Το Ψυχρό Σοκ διαταράσσει τη μνήμη που προκαλείται από μαζική προπόνηση στη Drosophila

Αφηρημένη:

Η εμπέδωση της μνήμης είναι μια χρονοεξαρτώμενη διαδικασία που συμβαίνει για ώρες, ημέρες ή περισσότερο σε διαφορετικά είδη και απαιτεί πρωτεϊνική σύνθεση. Μια προφανής εξαίρεση είναι ένας τύπος μνήμης στη Drosophila που προκαλείται από ένα μόνο επεισόδιο οσφρητικής προετοιμασίας, το οποίο φαινομενικά παγιώνεται γρήγορα, καθιστώντας το ανθεκτικό σε διαταραχές από ψυχρή αναισθησία λίγες ώρες μετά την προπόνηση. Αυτή η ανθεκτική στην αναισθησία μνήμη (ARM), είναι ανεξάρτητη από τη σύνθεση πρωτεϊνών. Η μνήμη ανεξάρτητη από τη σύνθεση πρωτεϊνών μπορεί επίσης να προκληθεί στο Drosophila από πολλαπλούς μαζικούς κύκλους οσφρητικής προετοιμασίας, και αυτό οδήγησε στην επικρατούσα αντίληψη ότι και τα δύο αυτά λειτουργικά διαφορετικά καθεστώτα εκπαίδευσης αποδίδουν ARM. Σημαντικά, δείχνουμε ότι, σε αντίθεση με το καλόπιστο ARM, η μνήμη που προκαλείται από μαζική προετοιμασία παραμένει ευαίσθητη στην αμνησιακή θεραπεία δύο ώρες μετά την προπόνηση και ως εκ τούτου δεν είναι ARM. Επομένως, υπάρχουν δύο τύποι μνήμης ανεξάρτητοι από τη σύνθεση πρωτεϊνών στο Drosophila.

Η μνήμη αναφέρεται στην ικανότητα του ανθρώπινου εγκεφάλου να λαμβάνει, να επεξεργάζεται, να αποθηκεύει, να αναπαράγει και να χρησιμοποιεί εξωτερικές πληροφορίες σε σωματικές και ψυχολογικές πτυχές. Η ενοποίηση μνήμης αναφέρεται στη διαδικασία ενίσχυσης και σταθεροποίησης νέων πληροφοριών μέσω διαφορετικών μεθόδων και τεχνικών για να διευκολύνεται η απομνημόνευση και η εξαγωγή τους. Υπάρχει μια άρρηκτη σύνδεση μεταξύ της ενοποίησης της μνήμης και της μνήμης.

Πρώτον, η ενοποίηση μνήμης μπορεί να βελτιώσει τη μνήμη. Η διαδικασία μνήμης του ανθρώπινου εγκεφάλου είναι μια πολύπλοκη διαδικασία νευρωνικής δραστηριότητας, η οποία απαιτεί την ενίσχυση και τη σταθεροποίηση της σύνδεσης μεταξύ των νευρώνων για την επίτευξη αξιόπιστης καταγραφής πληροφοριών. Ως εκ τούτου, μέσω διαφορετικών μεθόδων και τεχνικών εμπέδωσης μνήμης, είναι δυνατό να ενισχυθεί αυτή η σύνδεση μεταξύ των νευρώνων, βελτιώνοντας έτσι τη μνήμη.

Δεύτερον, η ενοποίηση μνήμης μπορεί να σώσει τη «λήθη». Στην καθημερινή ζωή, οι άνθρωποι συχνά ξεχνούν για κάποιους λόγους, όπως η μη επανεξέταση για μεγάλο χρονικό διάστημα, η υπερφόρτωση της μνήμης κ.λπ. Μέσω της παγίωσης της μνήμης, αυτού του είδους η λήθη μπορεί να αποφευχθεί αποτελεσματικά, βοηθώντας τους ανθρώπους να θυμούνται καλύτερα τις πληροφορίες και να διατηρούν τη μακροπρόθεσμη μνήμη.

Επιπλέον, η εμπέδωση της μνήμης μπορεί επίσης να προωθήσει τη μάθηση. Στη διαδικασία μάθησης, είναι συχνά απαραίτητο να απομνημονεύσουμε πολλές πληροφορίες και η εδραίωση της μνήμης μπορεί να κάνει τις πληροφορίες πιο βαθιά ριζωμένες στις καρδιές των ανθρώπων, να συνειδητοποιήσει την αλματώδη σχέση μεταξύ των σημείων γνώσης και, επομένως, να βελτιώσει τη συνολική μαθησιακή απόδοση.

Συνοψίζοντας, υπάρχει μια στενή σχέση μεταξύ της εμπέδωσης της μνήμης και της μνήμης, η οποία είναι ένας από τους σημαντικούς τρόπους για τους ανθρώπους να βελτιώσουν τη μνήμη, να ενισχύσουν το μαθησιακό αποτέλεσμα και να αποφύγουν τη λήθη. Επομένως, θα πρέπει να δίνουμε προσοχή στη χρήση διαφόρων μεθόδων και δεξιοτήτων εμπέδωσης μνήμης, να εμπεδώνουμε συνεχώς τη μνήμη και να βελτιώνουμε τη μνήμη. Χρειάζεται λοιπόν να βελτιώσετε τη μνήμη σας και το κιστανάκι μπορεί να βελτιώσει σημαντικά τη μνήμη σας, επειδή η πάστα κρέατος είναι παραδοσιακή κινέζικη ιατρική και έχει πολλές μοναδικές ιδιότητες, μία από τις οποίες είναι η βελτίωση της μνήμης σας. Τα οφέλη του κιμά προέρχονται από τα πολλά ενεργά συστατικά που περιέχει, όπως οξέα, πολυσακχαρίτες, φλαβονοειδή κ.λπ., τα οποία μπορούν να προάγουν την υγεία του εγκεφάλου με διάφορους τρόπους.

Κάντε κλικ στο Γνωρίζω για να βελτιώσετε τη βραχυπρόθεσμη μνήμη

Λέξεις-κλειδιά:

Μνήμη; μνήμη ανθεκτική στην αναισθησία. οσφρητική προετοιμασία? μαζική προετοιμασία? Δροσόφιλα.

1. Εισαγωγή

Οι μη παγιωμένες μνήμες είναι ασταθείς και διαταράσσονται από αμνηστικούς παράγοντες σε όλα τα πειραματόζωα [1,2]. Στη Drosophila, ένα σύντομο κρυολόγημα αμέσως μετά την αρνητικά ενισχυμένη οσφρητική ρύθμιση έχει ως αποτέλεσμα την πλήρη απώλεια μνήμης του συσχετισμού. Ωστόσο, εάν παραδοθεί μερικές ώρες μετά την προπόνηση είναι ατελώς ενοχλητικό, με την υπολειπόμενη μνήμη να ονομάζεται ανθεκτική στην αναισθησία μνήμη (ARM), καθώς επιμένει στο φαινομενικά αναισθητικό, ακινητοποιητικό ψυχρό σοκ [3] και είναι ανεξάρτητη από τη σύνθεση πρωτεϊνών [2 ,4]. Το ARM φαίνεται να εδραιώνεται σχετικά γρήγορα καθώς είναι μερικώς ασταθές λεπτά μετά την προετοιμασία [5] και σταθερό 2 ώρες μετά την προπόνηση [3,6]. Μια μνήμη ανεξάρτητη από τη σύνθεση πρωτεϊνών αναδύεται επίσης μετά από πολλαπλούς διαδοχικούς γύρους (massed conditioning-MC) αρνητικά ενισχυμένης οσφρητικής προετοιμασίας [3]. Αν και η θεραπεία κρύου σοκ μετά από έναν μόνο γύρο προετοιμασίας χρησιμοποιείται συνήθως για την ανίχνευση 3-h μνήμης και το πρωτόκολλο MC χρησιμοποιείται για 24-h αξιολόγηση μνήμης, η εικαζόμενη ανεξαρτησία της πρωτεϊνικής σύνθεσης έχει οδηγήσει σε αυτούς τους δύο τύπους μνήμης που ονομάζεται ARM.

Παρά τα στοιχεία που υποδηλώνουν ότι και οι δύο αυτοί λειτουργικά και χρονικά διακριτοί τύποι μνήμης εμπλέκουν κοινούς ή παρόμοιους μηχανισμούς [4,7,8], δεν είναι σαφές εάν αντικατοπτρίζουν το ίδιο γνωστικό αποτέλεσμα που προσδιορίζεται σε διαφορετικά χρονικά σημεία ή είναι διαφορετικοί τύποι μνήμης.

Ενώ τα πρωτόκολλα ψυχρού σοκ και τα πρωτόκολλα MC πέντε ή δέκα γύρων χρησιμοποιούνται ευρέως για την αντιμετώπιση ερωτήσεων σχετικά με το ARM [3,4,7], τα δεδομένα που αποκτώνται από τη μία μέθοδο εκπαίδευσης συνήθως δεν διασταυρώνονται με την άλλη. Για να διευκρινιστεί εάν η μνήμη με τις ίδιες ιδιότητες σχηματίζεται και με τις δύο μεθόδους, υποθέσαμε ότι εάν το ARM είναι ισοδύναμο ή το ίδιο με το MC απέδωσε 24-h μνήμη, ένα ψυχρό σοκ που παρέχεται 2 ώρες μετά την προπόνηση θα πρέπει να έχει παρόμοιο αποτέλεσμα. και στους δύο. Ωστόσο, αυτή η ιδέα δεν θα υποστηριχθεί εάν αυτή η αμνησιακή θεραπεία βλάπτει τη μνήμη 24-h MC. Για το σκοπό αυτό, ρυθμίσαμε το άγριου τύπου Drosophila ώστε να συσχετίσει μια αποκρουστική οσμή με ηλεκτροσόκ στο πόδι προπονώντας με πέντε γύρους MC. Τους υποβάλαμε σε ένα μόνο κρυολόγημα πριν από τη δοκιμή ή 2 ώρες μετά την προπόνηση. Χρησιμοποιούμε ένα MC πέντε στρογγυλών [4] επειδή στα χέρια μας προσφέρει υψηλότερη ανάλυση από πιο εντατικά πρωτόκολλα που μπορεί να αποδώσουν εφέ «οροφής». Αναφέρουμε ότι 2 ώρες μετά την προπόνηση, το MC πέντε γύρων αποδίδει μια ευαίσθητη σε ψυχρό σοκ μνήμη και ARM.

2. Αποτελέσματα
Η προετοιμασία πραγματοποιήθηκε χρησιμοποιώντας το κλασικό παράδειγμα αποστροφής προετοιμασίας που συνδυάζει μια αποστροφική οσμή (conditioned stimulus-CS+) με ηλεκτρικά σοκ ποδιών (the unconditioned stimulus-US), ενώ μια δεύτερη εξίσου αποτρεπτική οσμή που δεν συσχετίζεται ρητά με το σοκ ποδιού (CS−) χρησιμεύει ως έναν έλεγχο [9]. Η μνήμη αμέσως μετά από έναν γύρο προετοιμασίας περιέχει ένα στοιχείο ARM [5,10]. Ωστόσο, το καθοριστικό σύντομο ψυχρό σοκ που χρησιμοποιείται τυπικά για την αποκάλυψη του μη ασταθούς στοιχείου μνήμης ARM 3 ώρες μετά από έναν μόνο γύρο προετοιμασίας [3,11], δεν έχει εφαρμοστεί μετά από πέντε γύρους MC από όσο γνωρίζουμε. Το κρύο σοκ αμέσως μετά από έναν γύρο προπόνησης διαταράσσει εντελώς τη μνήμη [11]. Ωστόσο, αυτό το άμεσο αποτέλεσμα δεν μπορεί να αντιμετωπιστεί στα πειράματά μας, καθώς ο χρόνος που χρειάζεται για να παραδοθούν πέντε γύροι προπόνησης οδηγεί αναπόφευκτα σε δοκιμές είκοσι λεπτά μετά τη συσχέτιση σοκ/οσμής από το πρώτο πόδι. Επομένως, σε όλα τα πειράματά μας, το ψυχρό σοκ χορηγείται στις υποδεικνυόμενες ώρες μετά τον τελευταίο γύρο της προπόνησης.

Όπως φαίνεται στο Σχήμα 1Α, η 8-ελάχιστη μνήμη μετά από πέντε γύρους MC είναι επίσης σε μεγάλο βαθμό ασταθής και διαταράσσεται από ένα σύντομο κρύο σοκ. Απροσδόκητα, ένα 2-λεπτό ψυχρό σοκ 2 ώρες μετά από πέντε γύρους MC οδήγησε σε σημαντική μείωση της μνήμης 3-h (Εικόνα 1Β). Αυτό το φαινόμενο δεν είναι ειδικό για το στέλεχος w 1118, καθώς αποκαλύφθηκε παρόμοια μείωση μνήμης στις μύγες Canton S (Εικόνα 1Β). Επομένως, η μνήμη που προκαλείται από πέντε γύρους MC δεν παράγει μόνο ARM, αλλά μάλλον στοιχεία μνήμης ευαίσθητα στο κρύο και μη ευαίσθητα στο κρύο σοκ. Επομένως, η ενοποιημένη μνήμη μετά το MC δεν είναι ίδια με εκείνη μετά από έναν μόνο γύρο προπόνησης. Δεν αποτελεί έκπληξη, δεδομένης της κινητικής της ευαίσθητης στη σύνθεση πρωτεϊνών μακροπρόθεσμης μνήμης (LTM) [3], πέντε γύρους προετοιμασίας σε απόσταση, ένα παράδειγμα όπου οι κύκλοι προπόνησης απέχουν μεταξύ τους κατά δεκαπέντε λεπτά, που οδηγεί στο σχηματισμό LTM [2,3, 6], έδωσε επίσης μια ενοποιημένη και ασταθή συνιστώσα μνήμης 3 ώρες μετά την προπόνηση (Εικόνα 1C). Αυτό υποδηλώνει ότι τόσο οι μάζες όσο και οι αποστασιοποιημένες μνήμες που προκαλούνται από την προετοιμασία αποτελούνται από ασταθή συστατικά ακόμη και 3 ώρες μετά την προπόνηση. Η υπολειμματική θεραπεία αμνησίας που εμμένει στη μνήμη μετά από προπόνηση σε απόσταση είναι πιθανή ARM όπως προτείνεται προηγουμένως [3].

Είναι οι ενοποιημένες μνήμες 2 ώρες μετά την προετοιμασία μετά από έναν ή πέντε γύρους MC, ισοδύναμες ή ανάλογες με την ένταση της προπόνησης; Για να συγκρίνουμε απευθείας τα επίπεδα μνήμης, εκπαιδεύσαμε τις μύγες είτε με έναν γύρο είτε με πέντε γύρους MC και χορηγήσαμε ψυχρό σοκ 2 ώρες αργότερα. Η μνήμη 3- ωρών πέντε ζώων που δεν είχαν λάβει θεραπεία, που εκπαιδεύτηκαν με MC διέφερε σημαντικά από αυτή των εκπαιδευμένων μυγών με έναν γύρο (Εικόνα 1Δ), υποδεικνύοντας ότι η εντατική εκπαίδευση MC οδηγεί σε μια πιο ισχυρή μνήμη τριών ωρών. Ωστόσο, οι ανθεκτικές στο κρύο σοκ μνήμες δεν διέφεραν σημαντικά, υποδηλώνοντας ότι η ενοποιημένη συνιστώσα ARM δεν επηρεάζεται από την ένταση της προπόνησης. Οι παραπάνω παρατηρήσεις ήταν επίσης εμφανείς όταν υπολογίστηκε η σχετική μη ενοποιημένη μνήμη μετά το ψυχρό σοκ, η οποία έδειξε ότι παρόλο που δεν υπάρχει στατιστικά σημαντική διαφορά μεταξύ των δύο παραδειγμάτων, η μέση απόλυτη τιμή της μείωσης της μνήμης είναι υψηλότερη από αυτή που προκύπτει από τα πέντε στρογγυλό MC (Εικόνα 1Ε). Αυτό πιθανότατα αντανακλά την αυξημένη ασταθή μνήμη που παράγεται από το MC.

Υποθέσαμε ότι το στοιχείο που είναι ευαίσθητο στο κρύο σοκ μετά το MC μπορεί να αντανακλά την ενοποίηση της μνήμης με αργή κινητική. Ως εκ τούτου, χορηγήθηκε ένα ψυχρό σοκ 1 ώρα πριν από την αξιολόγηση μνήμης 24-h μετά τη MC για να διερευνηθεί η σταθερότητα της μνήμης σε αυτό το σημείο. Αυτό το ψυχρό σοκ πριν από τη δοκιμή δεν επηρέασε τη μνήμη, καθώς η απόδοση δεν ήταν διαφορετική από τις παρόμοια εκπαιδευμένες μύγες που δεν υποβλήθηκαν σε αμνησιακή θεραπεία (Εικόνα 2Α). Αυτό το αποτέλεσμα καταδεικνύει ότι η μνήμη που προκαλείται από MC παγιώθηκε 23 ώρες μετά την προπόνηση και επαληθεύει ότι η θεραπεία ψυχρού σοκ δεν επηρεάζει γενικά την ανάκληση. Αντίθετα, ένα κρύο σοκ που χορηγήθηκε 2 ώρες μετά από πέντε γύρους MC είχε ως αποτέλεσμα σημαντικά μειωμένη μνήμη 24-ωρών σε σύγκριση με εκείνη των μη κρυολογημένων μυγών ή ζώων που υποβλήθηκαν σε αμνησιακή θεραπεία 1 ώρα πριν από τη δοκιμή (Εικόνα 2Β) . Ως εκ τούτου, η μνήμη που προκαλείται από ένα MC πέντε γύρων περιλαμβάνει ένα σημαντικό ασταθές συστατικό 2 ώρες μετά την προπόνηση, το οποίο όταν αποκλείεται αντανακλάται σε εξασθενημένη 24- οσφρητική συνειρμική μνήμη. Συλλογικά, αυτά τα αποτελέσματα υποδηλώνουν έντονα ότι ένα MC πέντε γύρων αποδίδει έναν τύπο μνήμης που παγιώνεται αργά, όντας ασταθής στις 3 ώρες, ενώ ο ARM δεν είναι [3].

3. Συζήτηση

Η μαζική προετοιμασία (MC) σε μια αρνητικά ενισχυμένη εργασία οσφρητικής προετοιμασίας αποδίδει μια 24-h μνήμη ανεξάρτητη από τη μετάφραση. Από το 1995, όταν αναφέρθηκε για πρώτη φορά το πρωτόκολλο, θεωρείται ότι η μαζική μνήμη που προέρχεται από προετοιμασία είναι ισοδύναμη με 3- h μνήμη που προκαλείται από έναν μόνο γύρο προετοιμασίας και αποκαλύπτεται ως ανθεκτική σε ψυχρό σοκ 2 ώρες μετά την προπόνηση . Η μνήμη 3-h ARM και MC που προκαλείται από 24-h είναι ανεξάρτητη από τη σύνθεση πρωτεϊνών [2,3] και αναφέρεται ότι εμπλέκονται σε τυπικά μοριακά συστατικά [3,4,12]. Ωστόσο, σε αντίθεση με το ARM, η μνήμη που προκαλείται από πέντε γύρους MC δεν είναι ανθεκτική στην αμνησιακή θεραπεία 2 ώρες μετά την προπόνηση (Εικόνα 1Ε). Επιπλέον, η αμνησιακή θεραπεία στις 2 ώρες μετά την προπόνηση εξαλείφει σχεδόν 24-ώρα τη μνήμη του συμβάντος, υποστηρίζοντας περαιτέρω την ιδέα ότι, σε αντίθεση με το ARM, αυτή η μνήμη που προκαλείται από MC δεν ενοποιείται εκείνη τη στιγμή.

Ως εκ τούτου, η MC προκαλεί έναν ξεχωριστό τύπο μνήμης βραδείας ενοποίησης που παραμένει ευαίσθητη στο αμνησιακό ψυχρό σοκ δύο ώρες μετά την προετοιμασία, σε αντίθεση με την ανθεκτική αμνησιακή μνήμη που υπάρχει δύο ώρες μετά από έναν μόνο γύρο προετοιμασίας. Ως εκ τούτου, υποστηρίζουμε ότι οι δύο μνήμες είναι διακριτές και ότι το MC πέντε γύρων φαινομενικά δεν παράγει μόνο το ARM, αλλά και μια ασταθή μνήμη. Προτείνουμε τον όρο ανεξάρτητη μνήμη πρωτεϊνικής σύνθεσης (PSIM) για την ασταθή μνήμη που προκαλείται από τα πρωτόκολλα MC και ARM για την ανθεκτική σε ψυχρό σοκ μνήμη 3-h μετά από έναν μόνο γύρο προπόνησης για τη διάκρισή τους. Τα συλλογικά στοιχεία που παρουσιάζονται εδώ υποδηλώνουν σθεναρά ότι ένας γύρος εκπαίδευσης που προκαλείται ARM δεν ισοδυναμεί με μνήμη που παράγεται από πέντε γύρους και πιθανότατα δέκα γύρους MC, που παράγει ARM και PSIM. Επομένως, οι όροι δεν πρέπει να χρησιμοποιούνται εναλλακτικά

Παρόλο που πολλά γονίδια και μοριακά μονοπάτια έχουν αναφερθεί ότι λειτουργούν στο ARM, τα στοιχεία που υποστηρίζουν τη συμμετοχή τους προέρχονται σε μεγάλο βαθμό από μία από τις δύο αναλύσεις, είτε 3-h μνήμη μετά από ψυχρό σοκ (ARM) είτε μετά από MC, με λίγες δοκιμασμένες και στις δύο αναλύσεις [4,7,13] αποκαλύπτοντας παρόμοια ελαττώματα. Ωστόσο, για αυτά και άλλα που έχουν χαρακτηριστεί αποκλειστικά μέσω πρωτοκόλλων MC, η επίδραση του ψυχρού σοκ 2 ώρες μετά την προπόνηση στη μνήμη 24-h δεν έχει αξιολογηθεί, επομένως παραμένει ανοιχτό το ερώτημα εάν υπάρχουν ελαττώματα σε αυτά μεταλλάξεις προκύπτουν από το στοιχείο ARM ή PSIM. Αρχετυπικά μεταλλαγμένα όπως το ραπανάκι με σαφή ελλείμματα στο ARM [12,14] δεν έχουν υποβληθεί στις γνώσεις μας για αμνησιακές θεραπείες μετά από MC, επομένως το αναφερόμενο έλλειμμα μνήμης 24-h μετά από 10-γύρο MC [3] , μπορεί επίσης να έχει έλλειμμα PSIM. Επιπλέον, θα ήταν ενδιαφέρον να διερευνηθεί εάν το PSIM επηρεάζεται ή παραλληλίζεται με την ασταθή μνήμη που διακυβεύεται σε μεταλλαγμένα όπως το αμνησιακό [15,16]. Τα κοινά μοριακά συστατικά του PSIM και άλλων ασταθών τύπων μνήμης θα υποδεικνύουν τουλάχιστον εν μέρει επικαλυπτόμενους μοριακούς μηχανισμούς, αλλά ίσως αρκετά διακριτούς ώστε να διαφοροποιούν τις δύο διαδικασίες, μια υπόθεση που βρίσκεται επί του παρόντος υπό διερεύνηση.

4. Υλικά και Μέθοδοι

4.1. Drosophila Culture and Strains

Cantonized w 1118 και Canton S άγριου τύπου στελέχη καλλιεργήθηκαν σε τρόφιμα αλεύρου σίτου-ζάχαρης όπως περιγράφηκε προηγουμένως [4] και αυξήθηκαν σε κύκλο 12 ωρών νύχτας/σκότους, στους 25 ◦C και 50% υγρασία.

4.2. Πειράματα Συμπεριφοράς

Οι μύγες ηλικίας 2–4- ημερών χρησιμοποιήθηκαν σε όλα τα πειράματα, τα οποία πραγματοποιήθηκαν σε θερμοκρασία 25 ◦C και υγρασία 55–65% κάτω από αμυδρό κόκκινο φως. Η αποτρεπτική οσφρητική ρύθμιση χρησιμοποίησε ηλεκτρικά χτυπήματα ποδιών 90 Volt ως μη ρυθμισμένα ερεθίσματα (Η.Π.Α.), σε συνδυασμό με ένα από τα αποκρουστικά αρωματικά 5% βενζαλδεΰδη (BNZ) ή 50% οκτανόλη (OCT) αραιωμένη σε μυριστικό ισοπροπυλεστέρα ως ρυθμισμένα ερεθίσματα (CS). Ένας κύκλος προπόνησης αποτελούνταν από 12 ζεύγη CS/ΗΠΑ των 1,25 δευτερολέπτων με ένα διάστημα μεταξύ ερεθισμάτων 4-, ακολουθούμενο από 30 δευτερόλεπτα ανάπαυσης πριν εμφανιστεί άλλη οσμή απουσία σοκ. Κάθε οσμή συνδυάστηκε με σοκ, ενώ η άλλη χρησίμευε ως έλεγχος. Η μαζική προετοιμασία (MC) περιλάμβανε πέντε διαδοχικούς κύκλους προπόνησης με 30 δευτερόλεπτα μεταξύ των κύκλων. Η προπόνηση σε απόσταση ήταν πανομοιότυπη με τη διαφορά ότι το διάστημα μεταξύ των κύκλων ήταν 15 λεπτά. Η θεραπεία με ψυχρό σοκ χορηγήθηκε όπως περιγράφηκε προηγουμένως [4] σε 1 λεπτό, 2 ή 23 ώρες μετά τον τελικό γύρο προπόνησης, όπως υποδεικνύεται σε κάθε πείραμα. Η δοκιμή μνήμης περιελάμβανε την ταυτόχρονη παρουσίαση και των δύο οσμών για 90 δευτερόλεπτα όπως περιγράφεται [4]. Για τον υπολογισμό του Δ, της διαφοράς μεταξύ ασταθών και παγιωμένων αναμνήσεων, δύο ομάδες ζώων εκπαιδεύτηκαν ταυτόχρονα με 1 γύρο εκπαίδευσης και τα μισά υποβλήθηκαν σε ψυχρό σοκ ενώ τα άλλα όχι. Το Δ υπολογίστηκε ως η διαφορά απόδοσης μεταξύ ταυτόχρονα εκπαιδευμένων ζώων που δεν υποβλήθηκαν σε θεραπεία και ζώων που υπέστησαν κρύο σοκ. Μια παρόμοια μέθοδος χρησιμοποιήθηκε για τον υπολογισμό του Δ για ζώα που εκπαιδεύτηκαν με 5 γύρους MC.

4.3. Ανάλυση δεδομένων

Πραγματοποιήθηκε ανάλυση ακατέργαστων δεδομένων με το λογισμικό JMP7 (SAS Institute Inc., Cary, NC, USA). Οι στατιστικές συγκρίσεις πραγματοποιήθηκαν όπως περιγράφεται λεπτομερώς στο υπόμνημα του σχήματος. Η σύγκριση μεταξύ δύο ομάδων πραγματοποιήθηκε με ANOVA και επακόλουθες συγκρίσεις προγραμματισμένες με LSM ή, σε περιπτώσεις διαφορετικών διακυμάνσεων μεταξύ των ομάδων, μη ζευγαρωμένο παραμετρικό Welch's t-test όταν οι διακυμάνσεις των μετρήσεων ήταν άνισες. Οι στατιστικές λεπτομέρειες παρουσιάζονται στον Πίνακα 1. Τα γραφήματα δημιουργήθηκαν με το λογισμικό GraphPad Prism 8.0.1 και εμφανίζουν μέσους όρους ± SEM.

Συνεισφορές Συγγραφέων

Conceptualization, AB και EMCS. μεθοδολογία: AB και EMCS. επίσημη ανάλυση: AB; γραφή — προετοιμασία πρωτότυπου σχεδίου, AB; συγγραφή—ανασκόπηση και επιμέλεια: EMCS; εποπτεία: EMCS Όλοι οι συγγραφείς έχουν διαβάσει και έχουν συμφωνήσει με τη δημοσιευμένη έκδοση του χειρογράφου.
Χρηματοδότηση:

Αυτή η έρευνα υποστηρίχθηκε από επιχορήγηση από το Fondation Santé στο EMCS.

Δήλωση του Συμβουλίου Θεσμικής Αναθεώρησης:

Δεν εφαρμόζεται.

Δήλωση ενημερωμένης συναίνεσης:

Δεν εφαρμόζεται.

Δήλωση διαθεσιμότητας δεδομένων:

Όλα τα σχετικά δεδομένα παρουσιάζονται σε αυτό το χειρόγραφο.

Ευχαριστίες:

Οι συγγραφείς θα ήθελαν να ευχαριστήσουν τη Μ. Λοΐζου για την τεχνική βοήθεια, — τη Μαρουλάκου για τις συμβουλές και το Fondation Santé για την υποστήριξη.

Σύγκρουση συμφερόντων:

Οι συγγραφείς δηλώνουν ότι δεν υπάρχει σύγκρουση συμφερόντων.

βιβλιογραφικές αναφορές

1. Alberini, C.; Milekic, Μ.; Tronel, S. Μηχανισμοί σταθεροποίησης και αποσταθεροποίησης μνήμης. Cell ΜοΙ. Life Sci. 2006, 63, 999-1008. [CrossRef] [PubMed]

2. DeZazzo, J.; Tully, T. Ανατομή του σχηματισμού μνήμης: Από τη συμπεριφορική φαρμακολογία στη μοριακή γενετική. Trends Neurosci. 1995, 18, 212-218. [CrossRef]

3. Tully, Τ.; Preat, Τ.; Boynton, SC; Del Vecchio, M. Genetic dissection of consolided memory in Drosophila. Cell 1994, 79, 35-47. [CrossRef]

4. Κωτούλα, Β.; Moressis, Α.; Σεμελίδου, Ο.; Σκουλάκης, Η διαμεσολαβούμενη από την EMC Drk σηματοδότηση προς την κινάση Rho απαιτείται για ανθεκτική στην αναισθησία μνήμη στη Drosophila. Proc. Natl. Ακαδ. Sci. ΗΠΑ 2017, 114, 10984–10989. [CrossRef] [PubMed]

5. Bouzaiane, Ε.; Trannoy, S.; Scheunemann, L.; Placais, PY; Preat, T. Δύο ανεξάρτητα κυκλώματα εξόδου σώματος μανιτάρι ανακτούν τα έξι διακριτά στοιχεία της Drosophila aversive memory. Cell Rep. 2015, 11, 1280–1292. [CrossRef] [PubMed]

6. Margulies, C.; Tully, Τ.; Dubnau, J. Deconstructing Memory in Drosophila. Curr. Biol. 2005, 15, R700–R713. [CrossRef] [PubMed]

7. Lee, PT; Lin, HW; Chang, YH; Fu, TF; Dubnau, J.; Hirsh, J.; Chiang, A. Κύκλωμα σώματος SSerotonin-μανιτάρι που διαμορφώνει το σχηματισμό μνήμης ανθεκτικής στην αναισθησία στη Drosophila. Proc. Natl. Ακαδ. Sci. ΗΠΑ 2011, 108, 13794–13799. [CrossRef] [PubMed]

8. Noyes, Ν.; Walkinshaw, Ε.; Ο Davis, R. Ras δρα ως μοριακός διακόπτης μεταξύ δύο μορφών ενοποιημένης μνήμης στο Drosophila. Proc. Natl. Ακαδ. Sci. ΗΠΑ 2020, 117, 2133–2139. [CrossRef] [PubMed]

9. Tully, Τ.; Quinn, W. Κλασική προετοιμασία και κατακράτηση σε φυσιολογική και μεταλλαγμένη Drosophila melanogaster. J. Comp. Physiol. 1985, 157, 263-277. [CrossRef] [PubMed]

10. Knapek, S.; Sigrist, S.; Tanimoto, H. Bruchpilot, μια πρωτεΐνη συναπτικής ενεργής ζώνης για μνήμη ανθεκτική στην αναισθησία. J. Neurosci. 2011, 31, 3453–3458. [CrossRef] [PubMed]

11. Quinn, WG; Dudai, Y. Φάσεις μνήμης στη Δροσόφιλα. Nature 1976, 262, 576–577. [CrossRef] [PubMed]

12. Folkers, Ε.; Waddell, S.; Quinn, WG Το γονίδιο του ραπανιού Drosophila κωδικοποιεί μια πρωτεΐνη που απαιτείται για ανθεκτική στην αναισθησία μνήμη. Proc. Natl. Ακαδ. Sci. ΗΠΑ 2006, 103, 17496–17500. [CrossRef] [PubMed]

13. Drago, I.; Davis, RL Η αναστολή του μιτοχονδριακού ασβεστίου Uniporter κατά την ανάπτυξη βλάπτει τη μνήμη στην ενήλικη Drosophila. Cell Rep. 2016, 16, 2763–2776. [CrossRef] [PubMed]

14. Folkers, Ε.; Drain, Ρ.; Quinn, WG Radish, ένα μεταλλαγμένο Drosophila με έλλειψη ενοποιημένης μνήμης. Proc. Natl. Ακαδ. Sci. ΗΠΑ 1993, 90, 8123–8127. [CrossRef] [PubMed]

15. Turrel, Ο.; Goguel, V.; Το Preat, T. Amnesiac απαιτείται στο σώμα του μανιταριού ενηλίκων για το σχηματισμό μνήμης. J. Neurosci. 2018, 38, 9202–9214. [CrossRef] [PubMed]

16. Waddell, S.; Armstrong, JD; Kitamoto, Τ.; Kaiser, Κ.; Quinn, WG Το αμνησιακό γονιδιακό προϊόν εκφράζεται σε δύο νευρώνες στον εγκέφαλο Drosophila που είναι κρίσιμοι για τη μνήμη. Cell 2000, 103, 805-813. [CrossRef]

For more information:1950477648nn@gmail.com