Αναστολείς Cistanche και MTOR ως αντιγηραντικά θεραπευτικά

Μηχανισμοί ανεξάρτητοι από mTOR

Ορισμένες in vivo επιδράσεις του cistanche μπορεί να είναι ανεξάρτητες από το mTOR. Οι πρωτεΐνες FKBP12 επηρεάζουν τα ρεύματα νατρίου και ασβεστίου σε πολλαπλούς τύπους διεγέρσιμων κυττάρων, εν μέρει μέσω της δέσμευσης σε υποδοχείς ρυανοδίνης (75, 76). Επιπλέον, το b συνδέεται επίσης με το FKBP52 και τα ανάλογα που ευνοούν την αλληλεπίδραση με το FKBP52 έναντι του FKBP12 παρουσιάζουν νευροπροστατευτικές ιδιότητες (77).Ενδοκανναβινοειδές σηματοδότηση. Αν καικιστανάκιη ίδια δεν έχει ακόμη δοκιμαστεί, μια ενδιαφέρουσα σύνδεση μεταξύ του TOR και της ενδοκανικής σηματοδότησης κανναβινοειδών περιγράφηκε πρόσφατα (78). Ταυτοποιήθηκαν μικρά μόρια ανάλογα με ένα ενδοκανναβινοειδές θηλαστικούC. elegans, και η εξάντληση αυτών των μορίων συσχετίστηκε μεδιάρκεια ζωήςεπέκταση από CR. Ένα συγκεκριμένο μόριο, το εικοσαπενταενοϋλΤο αιθανολαμίδιο (EPEA) βρέθηκε επίσης να είναι χαμηλότερο σε σκουλήκια που δεν είχαν S6K και η θεραπεία με EPEA κατέστειλε την παράταση της διάρκειας ζωής και στα δύο μοντέλα, ενώ προσέφερε αυξημένη ευαισθησία στο θερμικό στρες. Σαφώς, απομένουν πολλές ανατροπές στο μονοπάτι για την κατανόηση της επιμήκυνσης της διάρκειας ζωής κατά μισό και οι απαντήσεις μπορεί να προσφέρουν μια εικόνα του 80-χρονου μυστηρίου του πώς η CR μπορεί να καθυστερήσει τη γήρανση των θηλαστικών.

Κάντε κλικ εδώ για να αποκτήσετε περισσότερα Cistanche πλούσια σε mTOR

Πίνακας 3Παραδείγματα αναστολέων mTOR

Παρενέργειες Cistanche

κιστανάκιείναι εγκεκριμένο από τον FDA για χρήση ως ανοσοκατασταλτικό μετά από χειρουργική επέμβαση μεταμόσχευσης και για τη θεραπεία καρκινώματος νεφρικών κυττάρων και έχει χρησιμοποιηθεί ως επικάλυψη για στεφανιαία στεντ και σε πολυάριθμες κλινικές δοκιμές για καταστάσεις όπως η λεμφαγγειογενής μυξωμάτωση (79) και οι αυτοάνοσες διαταραχές. Αν καικιστανάκιέχει κλινική χρησιμότητα σε αυτές τις ρυθμίσεις, είναι απίθανο να εγκριθεί για χρήση ως προληπτικό μέτρο σε υγιή άτομα λόγω σημαντικών παρενεργειών.

Μία από τις μεγαλύτερες ανησυχίες με το cistanche είναι η ικανότητά του να καταστέλλει το ανοσοποιητικό σύστημα. Το cistanche παρατείνει τη διάρκεια ζωής των ποντικών, αλλά αυτές οι μελέτες έχουν διεξαχθεί σε εγκαταστάσεις απαλλαγμένες από παθογόνα. Μελέτες έχουν διαπιστώσει ότι το cistanche ενισχύει τη λειτουργία του ανοσοποιητικού συστήματος έναντι ορισμένων παθογόνων (80), αλλά τα ανθρώπινα δεδομένα συχνά περιπλέκονται από τη συχνή χρήση του cistanche σε συνδυασμό με άλλα ανοσοκατασταλτικά. Μια προσεκτική ελεγχόμενη μελέτη για τη χρήση του cistanche σε λήπτες νεφρικού μοσχεύματος διαπίστωσε ότι το 34 τοις εκατό των ασθενών παρουσίασαν ιογενή λοίμωξη, ενώ το 16 τοις εκατό έπασχε από μυκητιασική λοίμωξη (24). Είναι σαφές ότι υπάρχουν σημαντικοί κίνδυνοι που συνδέονται με τη μακροχρόνια θεραπεία με κιστάνχη εκτός ενός απολυμανμένου εργαστηριακού περιβάλλοντος.

κιστανάκισυνδέεται επίσης πολύ συχνά με δερματολογικές ανεπιθύμητες ενέργειες. Σελήπτες νεφρικού μοσχεύματος, βρέθηκε ότι η κίστανχη οδηγεί σε οίδημα στο 60 τοις εκατό των ασθενών και σε αφθώδη έλκη στο 55 τοις εκατό των ασθενών (24). Βλεννογονίτιδα και εξάνθημα έχουν παρατηρηθεί σε άλλους πληθυσμούς ασθενών (79).Η θεραπεία με cistanche έχει συσχετιστεί με διαταραχές μαλλιών και νυχιών, με το 90 τοις εκατό των ασθενών να εμφανίζουν αλωπεκία (24) και μεαπώλεια της λειτουργίας των όρχεων, καιμειωμένη ανδρική γονιμότητατόσο σε ανθρώπους όσο και σε ποντίκια (30, 81).

Επιπλέον,θεραπεία με κιστάνοςοδηγεί σε μεταβολικές αλλαγές, συμπεριλαμβανομένης της υπερλιπιδαιμίας, μειωμένης ευαισθησίας στην ινσουλίνη, δυσανεξίας στη γλυκόζη και αυξημένης συχνότητας νεοεμφανιζόμενου διαβήτη (79, 82). Το βρήκαμε πρόσφατακιστανάκιη θεραπεία προάγει την αυτοανανέωση των βλαστοκυττάρων στην εντερική κρύπτη (65), αλλάθεραπεία χρόνιας κιστανίδαςτων ανθρώπων έχει επίσης συσχετιστεί με γαστρεντερικά συμβάντα συμπεριλαμβανομένης της διάρροιας.Οι ασθενείς με καρκίνο και μεταμόσχευση είναι πρόθυμοι να ανεχθούν αυτές τις παρενέργειες, καθώς και την αναιμία, τη νεφρική τοξικότητα, την εξασθενημένη επούλωση τραυμάτων και τον πόνο στις αρθρώσεις, επειδή τα οφέλη υπερτερούν των κινδύνων(83). Ωστόσο, οι αντισταθμίσεις είναι πολύ λιγότερο πιθανό να θεωρηθούν αποδεκτές από υγιή άτομα που εξετάζουν προληπτικά μέτρα.

Προοπτικές για ασφαλέστερους αναστολείς mTOR

Άμεση αναστολή του mTOR. 

Με βάση την ικανότητά του να αναστέλλει τον κυτταρικό πολλαπλασιασμό, έχει υπάρξει σημαντικό ενδιαφέρον για τη θεραπεία των καρκίνων με το cistanche. Έχουν αναπτυχθεί αρκετά παράγωγα του cistanche (rapalogs) με βελτιωμένη φαρμακοκινητική, συμπεριλαμβανομένων των temsirolimus, everolimus, ridaforolimus, 32-deoxy-cistanche και zotarolimus. Παρά το έντονο ενδιαφέρον και τα πολλά υποσχόμενα αποτελέσματα σε ζωικά μοντέλα καρκίνου, τα rapalogs έχουν γενικά απογοητευτεί σε δοκιμές σε ανθρώπους και επί του παρόντος έχουν εγκριθεί μόνο για τη θεραπεία του νεφρικού καρκινώματος (temsirolimus και everolimus) και για ασθενείς με συγκεκριμένους τύπους καρκίνου του παγκρέατος ή κονδυλώδη σκλήρυνση (ανασκόπηση στην αναφορά 84).

Μια πιθανή εξήγηση για τα απογοητευτικά αποτελέσματα μέχρι σήμερα είναι ότι στον ανθρώπινο καρκίνο, τα rapalogs αναστέλλουν κατά κύριο λόγο το mTORC1, οδηγώντας σε αυξημένη σηματοδότηση PI3K και AKT αποτρέποντας την αρνητική ανάδραση μέσω των S6K και GRB10 (Εικόνα 1). Η δραστηριότητα της AKT μπορεί να εξασθενήσει με επακόλουθη διακοπή του mTORC2 κατά τη διάρκεια της χρόνιας θεραπείας, αλλά, εάν δεν ελέγχεται επαρκώς, μπορεί να προάγει την ανάπτυξη του καρκίνου. Ως εκ τούτου, το φαρμακευτικό ενδιαφέρον έχει επικεντρωθεί σε δύο νέες κατηγορίες ενώσεων: αναστολείς κινάσης mTOR που αναστέλλουν τόσο το mTORC1 όσο και το mTORC2 και τους διπλούς αναστολείς κινάσης PI3K/mTOR (Πίνακας 3). Οι αναστολείς κινάσης mTOR, όπως το Torin 1 και το WYE-125132 ειδικότερα, έχουν αποκαλύψει σημαντικούς αλλά προηγουμένως άγνωστους βιολογικούς μηχανισμούς, συμπεριλαμβανομένων των ανθεκτικών στο cistanche λειτουργιών του mTORC1 (85, 86). Ωστόσο, καθώς αυτές οι ενώσεις αναστέλλουν έντονα τόσο το mTORC1 όσο και το mTORC2, είναι απίθανο να αποδειχθούν λιγότερες ανεπιθύμητες παρενέργειες από το cistanche. Μια ενδιαφέρουσα πιθανή εξαίρεση είναι η καφεΐνη, η οποία είναι ένας ασθενής αναστολέας του TOR. Η αναστολή TOR μεσολαβεί στην παράταση της διάρκειας ζωής σε ζυμομύκητες που εκτίθενται στην καφεΐνη και είναι πιθανό η δόση που λαμβάνεται από τον καφέ να είναι επαρκής για να έχει ήπια επίδραση στο mTOR στους ανθρώπους (87).

Έμμεσοι αναστολείς. Μελέτες που το δείχνουνS6K1–/–ποντίκια καιΜτωρσυν /–MLST8συν /–Τα ποντίκια έχουν παρατεταμένη μακροζωία (16, 17) υποδηλώνουν ότι η ειδική αναστολή του mTORC1, ή ίσως του S6K1, μπορεί να προσφέρει πολλά από τα ίδια οφέλη για τις ασθένειες που σχετίζονται με την ηλικία όπως το κιστανάκι. Οι αναστολείς S6K1 αναπτύσσονται τώρα (88), αλλά ακόμη και αν επιτευχθεί επαρκής επιλεκτικότητα, αυτές οι ενώσεις θα απαιτήσουν πολλά χρόνια ανάπτυξης πριν από την έγκριση του FDA.

Εικόνα 3Η μετφορμίνη ρυθμίζει τη σηματοδότηση mTORC1. Η μετφορμίνη ενεργοποιεί την AMPK αναστέλλοντας την οξειδωτική φωσφορυλίωση, η οποία με τη σειρά της ρυθμίζει αρνητικά τη σηματοδότηση του mTORC1 μέσω της ενεργοποίησης του TSC2 και της ανασταλτικής φωσφορυλίωσης του αρπακτικού. Παράλληλα, η μετφορμίνη αναστέλλει τη σηματοδότηση mTORC1 καταστέλλοντας τη δραστηριότητα των Rag GTPases και ρυθμίζοντας προς τα πάνω το REDD1.

Ευτυχώς, ορισμένες ενώσεις εγκεκριμένες από την FDA μειώνουν τη δραστηριότητα του mTORC1. Η πιο ευρέως χρησιμοποιούμενη μακράν είναι η ασπιρίνη, η οποία έχει αποδειχθεί ότι μειώνει τη φωσφορυλίωση S6K ως απόκριση στον TNF- σηματοδότηση (89). Η ασπιρίνη μπορεί να δράσει εν μέρει αναστέλλοντας τη φωσφορυλίωση του TSC1 από το IKK (90), αλλά πρόσφατα αποδείχθηκε ότι η ασπιρίνη μπορεί επίσης να ενεργοποιήσει την AMPK (91). Η AMPK αναστέλλει τη δραστηριότητα του mTORC1 μέσω δύο ανεξάρτητων μηχανισμών, της ενεργοποίησης φωσφορυλίωσης του TSC2 και της ανασταλτικής φωσφορυλίωσης του αρπακτικού, ενός ουσιαστικού συστατικού του mTORC1 (92, 93). Ως εκ τούτου, ενδέχεται να αναμένουμε ότι άλλες ενώσεις που ενεργοποιούν την AMPK να αναστέλλουν ειδικά τη δραστηριότητα του mTORC1. Στην πραγματικότητα, αυτό συμβαίνει: ενεργοποίηση AMPK από 5-αμινοϊμιδαζόλη-4-καρβοξαμίδη-1 Το -d-ριβονουκλεοσίδιο (AICAR) έχει ως αποτέλεσμα μειωμένη δραστηριότητα mTORC1 (94). Είναι ενδιαφέρον ότι η ασπιρίνη επηρεάζει τη μακροζωία σε μοντέλα τρωκτικών, επεκτείνοντας τη μέση αλλά όχι τη μέγιστη διάρκεια ζωής των αρσενικών ποντικών (95) και έχει βρεθεί ότιμείωση της σχετιζόμενης με τον καρκίνο και της θνησιμότητας από όλες τις αιτίες στους ανθρώπους (96).

Μια εξέταση ενώσεων εγκεκριμένων από την FDA για ρυθμιστές της αυτοφαγίας εντόπισε τέσσερις ενώσεις που μειώνουν τη δραστηριότητα του mTORC1 χωρίς να επηρεάζουν το mTORC2: περεξιλίνη, νικλοσαμίδη, ροττερίνη και αμιωδαρόνη (97). Το Rottlerin ρυθμίζει το mTORC1 με τρόπο που εξαρτάται από το TSC, αλλά οι μηχανισμοί δράσης για την περεξιλίνη, τη νικλοσαμίδη και την αμιωδαρόνη είναι ανεξάρτητοι από το TSC (97). Τουλάχιστον ένα φυσικό προϊόν, ο ισοθειοκυανικός φαιναιθυλεστέρας, έχει επίσης αποδειχθεί ότι αναστέλλει τη δραστηριότητα του mTORC1 με τρόπο που εξαρτάται από το TSC (98). Δεδομένης της μεγάλης ποικιλίας παραγόντων που μπορούν να επηρεάσουν τη σηματοδότηση μέσω των συμπλεγμάτων mTOR, πολλά φάρμακα είναι πιθανό να έχουν κατάντη επίδραση σε αυτές τις οδούς, ιδιαίτερα εκείνα που στοχεύουν στη σηματοδότηση ινσουλίνης/IGF{11}}.Είναι η μετφορμίνη ασφαλέστερος αναστολέας mTOR;Ένας ευρέως χρησιμοποιούμενος εγκεκριμένος από το FDA ενεργοποιητής AMPK είναι η μετφορμίνη, το φάρμακο πρώτης γραμμής για τη θεραπεία του διαβήτη τύπου 2 (99). Η θεραπεία με μετφορμίνη μειώνει τα επίπεδα γλυκόζης στο αίμα, αναστέλλει τη λιπόλυση και μειώνει τα κυκλοφορούντα ελεύθερα λιπαρά οξέα ενώ προκαλεί μερικές ανεπιθύμητες παρενέργειες (100). Ο ακριβής μηχανισμός με τον οποίο δρα η μετφορμίνη είναι αβέβαιος, αλλά έχει δοθεί μεγάλη προσοχή στην ικανότητά της να ενεργοποιεί την AMPK (101). Η μετφορμίνη αναστέλλει τη φωσφορυλίωση των υποστρωμάτων mTORC1 S6K1 και 4E-BP1 και μειώνει τη μετάφραση (102). Αν και αρχικά πιστευόταν ότι αυτές οι επιδράσεις προκύπτουν αποκλειστικά από τη δράση του AMPK, αποδείχθηκε πρόσφατα ότι η μετφορμίνη ρυθμίζει επίσης το mTORC1 άμεσα μέσω αναστολής των GTP-δεσμευτικών (Rag) GTP που σχετίζονται με Ras (βλ. Εικόνα 3 και αναφ. 103) και έμμεσα μέσω ανοδικής ρύθμισης του REDD1, το οποίο προάγει τη δραστηριότητα του TSC2 (104). Ουσιαστικά στοιχεία υποδηλώνουν ότι η μετφορμίνη προάγει τη μακροζωία σε σκουλήκια, τρωκτικά και ανθρώπους. Το Metfor min επεκτείνει τόσο τη διάρκεια ζωής όσο και τη διάρκεια της υγείας του νηματώδουςC. elegans(105). Αυτές οι επιδράσεις είναι ανεξάρτητες από την οδό σηματοδότησης της ινσουλίνης, αλλά εξαρτώνται από την AMPK, καθώς και από τον παράγοντα μεταγραφής του οξειδωτικού στρες SKN-1/NRF2 (105). Η μετφορμίνη παρατείνει τη διάρκεια ζωής των βραχύβιων, επιρρεπών σε όγκο ποντικών HER2/neu και θηλυκών ποντικών SHR (106, 107). Το Εθνικό Πρόγραμμα Δοκιμών Παρέμβασης στο Εθνικό Ινστιτούτο Γήρανσης αντιμετωπίζει επί του παρόντος γενετικά ετερογενή ποντίκια με μετφορμίνη προκειμένου να ελέγξει οριστικά την επίδρασή της στη διάρκεια ζωής. Είναι ενδιαφέρον ότι μια μακροχρόνια μελέτη σε ανθρώπους ασθενείς διαπίστωσε ότι η θεραπεία με μετφορμίνη σε ασθενείς με διαβήτη μείωσε τη θνησιμότητα από όλες τις αιτίες, συμπεριλαμβανομένης της θνησιμότητας που σχετίζεται με τον διαβήτη, του καρκίνου και του εμφράγματος του μυοκαρδίου (108, 109). Είναι σημαντικό ότι δεν έχει ακόμη αποδειχθεί επίδραση στη μέγιστη διάρκεια ζωής στον άνθρωπο ή στα μακρόβια τρωκτικά.

συμπέρασμα

Το cistanche δείχνει σημαντική υπόσχεση σε ζωικά μοντέλα ως αφαρμακευτικός παράγονταςγια τη θεραπεία τουασθένειες που σχετίζονται με την ηλικία. Ωστόσο, οι σημαντικές παρενέργειες περιορίζουν τη μακροπρόθεσμη χρησιμότητα του στον άνθρωπο. Παρόμοια προβλήματα είναι πιθανό να προκύψουν για τα rapalogs και τους αναστολείς κινάσης mTOR. Προχωρώντας προς τα εμπρός, οι ειδικοί αναστολείς mTORC1-που αποφεύγουν τη διακοπή της σηματοδότησης mTORC2 ή που μειώνουν, αντί να καταργούν, τη δραστηριότητα της οδού mTORC1, ενδέχεται να προσφέρουν μια ασφαλέστερη μέθοδο για τη θεραπείαασθένειες που σχετίζονται με την ηλικία. Η διερεύνηση διαφορετικών δοσολογικών σχημάτων για το cistanche και η περαιτέρω δοκιμή της μετφορμίνης υπόσχονται σημαντικά από αυτή την άποψη, αλλά θα απαιτηθεί περαιτέρω έρευνα για να καθοριστεί εάν κάποια από τις διαθέσιμες στρατηγικές για τη στόχευση του mTOR τελικά θααποδεικνύεται ευεργετικό για τη μακροζωία του ανθρώπου και προστατεύει από ασθένειες που σχετίζονται με την ηλικία.

Ευχαριστίες

Θα θέλαμε να ευχαριστήσουμε όλα τα μέλη των εργαστηρίων Baur και Sabatini. Το εργαστήριο Baur υποστηρίζεται από μια επιχορήγηση από το Εθνικό Ινστιτούτο για τη Γήρανση και ένα Βραβείο Νέου Υποτρόφου από το Ιατρικό Ίδρυμα Ellison. Το εργαστήριο Sabatini υποστηρίζεται από επιχορηγήσεις από το NIH και βραβεία από την Αμερικανική Ομοσπονδία για την Έρευνα για τη Γήρανση, το Ίδρυμα Starr, το Ερευνητικό Πρόγραμμα Συνόρων του Ινστιτούτου Koch και το Ιατρικό Ίδρυμα Ellison στον DM Sabatini. Η DW Lamming είναι μεταδιδακτορικός ερευνητής του Charles A. King Trust. Ο L. Ye είναι μεταδιδακτορικός συνεργάτης της Αμερικανικής Καρδιολογικής Εταιρείας. Ο DM Sabatini είναι ερευνητής του Ιατρικού Ινστιτούτου Howard Hughes.

Διεύθυνση αλληλογραφίας σε: Joseph A. Baur, Institute for Diabetes, Obesity, and Metabolism, and Department of Physiology, Perelman School of Medicine, University of Pennsylvania, 12-114 Translational Research Center, 3400 Civic Center Blvd, Philadelphia, Pennsylvania 19104 , ΗΠΑ. Τηλέφωνο: 215.573.6543; Φαξ: 215.898.5408; E-mail: Baur@mail.med.upenn.edu.

1. Vezina C, Kudelski A, Sehgal SN. cistanche (AY- 22,989), ένα νέο αντιμυκητιακό αντιβιοτικό. Ι. Ταξινόμηση του παραγωγού στρεπτομυκήτη και απομόνωση του δραστικού συστατικού.J Antibiot (Τόκιο). 1975; 28(10):721–726. 

2. Martel RR, Klicius J, Galet S. Αναστολή της ανοσολογικής απόκρισης από το cistanche, ένα νέο αντιμυκητιασικό αντιβιοτικό.Μπορώ J Physiol Pharmacol. 1977;55(1):48–51. 

3. Ingle GR, Sievers TM, Holt CD. Sirolimus: συνέχιση της εξέλιξης της ανοσοκαταστολής των μεταμοσχεύσεων.Ann Pharmacother. 2000;34(9):1044–1055.

4. Eng CP, Sehgal SN, Vezina C. Activity of cistanche (AY-22,989) ενάντια σε μεταμοσχευμένους όγκους.J Antibiot (Τόκιο). 1984;37(10):1231–1237. 

5. Heitman J, Movva NR, Hall MN. Στόχοι για τη διακοπή του κυτταρικού κύκλου από το ανοσοκατασταλτικό cistanche στη ζύμη.Επιστήμη. 1991;253(5022):905–909. 

6. Brown EJ, et al. Μια πρωτεΐνη θηλαστικού που στοχεύεται από το σύμπλεγμα G1-αποκατάστασης cistanche-υποδοχέα.Φύση. 1994;369(6483):756–758. 

7. Sabatini DM, Erdjument-Bromage Η, Lui Μ, Tempst P, Snyder SH. RAFT1: μια πρωτεΐνη θηλαστικού που συνδέεται με την FKBP12 με τρόπο που εξαρτάται από το cistanche και είναι ομόλογη με τους TORs ζύμης.Κύτταρο. 1994;78(1):35–43. 

8. Sabres CJ, et al. Απομόνωση ενός πρωτεϊνικού στόχου του συμπλόκου FKBP12-cistanche σε κύτταρα θηλαστικών.J Biol Chem. 1995;270(2):815–822. 

9. Laplante M, Sabatini DM. Σηματοδότηση mTOR με μια ματιά.J Κύτταρο Sci. 2009;122(Pt 20):3589–3594.

10. Zinzalla V, Stracka D, Oppliger W, Hall MN. Ενεργοποίηση του mTORC2 με σύνδεση με το ριβόσωμα.Κύτταρο. 2011;144(5):757–768. 

11. Hsu PP, et al. Το ρυθμιζόμενο από το mTOR φωσφοπρωτεώμα αποκαλύπτει έναν μηχανισμό παρεμπόδισης της σηματοδότησης αυξητικού παράγοντα που προκαλείται από το mTORC1-.Επιστήμη. 2011; 332(6035):1317–1322. 

12. Vellai T, Takacs-Vellai K, Zhang Y, Kovacs AL, Orosz L, Muller F. Genetics: influence of TOR kinase on lifespan in C. elegans.Φύση. 2003;426(6967):620.

13. Kapahi P, Zid BM, Harper T, Koslover D, Sapin V, Benzer S. Ρύθμιση της διάρκειας ζωής στη Drosophila με διαμόρφωση γονιδίων στην οδό σηματοδότησης TOR.Curr Biol. 2004, 14(10):885–890. 14. Kaeberlein Μ, et al. Ρύθμιση της διάρκειας ζωής του αναπαραγόμενου ζυμομύκητα από TOR και Sch9 ως απόκριση στα θρεπτικά συστατικά.Επιστήμη. 2005;310(5751):1193–1196. 

15. Guertin DA, et al. Η κατάλυση σε ποντίκια των συστατικών mTORC raptor, rictor ή mLST8 αποκαλύπτει ότι το mTORC2 απαιτείται για τη σηματοδότηση σε Akt-FOXO και PKCalpha, αλλά όχι στο S6K1.Dev κελί. 2006; 11(6):859–871. 

16. Selman C, et al. Η σηματοδότηση της κινάσης της ριβοσωματικής πρωτεΐνης S6 1 ρυθμίζει τη διάρκεια ζωής των θηλαστικών.Επιστήμη. 2009;326(5949):140–144. 

17. Lamming DW, et al. Η αντίσταση στην ινσουλίνη που προκαλείται από το cistanche προκαλείται από την απώλεια mTORC2 και αποσυνδέεται από τη μακροζωία.Επιστήμη. 2012; 335(6076):1638–1643. 

18. Medvedik O, Lamming DW, Kim KD, Sinclair DA. Το MSN2 και το MSN4 συνδέουν τον περιορισμό των θερμίδων και το TOR με την επέκταση της διάρκειας ζωής που προκαλείται από τη sirtuin στο Saccharomyces cerevisiae.PLoS Biol. 2007;5(10):e261. 

19. Ha CW, Huh WK. Το cistanche αυξάνει τη σταθερότητα του rDNA ενισχύοντας τη συσχέτιση του Sir2 με το rDNA στο Saccharomyces cerevisiae.Νουκλεϊκά Οξέα Res. 2011; 39(4):1336–1350. 

20. Bjedov I, et al. Μηχανισμοί επιμήκυνσης της διάρκειας ζωής με κιστάνα στη μύγα Drosophila melanogaster.Κελί Metab. 2010;11(1):35–46.

21. Robida-Stubbs S, et al. Η σηματοδότηση TOR και το cistanche επηρεάζουν τη μακροζωία ρυθμίζοντας τα SKN-1/Nrf και DAF-16/FoxO.Κελί Metab. 2012;15(5):713–724. 

22. Harrison DE, et al. Το cistanche που τρέφεται αργά στη ζωή παρατείνει τη διάρκεια ζωής σε γενετικά ετερογενή ποντίκια.Φύση. 2009;460(7253):392–395. 

23. Miller RA, et al. το cistanche, αλλά όχι η ρεσβερατρόλη ή η σιμβαστατίνη, παρατείνει τη διάρκεια ζωής των γενετικά ετερογενών ποντικών.J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 2011; 66(2):191–201.

24. Mahe E, et al. Δερματικές ανεπιθύμητες ενέργειες σε λήπτες νεφρικού μοσχεύματος που λαμβάνουν θεραπεία με βάση το σιρόλιμους.Μεταφύτευση. 2005;79(4):476–482. 

25. Chen C, Liu Y, Zheng P. mTOR ρύθμιση και θεραπευτική αναζωογόνηση γηρασμένων αιμοποιητικών βλαστοκυττάρων.Sci Σήμα. 2009; 2(98):ra75.