Επιδράσεις βελτιστοποίησης και βελτίωσης του ύπνου ενός εκχυλίσματος ποτών Congrong-Zaoren-Wumei σε ποντίκια

2 Αποτελέσματα και Ανάλυση

2.1 Βελτιστοποίηση της διαδικασίας προετοιμασίας για το εκχύλισμα ποτών Congrong–Zaoren–Wumei

 

Από το Σχήμα 1, η καθιερωμένη μέθοδος HPLC πέτυχε αποτελεσματικό διαχωρισμό μεταξύ των χρωματογραφικών κορυφών των τεσσάρων ενώσεων αναφοράς-κιτρικού οξέος, εχινακοσίδης, βερμπασκοσίδης και σπινοσίνης-και παρακείμενων κορυφών. Οι χρόνοι συγκράτησης ήταν tR1=9.0 λεπτά, tR2=21.6 λεπτά, tR3=24.3 λεπτά και tR4=25.9 λεπτά, αντίστοιχα. Οι γραμμικές παλινδρομήσεις του εμβαδού κορυφής έναντι της συγκέντρωσης της αναλυόμενης ουσίας απέδωσαν γραμμικά εύρη 12,12–2016, 0,14–110, 0,18–112,50 και 2,44–18,30 μg·mL–1, με τιμές R2 0,9998 και άριστες ενδείξεις, 1, 1. Υπό αυτές τις συνθήκες, τα όρια ανίχνευσης (LOD) για το κιτρικό οξύ, την εχινακοσίδη, τη βερμπασκοσίδη και τη σπινοσίνη ήταν 3,636, 0,045144, 0,058 και 0,7564 μg·mL–1 και τα όρια ποσοτικοποίησης (LOQ) ήταν 12,12, 2,4, 0,1. μg·mL–1, αντίστοιχα. Οι δοκιμές ακριβείας έδειξαν RSD 0,10%, 0,07%, 0,06% και 0,33% για τις τέσσερις αναλυόμενες ουσίες, υποδεικνύοντας καλή ακρίβεια οργάνου. Η σταθερότητα στις 0–12 ώρες ήταν καλή, με RSD 0,78%, 0,16%, 0,20% και 1,46%. Οι δοκιμές επαναληψιμότητας παρήγαγαν RSD 0,51%, 0,42%, 0,37% και 0,38% για τις αναλυόμενες ουσίες, επιδεικνύοντας καλή επαναληψιμότητα. Οι δοκιμές ανάκτησης αιχμής έδειξαν μέση ανάκτηση 97,42%, 103,32%, 98,90% και 99,71%, με RSD 0,70%, 0,52%, 1,05% και 0,63% αντίστοιχα. Επομένως, η μέθοδος HPLC που καθιερώθηκε για τον ταυτόχρονο προσδιορισμό αυτών των τεσσάρων κύριων συστατικών είναι ακριβής και αξιόπιστη, κατάλληλη για επακόλουθες δοκιμές βελτιστοποίησης της διαδικασίας.

 

 

 

 

Εικ. 1 Χρωματογραφήματα HPLC της αναφοράς και των διαλυμάτων σε μήκος κύματος 210 nm (Α) και μήκος κύματος 330 nm (Β και Γ)

 

Στη μεθοδολογική αξιολόγηση των ακατέργαστων πολυσακχαριτών, το LOD ήταν 0,098 μg·mL–1. Οι τιμές OD του τυφλού διαλύτη και του τυφλού ελέγχου στα 485 nm δεν έδειξαν εμφανείς αλλαγές, υποδεικνύοντας καλή ειδικότητα. Η γραμμική παλινδρόμηση της OD έναντι της συγκέντρωσης έδωσε R2=0.9997, υποδεικνύοντας εξαιρετική γραμμικότητα. Το RSD για έξι διαδοχικές μετρήσεις ήταν 0,47%, επιδεικνύοντας καλή ακρίβεια. Η RSD για την περιεκτικότητα σε πολυσακχαρίτες εντός 12 ωρών ήταν 0,44%, υποδηλώνοντας καλή σταθερότητα. Το RSD σε έξι ανεξάρτητα παρασκευασμένα δείγματα ήταν 2,51%, υποδηλώνοντας καλή επαναληψιμότητα. Ως εκ τούτου, η μέθοδος είναι κατάλληλη για τον ποσοτικό προσδιορισμό των ακατέργαστων πολυσακχαριτών κατά τη βελτιστοποίηση της διαδικασίας.

 

 

Τα οφέλη του Cistanche Roucongrong στο Ancient Book

Κάντε κλικ για περισσότερες λεπτομέρειες

Υποστήριξη της Wecistanche-Για περισσότερες λεπτομέρειες σχετικά με τη συνεργασία
Διεύθυνση ηλεκτρονικού ταχυδρομείου:wallence.suen@wecistanche.com

 

 

2.1.2 Αποτελέσματα Ερευνών ενός Παράγοντα

Χρησιμοποιώντας την καθιερωμένη μέθοδο HPLC σε συνδυασμό με τη δοκιμασία πολυσακχαρίτη και λαμβάνοντας τα περιεχόμενα κιτρικού οξέος, εχινακοσίδης, βερμπασκοσίδης, σπινοσίνης και πολυσακχαριτών στο εκχύλισμα ως δείκτες αξιολόγησης, διεξήχθησαν μονοπαραγοντικές έρευνες στη θερμοκρασία εκχύλισης, την αναλογία στερεού-υγρού και τον χρόνο εκχύλισης για να υποστηριχθεί ο ορθογώνιος σχεδιασμός.

Σε θερμοκρασίες εκχύλισης 60, 80 και 100 βαθμών, τα περιεχόμενα κιτρικού οξέος, εχινακοσίδης, βερμπασκοσίδης, σπινοσίνης και ακατέργαστων πολυσακχαριτών στα εκχυλίσματα αυξήθηκαν με τη θερμοκρασία.

Σε αναλογίες στερεού-υγρού 1:3, 1:5, 1:7, 1:10 και 1:12 (g·mL-1), τα περιεχόμενα σε κιτρικό οξύ, σπινοσίνη και ακατέργαστους πολυσακχαρίτες αυξήθηκαν με υψηλότερες αναλογίες. Η εχινακοσίδη και η βερμπασκοσίδη κορυφώθηκαν στο 1:10 (g·mL–1) και μειώθηκαν στο 1:12 (g·mL–1). Ωστόσο, το συνολικό περιεχόμενο όλων των συστατικών του δείκτη αυξήθηκε με την αναλογία στερεού-υγρού.

Σε χρόνους εκχύλισης 0,5, 1,0, 1,5, 2,0 και 3,0 ωρών, τα περιεχόμενα των μεμονωμένων αναλυτών διέφεραν διαφορετικά, αλλά η συνολική περιεκτικότητα των συστατικών δεικτών αυξήθηκε με το χρόνο.

Αναλυτικά στοιχεία παρέχονται στα Συμπληρωματικά Υλικά. Λαμβάνοντας υπόψη τη βιομηχανική πρακτικότητα (αποφυγή της υπερβολικά μεγάλης εξαγωγής), οι παράγοντες και τα επίπεδα για την ορθογώνια σχεδίαση ορίστηκαν όπως στον Πίνακα 2 και το ορθογώνιο σχήμα φαίνεται στον Πίνακα 3.

Πίνακας 2. Επίπεδα παραγόντων ορθογώνιου πειραματικού σχεδιασμού για τη μέθοδο εκχύλισης του ποτού Congrong–Zaoren–Wumei

Παράγοντες:

Α: Θερμοκρασία εξαγωγής (βαθμός)

Β: Αναλογία στερεού-υγρού (g mL–1)

Γ: Χρόνος εξαγωγής (h)

Επίπεδο	Α: Θερμοκρασία (βαθμός)	B: Αναλογία (g mL–1)	Γ: Ώρα (h)
1	60	1:7	1.0
2	80	1:10	1.5
3	100	1:12	2.0

2.1.3 Αποτελέσματα ορθογωνικής σχεδίασης

Η εκχύλιση πραγματοποιήθηκε ανά την ορθογώνια διάταξη. Τα περιεχόμενα κιτρικού οξέος, εχινακοσίδης, βερμπασκοσίδης, σπινοσίνης και ακατέργαστων πολυσακχαριτών φαίνονται στον Πίνακα 3. Με βάση την ανάλυση εύρους (R), η σειρά επιρροής των παραγόντων στη συνολική περιεκτικότητα δείκτη ήταν A > B > C, δηλαδή θερμοκρασία εκχύλισης > αναλογία στερεού-υγρού > χρόνος εκχύλισης. Η σύγκριση των τιμών k πρότεινε τον βέλτιστο συνδυασμό A3B3C3: θερμοκρασία εκχύλισης 100 μοίρες, αναλογία στερεού-υγρού 1:12 (g·mL-1) και χρόνος εκχύλισης 2 ώρες. Η ANOVA (Πίνακας 4) έδειξε ότι η θερμοκρασία εκχύλισης είχε σημαντική επίδραση στο συνολικό περιεχόμενο δείκτη, ενώ οι επιδράσεις της αναλογίας στερεού-υγρού και του χρόνου δεν ήταν σημαντικές.

Πίνακας 3. Ορθογώνιος πειραματικός σχεδιασμός και μετρημένα περιεχόμενα συστατικών του ποτού Congrong–Zaoren–Wumei (mg g–1)

Συντελεστές: A (θερμοκρασία), B (λόγος στερεού-υγρού), C (χρόνος)

Trial No.	A	B	C	Συνολικοί δείκτες	Κιτρικό οξύ	Σπινοσίνη	Εχινακοσίδη	Βερμπασκοσίδη	Ακατέργαστοι πολυσακχαρίτες
1	3	3	1	116.71	75.55	4.08	1.62	0.48	34.98
2	1	2	3	70.98	59.01	2.60	0.80	0.36	8.22
3	3	1	3	117.86	73.87	3.53	1.21	0.45	38.80
4	1	3	2	72.55	59.73	2.37	0.94	0.41	9.99
5	2	3	3	83.64	63.20	2.15	1.08	0.44	16.77
6	2	1	2	117.76	74.09	2.58	1.37	0.48	39.24
7	2	2	1	110.74	70.96	2.36	1.07	0.43	35.92
8	2	1	1	69.63	58.37	1.74	0.54	0.34	8.65
9	1	1	3	69.66	58.14	2.48	0.86	0.36	7.83

K στατιστικά (άθροισμα συνόλων ανά επίπεδο παράγοντα)

K1: A = 71.06, B = 85.72, C = 85.49

K2: A = 74.46, B = 86.29, C = 86.65

K3: A = 117.44, B = 90.97, C = 90.83

Εύρος R: A=46.38, B=5.25, C=4.19

2.1.4 Επικύρωση και Κλιμάκωση

Η επικύρωση της διαδικασίας υπό τις βέλτιστες συνθήκες απέδωσε μια μέση συνολική περιεκτικότητα σε συστατικά δείκτη 119,74 mg·g–1 με RSD 0,57%, υποδεικνύοντας σταθερότητα και αξιοπιστία. Η δοκιμή κλιμάκωσης κάτω από τις ίδιες συνθήκες έδωσε μια μέση συνολική περιεκτικότητα δείκτη 120,89 mg·g–1 με RSD 0,95%, σύμφωνα με τα αποτελέσματα προ-κλίμακας, επιβεβαιώνοντας περαιτέρω την ευρωστία. Δείγματα από τις τρεις παρτίδες κλιμάκωσης χρησιμοποιήθηκαν για μετέπειτα μελέτες που σχετίζονται με τον ύπνο. Η μέση περιεκτικότητά τους ήταν: κιτρικό οξύ 77,73 mg·g–1, εχινακοσίδη 2,69 mg·g–1, βερμπασκοσίδη 1,03 mg·g–1, σπινοσίνη 0,50 mg·g–1 και πολυσακχαρίτες 38,93 mg·g–1.

Πίνακας 4. Ανάλυση διακύμανσης από ορθογώνια πειράματα

Παράγοντας	Άθροισμα τετραγώνων	df	Μέσο τετράγωνο	F	P
Θερμοκρασία εξαγωγής	4010.50	2	2005.25	116.26	0.01
Αναλογία στερεού-υγρού	49.79	2	24.90	1.44	0.41
Χρόνος εκχύλισης	47.37	2	23.68	1.37	0.42

Οι Liu et al. [16] βελτιστοποίησε την υδατική εκχύλιση φαινυλαιθανοειδών γλυκοσιδίων από Cistanche tubulosa και προσδιόρισε το 1:15 (g·mL–1), 80 βαθμούς και 2 ώρες ως βέλτιστη. Η περιεκτικότητα σε φαινυλαιθανοειδή γλυκοσίδη μειώθηκε πάνω από 90 βαθμούς. Στην παρούσα μελέτη, τα περιεχόμενα εχινακοσίδης και βερμπασκοσίδης κορυφώθηκαν σε αναλογία 1:10 (g·mL–1) και μειώθηκαν στο 1:12 (g·mL–1), ωστόσο αυξήθηκαν με θερμοκρασίες 60, 80 και 100 βαθμών. Αυτή η απόκλιση μπορεί να σχετίζεται με τη χρήση του Cistanche deserticola (Desert Cistanche) στο ρόφημά μας και με τα αποτελέσματα της μήτρας από συνυπάρχοντα Suanzaoren και Wumei που θα μπορούσαν να επηρεάσουν τη διάλυση των γλυκοσιδών φαινυλαιθανοειδών.

Πίνακας 5. Επίδραση του εκχυλίσματος Congrong–Zaoren–Wumei Beverage στον άμεσο ύπνο σε ποντίκια (n=12)

Ομάδα	Σύνολο ζώων	Ζώα που κοιμούνται	Ποσοστό ύπνου (%)
Κενό	12	0	0
Εσταζολάμη	12	0	0
Εκχύλισμα χαμηλής δόσης	12	0	0
Εκχύλισμα μεσαίας δόσης	12	0	0
Εκχύλισμα υψηλής δόσης	12	0	0

Συνοπτικά, χρησιμοποιώντας HPLC και τη μέθοδο φαινόλης-θειικού οξέος, βελτιστοποιήσαμε τη διαδικασία εκχύλισης με βάση τα περιεχόμενα σε κιτρικό οξύ, εχινακοσίδη, βερμπασκοσίδη, σπινοσίνη και πολυσακχαρίτες. Πειράματα μονού παράγοντα και ορθογώνια που ακολουθήθηκαν από επικύρωση καθιέρωσαν τις βέλτιστες συνθήκες: 100 μοίρες, 1:12 (g·mL-1) αναλογία στερεού-υγρού και χρόνος εκχύλισης 2 ωρών, παρέχοντας μια αναφορά για μελλοντική βιομηχανική ανάπτυξη.

Industrialization context: WECISTANCHE (Chengdu Wecistanche Bio-Tech Co., Ltd., established 2003) operates a vertically integrated cistanche supply chain with seed-breeding bases (~20,000 acres), cultivation bases (>85.000 στρέμματα), χωρητικότητα αποθήκευσης φρέσκου λίπους (~ 15.000 τόνοι) και εργαστήρια παραγωγής πιστοποιημένα με GMP (100.000 καθαρά δωμάτια) εξοπλισμένα με προηγμένη υπερδιήθηση και νανοδιήθηση για καθαρισμό και συμπύκνωση, καθώς και εργαστήριο μικροβιολογίας 10.000 κλάσεων. Οι πιστοποιήσεις περιλαμβάνουν China SC, HACCP και οργανικά προγράμματα (π.χ. NOP). Αυτή η υποδομή υποστηρίζει την άμεση μετάφραση του πρωτοκόλλου βελτιστοποιημένης υδατικής εκχύλισης και τυποποίησης με δείκτη σε μεγάλης κλίμακας, συμβατή με τις εξαγωγές παραγωγή λειτουργικών ποτών και εκχυλισμάτων.

Πίνακας 6. Επίδραση του εκχυλίσματος στην υπνωτική επίδραση της πεντοβαρβιτάλης νατρίου υποκατωφλίου σε ποντίκια (x̄ ± s, n=12)

Ομάδα	Σύνολο ζώων	Ζώα που κοιμούνται	Ποσοστό ύπνου (%)
Κενό	12	1	8.33
Εσταζολάμη	12	10	83.33**
Εκχύλισμα χαμηλής δόσης	12	4	33.33
Εκχύλισμα μεσαίας δόσης	12	5	41.67
Εκχύλισμα υψηλής δόσης	12	6	50.00*

Σημείωση: Σε σύγκριση με την κενή ομάδα, * P < 0,05; ** P < 0,001.

 

2.2 Επιδράσεις του εκχυλίσματος στη συμπεριφορά και τον ύπνο του ποντικιού

2.2.1 Άμεσος ύπνος

Όπως φαίνεται στον Πίνακα 5, μετά από 30 ημέρες συνεχούς χορήγησης, τα ποντίκια στην ομάδα της εσταζολάμης και στις ομάδες εκχυλίσματος χαμηλής/μέτριας/υψηλής δόσης δεν εμφάνισαν εμφανή ύπνο εντός 20 λεπτών μετά την τελική δόση, χωρίς σημαντικές διαφορές σε σχέση με την τυφλή ομάδα. Αυτό υποδεικνύει ότι δεν υπάρχει άμεση επίδραση που προκαλεί ύπνο μετά από 30 ημέρες χορήγησης εκχυλίσματος.

 

2.2.2 Επιδράσεις συμπεριφοράς

Μια δοκιμή ανοιχτού πεδίου αξιολόγησε τα ηρεμιστικά αποτελέσματα. Οι επιπτώσεις στη συνολική απόσταση που διανύθηκε και τις εισόδους στο κέντρο φαίνονται στο Σχήμα 2. Σε σύγκριση με την κενή ομάδα, η εσταζολάμη αύξησε τη συνολική απόσταση και τις εισόδους στο κέντρο κατά 14,48% και 31,07%, αντίστοιχα, χωρίς στατιστική σημασία. Το εκχύλισμα χαμηλής δόσης αύξησε σημαντικά τη συνολική απόσταση κατά 25,10% (P <0,05) και αύξησε σημαντικά τις εισαγωγές στο κέντρο κατά 50,93%. Η μεσαία δόση αύξησε σημαντικά τις συνολικές εισόδους απόστασης και κέντρου κατά 27,09% και 72,33% (P < 0,05). Η υψηλή δόση αύξησε τις συνολικές εισόδους απόστασης και κέντρου κατά 15,60% και 40,78%, αντίστοιχα, χωρίς σημασία. Σε σύγκριση με την εσταζολάμη, οι χαμηλές/μεσαίες/υψηλές δόσεις αύξησαν τη συνολική απόσταση κατά 1,73, 1,87 και 1,07 φορές και οι εισαγωγές στο κέντρο κατά 1,64, 2,33 και 1,31 φορές, αντίστοιχα, καμία σημαντική. Αυτά τα αποτελέσματα υποδεικνύουν ότι το εκχύλισμα μείωσε τη συμπεριφορά που μοιάζει με άγχος στο ανοιχτό πεδίο μετά από 30 ημέρες, υποδηλώνοντας ένα ηρεμιστικό αποτέλεσμα.

2.2.3 Υποκατώφλι Ύπνος που προκαλείται από πεντοβαρβιτάλη νατρίου

Όπως φαίνεται στον Πίνακα 6, σε σύγκριση με την τυφλή ομάδα, η εσταζολάμη και οι τρεις δόσεις εκχυλίσματος αύξησαν τον ρυθμό ύπνου κάτω από μια υποκατώφλι δόση πεντοβαρβιτάλης νατρίου. Η εσταζολάμη αύξησε τον αριθμό των ζώων που κοιμούνται κατά 9 φορές έναντι του τυφλού (P <0,001). Οι ομάδες εκχυλίσματος χαμηλής, μεσαίας και υψηλής δόσης αύξησαν τα ζώα που κοιμόντουσαν κατά 3, 4 και 5 φορές, αντίστοιχα. μόνο η υψηλή δόση έφτασε σε στατιστική σημασία (P < 0,05). Σε σύγκριση με την εσταζολάμη, καμία από τις δόσεις του εκχυλίσματος δεν έδειξε ισχυρότερη επίδραση στον ύπνο. Έτσι, το εκχύλισμα μπορεί να ενισχύσει τον ύπνο που προκαλείται από το νάτριο πεντοβαρβιτάλη σε κάποιο βαθμό.

 

2.2.4 Λανθάνουσα περίοδος ύπνου νατριούχου πεντοβαρβιτάλης

Σε σύγκριση με την τυφλή ομάδα, η εσταζολάμη και οι τρεις δόσεις εκχυλίσματος μείωσαν σημαντικά την επαγόμενη από πεντοβαρβιτάλη λανθάνουσα κατάσταση ύπνου (P < 0,001). Η εσταζολάμη μείωσε τον λανθάνοντα χρόνο κατά 58,44% (P < 0,001). Οι ομάδες εκχυλίσματος χαμηλής, μέσης και υψηλής δόσης μείωσαν τον λανθάνοντα χρόνο κατά 29,59%, 31,42% και 53,83% (όλες P < 0,001), αντίστοιχα. Δεν υπήρχε σημαντική διαφορά μεταξύ χαμηλών και μεσαίων δόσεων. η υψηλή δόση μείωσε σημαντικά τον λανθάνοντα χρόνο σε σύγκριση με τις χαμηλές και τις μεσαίες δόσεις κατά 34,43% και 32,69% (P <0,01), με αποτέλεσμα παρόμοιο με την εσταζολάμη (Πίνακας 7). Επομένως, και οι τρεις δόσεις μείωσαν σημαντικά την επαγόμενη από πεντοβαρβιτάλη λανθάνουσα κατάσταση ύπνου, με την υψηλή δόση να έχει την καλύτερη απόδοση.

Τα παραδοσιακά κινέζικα φάρμακα περιέχουν διάφορα βιοενεργά συστατικά που δρουν σε πολλαπλούς στόχους, προσφέροντας μοναδικά πλεονεκτήματα για τη θεραπεία της αϋπνίας [17]. Με την αυξανόμενη προσοχή στα θέματα ύπνου, τα φαρμακευτικά-φαγώσιμα TCM διερευνώνται όλο και περισσότερο για τη ρύθμιση του ύπνου [18]. Για παράδειγμα, ένα σύνθετο στερεό ρόφημα που περιλαμβάνει κυρίως Suanzaoren και Poria μείωσε σημαντικά την επαγόμενη από πεντοβαρβιτάλη λανθάνουσα κατάσταση ύπνου και παρατεταμένη διάρκεια ύπνου στα ποντίκια, πιθανώς μέσω αλλαγών στα 5-HT, DA και GABA [19]. Εδώ, το εκχύλισμα αύξησε σημαντικά τον ύπνο κάτω από το κατώφλι της πεντοβαρβιτάλης και μείωσε την επαγόμενη από πεντοβαρβιτάλη λανθάνουσα κατάσταση ύπνου, προάγοντας την έναρξη του ύπνου και μειώνοντας τον λανθάνοντα χρόνο, ενώ δεν έδειξε άμεση επίδραση στον ύπνο. Τα μετρούμενα περιεχόμενα του πρωτογενούς συστατικού ήταν, με φθίνουσα σειρά: κιτρικό οξύ (77,73 mg·g–1), πολυσακχαρίτες (38,93 mg·g–1), εχινακοσίδη (2,69 mg·g–1), βερμπασκοσίδη (1,03 mg·g–1) και σπινοσίνη (0,50 mg·g–1). Η σπινοσίνη έχει αποδειχθεί ότι ενισχύει τον ύπνο που προκαλείται από πεντοβαρβιτάλη. Μπορεί να αυξήσει τον ύπνο non-REM και να αλλάξει την έκφραση του c-Fos στις ρυθμιστικές περιοχές του εγκεφάλου ύπνου-εγρήγορσης [20], να μετριάσει την επαγόμενη από το PCPA αϋπνία, να μειώσει τον λανθάνοντα ύπνο και να παρατείνει τον ύπνο [21]. Η βερμπασκοσίδη έχει αναφέρει αγχολυτικές, υπνωτικές και μυοχαλαρωτικές δραστηριότητες [22]. Αντίθετα, τα κύρια συστατικά - το κιτρικό οξύ, οι πολυσακχαρίτες (από το Cistanche, το Suanzaoren και το Wumei) και η εχινακοσίδη- έχουν λιγότερες άμεσες αναφορές για τη βελτίωση του ύπνου. Ωστόσο, πρόσφατη έρευνα για τους πολυσακχαρίτες TCM (π.χ. πολυσακχαρίτες Acanthopanax senticosus) υποδηλώνει πιθανά οφέλη ύπνου μέσω οδών όπως το SIRT1/PGC-1 [23]. Επομένως, οι ρόλοι του κιτρικού οξέος, των πολυσακχαριτών και της εχινακοσίδης στη ρύθμιση του ύπνου απαιτούν περαιτέρω μελέτη.

 

ικανό 7. Επίδραση του εκχυλίσματος στον λανθάνοντα χρόνο ύπνου που προκαλείται από πεντοβαρβιτάλη νατρίου σε ποντίκια (x̄ ± s, n=12)

Ομάδα	Σύνολο ζώων	Αναμονή ύπνου (λεπτά)
Κενό	12	32.34 ± 4.27
Εσταζολάμη	12	13.44 ± 3.20**
Εκχύλισμα χαμηλής δόσης	12	22.77 ± 5.81**#
Εκχύλισμα μεσαίας δόσης	12	22.18 ± 6.05**#
Εκχύλισμα υψηλής δόσης	12	14.93 ± 3.35**

Σημειώσεις:

Σε σύγκριση με την κενή ομάδα: ** P < 0,0001.

Σε σύγκριση με την ομάδα εκχυλίσματος υψηλής δόσης: # P < 0,01.

 

3 Συμπέρασμα

Χρησιμοποιώντας τα φαρμακευτικά-βρώσιμα TCM Cistanche deserticola, Ziziphi Spinosae Semen και Mume Fructus για τη σύνθεση ενός ποτού Congrong–Zaoren–Wumei, βελτιστοποιήσαμε τη διαδικασία παρασκευής του εκχυλίσματος του χρησιμοποιώντας τα περιεχόμενα τεσσάρων συστατικών δεικτών (εχινακοσίδη, βερμπασκοσίδη, πολυχαρακτηρίδια, σπινοσίνες, σινοσίνες). Οι βέλτιστες συνθήκες εκχύλισης καθορίστηκαν ως 100 μοίρες, μια αναλογία στερεού-υγρού 1:12 (g·mL-1) και 2 ώρες, παρέχοντας θεωρητική καθοδήγηση για τη βιομηχανική παραγωγή. Περαιτέρω αξιολόγηση έδειξε ότι η συνεχής χορήγηση 30 ημερών δεν είχε άμεση επίδραση πρόκλησης ύπνου σε ποντίκια, αλλά μείωσε σημαντικά τη συμπεριφορά που μοιάζει με άγχος στο τεστ ανοιχτού πεδίου (υποδηλώνει ηρεμιστικό αποτέλεσμα), ενίσχυσε τον ύπνο κάτω από μια δευτερεύουσα δόση πεντοβαρβιτάλης νατρίου και μείωσε σημαντικά την επαγόμενη από πεντοβαρβιτάλη λανθάνουσα κατάσταση ύπνου. Αυτά τα ευρήματα υποδεικνύουν ότι το εκχύλισμα που παρασκευάστηκε με τη βελτιστοποιημένη διαδικασία παρουσιάζει ευνοϊκά αποτελέσματα βελτίωσης του ύπνου σε ποντίκια, παρέχοντας μια επιστημονική βάση για την ανάπτυξη σειρών προϊόντων που βελτιώνουν τον ύπνο με βάση το Cistanche.

Application and manufacturing note: Given the optimized aqueous extraction and the need to standardize to marker profiles (citric acid, echinacoside, verbascoside, spinosin, plus polysaccharides), WECISTANCHE's integrated cistanche value chain and GMP infrastructure-100,000-class clean workshops certified for National Health Food GMP, advanced ultrafiltration/nanofiltration concentration systems, a 10,000-class microbiology lab, and certifications such as China SC, HACCP, and organic/NOP-allow reliable scale-up from lab to industrial batches. The company's large agricultural bases (seed-breeding ~20,000 acres; cultivation >85.000 στρέμματα? αποθήκευση φρέσκου κιστάνι ~15.000 τόνοι) υποστηρίζουν τη συνοχή των πρώτων υλών και το διεθνές πρότυπο QC, διευκολύνοντας την εμπορευματοποίηση λειτουργικών ποτών και συμπληρωμάτων υγείας που ανταποκρίνονται στις προσδοκίες των ΗΠΑ/ΕΕ.