Χαρακτηριστική Αξιολόγηση Διάφορων Συνθέσεων Αντιγηραντικής Κρέμας Από Καροτενοειδές Εκχύλισμα Βακτηριακού Symbiont Virgibacillus Salarius

Λέξεις-κλειδιά:κρέμα;κιστανάκι;αντιοξειδωτικά; αντηλιακό? βακτηριακή συμβίωση

Κάντε κλικ εδώ για να μάθετε περισσότερα για το Cistanche για την αντιγήρανση

1. Εισαγωγή

Πρόωρη γήρανσηείναι μια εκφυλιστική ασθένεια που χαρακτηρίζεται από ξηρό, ζαρωμένο, τραχύ δέρμακαι μαύρα στίγματα [1]. Δύο παράγοντες πυροδοτούν την πρόωρη γήρανση, δηλαδή εσωτερικοί παράγοντες όπωςόπως το άγχος, η αντοχή, οι ορμονικές αλλαγές και η υγεία καθώς και εξωτερικοί παράγοντες, συμπεριλαμβανομένωνυπεριώδεις ακτίνες και ελεύθερες ρίζες. Οι ελεύθερες ρίζες είναι μόρια που περιέχουν οξυγόνο των οποίωνΗ ατομική διάταξη είναι ασταθής και, ως εκ τούτου, υφίσταται αλυσιδωτές αντιδράσεις που μπορούν να συμβούν στοσώμα και οδηγεί σε συνεχή βλάβη [2]. 

Οι ελεύθερες ρίζες είναι πολύ αντιδραστικές και επικίνδυνες ουσίες που προκαλούν βλάβες στοιστούς του σώματος που μπορεί να οδηγήσουν στην ανάπτυξη διαφόρων ασθενειών στην τρίτη ηλικία [3]. Ωστόσο, οι ελεύθερες ρίζες είναι δυνατό να ξεπεραστούν με τη χρήση αντιοξειδωτικών [4] που σταματούναλυσιδωτές αντιδράσεις που προκαλούνται από ελεύθερες ρίζες δωρίζοντας ηλεκτρόνια στα ασταθή μόρια.Παραδείγματα αντιοξειδωτικών ενώσεων περιλαμβάνουν το κιστανάκι, τη βιταμίνη C και τη βιταμίνη Ε [5].

Το cistanche είναι ενώσεις που έχουν αποδειχθεί ότι είναι πιθανά αντιοξειδωτικά [6–10] όπως περιέχουνμια ένωση ισοπρενίου μακράς αλυσίδας με συζευγμένο διπλό δεσμό [5,7,11]. Το συζευγμένοΟ διπλός δεσμός αφαιρεί το απλό οξυγόνο και απενεργοποιεί άλλες ελεύθερες ρίζες που εμφανίζονται μέσωη διαδικασία μεταφοράς ηλεκτρονίων [12,13]. Στη συνέχεια, ενώσεις που έχουν συζευχθεί διπλάδεσμοί μπορούν να βρεθούν σε χερσαίους και θαλάσσιους οργανισμούς. Ενώσεις από θαλάσσιαΟι οργανισμοί έχουν μοναδικά χαρακτηριστικά και αρκετές ανακαλύψεις για νέες βιοδραστικές ενώσειςγια αντιβιοτικά, αντικαρκινικά, φαρμακευτικά, καλλυντικά, ένζυμα και χρωστικές ουσίεςέχουν ληφθεί από πολλά οικοσυστήματα κοραλλιών, ιδιαίτερα μαλακά κοράλλια.

Δεν πρέπει να χρησιμοποιείται μαζική χρήση μαλακών κοραλλιών, καθώς θα προκαλέσει ζημιάτο οικοσύστημα. Το βακτηριακό σύμβιο που σχετίζεται με τα μαλακά κοράλλια θα μπορούσε να γίνει ισχυρόμια εναλλακτική λύση που παράγει το κιστανάκι ως πηγή αντιοξειδωτικών [14,15]. Καλλυντικόσκευάσματα που μπορούν να εφαρμοστούν αβίαστα και άνετα απαιτούνται κατά τη χρήσηκαροτενοειδείς ενώσεις. Ως εκ τούτου, η καλλυντική σύνθεση που προτιμάται είναι στη μορφήτης κρέμας. Η κρέμα είναι το επιλεγμένο ημι-στερεό σκεύασμα που απλώνεται εύκολα ομοιόμορφα στο δέρμα,δεν κολλάει και καθαρίζεται εύκολα, επομένως είναι άνετο στη χρήση από τους καταναλωτές. Η χρήση τουΤα βακτήρια symbiont ως πηγή καλλυντικών πρώτων υλών είναι η τελευταία ανακάλυψη πουπρέπει να αναπτυχθεί.

2.1. Υλικά και Εργαλεία

Το βακτηριακό συμβίωσηV. μισθοίστέλεχος 19.PP.Sc1.6 που απομονώθηκε απόSinulariasp. origiκατάγεται από το νησί Panjang, Jepara, Central Java, Ινδονησία. το συγκεκριμένο σημείο βρίσκεται στις συντεταγμένεςτου «6◦340 37.3500 S", "110◦370 52.0100 Ε". Τα απαιτούμενα υλικά περιλαμβάνουν μεθανόλη (αναλυτικήβαθμός) που αγοράστηκε από τη Merck (Darmstadt, Γερμανία).

2,2-Διφαινυλ-1-πικρυλυδραζυλ

(DPPH) από τη Sigma-Aldrich Co. (St. Louis, MO, ΗΠΑ). Άλλα συστατικά που χρησιμοποιούνται στις συνθέσεις κρέμαςόπως στεατικό οξύ, γλυκερίνη, τετραβορικό Na, τριαιθανολαμίνη (TEA), λανολίνη,ηλιέλαιο, κερί μέλισσας, κετυλική αλκοόλη, span 80, μονοστεατική γλυκερίνη και Tween 80 ήταναγοράστηκε από τη Merck (Darmstadt, Γερμανία). Τα όργανα που χρησιμοποιήθηκαν ήταν UV-visΦασματοφωτόμετρο Shimadzu 1240 (Κιότο, Ιαπωνία), ιξωδόμετρο Brookfield LVDV-I(Toronto, ON, Καναδάς), μετρητής pH ψηφιακό USB Phs 3c 3d Rohs, φυγόκεντρος IEC Centra MP4R(Thermo Electron, Waltham, MA, ΗΠΑ), και τροχιακός αναδευτήρας Daihan SHO 2D ​​(Wonju, Κορέα).

2.2. Απομόνωση του Βακτηριακού Symbiont του Sinularia sp.

οSilunariasp. τα χαρτομάντιλα τοποθετήθηκαν σε αποστειρωμένα τρυβλία Petri που ήταν μερικώς γεμάτααποστειρωμένο θαλασσινό νερό. Οι επιφάνειες των μαλακών κοραλλιογενών ιστών κόπηκαν και μόνο το εσωτερικότου δείγματος χρησιμοποιήθηκε για μικροβιακή απομόνωση. Για βακτηριακή απομόνωση, μια σειρά από αραιώσειςδιενεργήθηκε για όλα τα δείγματα. Από κάθε τρυβλίο Petri, συλλέχθηκαν 10 mL του δείγματοςμια αποστειρωμένη πιπέτα και τοποθετείται σε φιάλη που περιέχει 90 mL αποστειρωμένο θαλασσινό νερό για να ληφθεί10−1 διάλυση. Από τα 10−1 αραίωση, 1 mL μετακινήθηκε σε ένα σωληνάριο που περιείχε 9 mL στείρουθαλασσινό νερό για να λάβετε 10−2 διάλυση. Αυτή η διαδικασία αραίωσης επαναλήφθηκε μέχρι το 10−5 διάλυσηΑποκτήθηκε. Ένα δείγμα (1 mL) από κάθε σειρά αραιώσεων συλλέχθηκε και τοποθετήθηκε σε αποστειρωμένοτρυβλίο Petri που περιέχει μέσο άγαρ Zobell 2216E (Himedia, Mumbai, Ινδία) για βακτηρίδιααπομόνωση. Στη συνέχεια, τα τρυβλία Petri επωάστηκαν στους 30°C◦C για 2 ημέρες. Κίτρινο βακτηρίδιοαποικίες που αναπτύσσονται στην επιφάνεια του μέσου άγαρ διαχωρίστηκαν με μια μέθοδο ραβδώσεων για ναλάβετε καθαρά βακτηριακά στελέχη.

2.3. Βακτηριακή Συμβιωτική Καλλιέργεια

Τα βακτήριαV. salariusστέλεχος 19.PP.Sc1.6 [16] εμβολιάστηκε με μεταφορά 1 mL απότο προϊόν απομόνωσης σε 2 L αποστειρωμένου ζωμού Zobell Marine 2216 (Himedia, Mumbai, Ινδία). Ήτανστη συνέχεια τοποθετείται στον αναδευτήρα στις 100 rpm στις 27◦C μέχρι να γίνει κίτρινο το χρώμα του μέσου (±7 ημέρες).Στη συνέχεια, τα συμβιωτικά βακτήρια που είχαν παραγάγει το cistanche απομονώθηκαν καιφυγοκεντρήθηκε για 15 λεπτά στις 6000 rpm, μετά την οποία τα σφαιρίδια διαχωρίστηκαν και στη συνέχεια διηθήθηκανχρησιμοποιώντας φίλτρο Whatman No 1 (Maidstone, UK).

2.4. Εκχύλιση καροτενοειδών

Η εκχύλιση του κιστάνιου με τη μέθοδο της ταχείας διαβροχής πραγματοποιείται σε σκοτάδιδωμάτιο. Η μεθανόλη (αναλυτικής ποιότητας) που αγοράστηκε από τη Merck (Darmstadt, Γερμανία) ήτανπροστέθηκε στην καλλιέργεια σφαιριδίων και στη συνέχεια φυγοκεντρήθηκε για 10 λεπτά στις 6000 rpm. Στη συνέχεια, αλήφθηκε διήθημα που περιείχε κιστάνζη και σφαιρίδια με τη μορφή βακτηριακής μάζας,φιλτράρεται με διηθητικό χαρτί Wahtman No 1, εξατμίζεται και ξηραίνεται με αέριο Ν [14,15].

2.5. Συνθέσεις κρέμας

Η φόρμουλα χρησιμοποιούσε τρία σκευάσματα με διαφορετικούς τύπους κρέμας, συγκεκριμένα vs,οκ, και ουά [16–18]. Ο τύπος που χρησιμοποιείται είναι όπως φαίνεται στον Πίνακα1.

Τραπέζι 1.Συνθέσεις κρέμας με εκχύλισμα καροτενοειδώνV. μισθοίστέλεχος 19.PP.Sc1.6.

2.5.1. Φόρμουλα 1: Κρέμα vs

Σε ένα μπολ λιώσαμε το στεατικό οξύ και τη γλυκερίνη. Το τετραβορικό Na και το ΤΕΑ ήτανδιαλύεται σε λίγο νερό και μετά βάζουμε σε διάλυμα στεατικού οξέος και γλυκερίνης. Στη συνέχεια, ανακατέψαμεκαι ομογενοποιήθηκε, και πρόσθεσε λίγο νερό για να είναι καλά τα αποτελέσματα. Το τελευταίο βήμα ήτανγια να προσθέσετε το εκχύλισμα καροτενοειδών και ανακατέψτε μέχρι να κατανεμηθεί ομοιόμορφα.2.5.2. Formula 2: Cream owΑρχικά, η μονοστεατική γλυκερίνη και η κετυλική αλκοόλη τήκονται στο φλιτζάνι 1. Ηλίανθος καιTween 80 αναμειγνύονται στο κύπελλο 2. Μετά από αυτό, τοποθετήσαμε το μείγμα στο κύπελλο 2 στο κύπελλο 1. Αυτόανακατεύτηκε μέχρι να ομογενοποιηθεί με λίγο ζεστό νερό. Τέλος, προσθέσαμε το καροτενοειδέςεκχυλίζουμε και το ανακατεύουμε μέχρι να ομογενοποιηθεί.

2.5.3. Formula 3: Cream wo

2.6. Αξιολόγηση κρέμας

Τα χαρακτηριστικά τριών συνθέσεων κρέμας αξιολογήθηκαν. την αρχική αξιολόγησηπου πραγματοποιήθηκε ήταν μια οργανοληπτική δοκιμή. Στις οργανοληπτικές δοκιμές, οι παρατηρήσεις περιλαμβάνουν αλλαγές σεχρώμα, οσμή (τάγγιση) και αίσθηση. Στο οργανοληπτικό τεστ χρησιμοποιήθηκαν ως ερωτηθέντες 25 άτομα,που αποτελείται από 15 εκπαιδευμένους και 10 ανεκπαίδευτους. Το παρακάτω τεστ ήταν ομοιογένεια,που επιτυγχάνεται με την εφαρμογή της κρέμας σε γυάλινες πλάκες και την παρατήρηση της ομαλότητας τουτο χρώμα, είτε είναι ομοιόμορφο είτε όχι. Στη συνέχεια, στη δοκιμή pH, η κρέμα εναποτέθηκεσε ένα γυάλινο ποτήρι ζέσεως και, στη συνέχεια, η μέτρηση του pH έγινε χρησιμοποιώντας ένα μετρητή pH που διέθετεείχε προηγουμένως βαθμονομηθεί με ένα πρότυπο Dappar (pH 4 και pH 7). Η δύναμη διασποράςΗ δοκιμή διεξήχθη σε διαφανές γυαλί τοποθετημένο σε χαρτί και 0.5 g κρέμας

τοποθετείται στο ποτήρι και στη συνέχεια σκεπάζεται με άλλο διαφανές ποτήρι και αφήνεται για±5 δευτ. έωςλάβετε τη διάμετρο της περιοχής που σχηματίστηκε. Στη συνέχεια, διαφορετικά βάρη των 50, 100, 150, 200, 250, 300,350, 400 και 450 g τοποθετήθηκαν στο διαφανές γυαλί και η διάμετρος της περιοχής που σχηματίστηκεπαρατηρήθηκε. Οι προδιαγραφές αναφέρουν ότι η κρέμα πρέπει να απλώνεται εύκολα και ομοιόμορφα.

Εν τω μεταξύ, η δοκιμή ιξώδους κρέμας προσδιορίστηκε χρησιμοποιώντας ένα Brookfield LVDV-I PrimeΙξωδόμετρο Διεξήχθη δοκιμή πρόσφυσης με ένα γυάλινο αντικείμενο με την ένδειξη ως4 × 2,5 εκ, στη συνέχεια όσο 0.25 g κρέμας τοποθετήθηκαν στο μέσο της περιοχής και καλύφθηκαν μεάλλα γυάλινα αντικείμενα. Επομένως, τοποθετήθηκε ένα φορτίο 1 kg για 5 λεπτά και στη συνέχεια τα δύο γυάλινα αντικείμεναπου είχαν προσαρτηθεί τοποθετήθηκαν στον δοκιμαστικό εξοπλισμό στον οποίο δόθηκε φορτίο 80σολ. Μετά από αυτό, σημειώθηκε ο χρόνος που απαιτείται για τον διαχωρισμό των δύο γυάλινων αντικειμένων. Παρατηρήσεις γιαόλες οι δοκιμές πραγματοποιήθηκαν εβδομαδιαία για 5 εβδομάδες.

2.7. Μέτρηση Αντιοξειδωτικής Δραστηριότητας

Κρέμες διαλυμένες σε μεθανόλη παρασκευάστηκαν σε μια σειρά συγκεντρώσεων. Ως εκ τούτου, ασυνολικά 3 mL του δείγματος αραιώθηκαν με 1 mL διαλύματος 0.1 mM DPPH και αφέθηκαννα σταθεί για 30 λεπτά. Κατά την καθίζηση, το διάλυμα ομογενοποιήθηκε και η απορρόφησή του έγινεμετρήθηκε με χρήση φασματοφωτόμετρου σε μήκος κύματος 517 nm. Η απορρόφηση τουΔιαβάστηκε επίσης το διάλυμα ελέγχου, δηλαδή το DPPH χωρίς διάλυμα δοκιμής. Επιπλέον, τοΗ ποσότητα της αντιοξειδωτικής δράσης μετρήθηκε χρησιμοποιώντας την ακόλουθη εξίσωση [19]: 

2.8. Μέτρηση του παράγοντα αντηλιακής προστασίας (SPF)

Έγινε μέτρηση της τιμής του παράγοντα ηλιακής προστασίας (SPF).in vitro. Το SPFπραγματοποιήθηκε δοκιμή για να προσδιοριστεί η αντηλιακή δράση της κρέμας χρησιμοποιώντας ένα UV-Visφασματοφωτόμετρο. Κάθε κρέμα, βάρους 0,1 g, διαλύθηκε σε 100 mL μεθανόλης σεογκομετρική φιάλη και διηθήθηκε χρησιμοποιώντας Whatman Νο. 1. Προστέθηκαν συνολικά 3 mL του διαλύματοςσε μια κυψελίδα για να μετρήσετε την απορρόφησή του χρησιμοποιώντας ένα φασματοφωτόμετρο UV-Vis. Στη συνέχεια, τοΟ προσδιορισμός της τιμής SPF χρησιμοποιώντας το φασματοφωτόμετρο UV-Vis ήταν γνωστός από τοχαρακτηριστικά πρόσληψης κρέμας σε μήκη κύματος 290 έως 320 nm με διαστήματα 5 nm.Ο υπολογισμός της τιμής SPF χρησιμοποιεί την ακόλουθη εξίσωση [20,21]: 

abs=Απορρόφηση δείγματος.

Ζήτα περισσότερα:

Email:wallence.suen@wecistanche.com Whatsapp plus 86 15292862950