Επιδράσεις του Cistanche στις αλλαγές της ATPase στα ηπατικά μιτοχόνδρια των αρουραίων σηψαιμίας

Επικοινωνία: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com

Wang Zhiqiang Yin Gang

Περίληψη: Στόχος:Να μελετήσει την αλλαγή τουΔραστηριότητα ΑΤΡάσης των ηπατικών μιτοχονδρίων στη σήψηκαι την επίδραση τουCistancheπάνω του.Μέθοδοι:40 αρουραίοι SD χωρίστηκαν τυχαία σε ομάδα εικονικής λειτουργίας, 12-ομάδα ελέγχου ώρας, 12-ομάδα ωρών διαχείρισης, 16-ομάδα ελέγχου ώρας και 16-ομάδα ωρών διαχείρισης. οσήψηΤο μοντέλο αντιγράφηκε με απολίνωση και διάτρηση του τυφλού (C LP) και συγκρίθηκε. Το ποσοστό επιβίωσης της ομάδας, μέση αρτηριακή πίεση (MAP), ήπαρμιτοχονδριακό ΑΤΡάσηαλλαγές δραστηριότητας.Αποτελέσματα:Αφού οι αρουραίοι αναπαρήγαγαν το μοντέλο της σήψης, τοΑΤΡάσηδραστηριότητα του ήπατοςμιτοχόνδριαμειώθηκε και το ποσοστό επιβίωσης 24-ωρών μειώθηκε σημαντικά. οΑΤΡάσηδραστηριότητα των ηπατικών μιτοχονδρίων μετά τη χορήγηση τουCistancheβελτιώθηκε σημαντικά σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου (Π<0.05), which="" was="" significantly="" positively="" correlated="" with="" the="" reduction="" of="" rat="" mortality.="">Συμπέρασμα:Μειωμένο μιτοχονδριακόΔραστηριότητα ΑΤΡάσης στη σήψη, η υπερφόρτωση ασβεστίου των κυττάρων και το οίδημα και η νέκρωση είναι οι άμεσες αιτίες θανάτου σεσηπτικούς αρουραίους. Το Cistanche ενισχύει τη δραστηριότητα της ATPaseείναι ένας σημαντικός μηχανισμός για τη θεραπεία τηςσήψη.

Λέξεις-κλειδιά: Cistanche, ένζυμο ATP μιτοχονδρίων cistanche σήψης

Σήψηείναι μια κλινικά κρίσιμη ασθένεια. Αν και τα αντιβιοτικά έχουν ενημερωθεί τα τελευταία 30 χρόνια, το ποσοστό θνησιμότητας από σήψη δεν έχει μειωθεί σημαντικά και εξακολουθεί να είναι τόσο υψηλό όσο το 50 τοις εκατό [1]. Η δυτική αντιβακτηριακή θεραπεία "εξάλειψης του κακού" από μόνη της δεν βελτιώνει την πρόγνωσησήψη.Στην παθογένεια του TCM, η σήψη ανήκει στη «δικαιοσύνη της ανεπάρκειας και του κακού», η θεραπεία πρέπει να βασίζεται στην αρχή της «ενδυνάμωσης του σώματος» και «εξάλειψης του κακού». Η παραδοσιακή κινεζική ιατρική έχει δείξει μεγάλες δυνατότητες στη θεραπεία της σήψης.Σήψηπου περιπλέκεται από ανεπάρκεια πολλαπλών οργάνων είναι η βασική αιτία του υψηλού ποσοστού θνησιμότητας και η βλάβη της κυτταρικής δομής είναι η μικροσκοπική παθολογική βάση της ανεπάρκειας πολλαπλών οργάνων [2]. Το Cistanche είναι ένα παραδοσιακό κινέζικο φάρμακο για τονωτικό, αυτό έχουν δείξει σύγχρονες φαρμακολογικές μελέτεςCistancheέχει ως αποτέλεσμα την αντίσταση στην υπεροξείδωση των εστέρων της μεμβράνης και την προστασία της κυτταρικής λειτουργίας [3]. Η λειτουργία τουμιτοχονδριακή ενέργειαο μεταβολισμός είναι μια από τις βασικές λειτουργίες των κυττάρων, και η δραστηριότητα τωνΑΤΡάσηείναι ένας σημαντικός δείκτης για τη μέτρηση της λειτουργίας τουμιτοχονδριακή ενέργειαμεταβολισμός. Σε αυτό το πείραμα, παρατηρήσαμε τις αλλαγές τουΑΤΡάσηδραστηριότητα των ηπατικών κυττάρων σεσηπτικούς αρουραίουςκαι η σχέση μεταξύ των επιπτώσεων τουCistancheσχετικά με αυτό και τη θνησιμότητα των αρουραίων και στόχευε στην παροχή θεωρητικής βάσης και αποτελεσματικής διερεύνησης για την κλινική «ενίσχυση» της θεραπείας τουσήψη.

Cistanche

1. Υλικά και μέθοδοι

1.1 Αντιδραστήρια

Cistancheαγοράστηκε από το Xinjiang (αναγνωρίστηκε από τον καθηγητή Tan Defu της Ιατρικής Σχολής του Πανεπιστημίου Three Gorges). Λήφθηκαν 200 g αποξηραμένου Cistanche και αφέψημα έγινε δύο φορές σε απεσταγμένο νερό. Το διήθημα εξατμίστηκε και συμπυκνώθηκε σε συγκέντρωση 1 g/ml. Πεντοβαρβιτάλη νατρίου (001104), China National Pharmaceutical Group Shanghai ChemicalΑντιδραστήριοΕταιρία;Αντιδραστήριο ATPase(20030108), Nanjing Jiancheng Bioengineering Research Institute.

1.2 Μοντέλο και ομαδοποίηση πειραματικών ζώων

40 αρσενικοί αρουραίοι SD (που αγοράστηκαν από το Κέντρο Πειραματικών Ζώων του Ιατρικού Κολλεγίου Tongji, Πανεπιστήμιο Επιστήμης και Τεχνολογίας Huazhong), χωρίστηκαν τυχαία σε 5 ομάδες: εικονική ομάδα χειρουργικής επέμβασης (n=8), 12-ώρα ελέγχου ομάδα (n=8), 12-ομάδα διαχείρισης ωρών (n=8), 16-ομάδα ελέγχου ώρας (n=8), 16-ώρα ομάδα διαχείρισης (n=8). Στην ομάδα εικονικής επέμβασης και στην ομάδα ελέγχου χορηγήθηκε φυσιολογικός ορός με καθετηριασμό και στην ομάδα χορήγησης έγινε καθετηριασμός με 1 g/ml Cistanche, δύο φορές την ημέρα, για έως και 15 ημέρες. ομοντέλο σήψηςαντιγράφηκε με απολίνωση του τυφλού και διάτρηση [4]. Πριν την επέμβαση, τα ζώα ήταν ελεύθερα να πίνουν νερό και νήστευαν για 12 ώρες.

1.3 Προσδιορισμός της μέσης αρτηριακής πίεσης

Η σφαγίτιδα φλέβα εισήχθη με βελόνα στο τριχωτό της κεφαλής, η ηπαρίνη χρησιμοποιήθηκε για αντιπηκτική αγωγή, η αριστερή κοινή καρωτίδα διασωληνώθηκε στο αορτικό τόξο και ο αυτοδημιούργητος καθετήρας συνδέθηκε με το βιολογικό πολυκαναλικό όργανο και ο μέσος όροςαρτηριακή πίεση(ΧΑΡΤΗΣ) καταγράφηκε. Πειραματιστείτε αφού σταθεροποιηθεί το MAP.

1.4 Προσδιορισμός της δραστηριότητας της μιτοχονδριακής ΑΤΡάσης

Πάρτε 6 g συκωτιού αρουραίου και τοποθετήστε το γρήγορα σε μέσο διαχωρισμού 0 βαθμών [250mmol σακχαρόζης, 2 mmol αιθοξυ-αιθυλο πιπεραζίνης 2-αιθυλοσουλφονικό οξύ, 0,1 mmol αιθυλενοδιαμινοτετραοξικού οξέος, pH7,4], ανοίξτε το και ξεπλύνετε τις ακαθαρσίες, Διαχωρίστε το μεσαίο εναιώρημα (1:10), ομογενοποιήστε με ηλεκτρικό ομογενοποιητή Teflon (1200r/min), φυγοκεντρήστε στα 2000r/min για 10 λεπτά, κρατήστε το υπερκείμενο, φυγοκεντρήστε στους 10000r /min για 15 λεπτά, απορρίψτε το υπερκείμενο, Πάρτε το ίζημα και εναιωρήστε το σε 2 ml μέσου διαχωρισμού για να λάβετεμιτοχονδριακό εναιώρημα. Η όλη διαδικασία πραγματοποιείται σε 0 έως 4 βαθμούς . Για τη μέτρηση χρησιμοποιήθηκε η μέθοδος προσδιορισμού του φωσφόρου [5]Δραστηριότητα ATPase(το κιτ αγοράστηκε από το Nanjing Jiancheng Institute of Biological Engineering).

1.5 Στατιστική επεξεργασία

Τα πειραματικά δεδομένα εκφράζονται όλα ως μέση ± τυπική απόκλιση (X±S) και το λογισμικό SPSS εκτελεί μονόδρομη ανάλυση διακύμανσης και ανάλυση συσχέτισης.

Εκχύλισμα Cistanche

2. αποτελέσματα

2.1 Η επίδραση του Cistanche στη μέση αρτηριακή πίεση και 24-ωριαία θνησιμότητα αρουραίων

Η αρτηριακή πίεση της ομάδας ελέγχου μειώθηκε σημαντικά στις 12 ώρες μετά την απολίνωση και τη διάτρηση του τυφλού και έγινε πιο εμφανής στις 16 ώρες. Σε σύγκριση με την ομάδα εικονικής επέμβασης, υπήρχε σημαντική διαφορά. Η αρτηριακή πίεση τουΘεραπεία Cistancheη ομάδα βελτιώθηκε. Το ποσοστό θανάτου της ομάδας ελέγχου ήταν σημαντικά υψηλότερο από αυτό της ομάδας ψευδούς επέμβασης και το ποσοστό θανάτου της ομάδας χορήγησης ήταν σημαντικά χαμηλότερο από αυτό της αντίστοιχης ομάδας ελέγχου.

2.2 Η επίδραση του Cistanche στη δραστηριότητα της μιτοχονδριακής ΑΤΡάσης

Οι δραστηριότητες τωνΑΤΡάση νατρίου-καλίου, ΑΤΡάση ασβεστίου, ΑΤΡάση μαγνησίου και ΑΤΡάση ασβεστίου-μαγνήσιουστην ομάδα χορήγησης ήταν σημαντικά υψηλότερες από αυτές της αντίστοιχης ομάδας ελέγχου, φτάνοντας στο επίπεδο της ομάδας εικονικής επέμβασης, η οποία συσχετίστηκε σημαντικά θετικά με τη μείωση τουθνησιμότητα αρουραίων (r=0.834) ).

Cistanche

3. Συζήτηση

Na συν -Κ συν -ATPase, επίσης γνωστή ως αντλία νατρίου-καλίου, παίζει σημαντικό φυσιολογικό ρόλο στη διατήρηση των φυσιολογικών δραστηριοτήτων των κυττάρων, της θερμοκρασίας του σώματος και του φυσιολογικού μεταβολισμού και στη ρύθμιση της ισορροπίας των ιόντων μέσα και έξω από το κύτταρο.Στη σηψαιμία, υπάρχει σοβαρή δυσλειτουργία της αντλίας νατρίου στην εσωτερική μιτοχονδριακή μεμβράνη, προκαλώνταςμιτοχονδριακόοίδημα. οΝα συν -Κ συν -ΑΤΡτο ένζυμο είναι κατεστραμμένο, η ανισορροπία τουμιτοχονδριακόΗ συγκέντρωση ιόντων αυξάνεται, η ενζυμική δραστηριότητα του μεταβολισμού της ενέργειας αναστέλλεται, η παροχή ενέργειας των κυττάρων εξαντλείται και προκαλείται κυτταροτοξικό οίδημα. Ταυτόχρονα, αυξάνεται η διαπερατότητα της μεμβράνης, η οποία τελικά οδηγεί σε κυτταρικό θάνατο. Στο πείραμα, διαπιστώσαμε ότι το μιτοχόνδριοNa συν -Κ συν -ATPaseΗ δραστηριότητα των σηπτικών ηπατοκυττάρων μειώθηκε σημαντικά (P<0.01), indicating="" that="" the="" liver="" tissue="" is="" seriously="" damaged.="" after="" administration="" of="" cistanche,="" the="">Na συν -Κ συν -ATPaseδραστηριότητα τουηπατικά μιτοχόνδριααυξήθηκε σημαντικά (Π<0.05), and="" the="" mortality="" of="">σηπτικούς αρουραίουςμειώθηκε σημαντικά. Τα πειραματικά αποτελέσματα υποδηλώνουν ότι η μείωση τουNa συν -Κ συν -ATPase δραστηριότητασυσχετίζεται σημαντικά θετικά με την ανάπτυξη τουσηψαιμία σε αρουραίους. Η αναστολή τουNa συν -Κ συν -ATPase δραστηριότητα, το κυτταρικό οίδημα και ο θάνατος που οδηγεί σε ανεπάρκεια πολλαπλών οργάνων μπορεί να είναι η ταχεία ανάπτυξη σήψης. Ένας από τους σημαντικούς μηχανισμούς. Τα τελευταία χρόνια έχουν γίνει πολλές αναφορές γιαNa συν -Κ συν -ATPaseκαι πολλές ασθένειες, που έχουν προσελκύσει την προσοχή κλινικών και βασικών εργαζομένων. Έχει μεγάλη σημασία η μελέτη του νόμου των αλλαγών στη δραστηριότητα τουNa συν -Κ συν -ATPaseκαι τον κανονισμό του [6]. Λίγα είναι γνωστά για τον συγκεκριμένο μηχανισμό τουNa συν -Κ συν -ATPaseστην ανάπτυξη και την έκβαση τουσήψη,και χρειάζεται περαιτέρω έρευνα.

Η σταθερότητα του ενδοκυτταρικού ασβεστίου και μαγνησίου είναι η απαραίτητη υλική βάση για τη διατήρηση της ενδοκυτταρικής απόκρισης απελευθέρωσης και της μετάδοσης πληροφοριών [7]. Στο πείραμα, η μείωση τουΔραστικότητα Ca2 συν -ATPaseστην ομάδα ελέγχου επηρεάζει άμεσα τη δραστηριότητα της αντλίας ασβεστίου και η μείωση της δραστηριότητας της αντλίας ασβεστίου αποδυναμώνει τον ρόλο τηςμιτοχονδριακόαντλία ασβεστίου για την απέκκριση Ca2 plus από το κύτταρο και Ca2 plus υπερφόρτωση μέσαμιτοχόνδρια. Η υπερφόρτωση ασβεστίου στα μιτοχόνδρια είναι μια σημαντική αιτίαμιτοχονδριακόδιαταραχή οξειδωτικής φωσφορυλίωσης, δομική βλάβη και κυτταρική νέκρωση [8, 9]. Το Ca2 plus υπερφόρτωση μειώνει το δυναμικό της μιτοχονδριακής μεμβράνης και την περιεκτικότητα σε ATP του ιστού [10] και η χρησιμοποίηση ενέργειας των κυττάρων των ιστών είναι μειωμένη. Το Ca2 plus μπορεί να ενεργοποιήσει τη φωσφολιπάση στα μιτοχόνδρια, να προκαλέσει βλάβη στα μιτοχόνδριαμιτοχονδριακή μεμβράνη, καταστρέφουν τη φυσιολογική λειτουργία σύνθεσης ATP των μιτοχονδρίων και εμποδίζουν την παραγωγή μιτοχονδριακής ενέργειας [11]. Διαταραχές τουμεταβολισμός του μιτοχονδριακού ασβεστίουμπορεί να επηρεάσει άμεσαμιτοχονδριακή αναπνευστική λειτουργία, προκαλώνταςμιτοχονδριακό οξυγόνοδιαταραχές πρόσληψης και οξείδωσης πρωτονίων στην αλυσίδα μεταφοράς ηλεκτρονίων [12]. Ταυτόχρονα, η αύξηση του Ca2 plus μπορεί να επιδεινώσει τη βλάβη της υπεροξείδωσης των εστέρων στα μιτοχόνδρια [13]. Όλα αυτά άμεσα ή έμμεσα οδηγούν στην αποτυχία της παροχής ενέργειας των κυττάρων και στο θάνατο ιστών και οργάνων και επιταχύνουν την ανάπτυξη παθολογικών αλλαγών στη σήψη. Στο πείραμα, διαπιστώσαμε επίσης ότι οι δραστηριότητες τουM g2 συν -ATPάση και Ca2 συν -M g2 συν -ATPάση σε σηπτικούς αρουραίουςμειώθηκαν επίσης σημαντικά.Mg2 συν -ΑΤΡάση και Ca2 συν -Μ g2 συν -ΑΤΡάσηείναι σημαντικές ουσίες για τη διατήρηση της ενδοκυτταρικής ισορροπίας ασβεστίου και μαγνησίου. Ο Widner ανέφερε ότι η μείωση των ενδοκυτταρικών ιόντων μαγνησίου είναι ο παράγοντας πρόκλησης μη αναστρέψιμης κυτταρικής βλάβης και η αναλογία Mg 2 συν /Ca2 plus είναι ένας σημαντικός δείκτης που αντικατοπτρίζει τη μη αναστρέψιμη βλάβη των κυττάρων [14]. οMg2 συν -ΑΤΡάση και Ca2 συν -Μ g2 συν -ΑΤΡάσηδραστηριότητες τουCistanche-η ομάδα που χορηγήθηκε ήταν ενισχυμένη, η Α ΤΡάση είναι μια σουλφυδρυλάση καιCistancheέχει δράση υπεροξείδωσης εστέρα κατά της μεμβράνης, η οποία μπορεί να οφείλεται στην ενίσχυση τουΑΤΡάσηδραστηριότητα από Cistanche Βάση Χημείας και Βάση Φαρμακολογίας [15].

Στη σήψη, μιτοχονδριακόδιαταραχή του ενεργειακού μεταβολισμού, μειωμένοςΕνζυμική δραστηριότητα ATP, το μιτοχονδριακό οίδημα, η ενδοκυτταρική υπερφόρτωση ασβεστίου και η διαταραχή της ισορροπίας ασβεστίου-μαγνήσιου είναι οι άμεσες αιτίες θανάτου των κυττάρων της σήψης και ανεπάρκειας πολλαπλών οργάνων.Cistancheανταγωνίζεται την υπεροξείδωση των εστέρων της μεμβράνης, ενισχύει τη δραστηριότητα της ΑΤΡάσης, διατηρεί την ενδοκυτταρική ομοιόσταση του ασβεστίου και του μαγνησίου και προστατεύει την κανονική λειτουργία των κυτταρικών λειτουργιών.Cistancheείναι ένας σημαντικός μηχανισμός για τη μείωση της θνησιμότητας απόσηπτικούς αρουραίους. Καταδεικνύει τις καλές προοπτικές τουCistanche στη θεραπεία της σήψης