Αντιφλεγμονώδη Iridoids από τα στελέχη του Cistanche Deserticola που καλλιεργούνται στην έρημο Tarim

Επικοινωνία: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com

ΑΦΗΡΗΜΕΝΗ

Προκειμένου να προσδιοριστούν τα χημικά συστατικά τουCistanche deserticolaπου καλλιεργήθηκαν στην έρημο Tarim, πραγματοποιήθηκε συστηματική φυτοχημική έρευνα. Τα συστατικά απομονώθηκαν με πυριτική πηκτή, Sephadex LH-20, γέλη MCI, χρωματογραφία στήλης ODS και ημι-παρασκευαστική HPLC. Οι δομές τους προσδιορίστηκαν με βάση τις φασματοσκοπικές αναλύσεις MS και NMR, με χημικές μεθόδους ή/και σύγκριση με δεδομένα της βιβλιογραφίας. Οι αντιφλεγμονώδεις δραστηριότητες των απομονώσεων αξιολογήθηκαν για τις ανασταλτικές τους επιδράσεις στην επαγόμενη από λιποπολυσακχαρίτη (LPS) παραγωγή μονοξειδίου του αζώτου (NO) σε μικρογλοιακά κύτταρα ποντικού BV-2. Εννέα ιριδοειδή απομονώθηκαν και ταυτοποιήθηκαν ωςcistanche desertosideA (1), cistanin (2), cistachlorin (3), 6-deoxycatalpol (4), gluroside (5), κανκανοσίδη A (6), ajugol (7), bartsioside (8) και {{9 }}επι-λογανικό οξύ (9). Η ένωση 9 εμφάνισε ισχυρή αναστολή στην παραγωγή ΝΟ με τιμή IC50 να είναι 5,2 μmol·L−1, συγκρίσιμη με την κερσετίνη θετικού ελέγχου (4,3 μmol·L−1). Η ένωση 1 ήταν ένα νέο ιριδοειδή και οι ενώσεις 5, 6 και 8 απομονώθηκαν από αυτό το είδος για πρώτη φορά.

[ΛΕΞΕΙΣ ΚΛΕΙΔΙΑ] Cistanche deserticola; Ιριδοειδείς; Διευκρίνιση δομής; Αντιφλεγμονώδης δράση

Cistanche deserticola

Εισαγωγή

Cistanches Herba(Roucongrong στα κινέζικα) που ανήκει στην οικογένεια Orobanchaceae, διανέμεται κυρίως στη Βόρεια Αφρική, την Αραβία και τις ασιατικές χώρες [1]. Ως γνωστό τονωτικό στην παραδοσιακή κινεζική ιατρική (TCM), οι μίσχοι τουCistanchedeserticolaκαιCistancheσωληνοειδήςέχουν χρησιμοποιηθεί από καιρό στην Κίνα και την Ιαπωνία για τη θεραπεία της νεφρικής ανεπάρκειας, της γυναικείας υπογονιμότητας, της νοσηρής λευκόρροιας, της νευρασθένειας και της γεροντικής δυσκοιλιότητας [2-3]. Προηγούμενες φυτοχημικές έρευνες έχουν

[Χρηματοδότηση έρευνας] Αυτό το έργο υποστηρίχθηκε οικονομικά από το Εθνικό Ίδρυμα Φυσικών Επιστημών της Κίνας (Αρ. 81222051), το Επιστημονικό Ερευνητικό Πρόγραμμα Παραδοσιακής Κινεζικής Ιατρικής (Αρ. 201307002) και το Εθνικό Πρόγραμμα Ε&Α βασικής τεχνολογίας "Νέα Καινοτομία Φαρμάκων" της Κίνας.

Αυτοί οι συγγραφείς δεν έχουν να δηλώσουν σύγκρουση συμφερόντων. Δημοσιεύθηκε από την Elsevier BV Με την επιφύλαξη παντός δικαιώματος υποδεικνύεται η παρουσία τουφαινυλαιθανοειδείς γλυκοσίδες(PhGs), ιριδοειδή, λιγνάνες και πολυσακχαρίτες στοCistancheείδη [4], και ορισμένα από τα απομονωμένα στελέχη παρουσίασαν νευροπροστατευτικά, ηπατοπροστατευτικά, αντιφλεγμονώδη, αντιβακτηριακά, αντι-ιικά και αντιοξειδωτικά αποτελέσματα [5-6].

Στα τέλη της δεκαετίας του 1990, προκειμένου να προστατευθεί το πετρελαιοφόρο Tazhong και να ελεγχθεί η έρημος, το εργοστάσιο στερέωσης άμμου Haloxylon ammodendron (CA Mey.) Bunge, που φιλοξενούσεCistanchedeserticola, εισήχθη από τα βόρεια προς τα νότια της Xinjiang, και μεγάλες ποσότητεςC. deserticolaκαλλιεργήθηκαν. Οι κλιματικές συνθήκες και το περιβάλλον ανάπτυξης στο νότο είναι πολύ διαφορετικά από αυτό στο βόρειο τμήμα της Xinjiang. Αν τα χημικά συστατικά τουCistanchedeserticolaπου καλλιεργούνται στο νότιο Xinjiang ποικίλλουν ή όχι δεν είναι σαφές. Προκειμένου να προσδιοριστούν τα χημικά συστατικά τουCistanchedeserticolaπου καλλιεργήθηκαν στην έρημο Tarim, διεξήχθη συστηματική φυτοχημική έρευνα στην παρούσα μελέτη. Εδώ, αναφέρεται η απομόνωση και η δομική αποσαφήνιση ενός νέου ιριδοειδή γλυκοζίτη (1) μαζί με οκτώ γνωστά ανάλογα (2-9), μαζί με τις αντιφλεγμονώδεις δραστηριότητές τους.

Αντιφλεγμονώδες αποτέλεσμα τουCistanche deserticola

Αποτελέσματα και συζήτηση

Το 85 τοις εκατό υδατικό εκχύλισμα αιθανόλης των στελεχών τουCistanchedeserticolaεναιωρήθηκε σε Η2Ο (10 L) και εκχυλίστηκε με EtOAc (10 L x 3) και n-BuOH διαδοχικά. Τα εκχυλίσματα EtOAc και n-BuOH υποβλήθηκαν σε σιλικαζέλ, Sephadex LH-20, MCI gel και χρωματογραφία στήλης ODS (CC) και ημι-παρασκευαστική HPLC για να δώσουν ένα νέο (1) και οκτώ γνωστά ιριδοειδή ({ {9}}) (Εικ. 1).

Η ένωση 1 απομονώθηκε ως λευκή άμορφη σκόνη με αρνητική οπτική περιστροφή ([a]20 -118.0, c 0,1, MeOH). Το φάσμα υπερύθρων του έδειξε ισχυρές ζώνες απορρόφησης σε περίπου 3 393 cm−1 που αποδίδονται στις υδροξυ ομάδες. Έχει μοριακό τύπο C16H26O9 που προσδιορίζεται από το οιονεί μοριακό ιόν σε m/z 385.148 5 [M συν Na] συν (Υπολογ. για C16H26O9Na, 385.146 9) και m/z 401. .122 8 [M συν K] συν (Υπολογ. για CHOK, 401.120 8) συσχετίσεις από H-1 σε C-1′, H{-10 έως C-7, C-8 και C-9, και από H-11 έως C-3, C{-4 και C{{32 }} υποστήριξε επίσης την παραπάνω διευκρίνιση.

Η στερεοχημεία της ένωσης 1 προσδιορίστηκε με σύγκριση των χημικών μετατοπίσεων και σταθερών σύζευξης με δεδομένα της βιβλιογραφίας και με ανάλυση του φάσματος NOESY. Η σχέση του H-5 με το H-9 προσδιορίστηκε ως cis από τη σταθερά σύζευξης (10.5 Hz) [8-9]. Για τα πιο φυσικά ιριδοειδή, οι διαμορφώσεις των C-1-OH, H-5 και H-9 είναι , και οι χημικές μετατοπίσεις 13C NMR του C{{1{0} } και C{-1′ είναι γενικά σε δC 93–98 και 97–101, αντίστοιχα. Ενώ, για εκείνους της - διαμόρφωσης, οι συντονισμοί των C-1 και C{-1′ είναι, κατά μέσο όρο, 5–6 μετατοπισμένες προς τα κάτω [10-11]. Τα δεδομένα NMR 13C του com-16 26 9 στο (συν )-HR-ESIMS και υποστηρίζονται από τα δεδομένα NMR 13C (Πίνακας 1), υποδεικνύοντας 4 βαθμούς ακορεστότητας. Οξύ υδρόλυση−1Πίνακας 1 1H NMR (500 MHz) και 13C NMR (125 MHz) δεδομένα του 1 (δ σε ppm, J σε Hz) της ένωσης 1 με 2 mol, L τριφθοροξικού οξέος έδωσε D-γλυκόζη, που αναγνωρίστηκε με ανάλυση των παραγώγων του σιλανίου με ανάλυση GC. Η σχετική διαμόρφωση στο ανωμερές κέντρο του γλυκοσυλίου εκχωρήθηκε ως από τη σταθερά σύζευξης των 8,0 Hz. Τα δεδομένα 1Η και 13C NMR (Πίνακας 1) της ένωσης 1, τα οποία εκχωρήθηκαν αναμφισβήτητα από διάφορα πειράματα 2D NMR, έδειξαν σήματα που μπορούν να αποδοθούν σε δύο μεθύλια σε δΗ 1,23 (3Η, s, Η-10) και 1,52 (3Η, br s, Η-11), ένα μεθυλένιο σε δΗ 1,70 (1Η, dt, J=13,5, 5,5 Hz, Η{-6) και 1,92–1,98 (1Η, m, Η -6 ), τρεις μεθίνες σε δΗ 2,47 (1Η, br d, J= 10.5 Hz, Η-9), 2,67–2,72 (1Η, m, Η-5 ), και 3,62 (1Η, t-όπως, J{= 5,5 Hz, Η{-7), και μια, -ακόρεστη ομάδα ακετάλης δΗ 5,40 (1Η, d, J {= 2). 0 Ηζ, Η-1), 5,92 (1Η, br s, Η-3), μαζί με ένα -D-γλυκοπυρανοσυλ ανωμερικό πρωτόνιο σε δΗ 4,61(1Η, d, J=8). 0 Hz, H{104}}′). Τα δεδομένα NMR 1Η και 13C της ένωσης 1 ήταν πολύ παρόμοια με εκείνα της πλευράς Λάνκα Α (6) εκτός από τα προφανή αποκαλυμμένα σήματα του Η-7 [δH 3.62 (1Η, t-όπως, J {= 5 0,5 Hz)] και C-7 (δC 79,8), υποδεικνύοντας την υδροξυλίωση της θέσης C-7 [7]. Αυτή η αφαίρεση υποστηρίχθηκε από αναλύσεις του 1H-1H COZY του H-1/H-9/H-5/H-6/H{127} ( Εικ. 2). Το άλλο HMBC

Η λίβρα 1 που αναφέρεται εδώ (Πίνακας 1) έδειξε τις κανονικές - διαμορφώσεις για τα C-1-OH, H-5 και H-9. Οι σχετικές διαμορφώσεις των H{-7 και H3-10 προσδιορίστηκαν από το φάσμα NOESY (Εικ. 2), στο οποίο οι συσχετίσεις NOE μεταξύ H-1 και H3-10 και μεταξύ H3-10 και H-7 έδειξε ότι αυτά τα πρωτόνια βρίσκονται όλα στην ίδια όψη. Καμία συσχέτιση NOESY μεταξύ H{3-10 και H{-9 δεν πρότεινε ότι τα H-9 και H3-10 βρίσκονται στην αντίθετη όψη του μορίου. Ως εκ τούτου, η δομή της ένωσης 1 διευκρινίστηκε ως 7-υδροξυ-Λάνκα πλευρά Α που ονομάζεταισισταδεσερτοζίδηA.

Οι γνωστές ενώσεις αναγνωρίστηκαν ως ορισμένες (2) [12],κισταχλωρίνη(3) [12], 6-δεοξυκαταλπόλη (4) [13], γλυκοσίδη (5) [14], πλευρά Lankan A (6) [7], Lugol (7) [15], bartsioside (8) [16] και 8-επι-οργανικό οξύ (9) [17] σε σύγκριση με τα δεδομένα NMR με αυτά που αναφέρονται στη βιβλιογραφία. Οι αντιφλεγμονώδεις δραστηριότητες αυτών των απομονωμένων ιριδοειδών αξιολογήθηκαν για τις ανασταλτικές τους επιδράσεις στην επαγόμενη από LPS παραγωγή ΝΟ σε BV-2 μικρογλοιακά κύτταρα και η κυτταροτοξικότητά τους δοκιμάστηκε αρχικά σε κύτταρα BV-2 με θεραπεία LPS για 24 η. Οι καθαρότητες των προϊόντων απομόνωσης είναι όλες μεγαλύτερες από 95 τοις εκατό με βάση τη φασματοσκοπική ανάλυση 1Η NMR. Όλα τα στελέχη δεν εμφάνισαν σημαντική κυτταροτοξικότητα σε συγκέντρωση 40 μmol·L−1 σε κύτταρα BV-2 (Πίνακας 2). Η ένωση 9 έδειξε ισχυρή ανασταλτική επίδραση στην παραγωγή ΝΟ με τιμή IC50 να είναι 5,2 μmol·L−1, συγκρίσιμη με την κερσετίνη θετικού ελέγχου (4,3 μmol·L−1), ενώ οι άλλες δεν έδειξαν αξιοσημείωτη επίδραση στο ελεγμένο συγκέντρωση 40 μmol·L−1 (Πίνακας 2). Η προκαταρκτική ανάλυση της σχέσης δομής-δραστικότητας έδειξε ότι η παρουσία μιας καρβοξυλικής ομάδας στη θέση C-4 στην ένωση 9 θα μπορούσε να σχετίζεται με τη σημαντική της δράση. Συνοπτικά, ένα νέο και οκτώ γνωστά ιριδοειδή απομονώθηκαν από τους μίσχους τουC. deserticolaπου καλλιεργήθηκαν στην έρημο Tarim και η ένωση 9 παρουσίασε μια αξιοσημείωτη ανασταλτική επίδραση στην επαγόμενη από LPS παραγωγή ΝΟ σε BV-2 μικρογλοιακά κύτταρα. Όλα τα γνωστά ιριδοειδή έχουν αναφερθεί στο παρελθόν από τη φύσηC. deserticola[7, 12-17], και επομένως, δεν υπάρχει προφανής διαφορά στη χημική σύσταση των ιριδοειδών και των φαινυλαιθανοειδών μεταξύ τωνC. deserticolaκαλλιεργούνται στην έρημο Ταρίμ με τους άλλους βιότοπους, σε συνδυασμό με την τελευταία μας αναφορά [19].

Cistanche deserticola: Αντιφλεγμονώδης δράση

Πειραματικός

Γενικές πειραματικές διαδικασίες

Τα φάσματα υπερύθρων καταγράφηκαν σε φασματόμετρο υπερύθρων Nicolet Nexus 470 FT. Τα φάσματα NMR ελήφθησαν σε φασματόμετρο Varian Inova-500. Τα φάσματα μάζας HR μετρήθηκαν σε σύστημα μάζας Bruker APEX IV FT-MS (7.{15}} T) εξοπλισμένο με πηγή ESI. Τα ESI-MS μετρήθηκαν σε φασματόμετρο MS ιοντικής παγίδας Agilent 6320. Οι οπτικές περιστροφές μετρήθηκαν σε πολωσίμετρο Rudolph AUTOPOL IV. Τα σημεία τήξης προσδιορίστηκαν σε μια ψηφιακή οθόνη X-4 συσκευή σημείου τήξης (μη διορθωμένη). Η ημι-παρασκευαστική HPLC μεταφέρθηκε σε όργανο Waters 600 με στήλη ODS (Alltech, 250 mm χ 10 mm ID, 5 μm). Οι αναλύσεις GC πραγματοποιήθηκαν σε αέριο χρωματογράφο VARIAN CP-3800 με στήλη DB-5 (0,25 mm × 30 m). Πραγματοποιήθηκε χρωματογραφία στήλης σε σιλικαζέλ (200–300 mesh, Qingdao Marine Chemistry Ltd., Κίνα), γέλη MCI (CHP20P, 75–150 μmol·L−1 , Mitsubishi Chemical Industries Ltd., Japan), Sephadex LH{{24 }} (Amersham Biosciences, Σουηδία) και ODS C18 (40–63 μm· Merck, Γερμανία). Η TLC διεξήχθη σε πλάκες GF254 επικαλυμμένες με γυαλί πυριτικής πηκτής. Οι κηλίδες έγιναν ορατές υπό υπεριώδες φως ή με ψεκασμό με διάλυμα αιθανόλης θειικού οξέος 5%.

Φυτική ύλη

Οι μίσχοι του C. deserticola συλλέχθηκαν στην έρημο Tarim, στην Αυτόνομη Περιοχή Xinjiang Uygur, στην Κίνα, και αναγνωρίστηκαν από τον καθηγητή TU Peng-Fei. Ένα δείγμα κουπονιού (αρ. CD201011) κατατέθηκε στο Ερμπάριο του Σύγχρονου Ερευνητικού Κέντρου του Πανεπιστημίου του Πεκίνου για την Παραδοσιακή Κινεζική Ιατρική. Εκχύλιση και απομόνωση Οι ξηροί μίσχοι του C. deserticola (15,3 kg) κόπηκαν λεπτά και εκχυλίστηκαν με 85 τοις εκατό υδατική αιθανόλη (120 L χ 1 ώρα χ 3). Το συμπυκνωμένο υπόλειμμα (4,5 kg) εναιωρήθηκε σε H2O (10 L) και εκχυλίστηκε με EtOAc (10 L × 3) και n-BuOH (10 NAN Ze-Dong, et al. / Chin J Nat Med, 2016, 14(1 ): 6165 – 64 – L × 3) διαδοχικά. Οι ενώσεις 2-6 ελήφθησαν από το εκχύλισμα EtOAc, ενώ οι ενώσεις 1 και 7-9 ελήφθησαν από το εκχύλισμα n-BuOH.

Το εκχύλισμα EtOAc (65,8 g) υποβλήθηκε σε πυριτική πηκτή CC (200–3{00 mesh), χρησιμοποιώντας ένα σύστημα βαθμίδωσης διαλυτών CHCl3/MeOH ( 50: 1, 20: 1, 10: 1, 6: 1, 2: 1, και 1: 1), για να δοθούν δέκα κλάσματα (Fr. 1– Φρ. 10). Ο π. 2 (5,3 g) διαχωρίστηκε με Sephadex LH-20 CC, εκλούοντας με CHCl3/MeOH (1: 1) για να δώσει τρία κύρια κλάσματα (Fr. 2-1, Fr. 2-2 και Fr. 2-2 και π. 2-3). Ο π. Το 2-3 διαχωρίστηκε με σιλικαζέλ CC χρησιμοποιώντας PE/Me2CO (50: 1, 20: 1, 10: 1, 5: 1, 2: 1, 1: 1 και 0: 1) για να δώσει τέσσερα κλάσματα ( π. 2-3-1–Π. 2-3-4). Ο π. Το 2-3-2 διαχωρίστηκε με πυριτική πηκτή CC, με έκλουση με PE/CHCl3/MeOH (8: 8: 1) για να δώσει την ένωση 3 (20,6 mg). Η ένωση 2 ελήφθη από τον Fr. 2-3-3 μετά από καθαρισμό με χρωματογραφία σε σιλικαζέλ CC, με έκλουση με PE/CHCl3/MeOH (5: 5: 1). Ο π. 4 (2,5 g) διαχωρίστηκε με Sephadex LH{-20 CC, εκλούοντας με CHCl3/MeOH (1: 1), για να δώσει τρία κλάσματα (Fr. 4-1, Fr. 4-2, και π. 4-3). Ο π. Το 4-2 υποβλήθηκε σε MCI gel CC (MeOH/H2O, 10: 90 έως 90: 10, V/V) για να δώσει τρία κύρια κλάσματα (Fr. 4-2-1, Fr. 4-2-2, και π. 4-2-3). Ο π. Το 4-2-1 καθαρίστηκε με ημι-παρασκευαστική HPLC [CH3CN-H2O (10: 80)] για να δώσει την ένωση 4 (32,3 mg) και 5 (15,0 mg), ενώ το Fr. Το 4-2-2 καθαρίστηκε με ημι-παρασκευαστική HPLC [CH3CN-H2O (10: 80)] για να δώσει την ένωση 6 (8,3 mg). Το εκχύλισμα n-BuOH (536 g) υποβλήθηκε σε πυριτική πηκτή CC (200-300 mesh), χρησιμοποιώντας ένα σύστημα βαθμίδωσης διαλυτών CHCl3/MeOH (20: 1, 10: 1, 6: 1, 2: 1, 1: 1, 0: 1), για να δώσει δέκα κύρια κλάσματα (Fr. D1–Fr. D10). Ο π. D5 (3,0 g) υποβλήθηκε σε MCI gel CC (MeOH/H2O, 10: 90 έως 80: 20, V/V) για να δώσει τρία κλάσματα (Fr. D5-1–Fr. D5-3 ). Ο π. Το D{132}} (120 mg) διαχωρίστηκε με σιλικαζέλ CC (200-300 mesh, 10,0 g· ΡΕ/ΕίΟΑο/ΜεΟΗ 3:3:1) για να δώσει την ένωση 8 (12,5 mg). Ο π. Το D8 (4,5 g) διαχωρίστηκε με Sephadex LH{-20 CC, εκλούοντας με MeOH για να δώσει τρία κλάσματα (Fr. D8-1–Fr. D8-3). Ο π. Το D{150}} διαχωρίστηκε σε μια ανοιγόμενη στήλη ODS (MeOH/H2O, 20: 80 έως 80: 20, V/V) για να δώσει τρία κλάσματα (Fr. D8-3-1–Fr. D{{157 }}). Ο π. Το D8-3-1 υποβλήθηκε σε ημι-παρασκευαστική HPLC [CH3CN-H2O (8: 90)] για να δώσει την ένωση 1 (2,3 mg). Ο π. Το D9 (10,1 g) διαχωρίστηκε με στήλη Sephadex LH-20, με έκλουση με MeOH, για να δώσει τρία κύρια κλάσματα (Fr. D9-1–Fr. D9-3). Ο π. Το D{174}} υποβλήθηκε σε στήλη πηκτής MCI (MeOH/H2O, 0: 100 έως 50: 50, ν/ν) για να δώσει τις ενώσεις 7 (15,3 mg) και 9 (45,5 mg). Cistadesertoside A (1): Λευκή άμορφη σκόνη. [] 20 D –118,0 (c 0,1, MeOH); IR (KBr) νμέγιστο: 3 393, 1 071, 1 028 cm−1 ; ( συν )-HRESI-MS m/z 385. 146 9 [M συν Na] συν (Υπολογ. για C16H26O9Na, 385.148 5) και m/z 401.{206}} [M. συν K] συν (Υπολογ. για C16H26O9K, 401.122 8); Δεδομένα 1H NMR και 13C NMR, δείτε τον Πίνακα 1.

Οξική υδρόλυση της ένωσης 1

Η ένωση 1 (1.0 mg) αναδεύτηκε στους 90 βαθμούς για 5 ώρες με 2 mol·L-1 CF3COOH (EtOH: H2O, 1: 1, 2 mL). Αφού ψύχθηκε σε θερμοκρασία δωματίου, το διάλυμα συμπυκνώθηκε υπό μειωμένη πίεση. Το υπόλειμμα διαλύθηκε σε 2 mL πυριδίνης με υδροχλωρικό μεθυλεστέρα της L-κυστεΐνης 0,1 mol·L-1 και αναδεύτηκε στους 60 βαθμούς για 1,5 ώρα. Αφού ψύχθηκε και συμπυκνώθηκε, το μίγμα υποβλήθηκε σε επεξεργασία με τριμεθυλοχλωροσιλάνιο (TMSCl) και εξαμεθυλοδισιλαζάνιο (HMDS) (1: 2, V/V, 0.5 mL) σε πυριδίνη (2 mL), που ακολουθήθηκε από ανάδευση στους 60°C βαθμός για 0,5 ώρα. Στη συνέχεια, το διάλυμα συμπυκνώθηκε μέχρι ξηρού και το υπόλειμμα κατανεμήθηκε με Η2Ο και η-εξάνιο (2 × 3 mL) [18]. Το κλάσμα η-εξανίου αναλύθηκε με GC χρησιμοποιώντας στήλη DB-5 (0,25 mm χ 30 m). Οι θερμοκρασίες του εγχυτήρα και του ανιχνευτή ορίστηκαν και οι δύο στους 220 βαθμούς. Εφαρμόστηκε ένα σύστημα διαβάθμισης θερμοκρασίας στο φούρνο, ξεκινώντας από τους 140 βαθμούς για 1 λεπτό και αυξάνοντας μέχρι τους 250 βαθμούς με ρυθμό 4 μοίρες ·min−1. Η κορυφή του προϊόντος υδρόλυσης του παραγώγου σακχάρου αναγνωρίστηκε με σύγκριση του χρόνου κατακράτησης με το αυθεντικό δείγμα D-γλυκόζης (19,24 λεπτά) μετά από παρόμοια επεξεργασία με TMSCl/HMDS.Αναστολή παραγωγής ΝΟ

Οι ανασταλτικές δραστηριότητες του ΝΟ των απομονωμένων ενώσεων αξιολογήθηκαν έναντι των μικρογλοιακών κυττάρων BV-2 που προκαλούνται από LPS με τη μέθοδο Griess χρησιμοποιώντας κιτ ανάλυσης ΝΟ (Nanjing-Jiancheng BioTech Institute, Nanjing, Jiangsu, Κίνα) όπως περιγράφηκε προηγουμένως [19], και η κερσετίνη χρησιμοποιήθηκαν ως θετικός έλεγχος. Επιπλέον, οι κυτταρικές βιωσιμότητα αξιολογήθηκαν με ανάλυση ΜΤΤ.

Οφέλη από το Cistanche: αντιφλεγμονώδες

βιβλιογραφικές αναφορές

[1] Kobayashi H, Oguchi H, Takizawa N, et al. Νέοι φαινυλαιθανοειδείς γλυκοσίδες απόCistanche tubulosa(Schrenk) Γάντζος. φά. I [J]. Chem Pharm Bull, 1987, 35(8): 3309-3314.

[2] Τεχνικές καλλιέργειας βασικών φαρμακευτικών φυτών Xinjiang [M]. Xinjiang: Xinjiang Institute of Traditional Chinese and Ethnologic Medicines Ed, Xinjiang Science and Technology Press, 2004: 84-88.

[3] Επιτροπή Φαρμακοποιίας της Κίνας, Κινεζική Φαρμακοποιία [M]. Τομ. I, Πεκίνο: China Medical Science and Technology Press, 2010: 126.

[4] Jiang Y, Tu PF. Ανάλυση χημικών συστατικών στο Cistanche

είδος [J]. J Chromatogr A, 2009, 1216(11): 1970-1979.

[5] Pan J, Yuan CS, Lin CJ, et al. Φαρμακολογικές δραστηριότητες και μηχανισμοί φυσικών φαινυλοπροπανοειδών γλυκοσιδών [J]. Pharmazie, 2003, 58(11): 767-775.

[6] Fu GM, Pang HH, Wong Y. Φυσικά απαντώμενες φαινυλαιθανοειδείς γλυκοσίδες: πιθανοί οδηγοί για νέα θεραπευτικά [J]. Curr Med Chem, 2008, 15(25): 2592-2613.

[7] Xie HH, Morikawa T, Matsuda H, et al. Συστατικά μονοτερπενίου απόCistanche tubulosa-χημικές δομές κανκανοσιδών ΑΕ και κανκανόλης [J]. Chem Pharm Bull, 2006, 54(5): 669-675.

[8] Foderaro TA, Stermitz FR. Χημεία των Scrophulariaceae. Μέρος 24. Ιριδοειδείς γλυκοσίδες από είδη Penstemon: AC-5, C-9 trans-iridoid και C{5}} επιμερικά ζεύγη [J]. Phytochemistry, 1992, 31(12): 4191-4195.

[9] Krull RE, Stermitz FR. Μεταγγισμένες ιριδοειδή γλυκοσίδες από Penstemon mucronatus [J]. Phytochemistry, 1998, 49(8): 2413-2415.

[10] Takeda Y, Yagi T, Matsumoto T, et al. Νεπετανουδοσίδες και ιριδοειδής γλυκοσίδες που έχουν νέα στερεοχημεία από το Nepeta nuda ssp. albiflora [J]. Phytochemistry, 1996, 42(4): 1085-1088.

[11] Takeda Y, Ooiso Y, Masuda T, et al. Γλυκοζίτες ιριδοειδή και ευγενόλης από την κάμερα Nepeta [J]. Phytochemistry, 1998, 49(3): 787-791.

[12] Kobayashi H, Karasawa H, Miyase T, et al. Μελέτες για τα συστατικά του Cistanchis herba. II. Απομόνωση και δομές νέων ιριδοειδών,κιστανίνη και κισταχλωρίνη[J]. Chem Pharm Bull, 1984, 32(5): 1729-1734.

[13] Arslanian RL, Harris GH, Stermitz FR. Χημεία των Scrophulariaceae. 7. Μερικοί ιριδοειδής γλυκοζίτες, συμπεριλαμβανομένης της νέας 6-δεοξυκαταλπόλης, από είδη ινδικών πινέλων που σχετίζονται με την Castilleja miniata [J]. J Nat Prod, 1985, 48(6): 957-961.

[14] Sticher O, Weisflog A. Προσδιορισμός και απομόνωση ιριδοειδών γλυκοζιδίων από Galeopsis tetrahit (Labiatae) και η διαλεύκανση της δομής του gluroside [J]. Pharm Acta Helv, 1975, 50(11): 394-403.

[15] Nishimura H, Sasaki H, Morota T, et al. Χημικές και βιολογικές μελέτες στο Rehmanniae Radix. Μέρος 3. Έξι ιριδοειδείς γλυκοσίδες από την Rehmannia glutinosa [J]. Phytochemistry, 1989, 28(10): 2705-2709.

[16] Junior P. Περαιτέρω ιριδοειδή από το είδος Penstemon [J]. Planta Med, 1984, 50(6): 530.

[17] Boros CA, Stermitz FR. Ιριδοειδείς. Μια ενημερωμένη κριτική. Μέρος Ι [J]. J Nat Prod, 1990, 53(5):1055-1147.

[18] Jian R, Zeng KW, Tu PF, et al. Αντινευροφλεγμονώδη συστατικά από Asparagus cochinchinensis [J]. Fitoterapia, 2013, 84: 80-84.

[19] Nan ZD, Zeng KW, Shi SP, et al. Φαινυλαιθανοειδείς γλυκοσίδες με αντιφλεγμονώδεις δράσεις από τα στελέχη τουCistanche deserticolaκαλλιεργείται στην έρημο Ταρίμ [J]. Fitoterapia, 2013, 89: 167-174.