Κλωνοποίηση και λειτουργική ταυτοποίηση του γονιδίου αποκαρβοξυλάσης της τυροσίνης από το Cistanche Tubulata

Cistanche tubulosa(Schrenk) Το Wish είναι ένα πολυετές ποώδες παρασιτικό φυτό του γένους Cistanche στην οικογένεια Lewandaceae.Είναι ένα πολύτιμο παραδοσιακό κινέζικο φάρμακο με γλυκιά, αλμυρή και ζεστή φύση. Έχει λειτουργίες όπως τονώνει το γιανγκ των νεφρών, ωφελεί την ουσία και το αίμα, ενυδατώνει τα έντερα και αφόδευση. Οι γλυκοσίδες της φαινυλαιθανόλης είναι τα κύρια ενεργά συστατικά του. 

Σούπερμαν βότανα σιστάνι

Αυτές οι ενώσεις έχουν ποικίλες δομές και εκτεταμένες φαρμακολογικές δραστηριότητες, γεγονός που τις καθιστά σημαντική πηγή ενώσεων μολύβδου για φαρμακευτική δράση. Ωστόσο, οι φυσικές πηγές αυτών των ενώσεων είναι περιορισμένες, η οδός χημικής σύνθεσης είναι επίπονη, οι συνθήκες αντίδρασης είναι σκληρές και το κόστος είναι υψηλό, το οποίο δεν μπορεί να καλυφθεί για εμπορική παραγωγή.

Κύρια χημικά συστατικά του Cistanche deserticola

Και εξερευνήστε τα βασικά γονίδια ενζύμων που εμπλέκονται στο μονοπάτι βιοσύνθεσης τουφαινυλαιθανοειδείς γλυκοσίδεςκαι μέσω της γενετικής μηχανικής,Η μέθοδος μπορεί να παρέχει τη δυνατότητα για ενζυμική σύνθεση δομικά διαφορετικώνφαινυλαιθανοειδείς γλυκοσίδες.

Η γλυκοσίδη της φαινυλαιθανόλης είναι το κύριο δραστικό συστατικό του Cistanche deserticola

Η ερευνητική ομάδα διεξήγαγε προκαταρκτική έρευνα για τις γλυκοζυλοτρανσφεράσες και τις ακυλοτρανσφεράσες που τροποποιήθηκαν μετά την κατάλυση της βιοσύνθεσης των τυροσολών (βασικά ενδιάμεσα των φαινυλαιθανοειδών γλυκοσιδών).Η σύνθεση της τυροσόλης απαιτεί τη χρήση τυροσίνης ως πρόδρομου, που καταλύεται από την αποκαρβοξυλάση τυροσίνης για την παραγωγή τυραμίνης, η οποία στη συνέχεια παράγεται μέσω μιας σειράς αντιδράσεων όπως η μονοαμινοξειδάση και η αλκοολική αφυδρογονάση. Καταλύεται από αποκαρβοξυλάση τυροσίνηςη αποκαρβοξυλίωση της τυροσίνης είναι το βασικό βήμα της αρχικής της αντίδρασης.

Πείραμα Cistanche deserticola

Σε αυτή τη μελέτη, ένα TDC γονίδιο αποκαρβοξυλάσης τυροσίνης κλωνοποιήθηκε από το γονιδίωμα του Cistanche tubulosa με τη μέθοδο RT-PCR σε συνδυασμό με την τεχνολογία RACE. Η πρωτεΐνη που κωδικοποιεί το γονίδιο περιέχει 509 αμινοξέα, τα οποία εκφράστηκαν με επιτυχία σε E. coli, και η ανασυνδυασμένη πρωτεΐνη με μοριακό βάρος 61 kDa απομονώθηκε και καθαρίστηκε.

Εκχύλισμα κιστάνσε σε σκόνη

Κάντε κλικ εδώ για να δείτε τα προϊόντα Cistanche

【Ask for more】 Email: xue122522@foxmail.com /  Whats App:  0086 18599088692 /  Wechat:  18599088692

Τα αποτελέσματα λειτουργικής ταυτοποίησης in vitro έδειξαν ότι το TDC μπορεί να καταλύσει την αποκαρβοξυλίωση της τυροσίνης (1) για την παραγωγή τυραμίνης (2) και το προϊόν ταυτοποιήθηκε με HR-MS και έλεγχο ουσίας αναφοράς. Περαιτέρω έρευνα διεξήχθη σχετικά με τον υποκυτταρικό εντοπισμό, τις βέλτιστες καταλυτικές συνθήκες και την ενζυματική εκλεκτικότητα της ανασυνδυασμένης πρωτεΐνης. Αυτό το γονίδιο μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως σημαντικό βιοσυνθετικό στοιχείο στην κατασκευή μηχανικών βακτηρίων για τη βιοσύνθεση γλυκοζιτών φαινυλαιθανολαμίνης και για την ενζυματική σύνθεση δομικά διαφορετικών γλυκοσιδών φαινυλαιθανολαμίνης Βάλτε τα θεμέλια.

αναφορά:

(1) Song Zhihong, Lei Li, Tu Pengfei, Κινεζική βοτανοθεραπεία, 2003,9113-115

(2) Song Zhihong, Tu Pengfei, Zhao Yuying, Zheng Junhua, Κινεζική βοτανοθεραπεία, 2000,11,10-12