Μια 13-εβδομαδιαία μελέτη υποχρόνιας τοξικότητας της 2-(l-μενθοξυ)αιθανόλης σε αρουραίους F344 Ⅲ

Συζήτηση

Μέχρι σήμερα, 24 αρωματικοί παράγοντες, συμπεριλαμβανομένης της 2-(l-menthoxy) αιθανόλης, έχουν αξιολογηθεί από την JECFA ως ουσίες δομικά σχετιζόμενες με τη μενθόλη και όλοι αναφέρονται ως "καμία ανησυχία για την ασφάλεια" στα τρέχοντα εκτιμώμενα επίπεδα πρόσληψης1, 11. Η 2-(lΜενθοξυ)αιθανόλη ταξινομείται σε μια υποομάδα αλικυκλικών αλκοολών ή αιθέρων και θεωρείται ότι είναι κυρίως συζευγμένη με γλυκουρονικό οξύ, ακολουθούμενη από απέκκριση στα ούρα1. Αν και οι από του στόματος τιμές LD50 αυτών των ουσιών σε τρωκτικά είναι σχετικά υψηλές, τα δεδομένα από μελέτες τοξικότητας επαναλαμβανόμενων δόσεων παραμένουν περιορισμένα. Μια 13-εβδομαδιαία μελέτη τοξικότητας επαναλαμβανόμενης δόσης αποκάλυψε ότι η καρβοξυλική μενθυλοπυρρολιδόνη (Αριθ. CAS 68127-22-0), μια ένωση που σχετίζεται δομικά με τη μενθόλη, μπορεί να συσχετιστεί με αυξημένο σχετικό βάρος στο ήπαρ και τους νεφρούς σε άνδρες και γυναίκες Αρουραίοι Wistar.

Συμπλήρωμα Cistanche Συμπλήρωμα υποστήριξης νεφρικής λειτουργίας PhGs75% Ech 30% Act 12%

Συσσώρευση 2u-σφαιρίνης στα εγγύς σωληνάρια αρσενικών αρουραίων παρατηρήθηκε επίσης σε δόση 1.111 mg/kg ΣΒ/ημέρα και το NOAEL προσδιορίστηκε ως 109 mg/kg ΣΒ/ημέρα1.Στην παρούσα 13-εβδομαδιαία μελέτη υποχρόνιας τοξικότητας της 2-(l-μενθοξυ)αιθανόλης, δεν παρατηρήθηκαν τοξικολογικές αλλαγές στη γενική κατάσταση, το σωματικό βάρος και την πρόσληψη τροφής. Μετά από αιματολογική εκτίμηση, παρατηρήσαμε μείωση της HGB (96,6% στις μέσες τιμές ελέγχου), της HCT (96,3%), της MCV (98,4%) και της MCH (98,2%) και μια αύξηση της PLT (111%) στους άνδρες Ομάδα 250 mg/kg, που θεωρήθηκαν τοξικολογικές επιδράσεις της θεραπείας με 2-(l-μενθοξυ)αιθανόλη. Τόσο το απόλυτο (115% και στα δύο φύλα) όσο και το σχετικό (119% στους άνδρες και 111% στις γυναίκες) τα βάρη του ήπατος αυξήθηκαν σημαντικά και στα δύο φύλα στις ομάδες των 250 mg/kg. Αν και δεν υπήρξαν ιστοπαθολογικές αλλαγές στο ήπαρ, αυξημένα επίπεδα T-Chol ορού (110% στους άνδρες και 121% στις γυναίκες) και TP (105% στους άνδρες) και μείωση της TG (60,1% στις γυναίκες) στους 250 Οι ομάδες mg/kg υποδεικνύουν τοξικές αλλαγές που σχετίζονται με το μεταβολισμό των λιπιδίων και τη σύνθεση πρωτεϊνών στο ήπαρ. Μειωμένη HGB και MCH και αυξημένη PLT, T-Chol και TP στους άνδρες και μειωμένη TG και αυξημένο απόλυτο και σχετικό βάρος του ήπατος και στα δύο φύλα εντοπίστηκαν επίσης, με στατιστική σημασία στην προκαταρκτική μελέτη 28-ημέρας (δεδομένα δεν παρουσιάζονται ), επιβεβαιώνοντας ότι αυτές οι τροποποιημένες αιματολογικές και βιοχημικές παράμετροι του ορού, καθώς και τα βάρη του ήπατος, δεν ήταν τυχαία, αλλά σχετιζόμενα με την ελεγχόμενη ουσία. Αντίθετα, η σημαντική αύξηση των σχετικών βαρών του ήπατος που ανιχνεύθηκε στην ομάδα ανδρών 60 mg/kg στην παρούσα μελέτη δεν συνοδεύτηκε από αύξηση στα απόλυτα βάρη ή αλλαγές στις σχετικές βιοχημικές παραμέτρους, υποδηλώνοντας ότι αυτή η αύξηση ήταν προσαρμοστική αλλαγή.

Πίνακας 2. Δεδομένα βιοχημείας ορού για αρουραίους F344 που υποβλήθηκαν σε θεραπεία με 2-(l-μενθοξυ)αιθανόλη για 13 εβδομάδες

Σημαντικά αυξημένο απόλυτο (120%) και σχετικό (118%) βάρος των επινεφριδίων στην αρσενική ομάδα των 250 mg/kg θεωρήθηκε ότι συσχετίστηκε με την υπό δοκιμή χημική ουσία. Επιπλέον, το αυξημένο απόλυτο και σχετικό βάρος των επινεφριδίων και στα δύο φύλα έδειξαν σαφή εξάρτηση από τη δόση στην προκαταρκτική μελέτη 28-ημέρας (τα δεδομένα δεν εμφανίζονται), υποδεικνύοντας τη συσχέτιση με την ελεγχόμενη χημική θεραπεία. Αν και η υπερτροφία των επινεφριδίων μπορεί να προκληθεί από το στρες, δεν υπήρξαν ευρήματα που να υποδηλώνουν άγχος, όπως μειωμένη αύξηση του σωματικού βάρους ή ατροφία του θύμου αδένα και άλλων λεμφοειδών οργάνων, τόσο στην παρούσα όσο και στην προκαταρκτική μελέτη. Δεδομένου ότι μπορεί να μην υπάρχουν ιστοπαθολογικές αλλαγές στα επινεφρίδια ακόμη και με μειωμένη παραγωγή γλυκοκορτικοειδών σε περιπτώσεις αναστολής των ενζύμων που σχετίζονται με τη στεροειδογένεση12, δεν μπορεί να αποκλειστεί η πιθανότητα το αυξημένο βάρος των επινεφριδίων να είναι τοξικό εύρημα. Αντίθετα, τα αυξημένα σχετικά βάρη της σπλήνας και των όρχεων στην ομάδα των 250 mg/kg των ανδρών, που δεν παρατηρήθηκαν στην προκαταρκτική μελέτη, θεωρήθηκαν τοξικολογικά ασήμαντα λόγω απουσίας ιστοπαθολογικών αλλοιώσεων ή σημαντικά αυξημένων απόλυτων βαρών. Ομοίως, η βιοχημεία ορού αποκάλυψε μείωση στο A/G και αύξηση του Ca και στα δύο φύλα, το οποίο θεωρήθηκε ότι δεν είχε τοξικολογική σημασία, δεδομένου ότι δεν ανιχνεύθηκαν ανωμαλίες σε σχετικές παραμέτρους. Επιπλέον, τα μειωμένα επίπεδα Bil και ALP και στα δύο φύλα και η μειωμένη AST και ALT στις γυναίκες ήταν σε αντίθεση με τις αναμενόμενες τοξικές επιδράσεις και θεωρήθηκαν μη σημαντικές.

Πίνακας 3. Δεδομένα βάρους οργάνων για αρουραίους F344 που υποβλήθηκαν σε θεραπεία με 2-(l-μενθοξυ)αιθανόλη για 13 εβδομάδες

Η χρόνια νεφροπάθεια που χαρακτηρίζεται από βασεόφιλα σωληνάρια, υαλώδη γύψο και εστιακή διάμεση φλεγμονή παρατηρήθηκε με στατιστική σημασία σε άνδρες όλων των ομάδων που έλαβαν θεραπεία. Επιπλέον, αυξημένο Cre ορού και απόλυτο και σχετικό βάρος νεφρών ανιχνεύθηκαν στις ομάδες των ανδρών 60 και 250 mg/kg. Αυτές οι αλλαγές δεν παρατηρήθηκαν σε γυναίκες ομάδες θεραπείας. Σε αυτές τις περιπτώσεις, ο βαθμός συσσώρευσης ηωσινόφιλων κοκκίων στα εγγύς σωληναριακά επιθηλιακά κύτταρα αυξήθηκε με προφανή δοσοεξαρτώμενο τρόπο. Αυτοί οι κόκκοι επιβεβαιώθηκαν ως 2u-σφαιρίνη με ανοσοϊστοχημεία, υποδεικνύοντας την εμφάνιση νεφροπάθειας 2u-σφαιρίνης. Οι 2u-σφαιρίνες που συνδέονται με ορισμένες χημικές ουσίες, όπως το d-λιμονένιο, συσσωρεύονται στα λυσοσώματα και παρατηρούνται στα εγγύς σωληνάρια ως ηωσινόφιλα ή υαλικά κοκκία9. Αυτή η συσσώρευση μπορεί να βλάψει τα επιθηλιακά κύτταρα, οδηγώντας σε χρόνια προοδευτική νεφροπάθεια και επακόλουθο σχηματισμό όγκου9. Έτσι, παρόλο που το NOAEL για την 2-(l-μενθοξυ)αιθανόλη που σχετίζεται με τη νεφροπάθεια 2u-σφαιρίνης σε νεφρούς αρσενικών αρουραίων δεν εντοπίστηκε, αυτός ο τύπος νεφροπάθειας αναφέρεται ότι είναι ειδικός για αρσενικούς αρουραίους και επομένως δεν σχετίζεται με την αξιολόγηση κινδύνου στον άνθρωπο13. Ένας αυξημένος κίνδυνος νεφρικής ανεπάρκειας που προκαλείται μέσω μηχανισμών που σχετίζονται με τη συσσώρευση 2u-σφαιρίνης είναι εξαιρετικά απίθανος, καθώς αυτή η πρωτεΐνη απουσιάζει στους ανθρώπους14. Ως εκ τούτου, κρίθηκε λογικό να αποκλειστούν από τον προσδιορισμό του NOAEL οι αλλαγές που σχετίζονται με τη χρόνια νεφροπάθεια που παρατηρήθηκαν σε άνδρες.

Συμπερασματικά, η παρούσα 13-εβδομαδιαία μελέτη υποχρόνιας τοξικότητας έδειξε ότι η θεραπεία με 250 mg/kg ΣΒ/ημέρα 2-(l-μενθοξυ) αιθανόλης προκάλεσε τοξικές αλλαγές στην αιματολογία, τη βιοχημεία ορού και το βάρος οργάνων σε άνδρες και θηλυκούς αρουραίους F344. Με βάση τα παρατηρούμενα αποτελέσματα, το NOAEL της 2-(l-μενθοξυ)αιθανόλης αξιολογήθηκε ως 60 mg/kg ΣΒ/ημέρα και για τα δύο φύλα.

Αποκάλυψη Δυνατοτήτων

Σύγκρουση συμφερόντων: Οι συγγραφείς δηλώνουν ότι δεν υπάρχει σύγκρουση συμφερόντων.

Ευχαριστίες: Αυτή η μελέτη υποστηρίχθηκε από το Υπουργείο Υγείας, Εργασίας και Πρόνοιας της Ιαπωνίας. Οι συγγραφείς ευχαριστούν τους Ayako Saikawa και Yoshimi Komatsu για την εξειδικευμένη τεχνική βοήθεια στην επεξεργασία ιστολογικών υλικών.

βιβλιογραφικές αναφορές

1. JECFA. ΠΟΥ Σειρά πρόσθετων τροφίμων: 60. Αξιολόγηση ασφάλειας ορισμένων πρόσθετων τροφίμων. 579–593. 2009.

2. Akagi J, Cho YM, Mizuta Y, Toyoda T και Ogawa K. Αξιολόγηση υποχρόνιας τοξικότητας του 5-ισοθειοκυανικού εξενυλίου, μιας ίδιας φύσης αρωματικής ουσίας από την Wasabia japonica, σε αρουραίους F344/DuCrj. Food Chem Toxicol. 122: 80–86. 2018. [Medline] [CrossRef]

3. Matsushita K, Toyoda T, Morikawa T και Ogawa K. Μια 13-εβδομαδιαία μελέτη υποχρόνιας τοξικότητας της ακετάλης προπυλενογλυκόλης βανιλίνης σε αρουραίους F344. Food Chem Toxicol. 132: 110643. 2019. [Medline] [CrossRef]

4. Matsushita K, Toyoda T, Morikawa T, Takahashi M, Inoue K και Ogawa K. Μια 13-εβδομαδιαία μελέτη υποχρόνιας τοξικότητας της 2-αιθυλβουτανάλης σε αρουραίους F344. Regul Toxicol Pharmacol. 100: 118–126. 2018. [Medline] [CrossRef]

5. Toyoda T, Cho YM, Matsushita K, Tachibana S, Senuma M, Akagi J και Ogawa K. Μια 13-εβδομαδιαία μελέτη υποχρόνιας τοξικότητας του οξικού εξυλεστέρα σε αρουραίους με SD. J Toxicol Pathol. 32: 205–212. 2019. [Medline] [CrossRef]

6. Akagi J, Cho YM, Mizuta Y, Tatebe C, Sato K και Ogawa Κ. Αξιολόγηση υποχρόνιας τοξικότητας του ισοευγενυλομεθυλαιθέρα σε αρουραίους F344/DuCrj με χορήγηση από του στόματος 13-εβδομάδας. Regul Toxicol Pharmacol. 102: 34–39. 2019. [Medline] [CrossRef]

7. Ide T, Mizuta Y, Akagi J, Masumoto N, Sugimoto N, Sato K, Ogawa Κ και Cho YM. Μια 90-ημερήσια μελέτη τοξικότητας επαναλαμβανόμενης από του στόματος δόσης τεσσάρων στερεοϊσομερών του 2,4-διμεθυλ- 4-φαινυλοτετραϋδροφουρανίου, μιας συνθετικής αρωματικής ουσίας, σε αρουραίους F344. Regul Toxicol Pharmacol. 114: 104664. 2020. [Medline] [CrossRef]

8. Furukawa S, Nagaike M, and Ozaki K. Βάσεις δεδομένων για τεχνικές πτυχές της ανοσοϊστοχημείας. J Toxicol Pathol. 30: 79–107. 2017. [Medline] [CrossRef]

9. Seely JC, Hard GC και Blankenship B. Kidney. Στο: Boorman's Pathology of the Rat, 2η έκδ. AW Suttie (επιμ.). Academic Press, Λονδίνο. 125–166. 2018.

10. Takanobu K, Aiso S, Umeda Y, Senoh H, Saito M, Katagiri T, Ikawa N, Ishikawa H, Mine T, Take M, Haresaku M, Matsumoto M, and Fukushima S. [Δεδομένα φόντου αυθόρμητων όγκων στο F344 /DuCrlCrlj αρουραίοι]. Sangyo Eiseigaku Zasshi. 57: 85–96. 2015 (στα Ιαπωνικά). [Medline] [CrossRef]

11. JECFA. Σειρά Τεχνικών Αναφορών ΠΟΥ: 891. Αξιολόγηση ορισμένων προσθέτων τροφίμων (Πενήντα πρώτη έκθεση της κοινής επιτροπής εμπειρογνωμόνων FAO/ΠΟΥ για τα πρόσθετα τροφίμων). 111–118. 2000.

12. Wallig MA. Ενδοκρινικό σύστημα. Στο: Fundamentals of Toxicologic Pathology, 3rd ed. MA Wallig, WM Haschek, CG Rousseaux, B Bolon και BW Mahler (επιμ.). Academic Press, Λονδίνο. 565–624. 2018.

13. Swenberg JA. Νεφροπάθεια 2u-σφαιρίνης: ανασκόπηση των κυτταρικών και μοριακών μηχανισμών που εμπλέκονται και των επιπτώσεών τους για την αξιολόγηση του ανθρώπινου κινδύνου. Περιβαλλοντική Προοπτική Υγείας. 101 (Παράρτημα 6): 39–44. 1993. [Medline] [CrossRef] 14. Greaves P. Urinary tract. Στο: Histopathology of Preclinical Toxicity Studies, 4th ed. Academic Press, Λονδίνο. 537–614. 2012.