμό καλύτερου βαθμού διαχωρισμού και ευρεία γραμμική περιοχή． Καθιέρωσε τα μοντέλα ανάλυσης TLC-NIS των sildenafil και noracetildenafil με ευρύ γραμμικό εύρος και τα καλύτερα σταθερά και προβλεπόμενα αποτελέσματα． Ο συντελεστής συσχέτισης (rR2), το μέσο τετραγωνικό σφάλμα της επικύρωσης βαθμονόμησης (rMSCV) και το μέσο τετραγωνικό σφάλμα της πρόβλεψης (rMSEP) ήταν {{1 0}．． 984, 0． 0 85 και 0． 081; 0． 982,0． 098 και 0． 087, αντίστοιχα． Χρησιμοποιώντας το μοντέλο TLC-NIS, 9 παρτίδες σε 10 παρτίδες προϊόντων ενίσχυσης του φύλου ανιχνεύθηκαν για να προστεθούν το sildenafil και ένας ανεπιφύλακτος ποσοστός 90%, η μέση σχετική απόκλιση της περιεκτικότητας σε sildenafil και noracetildenafil του προβλεπόμενου ήταν 1． 86%, 1． 96%, αντίστοιχα． Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι τα μοντέλα ανάλυσης TLC-NIRS μπορούν να χρησιμοποιηθούν για τα παραπάνω χημικά συστατικά ταχεία προσδιορισμός στα προϊόντα που ενισχύουν το φύλο． Η μέθοδος με συγκεκριμένη και απλή． Η οποία παρείχε τις ιδέες για την ταχεία αποφασιστικότητα των προστιθέμενων παράνομων ναρκωτικών στα προϊόντα υγειονομικής περίθαλψης．

 

Φυσικά συμπληρώματα βοτάνων cistanche για σεξουαλική απόδοση

 

Λέξεις -κλειδιά: προϊόντα υγειονομικής περίθαλψης; προστέθηκε παράνομα. Tlc-nirs; HPLC; προϊόν ενίσχυσης του φύλου

 

Καθώς η συνειδητοποίηση του κοινού για την υγειονομική περίθαλψη αυξάνεται, η ζήτηση για προϊόντα υγείας αυξάνεται, ειδικά τα προϊόντα υγείας που χαρακτηρίζονται ως παραδοσιακή κινεζική ιατρική. Τα προϊόντα υγείας είναι ένας δημοφιλής όρος για τα τρόφιμα για την υγεία, τα οποία ονομάζονται συμπληρώματα διατροφής στο εξωτερικό. Δεν είναι φάρμακα και έχουν τη λειτουργία της ρύθμισης των ανθρώπινων λειτουργιών. Χρησιμοποιούνται από συγκεκριμένες ομάδες ανθρώπων, αλλά δεν προορίζονται για τη θεραπεία ασθενειών [1]. Αντιμέτωποι με τον πειρασμό των υψηλών κερδών, οι παράνομοι προμηθευτές προσθέτουν υπερβολικές δόσεις φθηνών χημικών πρώτων υλών με προφανείς παρενέργειες στα προϊόντα υγείας για την ενίσχυση της αποτελεσματικότητας των προϊόντων. Αυτό έχει διαταράξει σε μεγάλο βαθμό την αγορά προϊόντων υγείας της χώρας μου και αποτελούσε σοβαρή απειλή για την υγεία του λαού. Για παράδειγμα, το 2009, το βοηθητικό υπογλυκαιμικό προϊόν υγείας της περιοχής Xinjiang "Tangzhining Capsule" πρόσθεσε υπερβολικές δόσεις του απαγορευμένου χημικού φαρμάκου Glibenclamide, προκαλώντας πολλούς θανάτους. Το 2014, η "κάψουλα απώλειας βάρους της Xianxian" στην επαρχία Shanxi πρόσθεσε τα απαγορευμένα χημικά φάρμακα sibutramine και sildenafil, προκαλώντας πολλούς ανθρώπους να έχουν ανεπιθύμητες αντιδράσεις ή ακόμα και να πεθάνουν. Τα τελευταία χρόνια, στην τυχαία επιθεώρηση και αξιολόγηση των προϊόντων υγείας, διαπιστώθηκε ότι οι παράνομοι κατασκευαστές πρόσθεσαν υπερβολικές δόσεις sildenafil σε προϊόντα σεξουαλικής υγείας και παραδοσιακές προετοιμασίες για την υγεία της κινεζικής ιατρικής για την εξαπάτηση των καταναλωτών, θέτοντας σε κίνδυνο την υγεία των καταναλωτών [2,3]. Παρόμοια φαινόμενα όπως οι υπερβολικές δόσεις απαγορευμένων χημικών φαρμάκων όπως η φαιναφίλη, τα biguanides, η φουροσεμίδη και η φαινολοφθαλεΐνη στη σεξουαλική υγεία, η υπογλυκαιμική και η απώλεια βάρους, τα προϊόντα υγείας έχουν προκύψει σε ένα ατελείωτο ρεύμα και η απόκρυψη της προσθήκης γίνεται όλο και μεγαλύτερη [4,5]. Τέτοια φαινόμενα εμφανίζονται επίσης συχνά στο εξωτερικό [6]. Αυτές οι παράνομες πράξεις με ευρύτατη επίδραση και μεγάλη ζημιά αξίζουν βαθιά εξέταση από τις ρυθμιστικές αρχές των ναρκωτικών και είναι ιδιαίτερα σημαντικό να αναπτυχθούν ταχεία μεθόδους δειγματοληψίας και ανίχνευσης.

Επί του παρόντος, οι μέθοδοι ανίχνευσης που χρησιμοποιούνται για την παράνομη προσθήκη χημικών φαρμάκων στα παραδοσιακά κινεζικά φάρμακα και τα προϊόντα υγείας περιλαμβάνουν κυρίως χρωματογραφία λεπτής στρώματος (TLC) [7], υγρή χρωματογραφία υψηλής απόδοσης (HPLC) [IMS) και RAMANT (IMS-MS) [HPLC). [11].
Μεταξύ των διαφόρων μεθόδων ανίχνευσης που αναφέρθηκαν, οι LC-MS, GC-MS και IMS έχουν μελετηθεί περισσότερο, αλλά λόγω της υψηλής τιμής των οργάνων και της σύνθετης επιχείρησης, δεν είναι εύκολο να προωθηθούν και είναι δύσκολο να διαδοθούν σε αστικές και ορεινές περιοχές με σχετικά καθυστερημένη οικονομική ανάπτυξη. Το TLC είναι μία από τις τέσσερις παραδοσιακές μεθόδους αναγνώρισης φαρμάκων. Είναι γρήγορο, απλό και έχει καλά αποτελέσματα διαχωρισμού. Χρησιμοποιείται ευρέως στην ποιοτική και ποσοτική ταυτοποίηση των φαρμάκων. Ωστόσο, το μειονέκτημα του είναι ότι πρέπει να έχει αντίστοιχες ουσίες αναφοράς ή φαρμακευτικά υλικά αναφοράς [12, 13]. Η φασματοσκοπία της υπέρυθρης ακτινοβολίας (NIRS) έχει αναπτυχθεί τα τελευταία χρόνια. Συλλέγει τις πληροφορίες απορρόφησης δόνησης και περιστροφής των CH, OH, SH, NH, C=C και C=Ο ομάδες της ανιχνευόμενης ουσίας στο φάσμα εγγύς υπέρυθρων για ποιοτική και ποσοτική ανάλυση των ουσιών. Χρησιμοποιείται ευρέως στη γεωργία, το πετρέλαιο, τη χημική βιομηχανία, τον καπνό και τα τρόφιμα. Επί του παρόντος, έχει εφαρμοστεί σταδιακά στις βιομηχανίες φαρμακευτικής και εποπτείας για τα ναρκωτικά. Έχει μεγάλο αναπτυξιακό δυναμικό στην ταχεία ποιοτική και ποσοτική ανίχνευση και ανάλυση των φαρμάκων [14, 15].

Ως εκ τούτου, το παρόν έγγραφο χρησιμοποιεί τα υπάρχοντα δημοφιλή όργανα και τις μεθόδους δοκιμής για τη δημιουργία συνδυασμένης τεχνολογίας TLC-NIRS. Λαμβάνοντας τα προϊόντα σεξουαλικής υγείας ως παράδειγμα, δημιουργείται ένα καθολικό ποιοτικό και ποσοτικό μοντέλο ανίχνευσης για την παράνομη προσθήκη απαγορευμένων χημικών φαρμάκων για τη σεξουαλική υγεία. Μπορεί να χρησιμοποιηθεί αποτελεσματικά, γρήγορα και απλά για τον έλεγχο και την ανίχνευση της προσθήκης απαγορευμένων χημικών φαρμάκων στα προϊόντα υγείας της αγοράς, μειώνοντας έτσι το κόστος ανίχνευσης.

1 όργανα και φάρμακα δοκιμής

1.1 όργανα

Fourier μετασχηματιστή Tensor 37 Nir Spectometer (Bruker, Γερμανία), Opus 5. 0 Λογισμικό ανάλυσης. LC -20 σε υγρή χρωματογραφία υψηλής απόδοσης (Shimadzu, Ιαπωνία), LC Solution Chromatography Station. BS224S Ηλεκτρονική αναλυτική ισορροπία (Sartorius, Γερμανία); Silica Gel GF254 Πλάκα λεπτού στρώματος (Qingdao Ocean Biochemical Co., Ltd.).

 

1.2 Δοκιμάστε φάρμακα

Το Sildenafil (510068-201401, το 99,9%) και το narodenafil (520039-201902, το 96,5%) αγοράστηκαν από το Ινστιτούτο Έρευνας Τροφίμων και Ναρκωτικών και οι δομές παρουσιάζονται στο Σχήμα 1. Τα δείγματα υγείας ήταν δείγματα αγοράς.

 

Σχήμα 1 Δομές χημικών φαρμάκων που ενισχύουν το φύλο

 

2 μέθοδοι και αποτελέσματα

2. 1 Παρασκευή διαλύματος αναφοράς και διαλύματος δείγματος

Παρασκευή διαλύματος αναφοράς: Πάρτε περίπου 25 mg sildenafil και narendenafil αντίστοιχα, ζυγίστε με ακρίβεια, τοποθετήστε τα σε ογκομετρική φιάλη 5 ml και διαλύστε τα σε μεθανόλη για να παρασκευάσετε ένα μικτό απόθεμα αναφοράς περίπου 5 mg/ml το καθένα. Στη συνέχεια, πάρτε περίπου 5 mg sildenafil και narendenafil αντίστοιχα, ζυγίστε τους με ακρίβεια, τοποθετήστε τα σε ογκομετρική φιάλη 5 ml και διαλύστε τα σε μεθανόλη για να παρασκευάσετε ένα μόνο διάλυμα αναφοράς αναγνώρισης περίπου 1 mg/ml το καθένα.

Προετοιμασία του διαλύματος δείγματος: Πάρτε τη δόση αυτού του προϊόντος μία φορά, τοποθετήστε το σε μια ογκομετρική φιάλη 5 ml, προσθέστε μεθανόλη και υπερηχόσια για 3 0 min (100 W, 56 kHz), ψύξτε το, προσθέστε μεθανόλη στο σημάδι και φιλτράρετε για να αποκτήσετε το διήθημα. Κατά τον προσδιορισμό του περιεχομένου, μετρήστε με ακρίβεια 1 ml κάθε διαλύματος δείγματος, διαλύστε το στην κινητή φάση σε 25 ml και φιλτράρετε με μεμβράνη φίλτρου 0,45 μm. Δεδομένου ότι οι συγκεντρώσεις μάζας των συστατικών που ανιχνεύονται στα θετικά δείγματα (τα προϊόντα υγείας με απαγορευμένα χημικά φάρμακα προστίθενται) ποικίλλουν σε μεγάλο βαθμό, ο όγκος δειγματοληψίας μπορεί να αυξηθεί κατάλληλα ή το διάλυμα του δείγματος να μπορεί να αραιωθεί κατάλληλα για να γίνει η τελική συγκέντρωση μάζας εντός του γραμμικού εύρους.
Παρασκευή θετικού διαλύματος δείγματος: Δεδομένου ότι δεν παραλήφθηκε θετικό δείγμα για το Naringenfil, προστέθηκε ένα κενό δείγμα (Huangjingbajitian κάψουλα, βιολογία Luoyang Kangti, το αποτέλεσμα της δοκιμής ήταν αρνητικό). Το θετικό διάλυμα δείγμα παρασκευάστηκε σύμφωνα με τη μέθοδο παρασκευής κάτω από το διάλυμα δείγματος, έτσι ώστε οι συγκεντρώσεις μάζας του Naringenfil στο θετικό διάλυμα δείγματος να ήταν περίπου 5, 7,5 και 10 mg/ml, αντίστοιχα και 4, 3 και 3 αντίγραφα κάθε συγκέντρωσης μάζας παρασκευάστηκαν παράλληλα.

2. 2 Χρωματογραφικές και φασματικές συνθήκες

2. 2. 1 Χρωματογραφικές συνθήκες HPLC

Χρησιμοποιήθηκε χρωματογραφική στήλη φαινομένου C18 (25 0 mm × 4. 6 mm, 5μm). 45% μεθανόλη (α) -55% 0. 3% υδατικό διάλυμα φωσφορικού οξέος (b) χρησιμοποιήθηκε ως κινητής φάση για έκλουση για 30 λεπτά. Ο ρυθμός ροής ήταν 1 ml/min, το μήκος κύματος ανίχνευσης ήταν 290 nm. Η θερμοκρασία της στήλης ήταν 40 βαθμοί. Ο όγκος έγχυσης ήταν 10 μΐ.

 

2. 2. 2 TLC χρωματογραφικές συνθήκες

Χρησιμοποιήθηκε πλάκα χρωματογραφίας λεπτού στρώματος πυριτίου GF254 και χρησιμοποιήθηκε αμμωνία χλωροφορμίου-μεθανόλης (1 0: 1: 0.1) ως αναπτυσσόμενος διαλύτης για ανάπτυξη και εξάτμιση. Μετά από ξήρανση σε στεγνωτήριο για 1 ώρα, το σήμα επιθεωρήθηκε κάτω από λάμπα υπεριώδους 254 nm (βλ. Εικόνα 2).

 

2.

Ο ανιχνευτής στερεών ινών Bruker NIRS χρησιμοποιήθηκε για μέτρηση, με εύρος κύματος 12, 000 έως 4, 000 cm -1, 64 σαρώσεις, ανάλυση 16 cm -1, θερμοκρασία 10 έως 30 βαθμού και υγρού 35% ± 5%. Χρησιμοποιήθηκε μια κενή πλάκα λεπτού στρώματος GF254, και το φάσμα συλλέχθηκε μετά την αφαίρεση του υποβάθρου. Κάθε σημείο χημικών συστατικών μετρήθηκε παράλληλα 5 φορές και οι πληροφορίες NIRS αποθηκεύτηκαν.

 

2.3 Εγκατάσταση της μεθόδου προσδιορισμού περιεχομένου HPLC

2.3.1 Διερεύνηση γραμμικής σχέσης

2. 0 ml του μικτού διαλύματος αποθεμάτων αναφοράς (sildenafil 5.25 mg/ml, ναρκοληψία 5.15 mg/ml) ήταν με ακρίβεια αναρρόφηση και αραιωμένη σε 1 {7} ml με μεθανόλη και στη συνέχεια {9}} 25, {11}}} { 1 0, 1.5, 2. 7 {{4 0}, 8. 0, 9. 0, 1 0. 13 {0}}, 15. {64}}, 16. 0, 17. {68}}, 18. 2 0. 0, 21. 26 0, 27 0, 28 0, 29 {{1 {{1 {{1 {{1 {108}} 6}}} 4}}} 0}, 30.0, 31.0, 32.0, 34.0 36.0, 37.0, 38.0, 39.0, 40.0, 41.0, 42.0, 43.0, 44.0, 5 ml, διαλύονται σε κινητή φάση και συνθέτουν έως και 5 ml αντίστοιχα, ανακινήστε καλά.
Σύμφωνα με τις χρωματογραφικές συνθήκες κάτω από το "2.2.1", πραγματοποιήθηκε ανάλυση δείγματος, προσδιορίστηκε η περιοχή κορυφής και η εξίσωση γραμμής παλινδρόμησης υπολογίστηκε με την επιφάνεια αιχμής κάθε συστατικού ως τεταγμένη (y) και η συγκέντρωση μάζας της ουσίας αναφοράς ως abscissa (x): sildenafil είναι y {3}} × 1 {}}=0. 9989, γραμμική περιοχή 0. 0525 ~ 1.05 ug; Το naphthol είναι y=1 × 106x -3 184. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι οι παραπάνω ουσίες αναφοράς είχαν καλή γραμμικότητα εντός των αντίστοιχων γραμμικών περιοχών τους.

 

2.3. 2 Δοκιμή ακρίβειας, σταθερότητας, επαναληψιμότητας και ανάκτησης

Πάρτε το μικτό διάλυμα αναφοράς κάτω από το "2.3.1" και το κενό δείγμα (Huangjingbajitian κάψουλα, Luoyang Kangti Biological, το αποτέλεσμα της δοκιμής είναι αρνητικό) και προετοιμάστε 6 δείγματα διαλύματα που περιέχουν sildenafil και nardenafil παράλληλα σύμφωνα με τη μέθοδο κάτω από το "2.1". Σύμφωνα με τις χρωματογραφικές συνθήκες κάτω από το "2.2.1", το μικτό διάλυμα αναφοράς εγχύθηκε 6 φορές συνεχώς για ακρίβεια. Ένα από τα διαλύματα δείγματος εγχύθηκε στο {{10}, 3, 6, 9, 12 και 24 ώρες για σταθερότητα. 6 δείγματα διαλύματα παρασκευάστηκαν παράλληλα για επαναληψιμότητα και ανάκτηση και κάθε δείγμα εγχύθηκε μία φορά. Οι περιοχές αιχμής του sildenafil και της nardenafil προσδιορίστηκαν και η ανάκτηση και η τιμή RSD της υπολογίστηκαν. Αποτελέσματα Οι μέσοι ρυθμοί ανάκτησης των sildenafil και nardenafil ήταν 100, 16%, 100, 49%. Οι τιμές RSD ήταν όλες μικρότερες από 3% (n=6), υποδεικνύοντας ότι το όργανο είχε καλή ακρίβεια, η λύση δείγματος ήταν σταθερή εντός 24 ωρών και η μέθοδος είχε καλή ανάκαμψη και επαναληψιμότητα.

 

2.3.3 Προσδιορισμός περιεχομένου

Ακαδημία αναζωογονήστε κάθε διάλυμα δείγματος, εισάγετε και αναλύστε σύμφωνα με τις χρωματογραφικές συνθήκες κάτω από το "2.2.1", μετρήστε 3 φορές για κάθε παρτίδα, καταγράψτε την περιοχή αιχμής και υπολογίστε το περιεχόμενο. Τα αποτελέσματα δείχνουν ότι μεταξύ των 10 παρτίδων των δειγμάτων σεξουαλικής υγείας, 9 παρτίδες βρέθηκαν να περιέχουν το απαγορευμένο χημικό φάρμακο sildenafil και η προστιθέμενη δοσολογία ποικίλλει σε μεγάλο βαθμό. Ο ρυθμός ανίχνευσης ήταν 90%. Τα αποτελέσματα παρουσιάζονται στον Πίνακα 1 και στο Σχήμα 3.

 

Πίνακας 1 Αποτελέσματα προσδιορισμού ουσιών που προστέθηκαν παράνομα σε 10 προϊόντα ενίσχυσης του φύλου (n=3)

 

Δείγμα	Κατασκευαστής	Δείγμα βάρους	Περιεχόμενο (mg/Ώρα)
Εκχύλισμα λουλουδιών χρυσού	Γεωργικό πανεπιστήμιο της Δυτικής Κίνας	1 × 0.88 g	58.79 ± 1.03
Εντομοαπωθητικός	Χονγκ Κονγκ Πανεπιστημίου Επιστήμης και Τεχνολογίας	2 × 0.50 g	73.62 ± 0.21
Χαμομήλι	Haiyun βιολογικό	2 × 0.50 g	22.47 ± 0.23
Νωρίς το πρωί δροσιά	Χονγκ Κονγκ Πανεπιστημίου Επιστήμης και Τεχνολογίας	2 × 0.50 g	8.90 ± 0.03
Πίκρα	ΗΠΑ Habitat	2 × 0.50 g	61.83 ± 0.48
Α. Νίγηρας	Γεωργικό πανεπιστήμιο της Δυτικής Κίνας	2 × 0.50 g	45.20 ± 0.04
Χρυσό νήμα	Χονγκ Κονγκ Πανεπιστημίου Επιστήμης και Τεχνολογίας	2 × 0.50 g	Δεν ανιχνεύεται

 

Εικ. 3 HPLC 10 προϊόντων ενίσχυσης του φύλου

 

2.4 Δημιουργία ποιοτικού μοντέλου TLC-NIRS για χημικά φάρμακα σεξουαλικής υγείας

2.4.1 Συλλογή φασματικών πληροφοριών

Σύμφωνα με τις συνθήκες κάτω από το "2.2.3", συλλέχθηκαν οι NIRs των σημείων αναφοράς που εντοπίστηκαν μετά την ανάπτυξη στην πλάκα λεπτού στρώματος TLC αντίστοιχα. Οι όγκοι των σημείων του μικτού διαλύματος αναφοράς ήταν 1, 2, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45 και 50 μΐ και οι όγκοι του διαλύματος του δείγματος ήταν 2, 5 και 10 μΐ αντίστοιχα. Κάθε σημείο αναφοράς της μικτής αναφοράς και του δείγματος με διαφορετικούς όγκους σημείων συλλέχθηκε 5 φορές και το διάγραμμα επικάλυψης NIRS παρουσιάζεται στο Σχήμα 4. Στο πείραμα, τα φάσματα της ανάμικης αναφοράς με διαφορετικούς όγκους σημείων επιλέχθηκαν ως το σύνολο βαθμονόμησης και τα φάσματα των φάσματος των δειγμάτων με διαφορετικούς όγκους σημείων επιλέχθηκαν ως το σύνολο των φασματικών πληροφοριών.

Εικ. 4 Πρωτότυπα φάσματα NI των χημικών φαρμάκων