Επιδράσεις κατά της γήρανσης των νανοκυστιδίων που προέρχονται από το Cistanche

3.5. Ρύθμιση της εξωκυτταρικής μήτρας και του αντιοξειδωτικού γονιδίου με θεραπεία με Cistanche στο μοντέλο γήρανσης που προκαλείται από την υπεριώδη ακτινοβολία

Για να επιβεβαιώσετε τοαντιγηραντικές ιδιότητες των Cistanchesσε έναΜοντέλο γήρανσης που προκαλείται από την υπεριώδη ακτινοβολία από την άποψη της μοριακής βιολογίας, έκφραση mRNA της παραγωγής ECM που σχετίζεται με τη γήρανση καιαντιοξειδωτικό γονίδιοεξετάστηκε με qPCR. Τα αποτελέσματα της qPCR δείχνουν ότι το COL1 και η ELASTIN μειώθηκαν μετά από ακτινοβολία UV και η θεραπεία με Cistanches είχε ως αποτέλεσμα σημαντικά αυξημένο COL1. Ωστόσο, η ΕΛΑΣΤΙΝΗ δεν αυξήθηκε. Τα αντιοξειδωτικά γονίδια, SOD2 και HMOX1, μειώθηκαν με ακτινοβολία UV και αυξήθηκαν με επεξεργασία με Cistanches (Εικόνα 5α). Επιπλέον, τα αποτελέσματα της ανάλυσης ανοσοφθορισμού δείχνουν μειωμένη έκφραση του κολλαγόνου τύπου 1 σε γηρασμένα HDF που προκαλούνται από την υπεριώδη ακτινοβολία, η οποία αυξήθηκε με θεραπεία με Cistanches (Εικόνα 5β, γ). Αυτά τα αποτελέσματα δείχνουν ότι το Cistanches αυξάνει την παραγωγή ECM και το γονίδιο αντιοξειδωτικού που μειώνεται στη γήρανση.

Εικόνα 5. Ρύθμιση της εξωκυτταρικής μήτρας και του αντιοξειδωτικού γονιδίου με θεραπεία μεΚιστάνουςστο μοντέλο γήρανσης που προκαλείται από την υπεριώδη ακτινοβολία. (α) έκφραση mRNA των COL1, ELASTIN, SOD2 και HMOX1 που προκαλούνται από την υπεριώδη ακτινοβολία γηρασμένα HDF μετά από θεραπεία μεΚιστάνους. (β) Ανάλυση ανοσοφθορισμού του κολλαγόνου τύπου 1 των γηρασμένων HDF που προκαλούνται από την υπεριώδη ακτινοβολία μετά από θεραπεία με Cistanches. (Γ) Ουαντιτικά δεδομένα ανάλυσης ανοσοφθορισμού. Οι σημαντικές διαφορές μεταξύ των ομάδων προσδιορίστηκαν με μονόδρομη ANOVA (* p < 0.05, ** p < 0.01,* συν * p < 0,001).

Κάντε κλικ εδώ για να λάβετε εκχύλισμα Cistanche για αντιγήρανση

4. Συζήτηση

Σε αυτή τη μελέτη, διερευνήσαμε το ερώτημα εάν τα νανοκυστίδια που προέρχονται από TMSCs μπορούν να ασκήσουν αντιγηραντικές ιδιότητες. Απομονώσαμε και επιβεβαιώσαμε τα χαρακτηριστικά των TMSC καιΚιστάνους. Τα TMSC ήταν εξαιρετικά πολλαπλασιαστικά κύτταρα που μοιάζουν με MSC καιΚιστάνουςδιέθετε χαρακτηριστικά παρόμοια με εκείνα των εξωσωμάτων.Κιστάνουςεπιτάχυνε τον πολλαπλασιασμό και μείωσε τις δραστηριότητες της γαλακτοσιδάσης που σχετίζονται με τη γήρανση και την έκφραση της βινκουλίνης στην εστιακή προσκόλληση και των δύο γηρασμένων HDF. Η παραγωγή ECM και το αντιοξειδωτικό γονίδιο που εμπλέκεται στην κυτταρική γήρανση ρυθμίστηκαν προς τα πάνω στα γηρασμένα HDF με θεραπεία με Cistanches. Με αυτά τα αποτελέσματα, προτείνουμε ότι τα Cistanches μπορούν να χρησιμοποιηθούν για αναζωογόνηση του δέρματος και για σκοπούς αντιγήρανσης.

Την περασμένη δεκαετία, η χαμηλή απόδοση και η αναποτελεσματική διαδικασία διαχωρισμού για την παραγωγή εξωσωμάτων έχουν αμφισβητηθεί [19]. Για να ξεπεράσουμε αυτά τα ζητήματα, επιδιώξαμε να παράγουμε νανοκυστίδια εξωσωμάτων από μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα που προέρχονται από ανθρώπινες αμυγδαλές χρησιμοποιώντας μια σχετικά απλή διαδικασία εξώθησης [33]. Σε αυτή τη μελέτη, παρόλο που δεν παρουσιάζονται τα συγκριτικά δεδομένα των χαρακτηριστικών με τα εξωσώματα, τα Cistanches εκφράζουν τους ειδικούς για το εξώσωμα δείκτες (CD9 και CD63) και το μέγεθος των Cistanches είναι παρόμοιο με αυτό των εξωσωμάτων, πράγμα που σημαίνει ότι τα χαρακτηριστικά των Cistanches είναι παρόμοια με αυτά των εξωσωμάτων και τα Cistanches μπορούν να χρησιμοποιηθούν ως εναλλακτική λύση για θεραπείες εξωσωμάτων.

Έχει αναφερθεί ότι τα προφίλ mRNA και miRNA των εξωσωμάτων διαφέρουν από τα προερχόμενα κύτταρα τους [13]. Εδώ, πολυάριθμα κομμάτια έρευνας έχουν αποκαλύψει τον συγκεκριμένο δείκτη στα εξωσώματα για να καταδείξουν τον μηχανισμό της αναγέννησης των ιστών με τη μεσολάβηση των εξωσωμάτων. Για παράδειγμα, οι Ying et al. απέδειξε ότι η μεσολάβηση από το εξώσωμα χορήγηση miR-155 ρυθμίζει την ευαισθησία στην ινσουλίνη και την ομοιόσταση της γλυκόζης [34]. Xin et al. ανέφερε ότι τα εξωσώματα που προέρχονται από μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα μεταφέρονται σε νευρώνες και αστροκύτταρα και το miR με τη μεσολάβηση εξωσώματος διαδραματίζει βασικό ρόλο στη νευρολογική ανάκαμψη από το εγκεφαλικό [35]. Παρόλο που τα παρουσιαζόμενα αποτελέσματα δείχνουν ότι τα Cistanches μπορούν να χρησιμοποιηθούν ως εναλλακτική λύση στα εξωσώματα για την αναζωογόνηση του δέρματος, ο μηχανισμός ρύθμισης της κυτταρικής γήρανσης μέσω θεραπείας με Cistanches είναι ασαφής. Ως εκ τούτου, σε περαιτέρω μελέτη, σχεδιάζουμε να ανακαλύψουμε τον βασικό δείκτη του Cistanches στη ρύθμιση της κυτταρικής γήρανσης.

Η κυτταρική γήρανση χαρακτηρίζεται ως μη αναστρέψιμη διακοπή της κυτταρικής ανάπτυξης, η οποία συμβαίνει μέσω εναλλαγής του εστιακού συγκολλητικού κυτταροσκελετού [2,3]. Στην παρούσα μελέτη, η κυτταρική γήρανση προκλήθηκε τόσο από γηρασμένα HDF που σχετίζονται με το πέρασμα όσο και από γηρασμένα HDF που προκαλούνται από την υπεριώδη ακτινοβολία, και το Cistanches μείωσε τη γήρανση των κυττάρων και αύξησε τον κυτταρικό πολλαπλασιασμό, την έκφραση αντιοξειδωτικών γονιδίων και την παραγωγή εξωκυτταρικής μήτρας. Ωστόσο, η έκφραση της ΕΛΑΣΤΙΝΗΣ αυξήθηκε στα γηρασμένα HDF που σχετίζονται με τη μετάβαση αλλά όχι στα γηρασμένα HDF που προκαλούνται από την υπεριώδη ακτινοβολία. Η πρόβλεψή μας είναι μια διαφορά στον μηχανισμό επαγωγής γήρανσης και των δύο μοντέλων γήρανσης. Έχει αναφερθεί ότι η γήρανση μπορεί να προκληθεί από διάφορους παράγοντες και η οδός πρόκλησης γήρανσης μπορεί να είναι διαφορετική σε κάθε ερέθισμα [36]. Συγκεκριμένα, οι Pascal et al. ανέφεραν διαφορετικά προφίλ mRNA μεταξύ αντιπροσωπευτικών κυτταρικών μοντέλων γήρανσης, συμπεριλαμβανομένου ενός μοντέλου αναδιπλασιασμού γήρανσης, μοντέλου γήρανσης που προκαλείται από τριτ βουτυλικό υδροϋπεροξείδιο και μοντέλου γήρανσης που προκαλείται από EtOH [37]. Δεδομένων αυτών των αναφορών, σκοπεύουμε να διερευνήσουμε τον ρόλο της γήρανσης στη ρύθμιση της έκφρασης της εξωκυττάριας αυλικής μήτρας σε κάθε διαδικασία μοντελοποίησης, η οποία μπορεί να παρέχει περαιτέρω έρευνα για την αναζωογόνηση του δέρματος.

Το επόμενο όριο των νανοκυστιδίων εξωσωματικών μιμητών για την αναζωογόνηση του δέρματος είναι η επίδειξη του αναγεννητικού δυναμικού από ex vivo έως κλινικές δοκιμές. Σε αυτή τη μελέτη, προσδιορίσαμε τις προαγγειογενετικές και αντιφλεγμονώδεις επιδράσεις των εξωκυτταρικών κυστιδίων, οι οποίες θα είναι χρήσιμες στην αναγεννητική ιατρική.

Αυτή η μελέτη έδειξε ότι τα μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα που προέρχονται από ανθρώπινες αμυγδαλές μοιράζονται χαρακτηριστικά με τα εξωσώματα καιαυξάνουν τον πολλαπλασιασμό των γηρασμένων HDF. Οι δραστηριότητες της γαλακτοσιδάσης που σχετίζονται με τη γήρανση και η έκφραση της βινκουλίνης σε γηρασμένα κύτταρα μειώθηκαν κατάθεραπεία με Cistanches. Η γονιδιακή έκφραση της παραγωγής εξωκυτταρικής μήτρας και το αντιοξειδωτικό γονίδιο ενισχύθηκαν με θεραπεία με Cistanches. Αυτά τα ευρήματα θα μπορούσαν να συμβάλουν στην ανάπτυξη εργαλείων αναζωογόνησης του δέρματος και επιθυμητών καλλυντικών προϊόντων, εφόσον η κλινική εξέταση δείξει πολλά υποσχόμενη αποτελεσματικότητα.