Αντιοξειδωτική και αντιγηραντική δυνατότητα του ινδικού ελαίου σανταλόξυλου κατά των περιβαλλοντικών στρεσογόνων παραγόντων

Παρακαλώ επικοινώνησεoscar.xiao@wecistanche.comΓια περισσότερες πληροφορίες

Αφηρημένη:Αποσταγμένο από το εγκάρδιο του άλμπουμ Santalum, το ινδικό έλαιο σανταλόξυλου είναι ένα αιθέριο έλαιο που ιστορικά έχει χρησιμοποιηθεί ως φυσικό ενεργό συστατικό σε καλλυντικά για την περιποίηση και τη λάμψη του δέρματος. Έχει τεκμηριωθεί ότι παρουσιάζει αντιοξειδωτική, αντιφλεγμονώδη και αντι-πολλαπλασιαστική δράση. Εδώ, διερευνήσαμε τις προστατευτικές και αντιγηραντικές επιδράσεις του ινδικού σανταλόξυλου στην απομάκρυνση των ενεργών ειδών οξυγόνου (ROS) σε κύτταρα HaCaI και σε εκφυτεύματα ανθρώπινου δέρματος μετά από έκθεση σε οξειδωτικό στρες. Χρησιμοποιώντας έναν ανιχνευτή DCFH-DA, παρακολουθήθηκε η αντιοξειδωτική ικανότητα του ινδικού σανταλόξυλου μετά από έκθεση σε μπλε φως στα 412 nm και 450 nm ή καπνό τσιγάρου. Η αντιγηραντική επίδραση του ελαίου σανταλόξυλου διερευνήθηκε επίσης σε μοσχεύματα ανθρώπινου δέρματος μέσω της αξιολόγησης του επιπέδου κολλαγενάσης (MMP-1). Αναφέραμε ότι το ινδικό λάδι σανταλόξυλου διέθετε αντιοξειδωτικό δυναμικό που μπορεί να καθαρίσει το ROS που δημιουργείται από μια ένωση που δημιουργεί ελεύθερες ρίζες (AAPH). Η επακόλουθη έκθεση σε περιβαλλοντικούς στρεσογόνους παράγοντες αποκάλυψε ότι το ινδικό σανταλόξυλο είχε ανώτερη αντιοξειδωτική δράση σε σύγκριση με τη βιταμίνη Ε (άλφα-τοκοφερόλη). Χρησιμοποιώντας εκφυτεύματα ανθρώπινου δέρματος, αυτή η μελέτη έδειξε ότι το ινδικό σανταλόξυλο μπορεί επίσης να αναστείλει το επίπεδο της MMP που προκαλείται από ρύπους-1.βιοφλαβονοειδήΤα ευρήματα έδειξαν ότι το ινδικό λάδι σανταλόξυλου μπορεί δυνητικά να χρησιμεύσει ως προστατευτικό και αντιγηραντικό ενεργό συστατικό στα καλλυντικά και τη δερματολογία έναντι περιβαλλοντικών στρεσογόνων παραγόντων.

Κάντε κλικ εδώ για να μάθετε περισσότερα

Λέξεις-κλειδιά:εκθέματα? ex vivo; in vitro? οξειδωτικό στρες? γηράσκων; Ινδικό λάδι σανταλόξυλου

1. Εισαγωγή

Τα αιθέρια έλαια και τα μέρη φυτών που περιέχουν αιθέρια έλαια έχουν από καιρό εκτιμηθεί για την ικανότητά τους να έχουν θετική επίδραση στην ανθρώπινη υγεία. Τα αιθέρια έλαια ταξινομούνται ευρέως ως τερπένια και τα μονοοξυγονωμένα ανάλογα τους ταξινομούνται ως τερπένια. Αυτά τα μόρια παράγονται από πολλά φυτά στη φύση με δύο κύριους τύπους τερπενίων να βρίσκονται: μονοτερπένια, μόρια με πλαίσιο άνθρακα C10 και σεσκιτερπένια, με πλαίσιο άνθρακα C15.

Το ινδικό έλαιο σανταλόξυλου είναι το αιθέριο έλαιο που λαμβάνεται με απόσταξη ατμού του αρωματικού εγκάρδιου του άλμπουμ Santalum [1], που αποτελείται κυρίως από σεσκιτερπένια. Το λάδι είναι γνωστό για τα οσφρητικά του χαρακτηριστικά, έχοντας μια απαλή, ζεστή και ξυλώδη οσμή. Ως αποτέλεσμα αυτής της μυρωδιάς, το λάδι έχει βρει το δρόμο του σε πολλές εφαρμογές όπως η αρωματοποιία, τα άτταρ και το θυμίαμα [2].

Τα κύρια συστατικά του ινδικού ελαίου σανταλόξυλου είναι μια ομάδα ισομερών γνωστών ως σοταλόλη, (ζα-σανταλόλη, ζ- -σοταλόλη, τρανς- -περγαμόντο και επι- -σανταλόλη). Αυτά παράγονται από συνθάσες σεσκιτερπενίου που δρουν στο πυροφωσφορικό φαρνεζένιο που ακολουθείται από την επακόλουθη οξείδωση από P{5}}εξαρτώμενες μονοοξυγενάσες.αγοράστε κιστανάκιΗ δεύτερη ομάδα σεσκιτερπενολών παράγεται επίσης από τη δράση της συνθάσης μονοτερπενίου σε πυροφωσφορικό φαρνεζένιο (βισαβολόλες, κουρκουμίν-12-όλες και λογχόλη)[3,4].

Το Cistanche μπορεί να αντιγηρανθεί

Τα συστατικά του ινδικού ελαίου σανταλόξυλου έχουν περιγραφεί καλά και οι δομές τους έχουν διευκρινιστεί [5]. Η ανάλυση των συστατικών μπορεί να πραγματοποιηθεί με αέρια χρωματογραφία με ανίχνευση ιονισμού φλόγας (GC FID) ως ανάλυση ρουτίνας [3]. Έχει αναγνωριστεί ότι το ινδικό σανταλόξυλο έχει εφαρμογές ως καλλυντικό και φαρμακευτικό συστατικό. Στην πραγματικότητα, είναι ένα από τα παλαιότερα αναγνωρισμένα συστατικά καλλυντικών, με τεκμηριωμένη χρήση ήδη από το 500 π.Χ., όπου το σανταλόξυλο χρησιμοποιήθηκε για καλλυντικούς και υγειονομικούς σκοπούς και ενσωματώθηκε σε ινδικά και κινέζικα παραδοσιακά φάρμακα [6]. Η Κλεοπάτρα, της οποίας η φήμη συνεχίζει να προηγείται στη σύγχρονη εποχή, φέρεται να χρησιμοποίησε σανταλόξυλο για τα καλλυντικά του οφέλη. Λεπτομερείς πραγματείες σχετικά με τις καλλυντικές φόρμουλες που περιέχουν σανταλόξυλο γράφτηκαν την περίοδο Γκούπτα της Ινδίας και τη Δυναστεία Τανγκ της Κίνας [2,6].

Το σύστημα ιατρικής της Αγιουρβέδα έχει καταχωρίσει το σανταλόξυλο ειδικά ως ουσία για την υγεία του δέρματος, τονίζοντας τις δραστηριότητές του πέρα ​​από το άρωμα που εκλαμβάνεται ως άρωμα. Το σανταλόξυλο χρησιμοποιείται επίσης εσωτερικά ως φάρμακο για τον καθαρισμό του αίματος και την ενεργοποίηση τόσο στην Παραδοσιακή Κινεζική Ιατρική (TCM) όσο και στην Αγιουρβέδα [7,8]. Σήμερα, το ινδικό σανταλόξυλο βρίσκεται στην Αγιουρβεδική Φαρμακοποιία της Ινδίας, τη Φαρμακοποιία της Κίνας, και πρόσφατα προστέθηκε στη Βρετανική Φαρμακοποιία.

Προηγούμενοι ερευνητές έχουν επίσης εξετάσει τις φαρμακολογικές ιδιότητες του ελαίου με ιδιότητες όπως αντιμικροβιακές, αντιφλεγμονώδεις, αντι-ιικές και αντιπολλαπλασιαστικές ιδιότητες που διερευνώνται [9]. Για παράδειγμα, οι Mohankumar et al.[10] ανέφερε τις αντιοξειδωτικές ιδιότητες του ινδικού ελαίου σανταλόξυλου σε κυτταρικές σειρές ανθρώπινων νευροβλαστών για να διαπιστωθεί η επίδραση στον οξειδωτικό νευροεκφυλισμό [10]. Οι αντιφλεγμονώδεις ιδιότητες του ινδικού σανταλόξυλου αναφέρθηκαν από τους Sharma et al. [11] για κύτταρα δερματικών ινοβλαστών όταν διεγείρονται από βακτηριακούς λιποπολυσακχαρίτες [11,12].κιστανάκιΑναφέρθηκε ότι η θεραπευτική αξία του ινδικού ελαίου σανταλόξυλου σχετίζεται με την υψηλή περιεκτικότητά του σε φυσικά σεσκιτερπένια, συγκεκριμένα άλφα-σανταλόλη (50 τοις εκατό της σύνθεσης του ελαίου) και βήτα-σανταλόλη (20 τοις εκατό της σύνθεσης λαδιού)[13,14 ]Ενώ η έρευνα για τις φαρμακολογικές επιδράσεις του ινδικού σανταλόξυλου ήταν εκτεταμένη τα τελευταία χρόνια, η έρευνα για τις καλλυντικές ιδιότητες του ινδικού σανταλόξυλου δεν ήταν τόσο εκτεταμένη.

Το δέρμα είναι το μεγαλύτερο όργανο και ο πιο εξωτερικός φραγμός του σώματος συχνά εκτίθεται άμεσα και συχνά σε περιβαλλοντικούς ρύπους. Αυτό είναι προβληματικό, καθώς ενώ η κύρια λειτουργία του δέρματος είναι να προστατεύει από περιβαλλοντικούς στρεσογόνους παράγοντες, είναι επίσης πολύ ευαίσθητο σε αυτούς. Οι βλαβερές ουσίες όπως η ρύπανση και η επιβλαβής συνέργεια του ήλιου μπορεί να οδηγήσουν σε δερματολογικές καταστάσεις όπως φλεγμονή, οξειδωτικό στρες και κακές μεταβολικές δραστηριότητες στο δέρμα [15]. Οι πρόσφατες καλλυντικές τάσεις στοχεύουν στη διατήρηση της υγείας του δέρματος και στην προώθηση της θετικής γήρανσης του δέρματος όταν εκτίθεται στη ρύπανση, την υπεριώδη ακτινοβολία (UV) και το ορατό φως από τον ήλιο και τις ψηφιακές οθόνες[16]. Οι πρόοδοι στον τομέα της δερματολογίας έχουν οδηγήσει σε πολλαπλές μελέτες που διερευνούν τις δερματικές επιδράσεις της υπεριώδους ακτινοβολίας και του ορατού φωτός [17]. Τα τελευταία χρόνια, ένας νέος κλάδος της βιβλιογραφίας έχει αναπτυχθεί για να αποδείξει ότι εκτός από την υπεριώδη ακτινοβολία, άλλοι στρεσογόνοι παράγοντες όπως το ορατό φως υψηλής ενέργειας (HEV) ή το μπλε φως στην περιοχή 400-470 nm του ορατού φάσματος, επίσης ατμοσφαιρικοί ρύποι, θα μπορούσαν να προκαλέσουν βιολογικές διεργασίες στο επίπεδο του δέρματος και να οδηγήσουν σε πρόωρη γήρανση του δέρματος [18]Το μπλε φως υπάρχει φυσικά στο ηλιακό φως που φτάνει στην επιφάνεια της γης και εκπέμπεται επίσης μέσω διαφόρων ηλεκτρονικών συσκευών που περιέχουν λαμπτήρες διόδων εκπομπής φωτός (LED). 19]Έχει αποδειχθεί παλαιότερα ότι το μπλε φως από τον ήλιο, μαζί με ατμοσφαιρικούς ρύπους όπως τα σωματίδια, ο καπνός του τσιγάρου και το όζον, επηρεάζουν τη μοριακή δομή του δέρματος προκαλώντας σημαντικό οξειδωτικό στρες, φλεγμονή, απόπτωση και αποδόμηση κολλαγόνου. μέσω επαγωγής μεταλλοπρωτεϊνασών μήτρας όπως η MMP-1 και η βλάβη του DNA [20].

Οι ουσίες που προστατεύουν ή επιδιορθώνουν ενεργά το δέρμα από τα παραπάνω εκθέματα είναι γνωστές ως προσαρμογόνα [21]. Σε αυτή τη μελέτη, το μπλε φως (412 nm και 450 nm), ο καπνός του τσιγάρου και το όζον επιλέχθηκαν ως περιβαλλοντικοί στρεσογόνοι παράγοντες προκειμένου να αποδειχθεί ποσοτικά η αντιοξειδωτική και αντικολλαγενάση ικανότητα του ινδικού σανταλόξυλου.cistanche ΑυστραλίαΗ αντιοξειδωτική ικανότητα διερευνήθηκε με τη μέτρηση της δραστικότητας καθαρισμού του ινδικού σανταλόξυλου σε αντιδραστικά είδη οξυγόνου (ROS). Στη συνέχεια, διερευνήθηκε η αντιγηραντική δράση μετρώντας την ανασταλτική ικανότητα του ινδικού σανταλόξυλου σε MP-1. Τα δεδομένα που ελήφθησαν θα βοηθούσαν να ρίξει φως στην ικανότητα του ινδικού ελαίου σανταλόξυλου να είναι κατάλληλο προσαρμογόνο στην καλλυντική και δερματολογική φροντίδα ασκώντας προστατευτική δράση στα κύτταρα in vitro και στο δέρμα ex vivo.

2. Υλικά και μέθοδοι

2.1. Ουσίες δοκιμής και ελέγχου

Το ινδικό λάδι σανταλόξυλου παρεχόταν από την Quintis Sandalwood (Περθ, Ουάσιγκτον, Αυστραλία). Αυτό το λάδι αποστάχθηκε με ατμό από το αρωματικό εγκάρδιο του δέντρου άλμπουμ Santalum, το οποίο καλλιεργήθηκε σε φυτείες που βρίσκονται στην Kununurra της Δυτικής Αυστραλίας. Το λάδι δοκιμάστηκε και επιβεβαιώθηκε ότι συμμορφώνεται με το ISO 3518[22]. Η ανάλυση συστατικών με GC FID χρησιμοποιώντας τη μέθοδο που περιγράφεται λεπτομερώς στο ISO 3518 φαίνεται στον Πίνακα 1. Quercetin Gigma-Aldrich, St.Louis, MO, USA) και άλφα-τοκοφερόλη (Βιταμίνη Ε) (Sigma-Aldrich, St.Louis, MO , ΗΠΑ) χρησιμοποιήθηκαν ως θετικοί μάρτυρες.

2.2.Κύτταρα και αντιδραστήρια

Η ανθρώπινη αθανατοποιημένη κυτταρική σειρά κερατινοκυττάρων, HaCaT (ATCC&Manassas, VA, USA) καλλιεργήθηκε σε Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) (Thermo Scientific, Waltham, MA, USA) και συμπληρώθηκε με 100 ug/mL στρεπτομυκίνη. 10 U/mL πενικιλλίνη (Pen-Strep), 2 mm L-γλουταμίνη, 10 τοις εκατό αδρανοποιημένο με θερμότητα FBS και 0,25 τοις εκατό διττανθρακικό νάτριο (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, ΗΠΑ). Η κυτταρική σειρά διατηρήθηκε στους 37 βαθμούς με 5 τοις εκατό CO2. Τα κύτταρα διαβιβάστηκαν σειριακά σε 70-80 τοις εκατό συμβολή. Κατά την εκτέλεση πειραμάτων, τα κύτταρα HaCaT αναπτύχθηκαν κοντά στο 100 τοις εκατό συρροής και όλες οι θεραπείες πραγματοποιήθηκαν στο ίδιο μέσο.

2.3.Παρασκευή μοσχευμάτων ανθρώπινου δέρματος

Ελήφθησαν μοσχεύματα ανθρώπινου δέρματος, με τη συγκατάθεση της έρευνας, από υπολειμματικό δέρμα μετά από μαστοπλαστική και κόπηκαν για να αφαιρεθεί τυχόν υποδόριο λίπος. Ελήφθησαν βιοψίες δέρματος οκτώ χιλιοστών από δέρμα που αποτελείται από χόριο και επιδερμίδα χρησιμοποιώντας αποστειρωμένη δερματική βιοψία (Kai Medical, Ντάλας, Τέξας, ΗΠΑ) και τοποθετήθηκαν γρήγορα σε μια πλάκα 24-πηγαδιού. Στη συνέχεια, το δέρμα διατηρήθηκε υπό συνθήκες καλλιέργειας διεπαφής αέρα-υγρού σε μέσο καλλιέργειας δέρματος, GibcoTM DMEM, χωρίς γλουταμίνη ή κόκκινο φαινόλης (Thermo Fisher, Waltham, ΜΑ, ΗΠΑ). Το δέρμα διατηρήθηκε στους 37 βαθμούς σε ατμόσφαιρα COZ 5 τοις εκατό για επαρκή χρόνο προσαρμογής.

2.4.Πειραματικός Σχεδιασμός

Ο πειραματικός σχεδιασμός φαίνεται στο σχήμα 1.

2.5. Περιβαλλοντικοί στρεσογόνοι παράγοντες (έκθεση σε μπλε φως (412/450 nm) και καπνός τσιγάρου)

2.5.1. Πηγή μπλε φωτός

Κάθε λαμπτήρας μπλε φωτός (412 nm και 450 nm) αποτελούνταν από 10 πανομοιότυπα LED (Honglitronic, Guangzhou, Κίνα) που εκπέμπουν συνεχώς ορατή ακτινοβολία ενσωματωμένο σε έναν ανακλαστήρα, ο οποίος καλυπτόταν από ένα διαφανές γυάλινο παράθυρο. Μια μοναδική κορυφή με μέγιστο μήκος κύματος είτε 412 nm είτε 450 nm μπορούσε να παρατηρηθεί για τους λαμπτήρες. Το διάφραγμα στην πηγή φωτός ήταν 4,5 cm × 4,5 cm. Η διάταξη στην επιφάνεια έκθεσης ήταν περίπου 10 cm × 10 cm, σε απόσταση περίπου 5 cm από την πηγή φωτός. Ένας ανιχνευτής θερμόπηξης (Gentec EO USA Inc., Lake Oswego, OR, USA) χρησιμοποιήθηκε για τη μέτρηση της ακριβούς έντασης της πηγής φωτός σε Watt/cm² στο επίπεδο της περιοχής έρευνας. Ο χρόνος έκθεσης προσαρμόστηκε για να διασφαλιστεί ότι 1 J/cm2 μπλε φωτός παραδόθηκε στο σημείο της έρευνας. 2.5.2.Καπνός τσιγάρου

Χρησιμοποιήθηκε ένας διαφανής θάλαμος έκθεσης σχεδιασμένος για να φιλοξενεί τις πλάκες του πηγαδιού και ένα τσιγάρο συνδεδεμένο με μια αντλία αέρα (Tarsons, Καλκούτα, Ινδία). Κατά τη διάρκεια 30 λεπτών έκθεσης χρησιμοποιήθηκαν τρία τσιγάρα. Το τσιγάρο συνδέθηκε με μια αντλία που μιμείται την αναρρόφηση του καπνιστή και ο καπνός που απελευθερώνεται στον θάλαμο αντιστοιχεί στον εκπνεόμενο καπνό. Ένα τσιγάρο άναβε στην αρχή της έκθεσης και στη συνέχεια κάθε 10 λεπτά για συνολικά τρία τσιγάρα ανά έκθεση 30 λεπτών.

2.6. Έκθεση στο όζον

Το όζον παρήχθη χρησιμοποιώντας μια γεννήτρια όζοντος. Τα μοσχεύματα δέρματος εκτέθηκαν σε 1,6 μέρη ανά εκατομμύριο (ppm) για συνολικό χρόνο έκθεσης 30 λεπτών.

2.7.MTT (3-(4,5-Διμεθυλθειαζολ-2-υλ)-2,5-βρωμιούχο διφαινυλτετραζόλιο) για τη βιωσιμότητα και τον πολλαπλασιασμό κυττάρων

Διεξήχθη in vitro αξιολόγηση βιωσιμότητας κυττάρων στην κυτταρική σειρά HaCaT όπου 1 x 104 κύτταρα σε πλήρες μέσο προστέθηκαν σε κάθε φρεάτιο πλακών με επίπεδο πυθμένα 96-και επωάστηκαν στους 37 βαθμούς σε υγροποιημένο 5 τοις εκατό CO2 για 16 ώρες της επώασης. Τα κύτταρα υποβλήθηκαν σε επεξεργασία με διαφορετικές συγκεντρώσεις ελαίου Ινδικού σανταλόξυλου σε αιθανόλη για 24 ώρες ή 48 ώρες στους 37 βαθμούς. Τα υπερκείμενα αφαιρέθηκαν και 3-(4)5-διμεθυλ1-2-θειαζολυλ)-2,5-διφαινύ!-2Η-τετραζόλιο βρωμίδιο ( ΜΤΤ) (Sigma-Aldrich, St.Louis, ΜΟ, USA) διάλυμα (1 mg/mL σε DMEM) προστέθηκε σε κάθε φρεάτιο. Τα κύτταρα επωάστηκαν για δύο ώρες στους 37 βαθμούς. Μετά την επώαση, το διάλυμα ΜΤΙ απομακρύνθηκε και προστέθηκε ισοπροπανόλη για να διαλυθούν οι κρύσταλλοι φορμαζάνης. Στη συνέχεια, η απορρόφηση μετρήθηκε στα 570 nm χρησιμοποιώντας συσκευή ανάγνωσης μικροπλακών πολλαπλών λειτουργιών Synergy HTX (BioTek, Winooski, VT, USA). 2.8.Κυτταρική Αντιοξειδωτική Δοκιμασία

Αρχικά, 1 × 105 κύτταρα σε πλήρες μέσο προστέθηκαν σε κάθε φρεάτιο μιας πλάκας 24-πηγαδιού και επωάστηκαν στους 37 βαθμούς σε ένα υγροποιημένο 5 τοις εκατό CO2 για 16 ώρες επώασης. Με βάση τα δεδομένα που ελήφθησαν από τις δοκιμές κυτταροτοξικότητας και διαλυτότητας, η βέλτιστη συγκέντρωση ελαίου ινδικού σανταλόξυλου προσδιορίστηκε με δοκιμή του ινδικού ελαίου σανταλόξυλου σε οκτώ διαφορετικές συγκεντρώσεις: συγκεκριμένα, 0.2 τοις εκατό ,0.1 ποσοστιαία {29}}.01 τοις εκατό ,005 τοις εκατό και 0,001 τοις εκατό . Ως θετικός έλεγχος, η Quercetin (Sigma-Aldrich, St.Louis, ΜΟ, ΗΠΑ) δοκιμάστηκε επίσης σε αυτή τη δοκιμασία σε έξι διαφορετικές συγκεντρώσεις 0,0075 %, 0,00375 %, 0,001875 %, 0,0009375 %, 0,0047 % και 0,00023 %. Στη συνέχεια, τα κύτταρα HaCaT υποβλήθηκαν σε επεξεργασία με 1 mm του μη φθορίζοντος ανιχνευτή, διοξική 21,7'-διχλωροφλουορεσκεΐνη (DCFH-DA) (Sigma, St. Louis, MO, USA) για τρεις ώρες στους 37 βαθμούς και 5 τοις εκατό CO2 . Η αντίδραση οξείδωσης του DCFH ξεκίνησε με την προσθήκη 600 υΜ AAPH (διυδροχλωρικό 2,2'-αζοβις(2-αμιδινοπροπάνιο)) (Sigma, St. Louis, ΜΟ, ΗΠΑ). Ρυθμιστικό διάλυμα λύσης (2 τοις εκατό Triton X{-100 σε PBS) προστέθηκε στα φρεάτια. Στη συνέχεια, μετρήθηκε ο φθορισμός. Το μήκος κύματος διέγερσης 485/88 nm και εκπομπής 528/30 nm μετρήθηκε χρησιμοποιώντας τη συσκευή ανάγνωσης μικροπλακών πολλαπλών λειτουργιών Synergy HTX (BioTek, Winooski, VT, ΗΠΑ).

2.9. Δοκιμασία Δραστηριότητας Σάρωσης Ενδοκυτταρικών Αντιδραστικών Ειδών Οξυγόνου (ROS)

Περίπου 1×10 βαθμού κύτταρα HaCaT σπάρθηκαν ανά φρεάτιο σε διαφορετικές πλάκες 24-πηγαδιών. Μετά την περίοδο επώασης προσαρμογής των 16 ωρών στους 37 βαθμούς, το ινδικό λάδι σανταλόξυλου προστέθηκε στα κύτταρα σε τρεις διαφορετικές συγκεντρώσεις (0.2 τοις εκατό, 0.1 τοις εκατό και 0 0,05 τοις εκατό) για 24 ώρες στους 37 βαθμούς και συμπληρωμένο με 5 τοις εκατό CO2. Ο θετικός έλεγχος άλφα-τοκοφερόλη (βιταμίνη Ε) (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, ΗΠΑ) δοκιμάστηκε επίσης σε τρεις διαφορετικές συγκεντρώσεις: συγκεκριμένα, 15 μονάδες (που αντιστοιχούν σε 2 τοις εκατό), 7,5 μονάδες (που αντιστοιχούν σε 1 τοις εκατό) και 3,75 μονάδες (που αντιστοιχεί σε 0,5 τοις εκατό). Στη συνέχεια, τα κύτταρα υποβλήθηκαν σε επεξεργασία με DCFH-DA (Sigma, St. Louis, ΜΙ, ΗΠΑ) για τρεις ώρες στους 37 βαθμούς και 5 τοις εκατό CO2. Μετά την επεξεργασία DCFH-DA, τα κύτταρα πλύθηκαν τρεις φορές με 1Χ PBS. Στη συνέχεια, οι πλάκες του πηγαδιού 96-εκτέθηκαν σε μπλε φως 412 nm και 450 nm σε 1J/cm2 ή καπνό τσιγάρου ως περιβαλλοντικό στρεσογόνο παράγοντα και αφέθηκαν μη εκτεθειμένες σε σκοτεινό περιβάλλον ως έλεγχος. Μετά την έκθεση, διάλυμα λύσης (με 2 τοις εκατό Triton X-100) προστίθεται και στα 96 φρεάτια. Στη συνέχεια, οι πλάκες του φρεατίου ανακινήθηκαν και ο φθορισμός (μήκος κύματος διέγερσης 485/88 nm και εκπομπή 528/30 nm) μετρήθηκε χρησιμοποιώντας τη συσκευή ανάγνωσης μικροπλακών πολλαπλών λειτουργιών Synergy HTX (BioTek, Winooski, VT, USA).

2.10. Δοκιμασία αναστολής κολλαγενάσης μέσω μεταλλοπρωτεϊνάσης μήτρας-1(MP-1)

Μετά τη βιοψία δέρματος και το χρόνο προσαρμογής, το αντικείμενο δοκιμής εφαρμόστηκε και επωάστηκε για 24 hat37 βαθμούς και 5 τοις εκατό CO2. Στη συνέχεια, οι πλάκες του πηγαδιού εκτέθηκαν σε καπνό τσιγάρου ή όζον (1,6 ppm) για 30 λεπτά. Οι υπόλοιπες πλάκες αφέθηκαν μη εκτεθειμένες σε σκοτεινό περιβάλλον ως έλεγχος.οφέλη από το cistancheΣτη συνέχεια, το υπερκείμενο μεταφέρθηκε σε μια πλάκα πηγαδιού επικαλυμμένη με αντίσωμα για να εκτιμηθεί το επίπεδο της μεταλλοπρωτεϊνάσης μήτρας-1 (MP-1) ακολουθώντας τις οδηγίες του κατασκευαστή για το ανθρώπινο κιτ ELISA MMP-1 (Sigma , St. Louis, MI, ΗΠΑ). Μια αύξηση στην ένταση χρώματος παρακολουθήθηκε με τη φασματομετρία στα 450 nm (BioTek, Winooski, VI, ΗΠΑ). 2.11.Στατιστική Ανάλυση

Τα πειράματα επαναλήφθηκαν ανεξάρτητα σε βιολογικό τριπλούν. Οι γραμμές σφαλμάτων στα γραφικά δεδομένα αντιπροσωπεύουν μια τυπική εκτίμηση του μέσου όρου (SEM). Χρησιμοποιήθηκε μονόδρομη ANOVA για τη στατιστική ανάλυση χρησιμοποιώντας το λογισμικό GraphPad Prism Version 7 (GraphPad Software Inc., San Diego, CA, USA) και ισχυρίστηκε μια στατιστική σημασία όταν η τιμή p ήταν χαμηλότερη από {{3} }.01 (σελ<>

3. Αποτελέσματα

3.1.ΜΤΤ(3-(4,5-Διμεθυλθειαζολ-2-υλ)-2,5-βρωμιούχο διφαινυλτετραζόλιο) για τη βιωσιμότητα και τον πολλαπλασιασμό κυττάρων

Πριν από τον προσδιορισμό της αποτελεσματικότητας του ινδικού ελαίου σανταλόξυλου για την προστασία από το οξειδωτικό στρες που προκαλείται στα κύτταρα HaCaT, πραγματοποιήθηκε ανάλυση MTI για τον καθορισμό της βέλτιστης συγκέντρωσης ελαίου σανταλόξυλου που δεν θα προκαλούσε κανένα ελάττωμα στον κυτταρικό κύκλο ή την κυτταρική τοξικότητα. Έτσι, τα κύτταρα HaCaT υποβλήθηκαν σε επεξεργασία με διαφορετικές συγκεντρώσεις ινδικού σανταλόξυλου ελαίου είτε για 24 ώρες είτε για 48 ώρες (Εικόνα 2Α, Β).

24 ώρες μετά τη θεραπεία, δοκιμάστηκαν οι υψηλότερες συγκεντρώσεις ινδικού σανταλόξυλου (10 τοις εκατό ,2 τοις εκατό ,0.6 τοις εκατό ,0.5 τοις εκατό ,{{1{{13 }}}}.4 τοις εκατό και {{20}}.3 τοις εκατό ) αποκάλυψαν έναν αριθμό βιωσιμότητας κυττάρων χαμηλότερο από 70 τοις εκατό σε σύγκριση με τα κύτταρα που υποβλήθηκαν σε θεραπεία μόνο με μέσα κυτταροκαλλιέργειας. Σε συγκεντρώσεις μικρότερες ή ίσες με 0,2 τοις εκατό του ινδικού ελαίου σανταλόξυλου, μπορεί να παρατηρηθεί βιωσιμότητα κυττάρων υψηλότερη από 70 τοις εκατό. Παράλληλα, αξιολογήθηκε επίσης ο αριθμός κυττάρων των κυττάρων HaCaT που υποβλήθηκαν σε επεξεργασία για 48 ώρες με ινδικό σανταλόξυλο (Εικόνα 2Β). Σε συγκεντρώσεις 10 τοις εκατό , 2 τοις εκατό , 0,6 τοις εκατό , 0,5 τοις εκατό , 0,4 τοις εκατό και 0,3 τοις εκατό , μπορεί να παρατηρηθεί μείωση μικρότερη από το 70 τοις εκατό του αριθμού των κυττάρων. Ωστόσο, τα κύτταρα που υποβλήθηκαν σε επεξεργασία με 0,2 τοις εκατό ινδικού ελαίου σανταλόξυλου ή λιγότερο έδειξαν αποτελέσματα κυτταρικού αριθμού που έδειξαν περισσότερο από 70 τοις εκατό βιωσιμότητα των κυττάρων, κάτι που θύμιζε αυτό που παρατηρήθηκε προηγουμένως για χρόνο θεραπείας 24 ωρών. Με βάση αυτά τα αποτελέσματα, όλα τα επόμενα πειράματα αποτελεσματικότητας που πραγματοποιήθηκαν σε κύτταρα HaCaT και απαιτούσαν θεραπεία 24 ή 48 ωρών με έλαιο ινδικού σανταλόξυλου πραγματοποιήθηκαν στο 0,2 τοις εκατό ως την υψηλότερη συγκέντρωση.

3.2.Κυτταρική Αντιοξειδωτική Δοκιμασία

Στη συνέχεια, η δυνατότητα του ινδικού ελαίου σανταλόξυλου να προστατεύει από το οξειδωτικό στρες που προκαλείται από τον εκκινητή υπεροξυλίου AAPH παρακολουθήθηκε στα κύτταρα HaCaT. Όπως προσδιορίστηκε στην ανάλυση MTT, η υψηλότερη συγκέντρωση ινδικού σανταλόξυλου που χρησιμοποιήθηκε ήταν {{0}}.2 τοις εκατό και η χαμηλότερη συγκέντρωση που χρησιμοποιήθηκε ήταν 0.001 τοις εκατό . Η κερσετίνη, ένα γνωστό αντιοξειδωτικό, χρησιμοποιήθηκε ως θετικός μάρτυρας. Η υψηλότερη συγκέντρωση που χρησιμοποιήθηκε ήταν 0,0075 τοις εκατό, ενώ η χαμηλότερη συγκέντρωση που χρησιμοποιήθηκε ήταν 0,00023 τοις εκατό (Εικόνα 3Α, Β).

Το ινδικό λάδι σανταλόξυλου έδειξε αντιοξειδωτικό δυναμικό στις πέντε υψηλότερες συγκεντρώσεις που δοκιμάστηκαν ({{0}}.2 τοις εκατό ,0.1 τοις εκατό ,0.07 τοις εκατό,{ {11}}.05 τοις εκατό και 0.025 τοις εκατό ).Η αντιοξειδωτική ισχύς του ινδικού λαδιού σανδαλόξυλου ήταν ισοδύναμη με αυτή που παρατηρήθηκε με τις τρεις υψηλότερες συγκεντρώσεις ο θετικός έλεγχος κερσετίνη. Αυτά τα αποτελέσματα υποδεικνύουν ότι μια συγκέντρωση 0,2 τοις εκατό, το έλαιο ινδικού σανταλόξυλου έχει αντιοξειδωτική δράση που ήταν εξίσου ισχυρή με την αντιοξειδωτική δράση της κερκετίνης θετικού μάρτυρα στο 0,0075 τοις εκατό. Ο προσδιορισμός ICso βρέθηκε να είναι 0,03 τοις εκατό για το ινδικό λάδι σανταλόξυλου και 0,002 τοις εκατό για την κερσετίνη (Εικόνα 3Β). 3.3. Δοκιμασία δραστηριότητας σάρωσης ενδοκυτταρικών αντιδραστικών ειδών οξυγόνου (ROS)

Στη συνέχεια παρακολουθήθηκε το αντιοξειδωτικό δυναμικό του ινδικού σανταλόξυλου για προστασία από το οξειδωτικό στρες που προκαλείται από περιβαλλοντικούς στρεσογόνους παράγοντες. Τρεις διαφορετικοί περιβαλλοντικοί στρεσογόνοι παράγοντες χρησιμοποιήθηκαν σε αυτή τη μελέτη, συγκεκριμένα το μπλε φως στα 412 nm, το μπλε φως στα 450 nm και ο καπνός του τσιγάρου. Και τα δύο μήκη κύματος μπλε φωτός δοκιμάστηκαν σε δόση 1J/cm2. Για αυτόν τον προσδιορισμό χρησιμοποιήθηκαν τρεις συγκεντρώσεις ελαίου ινδικού σανταλόξυλου που έδειξαν καλή κυτταρική αντιοξειδωτική αποτελεσματικότητα από τον προσδιορισμό MTI: συγκεκριμένα, 0.05 τοις εκατό ,0.1 τοις εκατό και 0,2 τοις εκατό . Η άλφα-τοκοφερόλη, ένα λιπόφιλο αντιοξειδωτικό, χρησιμοποιήθηκε ως θετικός έλεγχος σε συγκεντρώσεις 0,5 τοις εκατό και 2 τοις εκατό (Εικόνα 4).

Μια απότομη επαγωγή στα επίπεδα ή στο ROS μπορεί να παρατηρηθεί βασικά όταν τα μη επεξεργασμένα κύτταρα HaCaT εκτέθηκαν στους στρεσογόνους παράγοντες: μπλε φως στα 412 nm, μπλε φως στα 450 nm και καπνός τσιγάρου. Όταν τα κύτταρα HaCaT υποβλήθηκαν σε επεξεργασία με τις τρεις συγκεντρώσεις ινδικού ελαίου σανταλόξυλου (0.05 τοις εκατό ,0,1 τοις εκατό και 0,2 τοις εκατό), μια σημαντική μείωση στο οξειδωτικό στρες που προκαλείται είτε από το μπλε φως (412 nm ή 450 nm) ή καπνός τσιγάρου. Πράγματι, 66 τοις εκατό (σελ<0.0001),73%><0.0001),and><0001) decreases="" in="" the="" level="" of="" ros="" could="" be="" observed="" in="" cells="" treated="" with="" 0.05%,0.1%,="" and="" 0.2%="" of="" indian="" sandalwood="" oil,="" respectively="" prior="" to="" exposure="" to="" blue="" light="" at="" 412="" nm.="" in="" cells="" exposed="" to="" blue="" light="" at="" 450="" nm,="" a="" similar="" trend="" could="" be="" observed="" where="" 60%(p="0.0012),68%(p=0.0005),and" 75%(p="0.0002)decreases" could="" be="" observed="" for="" similar="" concentrations="" of="" indian="" sandalwood="" oil,="" respectively.="" moreover,="" in="" hacat="" cells="" that="" were="" exposed="" to="" cigarette="" smoke,="" indian="" sandalwood="" oil="" was="" observed="" to="" significantly="" protect="" against="" the="" ros="" induced,="" although="" the="" decrease="" was="" more="" modest="" in="" comparison="" to="" blue="" light="" at="" 412="" nm="" and="" 450="" nm.="" thus,="" at="" the="" highest="" concentration="" (0.2%)="" of="" indian="" sandalwood="" oil,="" only="" a="" 28%(p="0.001)" decrease="" in="" the="" level="" of="" ros="" was="">

Ενώ και οι τρεις συγκεντρώσεις (0.5 τοις εκατό , 1 τοις εκατό και 2 τοις εκατό) του θετικού ελέγχου, της άλφα-τοκοφερόλης, θα μπορούσαν να μειώσουν σημαντικά το ROS που προκαλείται από το μπλε φως 450 nm, μόνο οι δύο υψηλότερες συγκεντρώσεις άλφα- Η τοκοφερόλη (1 τοις εκατό και 2 τοις εκατό) θα μπορούσε να προκαλέσει προστατευτική δράση έναντι των επιπέδων ROS που προκαλείται από τον καπνό του τσιγάρου σε σύγκριση με τα δείγματα που δεν έχουν υποστεί επεξεργασία. Ωστόσο, καμία από τις τρεις συγκεντρώσεις που δοκιμάστηκαν για άλφα-τοκοφερόλη δεν μπορούσε να μειώσει σημαντικά το ROS που προκαλείται από το μπλε φως 412 nm. Είναι ενδιαφέρον ότι σε κύτταρα HaCaT που υποβλήθηκαν σε επεξεργασία με την υψηλότερη συγκέντρωση άλφα-τοκοφερόλης πριν από την έκθεση στο μπλε φως στα 412 nm, μπορεί να παρατηρηθεί αύξηση των επιπέδων ROS σε σύγκριση με κύτταρα που δεν υποβλήθηκαν σε αγωγή αλλά εκτέθηκαν. Αυτό υποδηλώνει ότι ενδέχεται να υπάρχουν παρεμβολές μεταξύ της ανάλυσης DCFH-DA, της άλφα-τοκοφερόλης και του μπλε φωτός στα 412 nm.

3.4. Δοκιμασία αναστολής κολλαγενάσης (MMP-1)

Δεδομένου ότι αποδείχθηκε η προστατευτική επίδραση του ινδικού σανταλόξυλου έναντι του οξειδωτικού στρες που προκαλείται από περιβαλλοντικούς στρεσογόνους παράγοντες, διερευνήθηκε επίσης η αξιολόγηση του κατά πόσον το ινδικό έλαιο σανταλόξυλου θα μπορούσε να προστατεύσει από την επιβλαβή επίδραση της ρύπανσης παρακολουθώντας έναν τελεστή κατάντη, MMP-1. (Εικόνα 5).

Υπήρξε μια δραστική αύξηση στα επίπεδα MP{{0}} στα μη επεξεργασμένα δείγματα που εκτέθηκαν σε περιβαλλοντικούς στρεσογόνους παράγοντες σε σύγκριση με τα μη επεξεργασμένα και μη εκτεθειμένα δείγματα. Όταν εκτέθηκε στο όζον, το ινδικό λάδι σανταλόξυλου ανέστειλε την έκφραση του MMP-1 κατά 88 τοις εκατό (p < 0,0001).="" το="" ινδικό="" λάδι="" σανταλόξυλου="" επέδειξε="" επίσης="" ανασταλτική="" επίδραση="" στα="" επίπεδα="" mmp-1="" όταν="" εκτέθηκε="" στον="" καπνό="" του="" τσιγάρου.="" για="" αυτήν="" την="" έκθεση,="" η="" διαφορά="" μεταξύ="" των="" μη="" επεξεργασμένων="" και="" των="" δειγμάτων="" που="" υποβλήθηκαν="" σε="" επεξεργασία="" ήταν="" 70="" τοις="" εκατό="" (p="0.0003)," η="" οποία="" ήταν="" στατιστικά="">

4. Συζήτηση

Το ινδικό σανταλόξυλο χρησιμοποιείται για περισσότερα από 2500 χρόνια και η εμπορική χρήση του χρονολογείται από το 300 π.Χ. [2,6]. Έχει αναφερθεί παλαιότερα για τις αντιοξειδωτικές, αντι-τυροσινάση, αντιφλεγμονώδεις, αντιπολλαπλασιαστικές και αντιμικροβιακές του ιδιότητες [10-12,23,24]. Παρά τις αναφορές για τη φαρμακολογική δράση του σανταλόξυλου, λίγες μόνο μελέτες έχουν αξιολογήσει τα οφέλη του ως καλλυντικού συστατικού. Συγκεκριμένα, τα πιθανά οφέλη του ινδικού ελαίου σανταλόξυλου στην προστασία του δέρματος από τις βλαβερές επιπτώσεις των περιβαλλοντικών στρεσογόνων παραγόντων δεν έχουν ποτέ αναφερθεί. Σε αυτή τη μελέτη, δείξαμε ότι το ινδικό λάδι σανταλόξυλου έδειξε σημαντική προστατευτική δράση έναντι των ρύπων όπως ο καπνός του τσιγάρου και το όζον στα εκφυτεύματα δέρματος. Το ινδικό λάδι σανταλόξυλου αποδείχθηκε επίσης ότι προστατεύει τα κύτταρα HaCaT από το οξειδωτικό στρες που προκαλείται από περιβαλλοντική πρόκληση τόσο από το μπλε φως όσο και από τον καπνό του τσιγάρου. Περαιτέρω αποδείξαμε ότι το ινδικό έλαιο σανταλόξυλου μειώνει τα επίπεδα κολλαγενάσης MMP-1 στα εκφυτεύματα δέρματος. Πραγματοποιήθηκαν κυτταρικές αντιοξειδωτικές δοκιμασίες αποκαλύπτοντας την ανασταλτική δράση του ινδικού ελαίου σανταλόξυλου. Σε αυτή τη μελέτη, το διυδροχλωρικό 2,2'-αζωβίς (2-αμιδινοπροπάνιο) (AAPH) χρησιμοποιήθηκε ως ένωση δημιουργίας ελεύθερων ριζών που θα μπορούσε να μιμηθεί το οξειδωτικό στρες στα κύτταρα HaCaT. Αυτό χρησιμοποιήθηκε για την πρόκληση ενός σταθερού ρυθμού δημιουργίας ριζών, επιτρέποντας επαρκή χρόνο για την αξιολόγηση της δραστηριότητας δέσμευσης ελεύθερων ριζών [25]. Ως θετικός έλεγχος επιλέχθηκε η κερσετίνη. Η μελέτη μας έδειξε ότι το ινδικό λάδι σανταλόξυλου έχει ίση αντιοξειδωτική ικανότητα με την καθιερωμένη αντιοξειδωτική κερκετίνη, όπου μπορούσε να παρατηρηθεί 95-85 τοις εκατό μείωση στο επίπεδο του ROS στην υψηλότερη συγκέντρωση που χρησιμοποιείται και για τα δύο προϊόντα δοκιμής.

Στη συνέχεια, τα κύτταρα HaCaT υποβλήθηκαν σε περιβαλλοντικούς οξειδωτικούς στρεσογόνους παράγοντες, χρησιμοποιώντας καπνό τσιγάρου και στη συνέχεια δύο διαφορετικά μήκη κύματος μπλε φωτός. Ο καπνός του τσιγάρου αποδείχθηκε ότι προσδίδει πολύ μεγαλύτερη πίεση στα κύτταρα HaCaT σε σύγκριση με τα δύο μήκη κύματος του μπλε φωτός που χρησιμοποιήθηκαν. Πράγματι, ο καπνός του τσιγάρου αποτελούσε έναν πανταχού παρόν περιβαλλοντικό κίνδυνο ως πηγή ανθρώπινης έκθεσης σε χημικά ενεργούς ρύπους. Το όζον χρησιμοποιήθηκε παρομοίως στο ex vivo πείραμα. Και οι δύο στρεσογόνοι παράγοντες δημιούργησαν υψηλά επίπεδα ROS, συμπεριλαμβανομένων των ριζών υδροξυλίου και του υπεροξειδίου του υδρογόνου, τα οποία μπορούν να συνδεθούν με επιβλαβείς παθολογικές διεργασίες στο δέρμα [26,27]. Η προστατευτική δράση του ινδικού σανταλόξυλου ήταν πιο μέτρια στα κύτταρα που εκτέθηκαν στον καπνό του τσιγάρου σε σύγκριση με το μπλε φως. Αυτό θα μπορούσε να εξηγηθεί από το γεγονός ότι στα διάφορα πειράματα που πραγματοποιήθηκαν σε αυτή τη μελέτη, ο καπνός του τσιγάρου προκάλεσε περίπου δύο φορές περισσότερο ROS από το μπλε φως. Έτσι, ακόμη και στην υψηλότερη συγκέντρωση που δοκιμάστηκε (0,2 τοις εκατό ) ελαίου ινδικού σανταλόξυλου, καθώς και στον έλεγχο της άλφα-τοκοφερόλης στο 2 τοις εκατό (15 μονάδες), πιθανότατα κατακλύζονταν από την αυξημένη ποσότητα ROS που προκαλείται.

Η έκθεση στην υπεριώδη ακτινοβολία, σε συνδυασμό με τις φυσικές λειτουργικές αλλαγές λόγω της γήρανσης, αναγκάζει τους δερματικούς ινοβλάστες να αυξήσουν την παραγωγή MMP-1 [28,29]. Η μεταλλοπρωτεϊνάση μήτρας-1 (MMP-1) είναι μια εξαρτώμενη από ψευδάργυρο και ασβέστιο ενδοπεπτιδάση που συντίθεται και απελευθερώνεται τόσο από δερματικούς ινοβλάστες όσο και από κερατινοκύτταρα. Λειτουργεί με τη διάσπαση του κολλαγόνου που βρίσκεται στην εξωκυτταρική μήτρα (ECM). Στη συνέχεια, το MMP-1 απελευθερώνεται ως ανενεργό προένζυμο, το οποίο αργότερα ενεργοποιείται μέσω πρωτεολυτικής διάσπασης, οδηγώντας στην απελευθέρωση της ενεργής του μορφής. Μια αυξημένη έκφραση της δραστηριότητάς του που προκαλείται από μια ανοδική ρύθμιση έχει εμπλακεί με την υποβάθμιση της εξωκυτταρικής μήτρας και οδηγεί σε πρόωρη φωτογήρανση του ανθρώπινου δέρματος καθώς και σε καρκίνο του δέρματος [30].

Σε ιστό δέρματος ή καλλιεργημένους ινοβλάστες, τόσο η ενεργή όσο και η απενεργοποιημένη μορφή της MMP-1 απελευθερώνεται στο μέσο καλλιέργειας [28]. Ωστόσο, θα πρέπει να σημειωθεί ότι η ανάλυση ELISA υψηλής απόδοσης που χρησιμοποιήθηκε ποσοτικοποίησε μόνο τον pro-domain και την ενεργή μορφή του MMP-1 αλλά δεν ποσοτικοποίησε την απενεργοποιημένη μορφή του MMP-1 [28]. Συγκεκριμένα, το ινδικό λάδι σανταλόξυλου μπόρεσε να μειώσει το επίπεδο της μεταλλοπρωτεϊνάσης μήτρας-1 (MP-1) ​​στο ex vivo δέρμα κατά σημαντική ποσότητα. Ως εκ τούτου, μπορούμε να υποθέσουμε ότι δείχνοντας μια σημαντική πτώση στο έλαιο MP-1 Ινδικού σανταλόξυλου πιθανότατα ενεργούσε στην ενεργοποιημένη μορφή του ενζύμου MMP-1. Έτσι, μπορεί να συναχθεί το συμπέρασμα ότι το ινδικό λάδι σανταλόξυλου απέτρεψε αποτελεσματικά την αύξηση της δραστηριότητας τουλάχιστον της ενεργοποιημένης μορφής MMP-1. Στο μέλλον, θα μπορούσαν να διεξαχθούν περισσότερες μελέτες για την περαιτέρω διερεύνηση των οδών μέσω των οποίων η δραστηριότητα του MMP-1 διαταράχθηκε από το ινδικό λάδι σανταλόξυλου.

Είναι καλά τεκμηριωμένο ότι αυτοί οι περιβαλλοντικοί παράγοντες συμβάλλουν στην ευπάθεια του δέρματος και αυτό με τη σειρά του οδηγεί σε πρόωρη γήρανση του δέρματος [16]. Οι παράγοντες που ευθύνονται για την επιτάχυνση της γήρανσης του δέρματος συμβάλλουν σε μεγάλο βαθμό από την υπερέκφραση των ROS και την ανοδική ρύθμιση των MMPs [16]. Πράγματι, καθώς το δέρμα γερνάει και λόγω της ανισορροπίας στην έκφραση των ελεύθερων ριζών, ο αριθμός των κερατινοκυττάρων στην επιδερμίδα έπεσε. Αυτό οδήγησε στην επακόλουθη μείωση του κολλαγόνου που βρίσκεται στο δέρμα. Αυτές οι αλλαγές αναφέρθηκε ότι επαναφέρουν τον κύκλο και συμβάλλουν στην αύξηση της παραγωγής ελεύθερων ριζών [31]. Επιπλέον, ένας άλλος παράγοντας πρόωρης γήρανσης του δέρματος ήταν η αυξημένη έκφραση των MMPs και η μείωση του επιπέδου των αναστολέων του (TIMP). Διαπιστώθηκε ότι σχετίζονται με την ανοδική ρύθμιση του ROS[32]. Ως εκ τούτου, το επίπεδο των ROS που προκαλείται στο δέρμα έπαιξε κεντρικό ρόλο στις αντιδράσεις προς την πρόωρη γήρανση του δέρματος.

Εδώ, δείξαμε ότι το ινδικό λάδι σανταλόξυλου προστατεύει από την οξείδωση που προκαλείται από το μπλε φως στα 412 nm και 450 nm και την επίδραση του καπνού του τσιγάρου στα κερατινοκύτταρα με κατά προσέγγιση μείωση 75 τοις εκατό στη δραστηριότητα ROS που παρατηρήθηκε με το μπλε φως και μια κατά προσέγγιση μείωση περίπου 30 τοις εκατό στη δραστηριότητα ROS που παρατηρήθηκε για τον καπνό του τσιγάρου. Αυτή η μείωση στα ROS και MMP-1 υποδηλώνει ότι το ινδικό λάδι σανταλόξυλου πιθανότατα διέθετε αντιγηραντικές ιδιότητες του δέρματος. Αυτά τα στοιχεία του δέρματος που επηρεάστηκαν από τους ρύπους θα μπορούσαν να στοχοποιηθούν από ένα καλλυντικό συστατικό όπως το ινδικό λάδι σανταλόξυλου για την πρόληψη της πρόωρης γήρανσης του δέρματος. Τελικά, η γήρανση του δέρματος που προκαλείται από το περιβαλλοντικό στρες είναι ένα κρίσιμο στοιχείο που πρέπει να ληφθεί υπόψη για τη διατήρηση της καλής υγείας του δέρματος.

Όπως αναφέρεται από τους Velasco et al.[15], τα καλλυντικά συστατικά μπορεί να λειτουργήσουν είτε αποτρέποντας την επαφή μεταξύ του δέρματος και των ρύπων είτε προκαλώντας βιοχημικές διεργασίες που εμποδίζουν το οξειδωτικό πρωτογενές προϊόν. Για να επιτευχθεί μια ιδανική καλλυντική σύνθεση, και τα δύο χαρακτηριστικά είναι ιδιαίτερα περιζήτητα. Αυτά θα οδηγούσαν σε καλλυντικά προϊόντα που μπορούν να μειώσουν τις βραχυπρόθεσμες βλάβες όπως η φλεγμονή και να ρυθμίσουν προς τα πάνω τη οδό σηματοδότησης για να αυξήσουν τη μεταβολική δραστηριότητα και τη διαφοροποίηση των κυττάρων [15]. Σε αυτή τη μελέτη, αναφέραμε πολλά υποσχόμενα προκαταρκτικά αποτελέσματα που πιστοποιούν την προστατευτική και αντιγηραντική δράση του ινδικού ελαίου σανταλόξυλου. Έτσι, για να είναι επιτυχής υποψήφιος ως συστατικό καλλυντικών, θα πρέπει να πραγματοποιηθούν περαιτέρω δοκιμές αποτελεσματικότητας προκειμένου να αξιολογηθεί περαιτέρω το λειτουργικό χαρακτηριστικό του ινδικού σανταλόξυλου. Επιπλέον, απομένει να διεξαχθεί in vivo αξιολόγηση της δερματολογικής δραστηριότητας και των επιπέδων χρήσης του ελαίου για να εξεταστούν οι μακροπρόθεσμες και βραχυπρόθεσμες επιπτώσεις της έκθεσης σε περιβαλλοντικά εκθέματα.

5. Συμπεράσματα

Περιγράψαμε σε αυτή τη μελέτη μια νέα ιδιότητα του ινδικού σανταλόξυλου ως προστατευτικού δραστικού συστατικού έναντι της επιζήμιας επίδρασης των περιβαλλοντικών στρεσογόνων παραγόντων in vitro και στο ανθρώπινο δέρμα ex vivo.

Η αντιοξειδωτική αποτελεσματικότητα του ινδικού ελαίου σανταλόξυλου με τη χρήση μιας κυτταρικής αντιοξειδωτικής δοκιμασίας διερευνήθηκε όπου η υπό δοκιμή ουσία μείωσε σημαντικά το επίπεδο ROS που επάγεται από τον εκκινητή υπεροξυλίου AAPH. Θυμίζοντας τα τελευταία αποτελέσματα, το ινδικό λάδι σανταλόξυλου αποδείχθηκε επίσης ότι στη συνέχεια προστατεύει τα κύτταρα HaCaT από το οξειδωτικό στρες που προκαλείται από περιβαλλοντικούς στρεσογόνους παράγοντες όπως το μπλε φως στα 412 nm και τα 450 nm και ο καπνός του τσιγάρου.

Η προστατευτική επίδραση του ινδικού ελαίου σανταλόξυλου έναντι της επιζήμιας επίδρασης της ρύπανσης (καπνός τσιγάρου και όζον) παρακολουθήθηκε επίσης χρησιμοποιώντας ένα πιο περίπλοκο μοντέλο μοσχευμάτων ανθρώπινου δέρματος. Τα αποτελέσματά μας έδειξαν ότι το ινδικό λάδι σανταλόξυλου ήταν ικανό να μειώσει σημαντικά το επίπεδο MMP-1 που προκαλείται είτε από τον καπνό του τσιγάρου είτε από το όζον.

Τα αποτελέσματα που παρουσιάστηκαν σε αυτή τη μελέτη υποδηλώνουν ότι το ινδικό λάδι σανταλόξυλου έχει τη δυνατότητα να χρησιμεύσει ως ενεργό συστατικό στη δερματολογία για προστασία από περιβαλλοντικούς στρεσογόνους παράγοντες εκτός από τις ήδη υπάρχουσες εφαρμογές αρώματος και αρωματοθεραπείας. ως πολλά υποσχόμενο υποψήφιο στη χρήση του ως συστατικό πολλαπλών χρήσεων στη φροντίδα των καλλυντικών.

Αυτό το άρθρο εξάγεται από το Cosmetics 2021, 8, 53. https://doi.org/10.3390/cosmetics8020053 https://www.mdpi.com/journal/cosmetics